S7实验七 大蒜离体繁殖理论.docx

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S7实验七大蒜离体繁殖理论

实验七大蒜离体繁殖（理论）

植物离体快速繁殖

又称微体快繁，是指利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖的方法。

是常规营养繁殖的扩展和延伸。

特点：

繁殖数量大，速度快

一、意义与作用

是改良品种、培育新品种的一种手段；获得大量优质苗木的有效方法。

1、繁殖系数高，繁殖周期短，繁殖速度快

2、应用广泛

3、材料用量少，不受季节限制，可工厂化生产

4、能获得无毒苗木无性系

5、木本植物应用潜力大

二、基本程序

分为5个时期

1、稳定的无菌培养体系的建立时期

指从外植体选择、采取、清洗、灭菌、接种和茎芽发生，直到获得茎芽稳定生长和增殖、茎芽扩繁数量可随意控制的时段。

本期目标：

◆成功地无污染接种，并且诱导茎芽发生

◆提供合适的试管环境使培养物的生长达到稳定

过程包括：

◆外植体选择、外植体灭菌、培养基选定和稳定化培养

2、稳定培养系的增殖、生长和增壮时期

◆达到稳定状态的培养物通过不断的继代培养进行增殖、到达需求数量

◆是商品化组织培养的主要时期

分为3个阶段：

◆培养物保存阶段◆培养物大量增殖阶段◆培养物生长和增壮阶段

基本目标：

◆维持培养物的稳定状态◆不断增殖茎丛达到需要数量

措施：

◆调整培养基成分及含量◆以细胞分裂素为主，生长素为辅

◆温度、光照的改变

3、诱导茎芽生根形成小苗时期

使上一期培养的微枝发出不定根，形成完整小苗，便于经过驯化、培养成商品苗。

功能：

◆保证组织培养微枝的生根

◆安全地从试管内无菌环境转移到试管外有菌环境

茎芽生根诱导的途径：

A、试管内生根

培养基总盐浓度低，无机盐含量低，细胞分裂素可不含有，生长素有一定量，降低蔗糖浓度，琼脂含量高

B、试管外生根

优势：

根系发育好，根毛多，木质化程度高，分生能力强，生长速度快，茎干皮层细胞个体较小、液泡小，叶片角质层发达、气孔内陷、抗蒸腾能力和适应能力强，光合能力强

注意：

试管外生根不是万能的，对于难生根植物，试管内生根还是唯一选择。

4、生根小苗移栽和驯化时期

本阶段含两个过程：

◆异养阶段过度到自养阶段

◆人工环境过度到室外环境

措施：

◆将小苗分级◆炼苗：

一般1周左右◆选定好植场所

◆严格移栽技术，科学确定移栽时间◆移栽后管理

5、商品苗培育时期

经过驯化培养的小苗，可按照一般苗木的培育要求进行培养

三、植物离体无性繁殖中的器官发生方式

有五种方式：

1、不定芽型

a、繁殖率高

b、能保持遗传稳定性

c、缩短繁殖周期

2、器官型

a、繁殖率高，但速度慢

b、遗传性稳定

3、器官发生型

a、繁殖速度快

b、遗传性不稳定，易产生变异

c、愈伤组织是遗传转化、细胞培养或原生质体培养的良好材料

4、胚状体发生型

a、数量多、速度快、繁殖系数高；

b、遗传性稳定。

5、原球茎型

指兰属特有的器官发生方式，即外植体经培养产生原球茎，再直接长成植株。

四、影响因素

（一）内因

1、外植体

◆基因型◆外植体类型及其生理状态

◆外植体大小◆取材植株的年龄及生理状况

2、继代培养次数

◆继代次数多◆器官建成能力下降

◆根分化和茎分化具有相同规律

3、愈伤组织的遗传特性及生理状态

◆愈伤组织增殖培养越久或代数越多，转移到分化培养基上时，形态发生就会越困难，甚至丧失

◆愈伤组织块过大也不利于分化

原因：

◆长期培养导致染色体组变化

◆产生多倍体或非整倍体

4、芽的增殖途径

◆嫩梢扦插增殖途径

关键是外植体芽位的选取

◆丛生芽增殖途径

◆器官发生途径

愈伤组织器官形成

◆胚状体途径◆原球茎途径：

兰科植物的增殖

（二）外因

1、培养基

2、培养条件

五、无糖组培快繁技术简介

植株生长方式

◆自养：

依靠自身光合作用进行

◆异养：

依靠培养基中糖进行

◆混养：

前二者兼有

糖易导致污染发生

1、技术原理

用人工控制手段，以CO2代替糖作为碳源，提供最适条件，促进植株光合作用，从而促进植物的生长发育，在短时间内，较低生产成本下，快速繁殖大量优质种苗。

2、措施

A、培养容器

设计并使用具有控制湿度、气体的流动、CO2浓度、热的扩散的自动化容器。

特点：

透光性好，便于气体交换，分布均匀，利于CO2的吸收

B、培养基质

◆采用多孔有机材料来替代琼脂、卡那胶

◆蛭石、珍珠岩、砂、塑料泡沫、石棉、陶棉、纤维素等

特点：

良好的透气性，生产成本低

C、CO2输入

◆替代糖，减少了微生物的污染，促进植株自养

◆人工换气加速了气体的交换，满足了植株的生长需气量

3、优势

◆通过人工控制，动态调整优化植物生长环境

◆大幅度减少了植物组培过程中微生物的污染

◆节省投资，降低生产成本

◆工艺简单化，流程缩短，技术和设备的集成度提高

◆降低操作技术的难度和劳动作业强度，易于规模化生产