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全国卷海南选三试题及答案

1,(2018年全国I卷,第38题,15分)回答下列问题:

(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Coben)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。

该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了_________(答出两点即可)。

(2)体外重组的质粒可通过Ca2+参与的________方法导入大肠杆菌细胞,而体外重组的噬菌体DNA通常需与_________组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞,在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是_______。

(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。

为防止蛋白质被降解,在实验中应选用__________的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中因添加______________的抑制剂。

【答案】(15分)

(1)体外重组的质粒可以进入受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达。

(2)转化外壳蛋白(或噬菌体蛋白)细菌

(3)蛋白酶缺陷型蛋白酶

2(2018年全国卷Ⅱ,第38题,15分)某种荧光蛋白(GFP)在紫外线或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。

某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP基因的5’末端,获得了L1-GFP融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。

回答下列问题:

(1)据图推断,该团队在将甲插入质粒P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是________。

使用这两种酶进行酶切是为了保证_______,也是为了保证__________。

(2)将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了__________和___________过程。

(3)为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:

将能够产生绿色荧光细胞的________移入牛的________中,体外培养、胚胎移植等。

(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞的____________(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。

【答案】(15分)

(1)E1和E4  甲的完整  甲与载体正确连接

(2)转录  翻译(3)细胞核  去核卵母细胞(4)核DNA

3.(2018年全国卷Ⅲ,第38题,15分)2018年《细胞》期刊报道,中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆,获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。

回答下列问题:

(1)“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程,核移植是指。

通过核移植方法获得的克隆猴,与核供体相比,克隆猴体细胞的染色体数目(填“减半”“加倍”或“不变”)。

(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植,胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度(填“大于”或“小于”)体细胞核移植,其原因是。

(3)在哺乳动物核移植的过程中,若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体,通常,所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目(填“相同”或“不同”),性染色体组合(填“相同”或“不同”)。

【答案】(15分)

(1)将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变

(2)小于胚胎细胞分化程度低,恢复全能性相对容易

(3)相同不同

4.(2017年全国I卷,第38题,15分)真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有,原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。

已知在人体中基因A(有内含子)可以表达出某种特定蛋白(简称蛋白A)。

回答下列问题:

(1)某同学从人的基因组文库中获得了基因A,以大肠杆菌作为受体细胞却未得到蛋白A,其原因是_____________________。

(2)若用家蚕作为表达基因A的受体,在噬菌体和昆虫病毒两种载体中,不选用____________________作为载体,其原因是_____________________。

(3)若要高效地获得蛋白A,可选用大肠杆菌作为受体。

因为与家蚕相比,大肠杆菌具有_________________(答出两点即可)等优点。

(4)若要检测基因A是否翻译出蛋白A,可用的检测物质是___________________(填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”)。

(5)艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,也可以说是基因工程的先导,如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示,那么,这一启示是_________________________。

【答案】(15分)

(1)基因A有内含子,在大肠杆菌中,其初始转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出蛋白A

(2)噬菌体噬菌体的宿主是细菌,而不是家蚕

(3)繁殖快、容易培养

(4)蛋白A的抗体

(5)DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体

5.(2017年全国卷Ⅱ,第38题,15分)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。

通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。

回答下列问题:

(1)在进行基因工程操作时,若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA,常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料,原因是__________________________。

提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是__________________________。

(2)以mRNA为材料可以获得cDNA,其原理是__________________________。

(3)若要使目的基因在受体细胞中表达,需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞,原因是__________________________(答出两点即可)。

(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是______________。

(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是__________________________。

【答案】(15分)

(1)嫩叶组织细胞易破碎防止RNA降解

(2)在逆转录酶的作用下,以mRNA为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA

(3)目的基因无复制原点;目的基因无表达所需启动子

(4)磷酸二酯键

(5)目的基因的转录或翻译异常

6.(2017年全国卷Ⅲ,第38题,15分)编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。

回答下列问题:

(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,原因是_____________________________________。

(2)某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为_____________________,加入了________________作为合成DNA的原料。

(3)现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下实验:

将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为对照,培养并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。

①由图2可知,当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞继续增殖,可采用的方法是__________________。

细胞培养过程中,培养箱中通常要维持一定的CO2浓度,CO2的作用是__________________。

②仅根据图1、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少______________(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。

【答案】(15分)

(1)编码乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子

(2)模板四种游离的脱氧核苷酸(dNTP)

(3)①进行细胞传代培养维持培养液是的pH②C

7.(2016年全国I卷,第40题,15分)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。

有人将此质粒载体用BamHI酶切后,与用BamHI酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。

结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。

被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。

回答下列问题:

