光合细菌培养技术.docx

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光合细菌培养技术

光合细菌培养技术

一、绪言

　　1、生命起源

　　46亿年前地球诞生时是炽热、混沌的，一切元素都呈气体状态，没有生命。

最初的生命是地球温度下降以后，在极其漫长的时间里，由非生命物质经过复杂的化学变化过程，逐步演变而成的。

那时候，地球上火山内部喷发出来的气体中含有甲烷、氨、氢、硫化氢等，在大自然不断产生的宇宙射线、闪电的作用下，合成了氨基酸、核苷酸、单糖等一系列简单的有机小分子物质，它们经过长期积累,相互作用,在适当条件下，就形成了原始的蛋白分子和核酸分子。

又经过漫长时间的演化，38-35亿年前，终于形成了具有原始新陈代谢和能够进行繁殖的原始生命-古细菌。

　　地球出现原始生命后，又经过几十亿年的进化逐步形成了今天丰富多彩的生物界，大致可分为三大类：

植物界、动物界和微生物界。

所谓微生物是指一类个体微小，结构简单，肉眼无法看到的微小生物。

它们有细菌、真菌、放线菌、螺旋体、立克次体、衣原体、支原体、病毒等种类。

广泛存在于空气、海洋和陆地中，繁殖快，分布广，种类多。

十七世纪，显微镜发明家虎克（hoek）首次在水中发现了微小生物-细菌，从此揭开微生物界神秘的面纱。

细菌属于原核生物，没有完整的细胞核，它由细胞壁、细胞膜、细胞质和核区组成，有的还有鞭毛，鞭毛是细菌的运动器官.细胞大小约为1微米-10微米.细菌分三大类：

种类最多的杆菌、数目最多的球菌及纤细活泼的螺旋菌。

　　细胞壁位于菌体的最外层，具有一定的弹性和坚韧性，它对细胞有支持和保护作用。

其化学成份一般为多糖、蛋白质和脂类。

　　细胞膜是介于细胞壁和细胞质之间一层极薄的膜，成分主要是蛋白质、脂类。

它使细胞能保持相对的稳定性，维持正常的生命活动，具有渗透性，在酶的作用下，能选择性地让一些小分子物质进入或排出，与细菌的新陈代谢密切相关。

　　细胞质是细胞膜以内的原生质，为透明胶状物。

主要包括基质和细胞器。

　　核区是不完整的细胞核，是组成核物质集中的区域，是核糖体、脱氧核糖核酸等遗传物质贮存和复制的场所。

　　2、光合细菌概述

　　光合细菌（PhotoSyntheticBacteria简称：

PSB）属细菌中的一类，有紫硫菌、绿硫菌、紫色非硫细菌和绿色非硫细菌。

这里，我们将主要介绍紫色非细菌，它们是兼性厌氧菌，属原核生物界，光能异养型原核生物门，红色光合细菌纲，红螺菌目，红螺菌科，红假单胞菌属，主要有荚膜红、沼泽红、球形菌、深红红螺菌等种类。

菌体外形有螺旋状、短杆状、近于球形和球形的。

一般规格：

长×宽＝1微米-3.2微米×0.6微米-0.8微米,球形菌直径0.8微米-1.5微米。

它们以光和热为能源，主要利用有机物中的碳，同化其它营养进行元素进行生长繁殖，是高营养、高效能、多用途的有益微生物。

　　3、光合细菌用途

　　光合细菌生命力、适应性都很强，在生长繁殖过程中能分解有机物和吸收水体中的氨态氮、硫化氢、亚硝酸盐等有害物质，本身无毒无污染。

它在光照厌氧条件下生长旺盛，在无光黑暗通气条件下亦能生长，但不合成红色素，易经诱导产生广泛的适应酶，对降解某些有毒或人工合成化合物具有潜力；耐低温（即使冰冻也不会死亡）和高盐度（20%），适合处理高浓度有机废水，是优良的水环境改良剂。

