35.不同的蛋白质的含(N)量颇为相近,平均含量(16)%。
36.试述蛋白质结构与功能的关系?
①一级结构不同的蛋白质,功能各不相同,如眉原和酶;②一般结构近似的蛋白质,功能也相似。
同源蛋白质的一级结构,且亲缘关系越接近者,差异越小。
如胰岛素、细胞色素C等;③来源于同种生物体的蛋白质,如其一级结构有微细差异,往往是分子病的基础。
如HbA和HbS的比较;④蛋白质变性作用表明蛋白质空间结构与功能的关系十分密切。
⑤变构蛋白和变构酶也证明,构象改变时,功能也会发生改变。
37.测定氨基酸的氨基态氮,使用NaOH标准溶液氨基酸的羧基,再直接求出氨基态氮的量。
试问在NaOH滴定前为什么要加甲醛?
先加入过量的甲醛,用标准氢氧化钠滴定时,由于甲醛与氨基酸的—NH2作用形式—NH·CH2OH,—N(CH2OH)2等羟甲基衍生物,而降低了氨基的碱性,相对地增强了—N+3的酸性解离,使pk12减少2-3个pH单位。
使滴定终止由pH12左右移至9附近,亦即达到酚酞指示剂的变色区域。
40.根据AA通式的R基团的极性性质,20种常见的AA可分成哪四类?
非极性R基:
丙氨酸、颉氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸;
带正电荷的R基:
赖氨酸、精氨酸、组氨酸;
不带电荷的极性R基:
甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺;
带负电荷的R基:
天冬氨酸、谷氨酸。
41.根据蛋白质的理化性质,详细阐述蛋白质的分离提纯的主要方法?
分离纯化的方法:
1.分子大小;2.溶解度;3.电荷;4.吸附性质;5.对配体分子的生物亲和力等。
1.透析:
利用蛋白质分子不能通过半透膜,使蛋白质和其它小分子物质如无机盐、单糖等分开。
2.密度梯度离心:
蛋白质颗粒的沉降系数不仅决定于它的大小,而且也取决于它的密度。
3.凝胶过滤:
利用蛋白质分子大小,因为凝胶过滤所用的介质是凝胶珠,其内部是多孔的网状结构。
当不同的分子大小的蛋白质分子流过凝胶层析柱时,比凝胶珠孔径大的分子进入珠内的网状结构,而被排阻在凝胶珠之外随溶剂在凝胶珠之间的空隙向下移动并最先流出柱外,比网孔小的分子能不同程度底自由出入凝胶珠的内外,由于不同大小的分子所经路径不同而得到分离。
大分子先被洗脱下来。
小分子后被洗脱
利用溶解度差别的纯化方法
1.等电点沉淀和PH的控制:
蛋白质处于等电点时,其净电荷为零,由于相邻蛋白质分子之间没有静电斥力而聚集沉淀。
因此在其他条件相同时,它的溶解度达到最底点,利用等电点分离蛋白质是一种常用的方法。
42.简述Folin-酚法测定蛋白质含量的反应原理和反应条件。
条件:
第四章酶
1、关于酶的抑制剂的叙述正确的是(c)。
A、酶的抑制剂中一部分是酶的变性剂B、酶的抑制剂只与活性中心上的基团结合
C、酶的抑制剂均能使反应速度下降 D、酶的抑制剂一般是大分子物质
E、酶的抑制剂都能竞争性地使酶的活性降低
2、酶催化底物反应时,将产生下列哪一种能量效应?
(b)
A、提高反应所需的活化能 B、降低反应所需的活化能
C、降低反应的能量水平 D、提高产物的能量水平
3、关于米氏常数Km的说法。
哪个是正确的?
( d )
A、饱和底物浓度时的速度 B、在一定酶浓度下,最大速度的一半
C、饱和底物浓度的一半 D、速度达最大速度半数时的底物浓度
E、降低一半速度时的抑制剂浓度
4、丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响是属于(d )。
A、产物反馈抑制 B、产物阻遏抑制 C、非竞争性抑制
D、竞争性抑制 E、不可逆抑制
5、对于一个符合米氏方程的酶来说,当〔S〕=Km,〔I〕=KI时,I为竞争抑制剂,则V为(b)。
A、Vmax×2/3B、Vmax×1/3C、Vmax×1/2D、Vmax×1/4E、Vmax×1/6
6、下列关于酶活性中心的叙述哪些是正确的?
