公共卫生基本操作技能第二章 样品的采集与现场检测.docx
《公共卫生基本操作技能第二章 样品的采集与现场检测.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《公共卫生基本操作技能第二章 样品的采集与现场检测.docx（23页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
公共卫生基本操作技能第二章样品的采集与现场检测
公共卫生基本操作技能——第二章 样品的采集与现场检测
考情分析
本章样品采集与现场检测是在第三站第一题的位置，分为样品采集和现场检测两部分内容。
题目为两者之一。
样品采集为三部分：
环境样品、食品样品、医院消毒效果检测。
这部分内容较多，考生遇见的可能性大。
现场检测主要为仪器的使用方法和注意事项等，这部分内容相对少，但是要注意仪器使用细节，容易丢分。
考试大纲
样品采集
1.环境样品◆水样品采集◆空气样品采集◆公共用品采集
2.食品样品散装食品（固态、液态）的微生物样品采集
3.医院消毒效果检测空气、手、物体表面、医疗用品、消毒剂的样品采集
现场检测仪器的操作：
噪声测定仪、风速仪、照度仪、紫外辐照计
水样品采集
采样前准备
采样容器的选择
①有机物和微生物检测用玻璃容器，不用橡胶塞
②碱性样品不能用玻璃塞
③无机物、金属、放射性元素用塑料容器
④光敏物质用棕色或深色容器
⑤生物样品（含藻类）用不透明的非活性玻璃容器，并存放暗处
水样采集一般要求
①测定溶解氧、生化需氧量、有机物的水样采集时，将水样注满容器，上部不留空间，水封。
②检测微生物水样，直接采集，不得用水样涮洗灭菌采样瓶，水样不得充满采样瓶（2/3瓶水），整个过程无菌操作。
③检测理化的水样，采样前用水样荡洗采样器、采样容器和塞子2～3次（油类除外）。
④色度、浊度、pH及电导率在现场测定。
类型
▲水源水（河流、湖泊、水库水、地下水）
▲出厂水
▲末梢水（龙头水）
▲二次供水
▲分散式供水
1.水源水（河流、湖泊、水库水、地下水）
采样工具：
河流、湖泊、水库水和自涌泉---水桶直接采集
一定深度的水---直立式采水器
非自涌泉水、深井水---充分抽汲后采集
（1）河水样品的采集
河流不同深度的采样点（垂直）
深（m）
采样点数（个）
说明
≤5
1（距水面0.5m）
1.水深不足1m时，在1/2水深处
2.河流封冻时，在冰下0.5m处
3.若有充分数据证明垂直上水质均匀，可减少采样点数
5～10
2（距水面0.5m,河底以上0.5m）
＞10
3（水面下0.5m，1/2深处，河底以上0.5m）
不同规模河流的采样点（断面）
年平均流量（m3/s）
分类名称
采样点数
＜5
小溪
2
5～150
小河
4
150～1000
河流
6
＞1000
大河
至少6个点，按流量增大，适当增加
河流采样断面的设置
断面名称
断面设置位置
断面设置意义
对照断面
河流入城市前，避开污水流入或回流的断面
了解入境前水体水质状况
背景断面
清洁河段（河流上游）
水环境质量受人类影响较小的断面
控制断面
受污染可能大，对城乡饮用水影响大的断面
监测特定排污对于水体的影响，评价水质污染
监控断面
集中式供水取水点河段的断面
了解水质状况，指导水质处理
（2）湖泊、水库水样品的采集
采样断面的设置
①进入湖泊、水库的河流汇合口处。