　　光合细菌菌体营养丰富，含蛋白质（60%以上），维生素B12、叶酸、核黄素、类胡罗卜素、辅酶Q10等促长因子和生理活性物质，是优良的饲料添加剂。

　　光合细菌以土壤接受的光和热为能源，将有机和无机营养物质转化成易为植物吸收的小分子物质。

同时光合细菌除本身的有机营养物质外，还含有铜、锌、钼、钴、镍等微量元素，含量适中，施用后，可补充土壤所缺，提高肥效，是优良的植物肥料。

　　4、光合细菌应用

（1）.养殖业

　　我国是养殖大国，近年来，养殖业取得了很大的发展。

但是，传统的水产和畜禽养殖成本高，产量小，效益低，特别是养殖中使用的各种消毒剂和抗生素,即破坏养殖环境，污染水产品，又增加养殖成本。

如何有效地克服上述缺点呢？

光合细菌作为优良的水环境改良剂和饲料添加剂，用于养殖业在我国才是近几年的事，由于最早使用光合细菌的用户，取得了很好的效果和较大的经济效益，因此目前倍受推崇，大有普及之势。

那么，光合细菌究竟起到什么样的作用呢？

　　①净化水质

　　由于高密度水产养殖的水体中，含有大量的鱼类粪便和残饵，以及鱼药的残留物，它们腐败后产生的有害物质直接污染水体和底泥。

轻度污染可造成鱼类生活不适，饲料系数增高，生长缓慢，免疫力下降；积累到一定程度后，能使鱼类中毒、发病甚至死亡。

这是由于有害物质，除直接危害鱼类外，同时也是病原微生物的营养源，并使之大量繁殖，使鱼类染发病。

兼性厌氧的光合细菌能改善水质的主要原因，是它在分解有机质时不产生有害物质，并且还能利用有害物质作为营养源，长成自已的有益细胞，变害为宝；形成优势群落后，还能竞争性地抑制病原微生物的生长，降低感染机率。

从而净化水质使鱼类健康生长。

　　②维持微生态平衡

　　养殖的水体中存在着各种各样的微生物，有的是有益的；有的是有害的；有的处于中间状态，叫"条件致病微生物"，即正常情况下，这类微生物不致病，但在水质恶化，鱼类免疫力下降时，便大量繁殖危害鱼类。

自然界中，有害微生物和条件致病微生物都叫"病原微生物"是不可排除的，广义上讲，它们有利于生物进化。

它们能使一些不健康的、免疫力低或退化了的生物体被淘汰。

但是，无论是有害微生物还是条件致病微生物，必须在水体中达到一定浓度才能危害鱼类，这个浓度叫"发病临界点"。

不同种或不同体质的鱼，发病临界点不一定相同。

在渔业生产中，控制病原微生物的浓度，使其达不到发病临界点，是健康养殖的关键。

通常人们采用消毒杀菌剂来控制，但随着施用次数的增加，病原微生物的耐药性亦相应增强，为了达到预防效果，施用剂量逐步加大，这不仅增加了用药成本，还污染了水体，造成水产品品质下降，甚至不能食用。

同时鱼类易产生应激反应，停食、消瘦，浪费有限的生长期。

到了鱼类发病需要治疗的时候，安全剂量治不了病，大剂量施用又危及鱼类，这个矛盾制约了水产业的发展。

　　如何控制病原微生物的生长繁殖，并使其不产生耐药性呢？

光合细菌可基本克服消毒杀菌剂的缺点，它通过降解或清除水体中包括鱼药在内的有害化学物质；与病原微生物争夺营养、空间，使其无法大量繁殖，从而不易形成致病的环境条件。

假如由于病原微生物的原因，鱼类发了病，说明它在水体中的浓度已达到或超过发病临界点，在微生物群体中占优势，此时，再用光合细菌治疗是没有明显效果的.须用消毒杀菌剂治疗,6-7天后,再施用光合细菌保养水质。

