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申报资料模板09

尼麦角林

确证化学结构或组分的试验资料及文献资料

一、产品的名称、结构式、分子式、分子量

产品名称：

尼麦角林

化学名：

（8β）-10-甲氧基-1,6-二甲基麦角林-8-甲醇基-5-溴-3-吡啶羧酸酯

（8β）-10-Methoxy-1,6-dimethylergoline-8-methanol-5-bromo-3-pyridinecarboxylate

化学结构式：

分子式：

C24H26BrN3O3

分子量：

484.39

二、供确证化学结构用样品的纯度

批号：

030106

样品含量：

100.10％

含量测定方法：

照高效液相色谱法测定。

色谱条件：

用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-磷酸盐缓冲液（取无水磷酸氢二钾1.74g，加水900ml溶解后，加三乙胺1.0ml，用磷酸调节pH值至6.0，加水稀释至1000ml）（58：

42）为流动相，检测波长为280nm。

测定法：

取本品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含1.0mg的溶液，精密量取20ul注入液相色谱仪，记录色谱图；另取测定过水分与有关溶剂残留量的尼麦角林对照品（来源：

MPBiomedicals,LLC），同法操作。

按外标法以峰面积计算，即得。

三、试验结果及解析

1、理化常数：

（1）性状：

本品为白色结晶性粉末。

（2）溶解度：

在氯仿中极易溶解，在乙醇中溶解，在水中几乎不溶。

（3）比旋度：

[α]D=+21.08˚（C=40mg/ml，25.0℃，CHCl3）

（4）熔点：

133.5～135.5℃

2、高分辨质谱（MS）

（1）仪器型号：

BrukerDaltonicsInc.APEXⅡFT-ICR质谱仪，电喷雾源。

（2）测试图谱见附图1，主要碎片分析结果见表1。

表1质谱测定结果数据表

m/z

元素组成

碎片

486.1226

C24H27N3O381Br

484.1230

C24H27N3O379Br

454.0957

C23H23N3O281Br

452.0987

C23H23N3O279Br

374.1859

C23H24N3O2

373.1775

C23H23N3O2

（3）解析及结论：

高分辨质谱给出了样品的[M+H+]、M+-OCH3等离子峰，具体碎裂过程如下图所示。

质谱给出样品分子离子峰、裂解方式、碎片离子峰的特点与尼麦角林的结构特征是一致的。

3、红外吸收光谱（IR）

（1）仪器型号：

NICOLET傅立叶红外光谱仪NEXUS470

（2）校正和检定：

按中国药典（2000年版）傅立叶变换红外光谱仪检定规程校正，符合要求。

（3）KBr压片法

样品红外图谱见附图2，测定数据见表2。

表2样品的红外光谱测试数据及解析

测定值（cm-1）

振动类型

吸收峰强度

相应基团

3067

νC-H

w

吡啶环C-H

3047

νC-H

w

吲哚环C-H

2935,2847,2766

νC-H

m

CH2，CH3

1720

νC=O

s

酯C=O

1612,1469

νC=C

m

吲哚环C=C

1612,1579

νC=C,νC=N

w

吡啶环C=C、C=N

1435,1367

δC-H

m

O-CH3

1424,1367

δC-H

m

N-CH3

1275

νC-O

s

酯C-O

1076

νC-O-C

s

醚C-O-C

762,688

δC-H

m

吲哚环C-H

812,750

δC-H

s

吡啶环C-H

