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繁殖学答案
一、以母牛为例，试述“下丘脑---垂体---卵巢轴”概念及其内容。
1.下丘脑是机体调节内分泌活动的枢纽。
下丘脑支配垂体调节、管理其他某些内分泌腺。
下丘脑中有一些细胞不仅能传导兴奋，而且能分泌激素。
下丘脑分泌的促性腺激素释放激素，能够促进垂体合成和分泌促性腺激素。
2.哺乳动物的下丘脑、垂体和卵巢分泌的激素在功能上相互作用，构成一个完整的神经内分泌生殖调节体系，即下丘脑-垂体-卵巢轴，它在生殖活动中起着主要的调节作用，下丘脑中分布的GnRH神经元可以分泌GnRH，GnRH调节垂体中促性腺激素细胞分泌促性腺激素F$H和LH，促性腺激素作用于卵巢受体，引起雌激素和孕酮分泌并影响生殖活动，从组织学角度上研究，下丘脑-垂体-卵巢轴中的结构，如GnRH神经元、促性腺激素细胞、卵泡随周期性变化而呈现出不同的形态结构和分泌特点。
3.卵巢与下丘脑及垂体的关系
卵巢是重要的生殖器官，其功能活动受到垂体和下丘脑的调控。
其调控机制为：
腺垂体内促性腺激素细胞分泌FSH和LH，随血流到达卵巢时，与分布在卵泡颗粒细胞膜上特异的FSH和LH受体相结合，从而发挥促卵泡生长和卵泡类固醇生成的作用。
而下丘脑则可以通过分泌GnRH来调节垂体FSH和LH的分泌，而间接影响卵巢的活动。
同时，GnRH可直接与卵巢作用，例如临床上应用大剂量的GnRH有抑制生殖系统的作用。
另一方面，卵巢能通过分泌类固醇激素对下丘脑或垂体起负反馈作用。
例如，下丘脑中有广泛的雌激素受体（es-trogenreceptor，ER）分布，则雌激素可直接作用于下丘脑而影响神经元结构和功能。
研究发现，Gn-RH神经元中可能存在ERmRNA，雌激素能直接抑制GnRH基因的表达。
因此，下丘脑、垂体、卵巢之间存在着相互影响、相互制约的关系，是影响动物繁殖性能的统一体。
4下丘脑一垂体一卵巢轴分泌的激素
4．1GI1RH的分泌特点GnRH主要在下丘脑中由GnRH神经元合成，经血流到达垂体及其他部位发挥作用。
GnRH在生殖功能的调控中具有举足轻重的作用，可促进合成、释放FSH和LH。
同时，GnRH的分泌亦受到中枢神经系统的控制，光照、温度、食物等环境条件改变都可导致GnRH的分泌呈现季节性变化。
另外，生殖激素对GnRH的分泌有反馈调节作用，使其呈周期性变化。
因此，GnRH的释放不是持续性的，而是呈波动式的。
4．2FSH和LH的分泌特点FSH和LH由垂体中的促性腺激素细胞合成，其释放受下丘脑GnRH的调节，且分泌量与GnRH呈正相关。
单层培养的垂体细胞LH、FSH释放就对GnRH类似物刺激的反应呈剂量依赖性。
但目前大多数学者认为GnRH主要调节LH的释放，而对FSH影响较小。
4．3雌激素与孕酮雌激素主要由卵泡颗粒细胞和膜性黄体细胞所分泌，孕酮主要由粒性黄体细胞和胎盘分泌。
二者协调作用于生殖活动，共同促进并调节雌性动物发情排卵；还可以反馈调节GnRH、FSH、LH的释放量而影响生殖功能。
二、试述生物细胞在冷冻过程中可能遭遇哪几方面的损伤和相应克服的措施
1.物理损伤（胞内冰晶）
（1）降到细胞悬浮液冰点时，首先使细胞外溶液中的水结冰，细胞内此时由于原生质的作用处于过冷却状态（低于冰点而未结冰的状态），随着温度的进一步下降和胞外冰晶的增长出现了一种胞外溶液渗透压逐渐高于胞内过冷溶液的不平衡状态。