　　鱼类病害防治原则是：

防重于治。

只有在日常渔业生产中，维持水体微生态平衡，使有益微生物始终占绝对优势，才是健康养殖的出路。

如果平时不有效地预防，到了出现症状时再去治疗，那么，包括鱼药成本在内的重大损失将是不可避免的。

　　③培养浮动物作饵料

　　光合细菌营养丰富，这正是浮游动物的优质饵料。

实践证明，水体中光合细菌越多，浮游动物生长繁殖越旺盛,以浮游动物为食的鱼类增产效果也就越明显,如虾、蟹、花鲢、河蚌等。

浮游动物作为仔鱼、糠虾、贝苗等开口饵料，营养价值高，易于消化吸收。

此外，光合细菌对于刚孵化后，还不能主动捕食的仔鱼是最适宜的饵料，此时仔鱼的消化系统各器官尚未完全分化，光合细菌通过鳃被吸入体内，在卵囊尚未被完全吸收的同时，即可从外界摄取营养，以弥补内源性营养的不足，从而大大提高成活率。

　　④间接增氧

　　光合细菌分解有机质进行生长繁殖时，不需要氧气，也不释放氧气，它节约了好氧微生物分解有机质时所需的氧，产生间接增氧作用。

但随后好氧的浮游动物因得到丰富的饵料，数量剧增，增氧效果就不明显了。

　　⑤饲料添加剂

　　在相对营养不良的情况下,养殖动物的免疫力下降,有害菌得以发展，容易出现疾病症状。

一般情况下，配合饲料中的活性营养成份较少，饲料系数较高。

光合细菌作为优良的饲料添加剂，含有大量的促长因子和生理活性物质，营养丰富，拌和饲料后，可补充和增加饲料营养成份、降低饲料系数；刺激动物免疫系统，促进胃肠道内的有益菌生长繁殖，增强消化和抗病能力，促进生长。

（2）.种植业

　　光合细菌肯有很强的固氮能力，能够改善土壤的营养结构,肥沃土壤,可作为基肥、追肥。

光全细菌在土壤中大量生长繁殖，有利于土壤中有效力微生物（如放射线菌）的生长，减少有害菌群（如丝状真菌）引起的病害。

　　光合细菌作为农作物，用于水稻和小麦，有利于根系发育，提高有效分蘖和成穗数，用于蔬菜及花卉等，可提高产量和品质，延长保鲜期；用于浸泡种子，发芽率高、生长速度快、抗病力强。

对棉花的枯黄、草莓的根腐病等防治效果显著。

　　（3）环保业

　　生物学污水处理法是指通过微生物酶的作用，分解和合成有机质。

其中起主要作用的是细菌，污水中一些可溶性的有机物在胞内酶的作用下被菌体选择性地吸收；颗粒、胶体等难溶或不溶性的有机物先附着在菌体外，由菌细胞分泌的胞外酶分解成脂溶性和水溶性物质，再被菌体吸收。

通过微生物体内的生化作用，反一部分有机物同化成自身，另一部分被异化成水分子有机物、二氧化碳、水等，从而使污染物质得到降解。

　　光合细菌兼性厌氧的我和很强的适应性，使其在污水发酵处理中，作用日益突出。

例如光合细菌（荚膜红假单胞菌）可将致癌物亚硝胺转化为无毒的化合物，对于生化需氧量（BOD）高达数千mg/L的有机废水，一些生物膜法及活性污泥法等需氧处理法难以耐受，而光合细菌则可以承受，故在处理高浓度有机废水方面具有广泛的应用前景。