②在生活污水和工业污水的排污口、城乡生活饮用水源取水口的辐射线上设置弧形采样断面。
③在湖泊、水库中心和沿水流流向以及滞流区分别设置采样断面。
④风景游览区、游泳场、排灌站、不同鱼类的回游产卵区和水生生物经济区等处设置采样断面。
（3）地下水样品的采集
地下结构复杂，调查与监测点的设置受到限制
1）浅层地下水监测点：
目标井及周围30m范围的井及河流。
2）深层地下水和泉水：
结合情况在补给水源范围内的井及河流布点。
3）机井水、手压泵井：
泵抽水、压水15min后采集水样。
2.出厂水的采集
出厂水：
集中式供水单位水处理工艺完成的水
采样点：
水出厂进入输配水管网前
监测点：
集中式供水单位的出水口处
采样点数=水厂出水口数
3.末梢水采集
末梢水：
出厂水经输配水管网输送至用户的水（龙头水、饮用水）
注意：
采集末梢水前，必须放水15min，管道冲洗充分
末梢水采样点数
人口（万）
采样点数（个）
1
2
10
4
20
6
50
8
100
10
200
12
＞200
≥15
公共卫生基本操作技能---末梢水样品采集
一般理化指标：
5L聚乙烯采样桶
24h挥发性酚类和氯化物：
1000ml磨口玻璃瓶、加NaOH0.5～1g，使pH≥12
14d测金属水样采集（铝、铁、锰、铜、锌）：
1000ml聚乙烯瓶、加HNO31～1.5ml，使pH≤2。
24h测耗氧量：
500ml磨口玻璃瓶、500ml加0.4ml浓硫酸
4h微生物：
500ml灭菌微生物采样瓶、125ml加0.1mg硫代硫酸钠
一、测定一般理化指标的水样采集
1.选择采样容器——5000ml（5L）的聚乙烯采样桶。
2.打开水龙头，必须放水15min以上。
3.龙头水洗涤容器和桶盖，3次以上。
4.采水量3～5L，加盖。
5.填写采样记录单，贴标签，置于冷藏箱中送检。
一般理化指标——硬度、浊度、色度、电导率
二、测定挥发性酚类和氯化物的水样采集
1.选择容器——1000ml磨口玻璃瓶。
2.打开水龙头，必须放水15min以上。
3.龙头水洗涤容器和桶盖，3次以上。
4.采水量0.5L～1L水样，加NaOH0.5～1g，使pH≥12
5.加盖，混匀。
6.填写采样记录单，贴标签送检。
三、用于测金属水样采集（铝、铁、锰、铜、锌）
1.选择容器——5000ml聚乙烯桶或1000ml聚乙烯瓶。
2.打开水龙头，必须放水15min以上。
3.龙头水洗涤容器和桶盖，3次以上。
4.采水量0.5L～1L水样，加HNO31～1.5ml，使pH≤2。
5.加盖，混匀。
6.填写采样记录单，贴标签送检。
四、用于测耗氧量水样采集
1.采样容器选择——500ml磨口玻璃瓶。
2.打开水龙头，必须放水15min以上。
3.龙头水洗涤容器和桶盖，3次以上。
4.采0.5～1L水样，每升水加0.8ml浓硫酸（题目为500ml加0.4ml浓硫酸），加盖，混匀。
5.填写采样记录单，贴标签，冷藏送检。
五、测定微生物水样品的采集
1.采样容器：
500ml灭菌微生物采样瓶（每125ml水样加入0.1mg硫代硫酸钠除去残留余氯）。
2.对水龙头进行消毒（酒精棉擦或者酒精灯烧均可）。
3.放水15min以上。
4.点燃酒精灯制造无菌环境，手消毒用酒精棉擦。
5.直接采样+硫代硫酸钠，不能用水样洗涮灭菌采样瓶。
6.采集2/3瓶水，瓶口置于酒精灯处烧一下。
7.避免手指和其他物品对瓶口的污染（如何拿瓶盖），加盖、密封。
8.采样单内容：