不平衡，要么是胞内水分外流；要么是胞内水分就地结冰。
出现哪种情况取决于温度下降的速度。
快速降温的结局，下降很快，超过了细胞膜具有的渗透能力（这种能力与细胞种类大小和温度等因素有关），胞内水分就来不及外渗，而是就地结冰，冰晶体积达到一定程度就会对细胞膜和细胞器造成机械损伤（挤压、穿刺），最终导致细胞死亡，这就是冷冻情况下的物理损伤。
（2）胞内冰晶的预防，为使细胞内部不产生冰晶，冷冻保存液中必须添加抗冻保护剂物质。
胚胎或卵子的冷冻保存中，常采用的抗冻保护剂除丙三醇外，还有乙二醇、丙二醇、DMSO和乙酰胺等。
这些物质的分子量不超过100道尔顿，可以自由地通过细胞膜，所以被称作渗透性抗冻保护剂或细胞内液抗冻保护剂。
细胞内、外液的抗冻保护剂的摩尔浓度较高的情况下，使溶液的冰点下降，具有抑制冰晶生成的作用。
2.化学损伤（渗透效应或溶液效应、胞外冰晶）
降温较慢时，胞内的水分不断外流然后结冰，即胞外冰晶。
细胞外液的水分形成冰晶后使未结冰溶液浓度升高，若盐类浓度升高，对细胞产生离子影响（盐害），即高浓度的的电解质作用于细胞膜，引起脂蛋白复合物的变性和部分类脂质的丢失，增加了细胞膜对阳离子的通透性，在细胞上形成一些小孔，解冻时水分大量进入细胞造成渗透休克。
此时胞内外渗透压在高位相近或相等，随着冷却时间的延长，细胞外液有更多的冰晶，使水分逐渐减少，溶液发生浓缩，对细胞的影响越来越大，原生质变干，电解质浓度增高，酸碱度失衡；抗冻液的浓度升高，抗冻剂的化学毒性也随之增大，同样导致细胞死亡，这是冷冻对细胞的化学损伤，也称溶液效应（solutioneffects）。
降低温度可以减少盐类和抗冻保护剂对细胞的化学损伤。
为避免化学损伤，冷却过程中应尽快地使溶液降至致命温度以下的低温状态。
3.低温损伤和低温打击
一些动物品种的卵子或胚胎，在10～20℃情况下则可受到损伤。
这与胞质内的脂肪颗粒的含量有关，这种损伤称为低温损伤（chillinginjury）。
猪的胚胎在孵化囊胚以前的发育阶段对低温损伤更为敏感，故迄今猪的卵子和胚胎的冷冻保进展缓慢。
牛体内受精卵发育到致密桑葚胚前和体外受精卵发育到致密桑葚胚阶段的胚胎，仍可出现低温损伤现象。
但是，体内或体外的胚胎超过上述发育阶段时，几乎不受低温损伤的影响。
家畜的精子在室温到O℃之间的温度区域急速降温，使得活率和受精能力下降，这种现象称为低温打击（coldshock）。
但卵子和胚胎的这种现象不常见。
实验证明，小鼠的受精卵从液氮中直接投入室温的水中反复冻融（2～3次），仍保持存活率。
说明哺乳动物的卵子和胚胎除对低温敏感外，温度变化对其存活的影响不大。
4.抗冻保护剂的化学毒性
采用慢速冷冻法对胚胎或卵子进行冷冻保存，其冷冻液中所含抗冻保护剂的浓度一般在1.0～2.Omol/L。
添加抗冻保护剂和生理性溶液大不相同，当胚胎或卵子移入含有抗冻保护剂溶液中平衡，随着时间的延长和浓度的升高，生存率下降。
造成这个结果的原因是抗冻保护剂的化学毒性。
另外，化学毒性的强弱不仅与抗冻保护剂的种类有关，同时也受温度高低的影响。
如果使用较高浓度的抗冻液，应选择化学毒性较低的抗冻保护剂，且在室温下对胚胎或卵子的处理时间相对要短。
5.破裂损伤
液氮中保存的胚胎或卵子，解冻后常见到透明带或部分胞质破裂。