(bd)
A、是由一条多肽链中若干相邻的氨基酸残基以线状排列而成
B、对于整个酶分子来说,只是酶的一小部分
C、仅通过共价键与作用物结合 D、多具三维结构
7、关于酶促反应的叙述正确的是(ae )。
A、底物浓度低时,反应速度与底物浓度成正比
B、底物浓度过量时,反应速度与酶浓度成正比
C、底物浓度与酶浓度相等时,反应达最大速度
D、底物浓度为米氏常数一半时,底物浓度等于米氏常数
E、反应速度为最大速度一半时,底物浓度等于米氏常数
F、底物浓度极大时,反应速度等于米氏常数
8、在酶促反应的双倒数作图法中,横切距为(d),纵切距为(b)。
A、〔S〕-1B、Vmax-1C、km-1D、—km-1
三、填空题:
1、用y=ax+b的形式来表达米氏方程时,其表达式为(
)。
当在反应体系中加入竞争性抑制剂时,a值将(增大);当在反应体系中加入非竞争性抑制剂时,a值将(增大)。
2、酶促可以服从反应动力学以下方程:
v=(Kcat〔E〕〔S〕)/(Km+〔S〕)该方程为(米氏)方程。
其中,〔E〕是(酶浓度),〔S〕是(底物浓度),酶浓度一定,反应的最大速率=(Kcat[E]),米氏常数Km越大,反应酶和底物的亲和力越(低)。
〔S〕=(Km)时,反应速率达到最大反应速率一半。
3、测定酶活力时,初速度对底物浓度应是(零)级反应,而对酶浓度应是
(一)级反应。
四、判断题:
1、酶原激活作用是不可逆的。
(对)
2、酶的激活与酶原的激活是完全不同的两个过程。
(对)
3、核酶是指细胞核中的酶的简称。
(错)
五、简述酶具有高催化效率的因素。
①邻近和定向效应;②分子张力和扭曲;③酸碱催化;④共价催化;⑤低价电环境
第五章核酸
1、DNA合成仪合成DNA片段时用的原料是(a )。
A、4种dNTP B、4种NTP
C、4种dNDP D、4种脱氧核苷的衍生物
2、稀有碱基主要存在于(c)中。
A、染色体DNAB、rRNAC、tRNAD、mRNA
3、绝大多数mRNA的5′端有(b)。
A、polyAB、帽子结构C、起始密码子D、终止密码子
4、某双链DNA样品含15%的A,该样品含C为(a)。
A、35%B、15% C、30% D、20%
5、DNA一条链部分碱基顺序为5′-A-T-C-T-3′能与其互补的链是(a)。
A、5′-A-G-A-T-3′ B、5′-A-T-C-T-3′
C、5′-U-C-U-A-3′ D、5′-G-C-G-A-3′
6、核酸溶液的最大紫外吸收波长为(a )。
A、260nm B.270nm C.280nm D.250nm
7、snRNA的功能是(e)。
A、作为mRNA的前身物 B、促进DNA合成C、催化RNA合成
D、使RNA的碱基甲基化E、促进mRNA的成熟
三、填空题:
1、核酸的基本结构单位是核苷酸,它是由碱基、(核糖)和(磷酸)三部分组成,其中碱基又包括嘌呤碱和(嘧啶)碱两种。
ATP是一种多磷酸核苷酸,它由(腺嘌呤)(碱基名称)、(脱氧核糖)和三个磷酸残基组成。
ATP之所以在细胞能量代谢中发挥重要作用,是因为其中含有两个(高能磷酸键)键。
2、核酸变性时,紫外吸收值增高,叫(增色)效应。
3、维持DNA双螺旋结构的作用力主要有三种:
一是互补碱基对之间的(氢键),二是(碱基堆积力),三是磷酸残基上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的(离子键)。
4、简述DNA双螺旋结构模型。
①两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕;两条链都为右手螺旋。
②碱基位于双螺旋的内侧,磷酸与核糖在外侧,彼此通过3´,5´-磷酸二酯键相连接,形成DNA分子的骨架,碱基平面与纵轴垂直,糖环平面与纵轴平行。
③在双螺旋的表面有大沟和小沟
④两条链借碱基之间的氢键和碱基堆积力牢固地结合起来,维持DNA结构的稳定性。
第六章维生素、激素和抗生素
1、有促进生长发育和预防骨质疏松作用的脂溶性维生素是(d)。
A、维生素A B、维生素B1 C、维生素C D、维生素D E维生素E
2、维生素A在维持暗视觉中直接发挥作用的形式是(b)。
A、反视黄醛 B、顺视黄醛 C、视黄醛 D、视黄醇
3、与一碳单位代谢有关的维生素有(cd)。
A、维生素B2 B、维生素B6 C、维生素B12 D、叶酸 E、泛酸 F、生物素
4、下列哪种物质能生成一碳化合物?