样品编号、样品名称、采样人、采样日期时间、采样地点、水样体积、数量、保存方法、检测指标、气温、水温等。
11
9.贴标签，冷藏送检。
4.二次供水的采集
样品：
处理前进水、处理后出水、龙头水
二次供水设施数与采样点数
二次供水设施数（个）
采样点数（个）
5
2
10
4
50
8
200
10
500
12
1000
15
＞1000
＞15
5.分散式供水
采样容器与保存方法
采样容器
生活饮用水部分采样容器和保存方法（较特殊）
项目
采样容器
保存方法
保存时间
备注：
微生物采样瓶不充满水样
微生物
G（灭菌）
每125ml水样加入0.1mg硫代硫酸钠去除残留余氯
4h
一般金属
P
硝酸，pH≤2
14d
耗氧量，COD
G
每升水样加0.8ml浓硫酸，冷藏
24h
挥发性有机物
G
盐酸pH≤2，加抗坏血酸0.01～0.02g除余氯
12h
挥发性酚类与氰化物
G
氢氧化钠pH≥12，加亚砷酸钠去余氯
24h
样品管理与运输
1.样品管理：
采样标签、采样记录、水样编号、采样者、采样日期、采样时间、水样体积、数量、保存方法、水样采集点周边情况、气温、水温、需检指标等信息。
2.样品运输
水样采集的控制
1.现场空白：
现场的纯水/与样品相同条件送回。
操作步骤、环境条件的影响。
2.运输空白：
纯水/实验室、现场、实验室/样品运输、现场处理、贮存、容器的玷污。
3.现场平行：
同等条件/采样、实验室精密度。
4.现场加标样或质控样：
平行样加标准溶液/采样、运输中的准确度变化。
水样的现场检测
1.pH：
玻璃电极法/标准缓冲溶液比色法
2.余氯总余氯-游离余氯=化合余氯
结果判读与分析（部分）
指标
限制
总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希菌
不得检出
菌落总数
100
铜
1.0
总硬度
450
耗氧量
3
pH
6.5≤PH≤8.5
溶解性总固体
1000
3.不同消毒剂使用与之相对应的中和剂中和（中和被检消毒液的残效作用）
消毒剂
中和剂
醇类、酚类消毒剂
普通营养肉汤
含氯、含碘、过氧化物消毒剂（过氧乙酸、过氧化氢、臭氧）
0.1%硫代硫酸钠磷酸盐缓冲液
氯己定（洗必泰），季铵盐类（苯扎溴铵）
3%的吐温80磷酸盐缓冲液和
0.3%卵磷脂磷酸盐缓冲液
醛类消毒剂（戊二醛）
0.3%甘氨酸磷酸盐缓冲液
含有表面活性剂的各种复方消毒剂
3%的吐温80磷酸盐缓冲液
空气样品采集
采样方法
◇空气中化学性污染物采集方法
1.直接取样法（塑料袋采样、真空瓶取样）
2.液体吸收法
3.固体吸附法
4.颗粒物采样法：
滤料法
◇空气中生物性污染物采样方法
1.撞击法
2.沉降法
◇空气中物理因素采样方法
常用现场检测法，参照现场检测仪器操作
◇空气中化学性污染物采集方法
1.直接取样法空气中被测组分高，取少量即可满足需要
注意：
◆选用容器：
密闭的
◆选用材料：
化学惰性的
◆使用前检查密闭性
◆用清洁空气清洗
1）塑料袋取样法
采样对象：
CO、CO2
采样设备：
聚乙烯薄膜采样袋（CO）
铝箔复合薄膜采气袋（CO、CO2）
体积：
0.5～2L（都要检查气密性）
蝴蝶夹子；二联球；
标签及记号笔；采样记录单。
采样方法：
①检查气密性
②空气冲洗，3～5次
③采样
④密封气口
⑤贴标签
⑥填写记录单
⑦放入采样箱，并盖上盖子
2）真空瓶采样室内挥发性有机化合物采样
