届二轮复习 DNA的粗提取与鉴定 学案适用全国.docx

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届二轮复习DNA的粗提取与鉴定学案适用全国

1．实验原理

（1）DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同

溶解规律

2mol/LNaCl溶液

0.14mol/LNaCl溶液

DNA

溶解

析出

蛋白质

NaCl溶液物质的量浓度从2mol/L逐渐降低的过程中，溶解度逐渐增大

部分发生盐析沉淀

溶解

（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步分离。

（3）DNA与二苯胺沸水浴加热，呈蓝色。

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2．操作流程

考向DNA的粗提取与鉴定过程分析

1．下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是

A．鸡血细胞是较理想的实验材料B．DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的升高而增大C．洗涤剂能瓦解细胞膜，但对DNA没有影响

D．DNA溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴加热，检测结果呈蓝色

【参考答案】B

技法提炼

DNA的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”

加蒸馏水2次

①加到鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破；②加到含DNA的2mol/L的NaCl溶液中，使NaCl溶液的物质的量浓度稀释到0.14mol/L，使DNA析出

用纱布过滤4次

①过滤血细胞破裂液，得到含细胞核物质的滤液；②过滤用2mol/L的NaCl充分溶解的DNA，滤去溶液中的杂质；③滤取0.14mol/L的NaCl溶液中析出的DNA（黏稠物）；④过滤溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液

用NaCl溶液4次

①加2mol/L的NaCl溶液，溶解提取的细胞核物质；②用0.14mol/L的NaCl溶液使DNA析出；③用2mol/L的NaCl溶液，溶解滤取的DNA黏稠物；④用2mol/L的NaCl溶液，溶解丝状物用于鉴定DNA

2．DNA提取过程中可以选用鸡血或者菜花作为实验材料。

请回答下列关于DNA粗提取和鉴定的问题：

（1）使用鸡血提取DNA时，需在鸡血中加入柠檬酸钠，目的是___________；在鸡血细胞液中加入蒸馏水，目的是_______________。

（2）使用菜花提取DNA时，需要研磨，研磨时可加入一定的洗涤剂和食盐，其作用分别是______________________和_____________。

（3）DNA在浓度为_____mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低。

使用体积分数为95%的冷却酒精可使DNA_____（填“析出”或“溶解”）。

（4）使用二苯胺鉴定DNA时，需要在____________条件下进行，DNA与二苯胺反应呈现_________色。

【答案】

（1）防止血液凝固使鸡血细胞破裂

（2）瓦解细胞膜溶解DNA

（3）0.14析出

（4）沸水浴蓝

1．在DNA粗提取实验中，应尽可能避免DNA断裂和降解。

相关操作正确的是

A．以菜花为材料进行研磨时，可以适当加热以促进DNA溶解B．向DNA溶液中迅速加入蒸馏水，使DNA快速析出C．将丝状物溶解到2mol·L-1NaCl溶液中后，加水析出

D．向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌

2．在利用菜花进行“DNA粗提取与鉴定”实验中，相关操作正确的是

A．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝B．向菜花研磨液中加入适量的蒸馏水，以降低DNA酶活性C．向质量浓度为2mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水析出DNA时，应快速加入，直到出现黏稠物为止

D．向溶有粗提物的NaCl溶液中加入冷却的体积分数95%的酒精，可获得较纯净的DNA

3．在DNA的粗提取实验过程中，对DNA提取量影响较小的是

A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA等核物质

B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动

C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多

D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至可将混合液再放入冰箱中冷却

4．下列反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的坐标图，正确的是

A．

B．

C．

D．

5．关于“DNA的粗提取与鉴定”实验中不属于该实验依据的原理是

A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂

D．在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应

6．如图是利用鸡血粗提取DNA的基本操作，下表中操作目的不能实现的是

A．AB．B

C．CD．D

7．下图是“DNA粗提取与鉴定”实验中的两个操作步骤示意图，下列有关叙述错误的是

A．图1中的丝状物含有DNAB．图1所示操作的原理是DNA能溶于酒精，而蛋白质等杂质不溶C．图2所示实验操作完成后，最好待试管溶液冷却后观察颜色变化

D．图2中的溶液b能够溶解DNA

8．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均正确，但实验结果却不同，下列有关叙述不正确的是

A．实验材料选择错误的组别是丙B．沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C．甲组实验现象差的原因是25℃的酒精对DNA的凝集效果差

D．乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂

9．如图为菜花DNA的粗提取与鉴定的实验流程图。

据图回答下列问题：

（1）选择菜花作为提取DNA的实验材料的原因是______________。

（2）研磨前，向研钵中加入石英砂的目的是___，加入的物质a是_______。

（3）研磨液过滤后，应向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液，目的是______；也可以向滤液中加入嫩肉粉，目的是__________。