二、光合细菌培养条件

　　1、营养条件

　　光合细菌细胞体构成元素主要有：

碳、氢、氧、氮、磷、钾、钠、镁、钙、硫和一些微量元素等，它们也是所有生物细胞构成的主要物质。

一般情况下，细胞鲜重：

水占80％-90％、无机盐1％-1.5％、蛋白质7％-10％、脂肪1％-2％、糖类和其它有机物1％-1.5％。

其中干细胞含碳45％-55％、氢5％-10％、氧20％-30％、氮5％-13％、磷3％-5％、其它矿物元素3％-5％。

光合细菌的细胞壁具有半透性，能选择性地让一些营养元素按一定比例进内，在酶的作用下合成自己的细胞组织和裂新的个体。

　　营养元素的全面和搭配的合理,是营养条件的关键。

根据这一要求,选用多种食品添加剂，科学配方，经特殊加工而成的"光合细菌培养基"（图2），基本符合光合细菌生长繁殖所需的营养要求，无毒无副作用，使用安全，固状结晶体便于包装和运输，而且有2年的保质期。

用其生产菌液（每毫升含有30-50亿个活菌体），成本每500克仅0.4元，且现制现用，质量明优于市售同类产品。

　　光合细菌培养基（产品：

Q/321081BJA001-2000,即光合细菌高效生长剂），是光合细菌生长繁殖所需各种营养元素的组合体。

每种原料都能得以充分利用，最大限度地生产高浓度的菌液，因此，单位效价的光合细菌菌液生产成本低、质量好，这无论是对于用户、经销商还是厂家都有很大的益处，对在工农业生产中的推广和普及将产生深远的影响。

　　2.环境条件

　　有了营养全面的光合细菌培养基，才是内因，还不能培养出光合细菌菌液。

还需有适宜光合细菌生长的环境条件，才能培养出优质的菌液。

环境条件具体有以下几个方面：

（1）.培养介质：

含菌量较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水。

从经济、实用的角度考虑，地下水含菌量低，为最佳水源；清洁的地表水也可使用；含氯量较高的自来水应敞口放置两三天或调PH值至偏碱后使用；蒸馏水及纯净水固然很好，但成本太高，可用于提纯菌种。

（2）.酸碱度（PH）值：

7.5-8.5最佳（适应范围6-10）。

　　（3）.水硬度：

PH值中性时10度以下。

即调节PH值至8.0左右时，培养介质中的乳白色沉淀物不宜过多。

　　（4）.温度：

25℃-34℃最佳（适应范围15℃-40℃）。

　　（5）.光照度:

3000LX-4000LX最佳。

即每25千克菌液需用60瓦左右的电灯泡进行光照，当然，太阳光最好且无需成本。

　　（6）.透气性：

密闭、敞口皆可培养，密闭效果更好。

　　（7）.容器：

透明或白色容器；大规模培养可用土池、水泥池等，菌液深度30厘米以下为佳。

三、增菌培养

　　光合细菌具有生长优势强，培养条件要求不高，施用对象对菌液纯度要求不十分严格等特点，因而适合用户在普通条件下生产。

为了便于了解培养过程，掌握生产技术，现以样品为例介绍两种培养方法。

若培养海水光合细菌，只需将介质换成海水或每25千克淡水加450克的粗食盐即可。

样品：

1.光合细菌培养基（简称培养基）1袋）280克）。

2.菌种350克。

浓度为每克30亿个活菌体，简称30亿级（图3）

1.培养方法一：

材料（图1）：

本着实用和便于取材的宗旨,特备如下材料，供参考。

1、容器：

①清洁透明玻璃瓶或塑料瓶500毫升3只、1250毫升7只

②10升容积的塑料桶1只

　　③25升容积的塑料桶1只（装水用）

　　④50升容积的广口塑料桶1只

　　⑤小塑料漏斗1只

　　⑥玻璃杯1只

　　⑦5升塑料盆1只

　　2.水25千克

　　3.培养基1袋

　　4.菌种（优质成品菌液350克）

　　5.精密试纸1本（PH值范围5.5-9.0）

　　6.氢氧化钠（烧碱）30克（不得用手触摸，以免烧伤皮肤）

　　7.装满水插入温度指示瓶1只

　　8.电灯炮3只（25瓦、40瓦、60瓦）

　　9.清洁木棒2支（一支20厘米、另一支60厘米）

　　10.称量工具：

天平、秤

　　11.纸箱2个（体积视具体情况而定）

步骤

　　第一次培养

　　1.称取1.25千克的水倒入小塑料盆。

2.用天平称取培养基14克（图4），放入盆中，用木棒搅动，溶解制成培养基溶液。

　　3.用试纸测出溶液的PH值。

如是8.0左右为正好；如大于9.0，则需用盐酸下调至8.0（实际上在我国未发现有溶入培养基后，PH值还超过9.0的水源）；如小于7.5则用氢氧化钠溶液上调至8.0。

设测出的PH值为6.5。

需上调PH值。

　　4.取100克水,倒入玻璃杯中，再取氢氧化钠2克加入，搅拌溶解后，制成氢氧化钠溶液。

　　5.将培养基溶液搅动，加入氢氧化钠溶液10%左右，静置半分钟，用试纸测其PH值，如不能达到8.0，搅后再加10%，如此反复，直到PH值调至8.0为至（图5）。

计算所用掉氢氧化钠溶液量,推算出实际用掉氢氧化钠的重量,作为以后制备氢氧化钠溶液的参照数值。

上调PH值时，如出现少量白色絮状凝胶团，为正常现象，不影响培养效果。

调好PH值的溶液即为培养液。

　　6.从350克的菌种中取出250克，其余备用。

将250克的菌种加入到培养液中（图6），搅拌均匀，制成混合培养液，简称菌液。

菌液的重量为：

水1250克+培养基14克（忽略不计）＋菌种250克＋氢氧化钠（忽略不计）＝1500克。

菌种与培养液的比例为1：

5。

　　7.设菌液的密度为1克/毫升，则菌液的体积为1500毫升。

取500毫升容积的清洁透明玻璃瓶3只，用漏斗将菌液装入瓶中，拧紧瓶塞。

8.对菌液进行连续地光照和保温培养。

取纸箱一只，将菌液瓶和温度指示瓶贴近纸箱内壁放置，灯炮悬于箱内中部距瓶约10厘米处（图7），保持温度25℃-34℃。

注意观察温度的变化，如果温度过高，应更换小灯泡，仍过高，应打开箱散热，否则会蒸死细菌；如果温度低，应盖上箱盖增温，仍达不到要求，应更换大灯泡，否则会延长培养时间；室外温度适宜时，也可置于阳光下培养，谨防温度过高（45℃）！