采样仪器：
抽空的不锈钢钢瓶
采样方法：
①钢瓶放置现场
②限流阀控制空气流速
2.液体吸收法
空气被测组分被吸收在溶液中
适用样品：
甲醛、氨、SO2、NO2、O3
液体吸收法所用设备：
①大气采样器
②三脚架
③液体吸收管：
大泡吸收管、多孔玻板吸收管
④缓冲瓶
⑤温湿度计、气压表
⑥标签
⑦采样记录单
液体吸附法采样方法：
①检查计量检定标识、电源；
②采样高度：
采样器放在三脚架上，调节至呼吸带高度；
③采样系统连接（缓冲瓶，避免溶液倒吸）；
④采样：
开泵，调节采样时间，调节采样仪流量；
⑤采样完毕：
密闭采样管两端，样品编号，收设备；
⑥环境测定：
现场测定温度、大气压，做好记录；
⑦填写采样单：
采样地点、现场温度、大气压、样品编号。
序号
采集气体名称
吸收管名称
颜色
数量
1
甲醛
大泡吸收管（侧、上）
透明
1
2
氨
大泡吸收管
透明
1
3
二氧化硫SO2
多孔玻板吸收管（上、上）
透明
1
4
二氧化氮NO2
多孔玻板吸收管
棕色
1
5
臭氧O3
多孔玻板吸收管
棕色
2
6
苯系物
活性炭管
---
1
7
TVOC挥发性有机化合物
Tenax管
---
1
注意事项
①采样器进口与缓冲瓶侧方口连接；
②大泡吸收管侧方口与缓冲瓶上方口连接；
③多孔玻板吸收管上方球形出口与缓冲瓶上方出口相连接。
3.固体吸附法
空气中被测组分因吸附、溶解或化学反应等作用而被阻留在填充剂上
采样管类型：
苯系物---活性炭采样管
（TVOC）挥发性有机化合物---Tenax采样管
固体吸附法所用设备：
①大气采样器；
②三脚架；
③固体吸收管（活性炭吸收管、Tenax采样管）；
④温湿度计、气压表；
⑤标签；
⑥采样单。
固体吸附法采样方法：
①检查计量检定标识、电源
②采样高度：
采样器放在三脚架上，调节至呼吸带高度
③采样系统连接（不需缓冲瓶，采样管与地面垂直）
④采样：
开泵，调节采样时间，调节采样仪流量
⑤采样完毕：
密闭采样管两端，样品编号，收设备
⑥环境测定：
现场测定温度、大气压，做好记录
⑦填写采样单：
现场温度、大气压、采样地点、样品编号
4.颗粒物采样方法
计算空气中颗粒污染物浓度
滤料法（滤膜法）：
将滤纸或滤夹放在采样器上，用抽气泵通过滤料抽入空气，空气中的悬浮颗粒物质就被阻留在滤料上。
颗粒物采样法所需设备：
①粉尘采样器
②三脚架
③滤膜
④温湿度计、气压表
⑤标签
⑥采样单
采样方法
①准备（称重好的滤膜，毛面朝外）
②采样（定时、开泵）
③收样、编号
④关机
⑤填写采样单
◇空气中生物性污染物采样方法
空气中菌落总数评价
沉降法：
直径9cm的营养琼脂平板
沉降法采样方法：
①设置采样点
②采样高度：
呼吸带高度（1.0～1.5m）
③平皿开盖5min
④盖盖、编号，放入培养皿桶内
⑤填写记录单：
样品编号、样品名称、采样时间、地点、采样人、检测项目等
注意：
手不要触碰琼脂面，平皿盖的放置
采样基本原则
①代表性
②典型性
③适时性与适用性
④现场采样的质量控制
采样点的选择
（1）采样点数量：
室内面积
采样点数量
小于50m2
1个
50～200m2
2个
200m2以上
至少3～5个
（2）采样点分布：
（避开通风口，距墙壁>0.5m）
采样点数
采样点位置
1个
室内中央
2个
室内对称点
3个
对角线四等分3个点
5个
梅花状布点
（3）采样位置：
①采样时吸收管与地面垂直放置；