在投入液氮冷冻前的胚胎或卵子，处于浓缩的抗冻液中，投入液氮后溶液由液态变为固态。
在解冻过程中使固体变为液体，这种液相和固相急速转换过程中，由于物质的膨胀率和收缩率不同造成断裂，这种现象称作破裂损伤。
为防止这种伤害的发生，缓慢通过液体变相温度区域（-110～-130℃）非常重要。
6.渗透性休克
冷冻胚胎刚解冻时，细胞内通常所含的渗透性保护剂浓度很高，可达2000～3000mOsm/L或更高，若此时将胚胎置于渗透压为300mOsm/L的等渗溶液中，大量水分快速进入细胞而保护剂却不能立即渗出，细胞急剧膨胀甚至破裂，这种现象称为渗透性休克。
三、张民觉在动物繁殖学领域的主要贡献是哪几方面？
试分析其重要意义
1.发现了“冷休克”现象
1939-1940年，张民觉在剑桥大学农学院从事低温保存羊精子与羊的人工授精的研究。
在一项精子保存及其活力测定的实验中，张民觉发现了“冷休克”现象
2.精子获能的发现是人类最终实现体外受精、试管受精的重要里程碑。
揭开精子获能现象的奥秘后，张民觉对原先屡试不成的兔子体外受精实验做了很多改进。
经过不断的摸索，他终于在1959年成功地完成了兔子体外受精实验，并在《自然》杂志上发表了《兔卵体外受精获得成功》的学术论文。
1969年，他和他的试验小组还完成了人卵的体外受精。
这一切都为试管婴儿的诞生奠定了基础。
这也正是他为什么被称为"试管婴儿之父"的原因。
他们说经历过几百次失败的痛苦后，有幸读到张民觉早期的研究论文，因而得到了很大的启发帮助。
这无疑是医学界的一项奇迹和众多不孕夫妇久盼的福音。
3.张民觉博士被誉为"避孕药之父"，是基于他在口服避孕药研究方面的突出贡献。
第二次世界大战结束后，世界人口激增。
1945年，的反复试验，他们终于选出两种最有效的避孕药物用于临床。
世界药学界认为，口服避孕药是一项了不起的成就，它标志着生理学原理直接应用于人口控制，是用生理学原理控制人口增殖的一次革命。
4..张—奥原理
1950年冬，Physiol．Reviews生理学评论，请品克斯和张写一篇有关哺乳类动物受精的论述。
当时适逢品、张二人做兔子体外受精屡试不成。
张有心想弄明白难关疑症；他花了大量时间查阅几乎所有相关文献，发现绝大多数哺乳类动物的受精过程，实际上是精子在输卵管里等候卵子，而不是人们想象的卵子等候精子，张推测精子在雌性生殖道内一定经过某种生理变化才能与卵子受精结合。
他的假设很快得到他巧妙设计的实验证实。
同年澳大利亚学者奥斯汀博士，也在兔子和大老鼠的实验中发现相同现象并称之为精子获能。
国际生理学界把他们俩的研究成果命名为“张—奥斯汀原理”。
这一现象的发现不仅有助于解开精卵受精之谜，而且对实现精子体外获能和试管受精有明显指导意义。
5.口服避孕药的开发
除了在动物体外受精及育种方面的卓越贡献；张还是应用生理学原理控制人类生育的专家。
口服避孕药的发明，他列有头功。
研制口服避孕药始于50年代初，二次大战结束不久，世界人口出现爆炸式剧增。
提倡节育，开发新的便于服用的避孕药成了控制人口进一步膨胀的当务之急。
但与此背景极不相称的是当时美国联邦政府和世界卫生组织，WHO 并不很重视节育研究。
马州、康州等地均视避孕为非法。
地处马州中部的WFEB，虽在研究生殖生理、激素内分泌调控方面人才济济，实力雄厚，但因缺乏这方面的经费，大有巧妇难为无米之炊之苦。