(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有(答出两点即可)。

而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有启动子和终止子。

(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞不能区分的,其原因是;并且和的细胞也是不能区分的,其原因是。

在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有的固体培养基。

(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自于。

【答案】(15分)

(1)能自我复制、具有标记基因

(2)二者均不含氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不能生长含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长四环素

(3)受体细胞

8.(2016年全国卷Ⅱ,第40题,15分)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆晡乳动物(二倍体)的流程。

回答下列问题:

(1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为____。

过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用____的方法。

②代表的过程是____。

(2)经过多次传代后,供体细胞中____的稳定性会降低。

因此,选材时必须关注传代次数。

(3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是____________________。

(4)与克隆羊“多莉(利)”培育成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了___。

【答案】(15分)

(1)XX或XY显微操作胚胎移植

(2)遗传物质

(3)卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响

(4)动物已分化体细胞的细胞核具有全能性

9.(2016年全国卷Ⅲ,第40题,6分)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。

根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

(1)经BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被酶切后的产物连接,理由是。

(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图(c)所示。

这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有,不能表达的原因是。

(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有和,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。

【答案】(15分)

(1)Sau3AⅠ 两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端

(2)甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转录(其他合理答案亦可)

(3)E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 T4DNA连接酶

10.(2016海南卷.31题,15分)基因工程又称为DNA重组技术,回答相关问题:

(1)在基因工程中,获取目

的基因主要有两大途径,即和从中分离。

(2)利用某植物的成熟叶片为材料,同时构建cDNA文库和基因组文库,两个文库相比,cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少,其原因是。

(3)在基因表达载体中,启动子是聚合酶识别并结合的部位。

若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞,最常用的原核生物是。

(4)将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时,常用的携带目的基因的金属颗粒有和颗粒。

【答案】(15分)

(1)人工合成生物材料(每空2分,共4分,其他合理答案可酌情给分)

(2)cDNA文库中只含有叶细胞已转录(或已表达)的基因,而基因组文库中含有该植物的全部基因(5分,其他合理答案可酌情给分)

(3)RNA(2分)大肠杆菌(或答细菌)(2分)

(4)金粉钨粉(每空1分,共2分)

11.(2017年海南卷,31题,15分)甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料,利用植物组织培养技术繁殖该植物。

回答下列问题:

(1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体,在一定条件下进行组织培养,均能获得试管苗,其原理是________________________________________________。

(2)甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中,均加入一定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到______________________。

若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗,该细胞应具备的条件是________________________(填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”)。

(3)图中A、B、C所示的是不同的培养结果,该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的,这两种激素是__________________________。

A中的愈伤组织是叶肉细胞经_______________形成的。

(4)若该种植物是一种杂合体的名贵花卉,要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉,可用组织培养方法繁殖,在培养时,___________(填“能”或“不能”)采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体,原因是_______________________。

【答案】(15分)

(1)绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性,在一定条件下能发育成完整的植株。

(2)葡萄糖、果糖具有完整的细胞核

(3)细胞分裂素、生长素脱分化

(4)不能对杂合体的植株来说,其体细胞的基因型相同,而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。

用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株。

12.(2018海南卷.31)题,15分)甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质。

为了改善黄瓜的品质,科学家采用农杆菌转化法将一种甜蛋白基因成功导入黄瓜细胞,得到了转基因植株。

回答下列问题:

(1)用农杆菌感染时,应优先选用黄瓜(填“受伤的”或“完好的”)叶片与含重组质粒的农杆菌共培养,选用这种叶片的理由是。

(2)若在转基因黄瓜中检测到这种甜蛋白,则表明该重组质粒中已转移到植物细胞中且能够表达;用该转基因黄瓜的某一植株与一株非转基因植株杂交,发现子代中含甜蛋白个体数与不含甜蛋白个体数之比为1:

1,则说明甜蛋白基因已经整合到(填“核基因组”“线粒体基因组”或“叶绿体基因组”)中。

(3)假设某种转基因作物因为受到病毒感染而减产,若要以该转基因作物为材料获得脱毒苗,应选用作为外植体进行组织培养。

(4)通常,基因工程操作主要有4个步骤,即目的基因获取、重组表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

因此,基因工程的含义可概括为。

【答案】(15分)

(1)受伤的  叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质,可吸引农杆菌移向这些细胞

(2)甜蛋白基因  核基因组

(3)茎尖

(4)按照人们的愿望进行设计,并通过体外重组和转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出符合人们需要的新生物类型

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