　　9.菌液的光照和温度都适宜后，细菌就进入了增殖阶段。

每天颜色、气味、PH值、透光度和漂浮物等都有不同程度的变化，情况如下：

　　前3-4小时,菌种适应培养基,吸收水份和营养物质,细胞膨胀,将要裂殖,液体无明显变化。

　　48小时后，菌液的颜色更深，透光度更低，气味更浓，PH值也会有所升高，3-5天后升到9.0左右就不再升高了。

　　72小时后，菌液中的细菌浓度已很高，效价可达30亿级，颜色深红，有臭味，透光度低，PH值9.0左右，液底有少量淤泥状沉淀物。

继续培养几天，细菌浓度还会继续升高，此时，可将菌液对照剩余菌种（图8），如果浓度已达到或超过菌种，菌液即为成品菌液，培养成熟。

10-15天后，菌液浓度达到最高值。

　　如上述，第一次培养结束后已得到1.5千克的成品菌液，可作为菌种再次培养扩大。

　　第二次培养

　　从上述得知现有菌种1.5千克（成品菌液），根据接种比例1：

5的要求：

　　1.称取7.5千克水倒入10升塑料桶中，再用玻璃杯从中取出少许，用于溶解氢氧化钠。

　　2.称取培养基84克放入桶中，搅拌溶解制成培养基溶液。

　　3.将培养溶液PH值调节至8.0左右，制成培养液。

根据"第一次培养"中实际用掉氢氧化钠的重量推算，称取此次的所需量，即第一次实际用量的6倍，将其倒入玻璃杯中，制成氢氧化钠溶液，用于调PH值。

　　4.将1.5千克菌种加入到培养液中，制成菌液，则菌液的总重量为：

水7500克＋

培养基84克（忽略不计）＋菌种1500克＋氢氧化钠（忽略不计）＝9千克，即体积为9000毫升。

　　5.取清洁透明塑料瓶和玻璃瓶，容积为1250毫升的7只、500毫升的1只，用漏斗将菌液分别装满1250毫升的瓶中，拧紧瓶塞，其余装入500毫升的瓶中。

　　6.将菌液瓶等放入纸箱，按照第一次培养的方法进行培养。

　　几天后培养成熟，可得9千克成品菌液，作下次培养的菌种。

　　第三次培养

　　经过前两次培养后，菌种已达到9千克，还剩水约16.25千克、培养基182克。

根据菌种与培养液的比例为1：

5的标准，菌种已明显超过,菌种接入量的增多，有利于缩短培养时间，提高成品菌液质量。

　　1.将所剩的16.25千克水倒入广口塑料桶中。

　　2.将所剩的182克培养基加入桶内水中，溶解制成培养基溶液。

　　3.称取氢氧化钠，调节PH值至8.0，制成培养液。

4.将9千克菌种倒入培养液中，制成菌液。

则菌液的重量为：

16.25千克水＋182克培养基（忽略不计）＋9千克菌种＋氢氧化钠（忽略不计）=25.25千克。

　　5.将菌液25.25千克直接留在桶中培养（图9）。

取电灯泡一只，悬于桶内液面上10-20厘米处；将温度计插入桶内菌液中；用塑料薄膜盖桶口，进行连续光照，并保持适当温度。

如果温度过低，可将桶置于纸箱内增温。

培养过程中适当搅动菌液，使之受光均匀，这样几天后，即可得到成熟的菌液约25千克。

　　样品培养完毕。

　　室外温度适宜，可将菌液直接置于阳光下培养。

　　此时，如果有足够的培养基和水，仍可按菌种与培养液1：

5的比例，反复培养扩大。

当达到所需用量时，留下一部分作菌种，其余施用。

　　操作要点：

　　①PH值8.0左右；

　　②菌种接入量不低于1：

5；

　　③温度25℃-34℃；

　　④光照度3000LX-4000LX；

　　⑤水硬度10度以下。

　　2.培养方法二（简便方法）：

　　材料

　　1.容器：

①清洁透明玻璃瓶、塑料瓶500毫升3只，1250毫升6只

　　②50千克容积的广口塑料桶一只

　　③小塑料盆1只

　　④小塑料漏斗1只

　　⑥10升容积的塑料桶1只

　　2.水25千克

　　3.培养基1袋

　　4.菌种（成品菌液350克，30亿级）

　　5.装满水插入温度计的温度指示瓶1只

　　6.电灯泡3只（25瓦、40瓦、60瓦）

　　7.清洁木棒两2支（一支20厘米、另一支60厘米）

　　8.称量工具：

天平、秤

　　9.纸箱2个（体积视具体情况而定）

　　步骤：

　　第一次培养

　　1.称量水250克倒入小塑料盆。