在此节骨眼上，有远见的桑格尔夫人，曾任全美计划生育委员会主席和麦考密克夫人走访了WFEB，鼓励品克斯和张民觉做口服避孕药的研究，并承诺给予经费资助。
品、张二人深感作为生殖生理学家之责任，毅然把研究重心转移到口服避孕药的开发上。
首期实验，他们根据30年代人们所知的甾类化合物有抑制动物排卵的效应，确定以该类化合物作重点动物试验。
张民觉承担了首期实验的设计和具体实施工作。
他先后用几种不同的进药方式和剂量对兔子进行药物抑制排卵的观察，结果发现经口服一定剂量的甾类化合物后，兔子的排卵明显受到抑制。
张把重复后的实验结果交与品克斯看后，品大为兴奋，马上写成第一篇有关应用甾类激素来抑制动物排卵的论文发表。
紧接着张和他的学生开始以扩大实验动物和药物种类作比较的二期实验。
品克斯以他擅长的组织交际才能迅速联系到一批新近合成的甾类化合物供张民觉等作测试。
张和他的助手很快又在老鼠身上得出了同样的结果和结论。
在这期间，尽管张对药物作用于精子运动和受精过程的实验效果不明感到不满足，但在进一步证实排卵控制效应方面和改进药检方式上又迈进了一大步。
四、试从畜牧学和人文社会科学角度介绍你收集的畜牧学科学史PPT的主要内容
1.自1998年率先推出基于毛细管反应的LightCycler系列以来，罗氏应用科学部就在反应速度和准确性，操作的实用性和使用的灵活性方面不断地尝试突破，近期又推出了基于微孔板的LightCycler480高通量实时定量PCR系统,满足科研工作者对于定量PCR系统高通量方面的要求，以及将实时PCR系统整合到整个自动化工作流程中的需要。
2.LightCycler480系统从设计之初就坚持从用户使用的角度来考虑的，多处人性化的设计方案满足了不同的用户在不同阶段的实际研究需要，相信其在诸多方面的创新和改良，会让国内的用户影响深刻。
3.实时荧光定量PCR技术的应用定量PCR是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。
实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Appliedbiosystems公司推出，它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团，利用对荧光信号积累的实时检测来监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
该技术不仅实现了对DNA/RNA模板的定量，而且具有灵敏度和特异性高、能实现多重反应、自动化程度高、无污染、实时和准确等特点，目前已广泛应用于分子生物学研究和医学研究等领域。
4.分子生物学研究
基因表达研究：
细胞因子是一种调节蛋白，它对免疫反应、炎症反应具有重要的调节作用，包括对淋巴细胞激活、增生、分化、存活和凋亡的调节。
这些低分子蛋白由淋巴细胞、单核细胞和内皮细胞所分泌，其量的改变常常与一些疾病，如炎症反应、自身免疫性疾病、移植排斥反应等有密切的关系。
由于所得到组织样本常常因为太小而不能满足在蛋白质水平的检测，另外，通常用的蛋白质检测方法的灵敏度也难以完成对极微量的蛋白产物的检测，所以应用PCR检测细胞因子mRNA表达水平就显得很有意义。
实验研究表明：
定量结肠直肠癌淋巴结的癌抗原mRNA的表达量，可以作为诊断癌症微转移的重要依据。
单核苷酸多态性（SNP）及突变分析：