610

νC-Br

m

C-Br

（4）解析及结论：

红外图谱显示分子结构中含有吡啶环、吲哚环、酯羰基、碳-溴键等结构，符合尼麦角林的结构特征

4、紫外-可见光吸收光谱（UV-VIS）

（1）仪器型号：

Agilent8453紫外分光光度计

（2）仪器校正和检定：

按中国药典（2000版）紫外分光光度法仪器的校正和检定方法校正，符合要求。

（3）样品溶液的制备方法：

分别溶解于甲醇、水、0.1MHCl、0.1MNaOH，配制成浓度为30μg/ml、30μg/ml、30μg/ml、70μg/ml的溶液进行测定。

样品甲醇、水、0.1MHCl、0.1MNaOH四种溶液的紫外光谱数据见表3，紫外吸收图谱见附图3～附图6。

表3样品的紫外光谱测试数据及解析

溶剂

λmax（nm）

Abs（AU）

归属

甲醇

230

1.736

吲哚和烟酸酯结构的B带

288

0.533

吲哚和烟酸酯结构的E2带

水

226

2.110

吲哚和烟酸酯结构的B带

288

0.540

吲哚和烟酸酯结构的E2带

0.1MHCl

226

2.056

吲哚和烟酸酯结构的B带

288

0.535

吲哚和烟酸酯结构的E2带

0.1MNaOH

226

0.522

吲哚和烟酸酯结构的B带

284

0.161

吲哚和烟酸酯结构的E2带

（4）解析及结论：

样品在四种不同溶剂中的紫外光谱表明其结构母核中含有吲哚和烟酸酯两个共轭体系，这与尼麦角林的结构特点是一致的。

5、核磁共振谱（1H-NMR）、碳谱（13C-NMR，DEPT）以及相关谱（1H-1HCOSY、HSQC、HMBC）

仪器型号：

BRUKERAVANCE600核磁共振波谱仪

溶剂：

氘代二甲基亚砜（DMSO-d6），TMS为内标。

5.11H核磁共振谱（1HNMR）

样品的1H-NMR图谱见附图7，1H-1HCOSY图谱见附图8。

测定数据见表4。

表4样品1HNMR谱测定数据

No.

δH（ppm）

峰形

质子数

J（Hz）

COSY示相关H

20

9.10,9.11

d

1

1.8

24

22

8.97,8.98

d

1

1.8

24

24

8.47~8.48

t

1

1.8,1.8

20,22

14

7.29,7.31

d

1

7.8

15

15

7.10~7.12

t

1

7.8,7.2

14,16

16

7.01,7.02

d

1

7.2

15

2

6.97

s

1

-

-

17b

4.34~4.37

dd

1

4.8,10.8

8,17a

17a

4.22~4.25

dd

1

7.2,10.8

8,17b

1-CH3

3.75

s

3

-

-

7b

3.05,3.07

d

1

9.0

7a

4b

3.03~3.05

dd

1

4.2,10.4

4a,5

9b

2.98,2.99

d

1

13.8

9a

10-OCH3

2.83

s

3

-

-

4a

2.75~2.80

t

1

12.6,13.2

4b,5

8

2.39~2.41

br.s

1

-

7a,9a,17

6-CH3

2.32

S

3

-

-

5

2.19~2.22

dd

1

4.2,11.4

4

7a

1.97~2.01

t

1

10.8,11.4

8,7b

9a

1.23~1.27

t

1

13.2,13.2

8,9b

5.213C核磁共振谱（13CNMR）

样品的13CNMR谱见附图9，DEPT90º谱见附图10，DEPT135º谱见附图11，HSQC谱见附图12，HMBC谱见附图13，测定数据见表5。

表5样品13CNMR谱测定数据

No.