（4）鉴定DNA所用的化学试剂为________，鉴定实验中，A、B两支试管属于对照组的是____________________，对照组试管中加入的物质有______。

10．回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。

（1）下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述，正确的是____。

A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNAC．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂

D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应

（2）如图为该实验过程中的一些重要操作示意图。

①正确的操作顺序是____________________________________。

②上图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是__________________和________________。

③图A步骤中所用酒精必须经过____________才能使用，该步骤的目的是________________________________________________。

（3）为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加________试剂，沸水浴，如果出现________，则该丝状物的主要成分为DNA。

11．（2015·江苏卷）图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图，下列叙述正确的是

A.图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同

B.图1中完成过滤之后保留滤液

C.图2中完成过滤之后弃去滤液

D.在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质

1．【答案】D

【解析】以菜花为材料进行研磨时，可以加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液，A项错误；为避免DNA断裂，加入蒸馏水要缓慢，B项错误；将丝状物溶解到2mol·L-1NaCl溶液中后，加入与滤液体积相等的、冷却的、体积分数为95%的酒精溶液，静置2～3min，以析出含杂质较少的DNA，C项错误；为避免DNA断裂和降解，要向DNA溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌，D项正确。

2．【答案】D

3．【答案】B

【解析】A项的做法是为了充分释放出核中的DNA分子，使进入滤液中的DNA尽量的多；C项是让DNA充分沉淀，保证DNA的量；D项的道理同C项；而B项的操作并不能使DNA增多或减少。

4．【答案】C

【解析】NaCl溶液浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低；NaCl溶液浓度小于0.14mol/L时，随着NaCl溶液浓度的升高，DNA的溶解度逐渐降低；NaCl溶液浓度大于0.14mol/L时，随着NaCl溶液浓度的升高，DNA的溶解度逐渐升高。

所以C选项是正确的。

5．【答案】C

【解析】根据“DNA的粗提取与鉴定的实验”原理：

①DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变的。

当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低，利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。

②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。

利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

③洗涤剂能瓦解细胞膜但是对DNA没有影响。

④蛋白质不能耐受较高温度，在80℃条件下会变性，而DNA对温度的耐受性较高。

⑤蛋白酶能水解蛋白质，而对DNA没有影响。

⑥DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

C选项不属于该实验的原理。

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6．【答案】B

7．【答案】B

【解析】图1所示的步骤是提取含杂质较少的DNA，具体操作是在滤过的溶液中，加入冷却的、体积分数为95％的酒精溶液50mL，并用玻璃棒搅拌，溶液中会出现含杂质较少的白色丝状物。

用玻璃棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。

这种丝状物的主要成分就是DNA，A正确。

提取含杂质较少的DNA利用的原理是DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中蛋白质、脂质等物质可以溶于酒精溶液，B错误。

图2所示的步骤是DNA的鉴定，具体操作是取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的氯化钠溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。

因此，图2中的溶液b可以溶解DNA，D正确。

然后，向两支试管中各加入4mL二苯胺试剂。

混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化，C正确。

8．【答案】D

【解析】鸡血、菜花中都含有DNA，而猪是哺乳动物，其成熟的红细胞中不含DNA，因此实验材料选择错误的组别是丙，A正确；甲、乙、丁的实验材料中都含有DNA，但乙为植物，将植物细胞放入蒸馏水中时，植物细胞不会吸水胀破，且DNA应该用二苯胺鉴定，而不能用双缩脲试剂鉴定，因此沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁，B正确；甲组实验现象差的原因是25℃的酒精对DNA的凝集效果差，C正确；乙为植物，将植物细胞放入蒸馏水中时，植物细胞不会吸水胀破，且DNA应该用二苯胺鉴定，而不能用双缩脲试剂鉴定，D错误。

9．【答案】

（1）菜花中的DNA含量相对较高

（2）使研磨充分洗涤剂和食盐

（3）溶解DNA，析出不溶的杂质分解蛋白质

（4）二苯胺ANaCL溶液和二苯胺试剂

10．【答案】

（1）B

（2）①C→B→E→D→A②加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出③充分预冷提取含杂质较少（或较纯净）的DNA

（3）二苯胺蓝色

【解析】

（1）根据DNA粗提取和鉴定的原理：

DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；

DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；

DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度，洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；

在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。

分析选项可知，B正确。

（2）

根据DNA的粗提取和鉴定步骤：

加入蒸馏水，破碎细胞→过滤，获取含DNA的滤液，去除滤液中杂质，DNA的析出，鉴定。

所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。

C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂，E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低，析出DNA。

DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步骤中所用酒精必须经过充分预冷才能使用，以便除去溶于酒精的杂质，提取含杂质较少（或较纯净）的DNA。

（3）DNA鉴定用二苯胺水浴加热，呈蓝色。

11.【答案】BCD

质，D正确。