实时荧光定量PCR一个诱人的应用前景是用于检测基因突变和基因组的不稳定性。
基因突变的检测基于两条探针，一条探针横跨突变位点，另一条为锚定探针，与无突变位点的靶序列杂交，两条探针用两种不同的发光基团标记。
如靶序列中无突变，探针杂交便会降低杂交体的稳定性，从而降低其熔解温度（Tm）。
这样便可对突变和多态性进行分析。
拉米夫定是有效治疗慢性乙型肝炎的抗病毒药物，但临床应用中不断有病毒变异的报道，这些变异可能是治疗失败或病毒对治疗无反应的原因。
实时荧光定量PCR可以监测乙型肝炎患者服用拉米夫定后体内是否产生耐药突变病毒。
5.医学研究
1病原体检测：
目前，采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。
与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。
⑵产前诊断：
到目前为止，人们对遗传性物质改变引起的遗传性疾病还无法治疗，只能通过产前监测，减少病婴出生，以防止各类遗传性疾病的发生，如为减少X连锁遗传病患儿的出生，从孕妇的外周血中分离胎儿DNA，用实时荧光定量PCR检测其Y性别决定区基因是一种无创伤性的方法，易为孕妇所接受。
（3）药物疗效考核：
对乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）定量分析显示：
病毒量与某些药物的疗效关系。
HCV高水平表达，干扰素治疗作用不敏感，而HCV低滴度，干扰素作用敏感；在拉米夫定治疗过程中，HBV-DNA的血清含量曾有下降，随后若再度上升或超出以前水平，则提示病毒发生变异。
（4）肿瘤基因检测：
尽管肿瘤发病的机理尚未清楚，但相关基因发生突变是致癌性转变的根本原因已被广泛接受。
癌基因的表达增加和突变，在许多肿瘤早期就可以出现。
实时荧光定量PCR不但能有效地检测到基因的突变，而且可以准确检测癌基因的表达量。
目前用此方法进行过端粒酶hTERT基因、慢性粒细胞性白血病WT1基因、肿瘤ER基因、前列腺癌PSM基因、肿瘤相关的病毒基因等多种基因的表达检测。
随着与肿瘤相关的新基因的不断发现，荧光定量PCR技术将会在肿瘤的研究中发挥更大的作用。
6.临床意义
PCR技术在结核菌检测中的应用及意义结核菌基因诊断的意义主要表现在：
1） 区分TB与其它分枝杆菌；
2） 检测TB耐药基因；
3） 提高TB的阳性检出率。
PCR技术在HBV检测中的应用及意义
1） 了解乙肝病毒在体内存在的数量。
2） 是否复制。
3） 是否传染，传染性有多强。
4） 是否有必要服药。
5） 肝功能异常改变是否由病毒引起。
6） 判断病人是适合用哪类抗病毒药物。
7） 判断药物治疗的疗效。
PCR技术在HCV检测中的应用及其意义
HCV是引起输血后肝炎的主要致病因子，因其在血中的含量极低，仅为HBV的1%，其免疫学标志只有抗-HCV一项，且至今病毒分离尚未成功，所以HCV的检测较HBV困难的多，因此，PCR技术在HCV的检测出显得格外重要，其意义主要表现在：
1） 抗-HCV可作为HCV感染诊断的指标。
由于个体间免疫功能的差异，部分患者出现抗-HCV较晚，免疫功能低下者和经免疫抑制治疗者甚至可能不产生抗-HCV；因此HCV-RNA是HCV感染的确诊标志。