δC（ppm）

类型

HSQC示相关H

HMBC示相关H

18

163.52

C

-

17,20,24

22

154.67

CH

8.97,8.98

20,24

20

148.51

CH

9.10,9.11

22,24

24

139.16

CH

8.47~8.48

20,22

13

134.86

C

-

2,15,16,1-CH3

11

129.95

C

-

14,15

23

127.48

C

-

20,22

12

126.05

C

-

2,4,14,16

2

123.62

CH

6.97

4,1-CH3

15

120.99

CH

7.10~7.12

14,16

19

120.46

C

-

20,22,24

16

114.53

CH

7.01,7.02

14,15

3

109.71

C

-

2,4,5

14

109.12

CH

7.29,7.31

15,16

10

73.60

C

-

4,9,16,10-OCH3

5

69.22

CH

2.19~2.22

4,7,9,6-CH3

17

68.21

CH2

4.22~4.25;4.34~4.37

7,9

7

59.83

CH2

1.97~2.01;3.05,3.07

5,9,17,6-CH3

10-OCH3

48.46

CH3

2.83

5

6-CH3

43.05

CH3

2.32

7

1-CH3

32.98

CH3

3.75

2

8

30.68

CH

2.39~2.41

7,9,17

9

29.69

CH2

1.23~1.27;2.98,2.99

7,17

4

21.50

CH2

2.75~2.80;3.03~3.07

2,5,6-CH3

5.3谱图解析

（1）1HNMR的解析

1HNMR中显示有20组氢，由低场到高场的积分比例分别为1：

1：

1：

1：

1：

1：

1：

1：

1：

3：

1：

1：

1：

3：

1：

1：

3：

1：

1：

1，共26个质子，与尼麦角林的分子式相符，结合二维谱可以对各质子进行归属。

δ9.10,9.11处为一组二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ8.47~8.48处的氢相关，归属为20位芳氢。

δ8.97,8.98处为一组二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ8.47~8.48处的氢相关，归属为22位芳氢。

δ8.47~8.48处为一组三重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ9.10,9.11和δ8.97,8.98处的氢相关，归属为24位芳氢。

δ7.29,7.31处为一组二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ7.10~7.12处的氢相关，归属为14位芳氢。

δ7.10~7.12处为一组三重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ7.29,7.31和δ7.01,7.02处的氢相关，归属为15位芳氢。

δ7.01,7.02处为一组二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ7.10~7.12处的氢相关，归属为16位芳氢。

δ6.97处为一个单峰，质子数为1，归属为2位烯氢。

δ4.34~4.37、4.22~4.25处为两组双二重峰，质子数均为1，COSY谱显示这两组氢相关，HSQC谱显示这两个氢与δ68.41的亚甲基相关，归属为4位-CH2的两个氢。

δ3.75处为一个单峰，质子数为3，归属为1位甲基氢。

δ3.05,3.07处为一组二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ1.97~2.01处的氢相关，HSQC谱显示这两组氢与δ59.86的亚甲基相关，归属为7位-CH2的两个氢。

δ3.03~3.05处为一组二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ2.75

~2.80处的氢相关，HSQC谱显示这两组氢与δ21.99的亚甲基相关，归属为4位-CH2的两个氢。

δ2.98,2.99处为一组二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ1.23

~1.27处的氢相关，HSQC谱显示这两组氢与δ29.68的亚甲基相关，归属为9位-CH2的两个氢。

δ2.83处为一个单峰，质子数为3，归属为10位甲氧基氢。

δ2.39~2.41处为一个宽单峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ1.97~2.01和δ1.23~1.27处的氢相关，归属为8位氢。

δ2.32处为一个单峰，质子数为3，归属为6位氮甲基氢。

δ2.19~2.22处为一组双二重峰，质子数为1，COSY谱显示该氢与δ2.75~2.80、3.03~3.05处的氢相关，归属为5位氢。

（2）13CNMR谱的解析

13CNMR谱中共有24个碳信号，dept90˚谱显示其中有9个-CH；dept135˚谱显示有4个-CH2、3个-CH3，说明结构中还有8个季碳，这些特点与尼麦角林的结构式相符。

δ163.52的季碳为18位羰基峰，HMBC谱显示17、20、24位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ154.67的碳为22位芳香碳，HMBC谱显示20、24位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ148.51的碳为20位芳香碳，HMBC谱显示22、24位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ139.16的碳为24位芳香碳，HMBC谱显示20、22位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ127.48的碳为23位芳香碳，HMBC谱显示20、22位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ120.46的碳为19位芳香碳，HMBC谱显示20、22、24位氢与这个碳存在远程相关关系。