②采样流量不宜过大。
公共用品采集
采样数量：
投入使用总数的3%～5%抽取
不足30件，至少采1件
公共用品涂抹---采样器具的选取8
①内装10ml生理盐水的灭菌试管
②无菌长棉拭子（注意打开部位）
③酒精灯、酒精棉球
④灭菌剪刀、灭菌镊子
⑤记号笔、采样单
杯具、洁具---细菌总数、大肠菌群
棉织品、美容美发---细菌总数、大肠菌群、金葡菌
拖鞋---细菌总数
购物车---大肠菌群、霉菌、酵母菌
杯具---测定细菌总数、大肠菌群
①穿医用白色工作服，戴医用口罩、帽子
②打开酒精灯，同时进行手消毒，戴一次性乳胶手套
③打开试管盖，酒精灯灼烧试管口
④取1支灭菌干燥棉拭子，于10ml灭菌生理盐水内吸取约1ml灭菌生理盐水湿润棉拭子
⑤在随机采样的杯具与口唇接触1～5cm高度内外缘各涂抹一圈，总采样面积为50cm2
⑥用灭菌剪刀剪去棉拭子手接触部分，放入剩余9ml生理盐水内，烧灼试管口，盖无菌塞，关闭酒精灯，长棉拭子和一次性手套放入指定垃圾袋
⑦样品编号，填写采样单，4小时内送检
注意：
采样后的棉拭子不能碰触试管外壁
棉织品---细菌总数、大肠菌群、金葡菌
（1）毛巾、枕巾、浴巾
★在毛巾、枕巾、浴巾对折后一面的中央各5cm×5cm（25cm2）面积上均匀涂抹5次
★对折后的另一面中央部采用同样方法采集另一份样品
★每件用品采集2份样品，4小时内送检
（2）床单、被单等卧具
★分别在床单、被单的颈部接触部位5cm×5cm（25cm2）面积上均匀涂抹5次
★在脚部接触部位采用同样方法采集另一份样品
★每件用品采集2份样品，4小时内送检
（3）睡衣、睡裤
★在睡衣睡裤随机选择1个5cm×5cm（25cm2）面积范围内均匀涂抹5次
★再随机选择另一部位采用同样方法采集另一份样品
★每件用品采集2份样品，4小时内送检
洁具---细菌总数、大肠菌群
（1）浴盆
★在盆内一侧壁1/2高度5cm×5cm（25cm2）面积范围内均匀涂抹采样
★在盆底中央采用同样方法采集另一份样品
★每件用品采集2份样品，4小时内送检
（2）脸（脚）盆
★在盆内1/2高度一侧壁5cm×5cm（25cm2）面积范围内来回均匀涂抹
★在盆内另一侧壁采用同样方法采集另一份样品
★每件用品采集2份样品，4小时内送检
（3）坐便器
★在坐便圈前部弯曲处选择1个5cm×5cm（25cm2）面积范围内涂抹采样
★在前部弯曲处选择另一部位采用同样方法采集另一份样品
★每件用品采集2份样品，4小时内送检
（4）按摩床（椅）
★在床椅面中部选择1个5cm×5cm（25cm2）面积范围内涂抹采样
★在床椅面中部选择另一部位采用同样方法采集另一份样品
★每件用品采集2份样品，4小时内送检
拖鞋---细菌总数
★分别在每只鞋的鞋内与脚趾接触处5cm×5cm（25cm2）面积上有顺序地均匀涂抹5次
★总采样面积50cm2
★1双鞋为1份样品，用1支棉拭子涂2只鞋，4小时内送检
购物车（筐）---大肠菌群、霉菌、酵母菌
★在车（筐）把手处选择2个5cm×5cm（25cm2）范围内均匀涂抹5次
★采样总面积为50cm2
★1件物品为1份样品，4小时内送检
美容美发用品---细菌总数、大肠菌群、金葡菌
★理发推子：
在推子前部上下均匀各涂抹3次，采样面积达到25cm2为1份样品
★理发刀、剪：
在刀、剪两个面各涂抹1次，采样面积达到25cm2为1份样品
★美容美甲工具：
与人体接触处涂抹采样，采样面积达到25cm2为1份样品
