犬的解剖实验报告.docx

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犬的解剖实验报告

犬的解剖实验报告

　　篇一：

解剖实验报告

　　蛙类坐骨神经–腓肠肌标本制备、不同频率刺激对肌肉收缩的影响

　　一．目的要求

　　1.掌握蛙类双毁髓的试验方法；

　　2.掌握坐骨神经—腓肠肌标本标本的制作方法；

　　3.观察不同刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。

　　二．基本原理

　　蛙类动物的某些基本活动，如神经的生物电活动、肌肉收缩等与哺乳动物相似。

其离体组时所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握，而且动物来源丰富，因此在生理实验中常用蛙类的坐骨神经—腓肠肌标本和坐骨神经标本来观察组织的兴奋性、刺激与反应的规律以及骨骼肌收缩的特点等。

肌肉受到一次阈上刺激而产生的一次收缩为单收缩，其过程可分为三个时相，即潜伏期、缩短期和舒张期。

肌肉受到连续的阈上刺激时，如果刺激间隔小于单收缩的过程，相邻两单收缩的时相会出现融合，表现为强直收缩现象。

如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩的缩短期，称完全强直收缩，如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩的舒张期，称不完全强直收缩。

使用生物信号采集处理系统，可以观察到腓肠肌收缩的情况。

　　三．实验材料

　　实验动物：

健康青蛙一只；

　　实验器材和药品：

蛙类手术器械一套（粗剪刀一把，组织剪一把，眼科剪一把，镊子一把，探针一根、玻璃分针2把，蛙钉4个、培养皿一个，蛙板一个、滴管一个、棉线若干），张力换能器，肌槽，刺激电极，铁架台，生物信号采集处理系统，微机，任氏剂。

　　四．实验步骤

　　捣毁蟾蜍脑脊髓：

取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。

左手握蛙，用食指下压头部前端，拇指按压背部，使头前俯。

中指与无名指夹其前肢，无名指与小指夹其后肢，使整个躯干做最大屈曲。

把探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使其逐渐刺入整个椎管内，完全彻底捣毁脊髓。

脊髓破坏完全的标志是：

下颌呼吸运动消失，反射消失，四肢松软。

　　剪除躯干上部和内脏，去皮，制备下肢标本：

用粗剪刀在骶髂关节前1厘米处剪断脊柱，握住蟾蜍下肢，沿躯干两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。

此时躯干上部及内脏即全部下垂。

剪除全部躯干及内脏组织。

剪去肛周皮肤；用圆头镊子夹住脊柱，注意不要碰到坐骨神经，捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。

将全部皮肤剥除后，把标本置于盛有任氏液的培养皿中。

洗净双手和用过的全部手术器械。

　　分离两下肢：

避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开，将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。

取出一下肢，用蛙钉固定于蛙板上，固定时要注意，坐骨神经和腓肠肌朝上。

先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分直至腘窝，在分离过程中，把神经周围的结缔组织去除干净，并把神经的细小分支剪断，但要注意不要用金属器械碰触神经，也不要对神经过度牵拉。

实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。

　　用玻璃分针游离腓肠肌，并在下面穿线，在跟腱处打结。

在结扎线的下方剪断跟腱，在膝关节处把除腓肠肌外的小腿其他部分剪除。

注意保持完整的腓肠肌。

用棉线在靠近脊柱的位置结扎坐骨神经，并在结扎线的上方剪断神经，用眼科剪剪断坐骨神经的全部分

　　支。

从腘窝处开始剪掉大腿所有的肉，尽量把股骨刮干净，在膝关节上至少1cm处剪去上段股骨。

将标本浸入任氏剂的培养皿中。

　　实验装置与仪器连接：

1.将标本股骨残端固定在肌槽上的小孔内；2.将结扎腓肠肌肌腱的棉线与张力换能器连接，调节棉线的松紧，要与桌面垂直；3.将神经置于肌槽的刺激电极上，用任氏剂保持标本湿润；4.刺激电极插入微机上的刺激输入孔；5.张力换能器与微机相应通道相连。

　　打开电脑，进入生物信号采集处理系统，在菜单栏选择“实验项目”--------》“神经肌肉”-------》“刺激强度与反应的关系实验模块”点击开始，调节刺激参数，使频率自动逐渐递增，串间隔为2.连续记录不同频率时的肌肉收缩曲线。

　　五．结果与分析

　　不同频率刺激对肌肉收缩的影响：

串间隔为2,频率增量为1时的张力变化（如图）可见单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩。

　　分析：

刺激强度到达阈刺激时腓肠肌开始收缩，在最大刺激收缩力前随刺激强度增大而增大，到达最大刺激强度后，收缩力不发生明显改变；在最大刺激强度条件下，某较小频率使腓肠肌发生单收缩，频率增大到，单收缩变为不完全强直收缩（如图中第2-6次刺激），频率继续增大，不完全强直收缩变为完全强制收缩（如图中第7、8次刺激）。

不同的腓肠肌其阈刺激，最大刺激均存在差异；其单收缩，不完全强直收缩和完全强直收缩所要频率也不尽相同。

　　六．实验总结

　　本次试验严格按照操作步骤进行，所得实验结果较为理想，很容易观察到腓肠肌的单收缩、不完全强直收缩、完全强直收缩现象。

在实验的过程中，制备坐骨神经-腓肠肌标本是最繁琐的步骤，也是实验成功的关键所在，期间，我们进行的比较缓慢，生怕弄错了哪一步，一步步想原理、回忆老师是怎么说的，所幸的是我们最终成功了，得到了较好的结果，在这次的不断尝试和思考中，很好地锻炼了我们的动手能力和思维能力。