以上结构信息与尼麦角林中吡啶羧酸酯片断的特点是一致的。

δ134.86的碳为13位芳香碳，HMBC谱显示2、15、16位氢和1位甲基氢与这个碳存在远程相关关系。

δ129.95的碳为11位芳香碳，HMBC谱显示14、15位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ126.05的碳为12位芳香碳，HMBC谱显示2、4、14、16位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ123.62的碳为2位芳香碳，HMBC谱显示4位氢和1位甲基氢与这个碳存在远程相关关系。

δ120.99的碳为15位芳香碳，HMBC谱显示14、16位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ114.53的碳为16位芳香碳，HMBC谱显示14、15位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ109.71的碳为3位芳香碳，HMBC谱显示2、4、5位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ109.12的碳为14位芳香碳，HMBC谱显示15、16位氢与这个碳存在远程相关关系。

以上结构信息与尼麦角林中苯并吡咯片断的特点是一致的。

δ73.60的碳为10位连氧季碳，HMBC谱显示4、9、16位氢以及10-OCH3氢与这个碳存在远程相关关系。

δ69.22的碳为5位-CH，HMBC谱显示4、7、9位氢以及6-NCH3氢与这个碳存在远程相关关系。

δ68.21的碳为17位-CH2，HMBC谱显示7、9位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ59.83的碳为7位-CH2，HMBC谱显示5、9、17位氢以及6-NCH3氢与这个碳存在远程相关关系。

δ48.46的碳为10位-OCH3碳，HMBC谱显示5位氢与这个碳存在微弱的远程相关关系。

δ43.05的碳为6位-NCH3碳，HMBC谱显示7位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ32.98的碳为1位-NCH3碳，HMBC谱显示2位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ30.68的碳为8位-CH，HMBC谱显示7、9、17位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ29.69的碳为9位-CH2，HMBC谱显示7、17位氢与这个碳存在远程相关关系。

δ21.50的碳为4位-CH2，HMBC谱显示2、5位氢以及6-NCH3氢与这个碳存在远程相关关系。

综合以上信息可以确定样品的结构特征与尼麦角林是一致的。

6粉末x-射线衍射光谱

（1）仪器型号：

Rigaku/2200PCx-射线衍射仪

（2）样品的粉末x-射线衍射图谱分别见附图14。

（3）解析及结论：

粉末X-衍射图显示本品为结晶型粉末。

7差热扫描量热分析（DSC）

（1）仪器型号：

ShimadzuDSC~41差示扫描量热分析仪

（2）检测依据：

按照中国药典2000版附录VIIIQ“热分析法”进行检测。

（3）样品的差热扫描量热分析（DSC）见附图15。

（4）解析及结论：

样品在126.4~148.1℃存在一吸热峰，为尼麦角林的结晶熔融吸热峰；250.6~287.3℃还存在一个放热峰。

8热失重分析（TG）

（1）仪器型号：

MettlerToledoStareSystemDSC822e

（2）检测依据：

按照中国药典2000版附录VIIIQ“热分析法”进行检测。

（3）样品的热失重分析（TG）见附图16。

（4）解析及结论：

样品在260.0℃开始失重，在310.0℃基本达到平衡，说明样品不含结晶水，遇热较稳定。

4综合解析及结论

样品的质谱给出的分子量与尼麦角林一致，元素分析也与尼麦角林元素组成相同，符合分子式C24H26BrN3O3；红外光谱（IR）表明样品分子中含吡啶环、吲哚环、酯羰基、碳-溴键等结构。

核磁共振氢谱（1H-NMR）、碳谱（13C-NMR、DEPT90o、DEPT135o）以及相关谱（1H-1HCOSY、HSQC、HMBC）确证C、H归属符合样品结构式。

再综合粉末x-射线衍射光谱、差热扫描量热分析（DSC）、热失重（TG）可以确证本样品分子结构及其他性质。

样品的结构式为：