据报道，在患者发病30-60天和6-30个ELISA抗-HCV的检出率分别为45%和67%，说明ELISA检出抗-HCV有相当高的漏检率。
2） 在“窗口期”没有抗-HCV产生，但可检测出RNA。
3） HCV-RNA定量可指导用药，为疗效观察及预后判断提供客观指标。
血清HCV拷贝高对干扰素不敏感，低敏感，据报道，HCV<100pg/ml组：
11/30转阴HCV>100pg/ml组：
1/30转阴。
HCV-RNA持续维持高水平状态可能预后不佳。
4） 抗-HCV阳性并不能代表现症感染，丙型肝炎的诊断标准是HCV-RNA（+）。
PCR在CT检测中的应用
CT是非淋菌性尿道炎的主要病原微生物之一，有时还可引起不育等其它疾病。
CT为专性细胞寄生性，一般培养不能生长，只有在活细胞内才能增殖复制，实验室通过Mcloy、Hela-229细胞培养观察包涵体，可认为是诊断“金标法”。
五、试述动物人工授精的技术环节和每个环节依据的繁殖学原理
第四章人工授精
第一节概述
人工授精（artificialinsemination，AI）是使用器械采集公畜的精液，再用器械把经过检查和处理的精液输入到母畜生殖道内，以代替自然交配而繁殖后代的一种繁殖技术。
人工授精的基本技术环节包括公畜的采精、精液品质检查、精液的稀释、保存（液态保存和冷冻保存）、运输、冷冻精液的解冻与检查、输精等。
人工授精在家畜生产中的意义
有效地改变了动物的交配过程，提高优秀公畜的配种效能和种用价值。
加快家畜品种改良速度，促进育种工作进程。
减少了种公牛的饲养头数，降低其饲养管理费用。
公、母畜不接触即可完成配种，可防止各种接触性疾病的传播。
克服公、母畜因体格相差过大不易交配，或生殖道因某些异常不易受胎的困难，并能及时发现不孕症等生殖器官疾病，有利于提高母畜受胎率。
冷冻精液可以长期保存和运输，母畜配种不受地域限制，并可开展国际间的交流和贸易，代替种公畜的引进。
第二节采精
一、采精前的准备
（一）场地要求采精场固定，以便种公畜建立起条件反射。
露天采精场：
地势平坦、避风、肃静、有围墙、避免阳光直射。
采精室：
宽敞、平坦、安静、清洁，附设喷洒消毒和紫外照射杀菌设备。
设有采精架，以保定台畜或设立假台畜，供公畜爬跨采精。
采精场地应与人工授精操作室相连。
（二）采精台的准备
活台畜经训练过的公、母、阉畜均可作台畜。
要求性情温顺、体壮、大小适中、健康无疾病。
采精前，台畜保定在采精架内，台马须用保定绳保定在横木架上。
台畜的后躯，特别是尾根、外阴、肛门等部位应洗涤，擦干保持清洁。
假台畜应用假台畜采精，简单方便而且安全，各种家畜都能采用。
假台畜是模仿母畜大致轮廓作成的，并牢固固定在地面上。
要求大小适中、坚固稳定、表面柔软干净。
（三）采精准备和调教
公畜采精必须用诱情方法使公畜有充分的性兴奋和性欲，尤其对性欲迟钝的公畜，采取多次爬跨，改换台畜及变换位置等方法。
使用假台畜采精的种公畜必须经过调教。
方法有：
在假台畜后躯涂抹发情母畜阴道黏液或尿液，以引起公畜性兴奋并诱使其爬跨。
在假台畜旁放一发情母畜，诱使其爬跨几次，但不使其交配，当公畜性兴奋达到高峰时即牵向假台畜使其爬跨。
将待调教的公畜栓系在假台畜附近，观摩训练公畜的采精。
在调教过程中要耐心，反复训练。
强迫、抽打、恐吓及其他不良刺激都会引起调教困难或性抑制。
二、采精方法
（一）假阴道法它是利用人工模拟发情母畜的阴道环境，诱导公畜在其中射精的方法，可适用于各种家畜。