(c)
A脯氨酸 B、羟脯氨酸 C丝氨酸 D、谷氨酸 E、酪氨酸
5、青毒素的抗菌原理是(c)。
A、是K+的载体,破坏细菌内环境B、抑制细菌的核酸合成
C、抑制细菌细胞壁的合成D、抑制细菌核糖体的蛋白质合成
三、判断题:
1、维生素对人体的生长和健康是必需的,但人体不能合成维生素。
(错)
2、核黄素、生物素、叶酸和维生素C等均属于水溶性维生素。
(对)
四、填空:
1、维生素B6有(吡哆醇)、(吡哆醛)和(吡哆胺)三种存在形式,它们的磷酸酯是(转氨酶)的辅酶。
第七章代谢总论、生物氧化和生物能学
1、下列关于氧化磷酸化偶联机理的化学渗透学说的描述哪一项是错误的?
(d)
A、H+不能自由通过线粒体内膜
B、呼吸链中各递氢体可将H+从线粒体内转运到内膜外
C、在线立体膜内外H+形成跨膜梯度
D、线粒体内膜外侧pH值比内侧高
E、能量用于由Pi+ADP合成ATP
2、氧化磷酸化作用是将生物氧化过程释放的自由能转移并生成(c)。
A、NADPHB、NADHC、ATP D、FADH2
3、辅酶Q作为中间体的作用是(a)。
A、传递电子 B、传递氢 C、传递氧 D、传递CO2
4、氰化物中毒是由于(d)。
A、作用与呼吸中枢,换气不足B、干扰血红蛋白带氧能力
C、破坏线粒体结构D、抑制呼吸链E、使呼吸肌群麻痹
5、细胞色素氧化酶分子中含有金属离子(b)。
A、Mg+B、Fe2+C、En2+D、Mn2+
二、填空题:
1、代谢物在细胞内的氧化与在体外燃烧的主要的主要区别是(在体温下进行)、(需要有酶的催化)、(经过电子传递链)和(伴随有脱氢和DNA+、FAD的还原)。
第八章糖代谢二、选择题:
1、在糖酵解过程中,下列哪种酶不是调节酶?
(c)
A、己糖激酶B、葡萄糖激酶C、磷酸丙糖异构酶D、6-磷酸果糖激酶E、丙酮酸激酶
2、糖酵解的速度主要取决于(b)的活性。
A、磷酸葡萄糖变位酶B、磷酸果糖激酶C、醛缩酶D、磷酸甘油激酶
3、TCA循环(d)。
A、本身不会产生高能磷酸化合物B、不受无氧条件抑制
C、循环起始物acetylCoA中2个C原子在一轮循环中以2个CO2形式释出
D、循环速率取决于对ATP的需求
4、细胞内能荷高时,不受抑制的代谢途径是(c)。
A、EMP途径B、TCA循环C、PPP途径D、氧化磷酸化
5、由草酰乙酸和乙酰CoA合成柠檬酸是三羧酸循环重要控制点,ATP对柠檬酸合成酶的调节作用属于(a)。
A、变构效应B、反竞争抑制C、酶的共价修饰D、底物类似物抑制
6、三羧酸循环中草酰乙酸是什么酶作用的直接产物?
(c)
A、柠檬酸脱氢酶B、琥珀酸脱氢酶C、苹果酸脱氢酶D、顺乌头酸酶
7、NADPH能为合成代谢提供还原势,NADPH中的氢主要来自(c)。
A、糖酵解B、三羧酸循环C、磷酸戊糖途径D、糖原异生
三、填空题:
1、三羧酸循环在细胞的(线粒体)内进行,(柠檬酸合成酶)、(异柠檬酸脱氢酶)和(一酮戊二酸脱氢酶)三种酶所催化的反应是限速反应。
2、葡萄糖彻底氧化成水和二氧化碳能产生(30或32)ATP分子。
3、写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤(写出九步即可)。
4、什么是三羧酸循环,它有何生物学意义?