　　离体蛙心灌流

　　一、目的要求

　　1、学习斯氏离体蛙心灌流法;

　　2、了解心肌的生理特性;

　　3、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素,乙酰胆碱等对离体心脏活动的影响。

　　二、原理

　　将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩，心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对心脏活动的作用。

心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。

血钾浓度过高时（高于/L），心脏兴奋性、自律性、传导性及收缩性都下降，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。

血钙浓度升高时，心脏收缩力增强，过高可使心室停搏于收缩期。

血钙浓度降低，心肌收缩力减弱。

血中钠离子浓度的轻微变化，对心肌影响不明显，只有发生明显变化时，才会影响心肌的生理特性。

肾上腺素可使心率加快、传导加快及心肌收缩力增强，乙酰胆碱则与肾上腺素的作用相反。

　　三、实验仪器

　　青蛙、常用手术器械、蛙板、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿、纱布、棉线、橡皮泥、任氏液。

蛙心套管、套管夹、0．65％NaCl、5％NaCI、2％CaCl2、1％KCl、1：

5000肾上腺素、1：

10000乙酰肌碱、300U／mL肝素。

　　四、方法与步骤

　　1、斯氏蛙心插管法

（1）一只青蛙，双毁髓后背位置于蜡盘中，按前面的方法暴露心脏。

仔细识别心脏周围的大血管。

在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎。

再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。

左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。

选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量任氏液的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥。

当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内。

此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功。

用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。

稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧，再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管。

轻轻提起套管和心脏，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系，使心脏离体。

用任氏液反复冲洗心室内余血，使套管内灌流液不再有残留血液。

保持套管内液面高度一致，即可进行实验。

（2）将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉。

再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连（如右图）。

注意：

勿使灌流液滴到传感器上。

调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。

　　2、实验观察

　　记录正常心搏曲线

　　改用0．65％NaCI溶液灌流，并作好加药标记，观察心搏变化。

待曲线氏插管装置出现明显变化时，立即吸去套管中的灌流液，同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗2—3次，待心搏恢复正常。

注意：

换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线，同时保持灌流液面一致。

观察可得，NaCI溶液会阻遏心脏搏动。

　　迅速用新鲜任氏液清洗2～3次，待心搏恢复正常。

向套管内加入1～3滴2％CaCI：

溶液，观察并记录心搏曲线的变化。

当出现明显变化时，立即更换任氏液，待心搏恢复正常。

　　同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液，记录心搏曲线的变化。

当心搏曲线变化时，同法更换灌流液，待心搏恢复正常。

　　同法记录套管中加入l～2滴的肾上腺素溶液后心搏曲线的变化。

　　同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液后心搏曲线的变化。

　　五、实验结果与原因分析

　　曲线的幅度————收缩的程度

　　曲线的密度————心率

　　曲线的基线————舒张的程度

　　1、正常收缩曲线图

　　分析：

　　2、滴加含钠离子溶液图

　　分析：

滴加Na离子溶液后，心跳减弱，这种现象出现的原因是由于灌注液中缺乏Ca2+，当Na＋明显增高时，膜内外钠离子的浓度梯度增大，因此，细胞Na离子内流加快，去极速

　　2＋度和幅度均增加，导致传导性和自律性增高。

同时，Na离子内流的增多促进细胞内Ca的

　　2＋外运使细胞内Ca浓度降低，因此，心肌收缩能力减弱。

　　3、滴加2%CaCl溶液

　　分析：

细胞外Ca2＋在细胞膜上对Na＋内流有竞争性抑制作用，称为膜屏障作用。

[Ca2＋]增高时，Na＋内流受抑制，细胞0期除极速度与幅度减小，使兴奋性及传导性均降低。

[Ca2＋]增高使Ca2＋内流增多，因此慢反应细胞0期去极化加快加强，传导性增高，而快反应细胞平台期缩短，有效不应期缩短，复极加速。

Ca2＋内流增多，使心肌收缩能力增强。

[Ca2＋]降低时，所引起的变化与高钙时相反。

因此加入CaCl2后，心率减少、振幅减少，基线上移。

　　篇二：

犬解剖图整理

　　篇三：

动物解剖生理实验指导

　　实验内容

　　实验一、显微镜的使用、组织切片的显微观察实验二、犬骨骼的观察、骨骼辨认测试

　　实验三、血液的凝固

　　实验四、红细胞的脆性试验

　　实验五、蛙心活动观察

　　实验六、红细胞计数

　　实验七、反射弧分析及脊髓反射活动观察

　　实验八、胃肠运动观察和小肠吸收观察

　　实验一显微镜的构造、使用和保养

　　[实验目的]

　　了解显微镜的基本构造，掌握显微镜的使用方法和保养方法。

　　[材料设备]

　　显微镜、组织切片、擦镜纸等。

　　[方法步骤]

（一）机械部分

　　1、镜筒

　　2、物镜转换器

　　3、镜臂

　　4、调焦器

　　5、载物台

　　6、镜柱

　　7、镜座

（二）光学系统部分

　　光镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置（反光镜、聚光器和光圈等）。

　　1、目镜：

常见的有5×、10×和15×（×表示放大倍数）的目镜，可根据不同的需要选择使用，最常使用的是10×目镜。

　　2、物镜：

常用物镜的放大倍数有10×、40×和100×等几种。

一般将8×或10×的物镜称为低倍镜（而将5×以下的叫做放大镜）；将40×或45×的称为

　　高倍镜；将90×或100×的称为油镜（这种镜头在使用时需浸在镜油中）。

　　图1-3物镜的性能参数及工作距离

　　C线为盖玻片的的上表面，10?

物镜的工作距离为；4