1.假阴道的结构外壳：
由硬橡胶、金属或塑料制成。
内胎：
为弹性强、柔软无毒的橡胶筒，装在外壳内，构成假阴道内壁。
集精杯：
由暗色玻璃或橡胶制成，装在假阴道的一端。
附件：
固定内胎的胶圈，保定用的三角保定带，充气用的活塞和双联球，连接集精瓶（猪）或集精管（牛）橡胶漏斗。
2.假阴道的安装假阴道在使用前要洗涤，安装内胎，消毒，晾干，注水，涂润滑剂，调节温度和压力等步骤。
温度：
注入相当于假阴道内外壳间容积2／3的温水来维持内部温度，在采精时保持38～40℃。
温度不当往往造成采精失败。
压力：
注入水和空气来调节假阴道的压力，压力不足不能刺激公畜射精。
润滑度：
用消毒的液体石蜡或凡士林涂抹假阴道表面增加润滑度。
润滑剂的量过多过少都可能影响采精效果和精液的品质。
3.采精操作
将假阴道与公畜阴茎伸出的方向成一直线，紧靠并固定于台畜尻部。
待阴茎勃起充分时，迅速将阴茎导入假阴道内，动作要求迅速、准确。
射精时将假阴道集精杯一端向下倾斜，以便精液流入集精杯内。
当公畜跳下台畜时，假阴道随着阴茎后移，放掉假阴道内的空气，阴茎自行软缩脱出后再取下假阴道。
（二）手握法0.1％高锰酸钾溶液清洗消毒阴茎包皮及其周围，再用生理盐水冲洗干净。
带上灭菌乳胶手套，一只手持瓶口带有特制过滤纸或4层纱布的集精瓶或杯，蹲在台畜的一侧。
当阴茎从包皮内开始伸出时立即紧握龟头，待其抽送片刻后，手呈拳状有节奏的对阴茎施加压力，一不使阴茎滑脱为准。
待阴茎充分勃起时，顺势牵引向前则能引起公猪射精。
（三）电刺激采精法采精时须将公畜以侧卧或站立姿势保定。
牛和马鹿等野生动物在必要时还须用药物镇静。
剪去包皮附近的长毛，用生理盐水冲洗擦干。
如有条件可采用灌肠，排尽直肠宿粪，效果更好。
然后将直肠电极探头慢慢插入肛门。
牛、鹿深度20～25cm，羊约l0cm，兔约5cm，紧贴直肠底壁，靠近输精管壶腹部。
选择好频率，接通电源，逐步增高电压和刺激强度，直至伸出阴茎，排出精液。
（四）按摩法这一方法适用于公牛。
操作时先将直肠宿粪排除，再将手伸人直肠的25cm处，轻轻按摩精囊腺，刺激精囊腺分泌物自包皮流出，然后将食指放在输精管两膨大部中间，中指和无名指放在膨大部外侧，拇指放在另一膨大部外侧，同时由前向后轻轻伴以压力，反复滑动摩擦，即可引起公牛精液流出。
三、采精频率
采精频率（frequencyofsemencollection）是指每周内对公畜采精次数。
合理安排公畜采精频率是维持公畜健康和最大限度采集精液的重要条件。
各种公畜采精频率是根据精子生产和贮存量制定的。
在生产上，成年种公牛通常每周采2d，每天采2次，也可以每周3次，隔日采精；青年公牛精子产量较成年公牛少1／2～1／3，采精次数应酌减。
公猪、公马射精量大，很快使附睾内贮存精子彻底排空，采精最好隔日1次，如果需要每天采精，则连续2d后，休息1～2d。
公绵羊和公山羊射精量少而附睾贮存量大，由于配种季节短每天可采精多次，连续数周，不会影响精液质量。
第三节精液品质检查
精液品质检查的主要目的在于鉴定其品种的优劣，为精液稀释、分装保存和运输提供依据；了解种公畜饲养水平、生殖器官机能状态、采精操作技术水平等。
精液品质检查要求在37℃下进行，防止温度的骤然下降，取
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