三羧酸循环是需氧生物体内普遍存在的代谢途径,因为在这个循环中几个主要的中间代谢物是含有三个羧基的柠檬酸,所以叫做三羧酸循环。
生理意义:
1.三羧酸循环是机体获取能量的主要方式。
2.三羧酸循环是糖,脂肪和蛋白质三种主要有机物在体内彻底氧化的共同代谢途径。
3.三羧酸循环是体内三种主要有机物互变的联结机构。
5、简述乙酰辅酶A在含碳化合物代谢中的作用。
乙酰辅酶A在合碳化合物的代谢中占有重要的地位。
他不仅是脂肪合成中碳原子的来源,而且,通过了三羧酸循环,将糖代谢、脂肪代谢和氨基酸代谢彼此沟通。
6、糖异生与糖酵解途径是如何协调控制的?
糖异生和糖酵解两个途径中的各种酶的活性并不是具有高度的活性,而是相互配合的,许多别构酶的效应物在两个途径的协调中有重要作用:
①高浓度葡萄糖-6-磷酸抑制己糖激酶作用,而活化葡萄糖-6-磷酸酶,从而抑制了酵解,促进了糖异生。
②2,6-二磷酸果糖对决定葡萄糖分解和合成起着重要作用。
③在糖异生中丙酮酸羧化酶调节丙酮酸到磷酸烯醇式丙酮酸,而在酵解中是由丙酮酸激酶调节的。
④在酵解和异生两个途径的协调中,通常是一个途径开放,另一个途径关闭,从而避免消耗ATP的无效循环。
⑤另外,激素对糖异生及酵解途径亦有一定的协调作用。
7、在柠檬酸循环各个反应中并没有出现氧,但柠檬酸循环却是有氧代谢的一部分。
请解释。
因为柠檬酸循环包括几步脱氢反应,而NAD+、FAD则是其电子受体,线粒体内的NAD+、FAD库的大小相对于乙酰CoA的量来说是很小的,这些辅助因子必须重新循环才能满足其需要,循环需要经过电子传递链才能完成,而氧是传递链的最终电子受体。
在缺乏氧时,NAD+、FAD通过电子传递链重新产生是不可能的。
所以在柠檬酸循环各个反应中并没有出现氧,但柠檬酸循环却是有氧代谢的一部分。
第九章脂代谢
1.脂肪酸从头合成的反应顺序是(b),脂肪酸β-氧化的反应顺序是(d)
A.脱氢,再脱氢,水合和硫解B.缩合、还原和再还原
C.还原、缩水、再还原和脱水D.脱氢、水合、再脱氢和硫解
2.胞质中合成脂肪酸的限速酶是(c)。
A.β-酮脂酰合成酶B.水化酶C.乙酰辅酶A羧化酶
D.脂酰转移酶E.软脂酸脱酰酶
3.生成磷酸甘油的前体是(c)。
A.丙酮酸B.乙醛C.磷酸二羟丙酮D.乙酰辅酶A
4.下面哪一种化合物不参加乙酰辅酶A合成脂肪酸的反应?
(a)
A.CH3COCOOHB.HOOCCH2COSCOAC.NADPH+H+D.CO2(HCO3-)
5.下列那种说法最准确的描述了肉毒碱的功能?
(d)。
A.转运中链脂肪酸进入肠上皮细胞
B.转运中链脂肪酸越过线粒体内膜
C.是维生素C的衍生物,在视网膜暗适应中起作用
D.参与转移酶催化的转酰基反应
E.是脂肪酸合成代谢中需要的一种辅酶
7.生物体彻底氧软脂酸时,可以净产生多少ATP分子?
(c)
A.38B.2C.129D.66
8.脂肪酸的生物合成的碳链的直接供体是(a)
A.乙酰COAB.草酰乙酸C.磷酸单酰D.苹果酸
9.在磷脂的生物合成中所需要的核苷酸是(c)
A.ATPB.GTPC.CTPD.UTP
10.下列氨基酸中,哪些为卵磷脂的合成提供甲基?
(b)
A.苯丙氨酸B.蛋氨酸C.丝氨酸D.酪氨酸
11.脂肪酸合成的限速步骤由(乙酰CoA羧化酶)所催化的反应,该酶是受(柠檬酸)的变构激活。
12.β-氧化生成的β-羟脂酰CoA的立体异构体是(L)型,而脂肪酸合成过程中生成的β-羟脂酰的Acp的立体异构体是(D)型。
13.什么是酮体,酮体在正常人体中是否存在?
由于乙酰CoA形成的乙酰乙酸,D-β-羟丁酸及丙酮等三种物质,统