　　2.称取培养基2.8克溶于盆内水中，无需调节PH值，制成培养液。

　　3.取菌种250克加入培养液中，制成菌液。

菌种与培养液的比例为1：

1。

菌液的重量为：

水250克＋培养基2.8克（忽略不计）＋菌种250克＝500克，则菌液的体积为500毫升。

　　4.用漏斗将菌液装入500毫升瓶中，拧紧瓶塞。

　　5.取纸箱1只，将菌液瓶和温度指示瓶分别贴近纸箱内壁放置。

再将电灯泡悬挂于箱内中部（距瓶约10厘米），对菌液进行连续光照和保温培养。

注意观察温度的变化（25℃-34℃）

　　这样，3-5天后培养结束，得到约500克的成品菌液，可作为菌种再次培养。

第二次培养

　　由第一次培养已得菌种500克，根据菌种与培养液1：

1的要求。

　　1.取水500克倒入小塑料盆。

　　2.取培养基5.6克溶入盆内水中，制成培养液。

　　3.将菌种500克加入到培养液中制成菌液。

则菌液的重量为：

水500克＋培养基5.6克（忽略不计）＋菌种500克＝1000克，即体积为1000毫升。

　　4.取容积为500毫升的塑料瓶2只，用漏斗将菌液分别装入两只瓶中，拧紧瓶塞。

　　5.将菌液瓶等放入纸箱，对菌液进行培养，成熟后，可得到约1千克的成品菌液，作为下次培养的菌种。

　　依照上述方法，再经过3次培养，即可得到成品菌液约8千克作为菌种。

　　第六次培养：

　　1.取水8千克倒入广口塑料桶中。

　　2.取培养基89.6克溶入桶内水中，制成培养液。

　　3.将菌种8千克加入培养液中制成菌液。

则菌液的重量为：

水8千克＋培养基89.6克（忽略不计）＋菌种8千克=16千克。

　　4.将菌液留于桶中，内悬电灯泡于液面上10厘米处、温度计于菌液中，桶口覆盖薄膜，进行光照保温培养。

　　成熟后，可得到约16千克的成品菌液，仍作为下次培养的菌种。

　　第七次培养：

　　将剩余的水、培养基依次加入盛有16千克菌种的广口塑料桶中进行培养，成熟后可得约25千克成品菌液。

　　样品培养完毕。

　　室外温度适宜，可将菌液直接置于阳光下培养。

　　方法一与方法二的区别是：

　　①无需调PH值；

　　②菌种与培养液的比例为1：

1；

　　③培养周期短，质量好；

　　④单位时间总体增菌量少。

　　3.大规模生产方法介绍

　　根据光合细菌具有兼性厌氧、生命力强，易于培养等特点，本着便于取材，节约成本的宗旨，现采用"方法二"，以一次培养1吨菌液为例，简要介绍几种形式的培养

方法。

　　1.塑料桶培养法

　　材料（图10、11）：

　　①50升的透明或白色清洁广口塑料桶40只

　　②水1000千克

　　③菌种1吨（30亿级）

　　④培养基1箱（40袋，每袋可培养25千克菌液）。

　　往每只桶内加入25千克水和1袋培养基,搅拌使之溶解，再往每桶中加入25千克菌种，制成菌液，将温度计插入菌液中，用透明塑料薄膜覆盖桶口，并用橡皮筋扎紧，使之保持相对厌氧培养状态。

　　室外温度适宜情况下（25℃-34℃），将菌液直接置于阳光充足的地方培养；温度过低，可用透明塑料薄膜搭建温棚，采光增温，仍达不到要求，应采取其它增温措施；温度过高，将菌液置于通风的地方，仍过高，应在桶周围洒水降温。

　　如连续晴天，7-10天后可培养成熟；若有阴天，培养时间则相对延长，连续阴天，应采用功率较大的电灯泡悬于桶与桶之间，进行连续光照，由于白色塑料桶相对于透明塑料桶透光性较差，因此培养时间会相对延长。

培养成熟后即可得到1吨的菌液（菌种除外）。

2.土池（水泥池）培养法

　　材料：

①完好的桶状塑料薄膜（长8米，宽2米），塑料薄膜（长7米，宽4米）（图12）

　　②土池（长5米，宽1.8米，深0.4米）

　　③水1000千克

　　④菌种1吨（30亿级）

　　⑤培养基1箱（40袋）

　　在室外阳光充足的地方，先挖一个长5米，宽1.8米，深0.4米的土池，然后将塑料薄膜覆盖池底，整平，再将桶状塑料薄膜平铺在池中（图13）。

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