★修脚工具：
与人体接触处涂抹采样，采样面积达到50cm2为1份样品
★4小时内送检
食品样品采集
食品样品的采集（散装食品）
采样工具：
1.无菌采样器具：
铲子、夹子、勺、镊子、吸管、剪子、刀具等。
2.无菌容器：
广口瓶、灭菌袋。
3.其他：
酒精灯、打火机、酒精棉、记号笔、采样单等。
采样量：
固体不少于250g，液体不少于250ml。
采样操作步骤（散装固体）
1.穿工作服，戴工作帽、口罩。
2.在需采集样品的附近点燃酒精灯。
3.酒精棉消毒手，戴乳胶手套。
4.酒精棉消毒盛装食品的容器口。
5.打开容器，烧灼取样工具。
6.取样放入灭菌容器。
7.酒精灯火焰下将容器封口。
散装液体样品:
1.采样前先用灭菌玻璃棒搅匀或摇匀。
2.消毒盛装食品的容器口。
3.流出一些后用灭菌瓶直接接取，或用灭菌吸管吸取，或用灭菌勺盛取。
4.酒精灯火焰下封口。
食品样品的采集注意事项
1.各种取样工具要先烧灼灭菌后再用。
2.使用无菌容器盛放样品，确保容器密封，防止样品外漏。
3.不要触摸无菌容器里面。
4.液体样品的容量不要超过容器的3/4，以免泄露。
采样单填写：
1.样品名称
2.来源
3.批号、数量
4.保存条件
5.采样时间
6.采样地点
7.采样人
医院消毒效果检测
采样原则
1.无菌操作
2.4小时内送检
3.0～4℃保存
4.24小时内送检
5.样品唯一性标识
环境分类：
Ⅰ类环境：
洁净手术部和其他洁净场所。
Ⅱ类环境：
非洁净手术室、产房、导管室、血液病病区、烧伤区；重症监护病区；新生儿室。
Ⅲ类环境：
母婴同室、血液透析中心、普通住院病区。
Ⅳ类环境：
普通门诊及其检查、治疗室；感染科门诊和病区。
空气采样法
（1）采样时段：
Ⅰ类环境，在洁净系统自净和从事医疗活动前采样（手术室）
Ⅱ～Ⅳ类环境，在消毒后或规定的通风换气后和下一次活动前采样
（2）采样高度：
80～150cm（80cm为台面高度，150cm为呼吸带高度）
（3）采样方法：
Ⅰ类环境，按《医院洁净手术部建筑技术规范》规定的方法采样
沉降菌法：
90mm普通营养琼脂平板
撞击式采样：
6级筛孔撞击式采样器
中央设一点，房间大于10m2，每增加10m2增加一个采样点
采样时间：
Ⅰ类环境，30min
Ⅱ～Ⅳ类环境
沉降菌法：
90mm普通营养琼脂平板。
采样点：
1）室内环境≤30m2，设内中外对角线3点，内外点应距墙面1m。
2）室内环境＞30m2，设4角及中心5点，4角的布点部位应距离墙壁1m。
采样时间：
Ⅱ类环境15min,Ⅲ～Ⅳ类5min。
注意事项：
①采样前，关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min后采样。
②先布点（放平板），后开盖。
③行走时动作轻，尽量少走动。
④同一房间，由一人操作。
医务人员手采样
1.采样时间：
清洗消毒双手后，接触病人或者从事医疗活动前采样。
2.采样方法：
浸有生理盐水采样液的一支棉拭子在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次（一只手涂擦面积约30m2）。
转动棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入10ml采样液的试管内编号送检两只手为一个样品。
物体表面采样
1.采样时间：
污染区、潜在污染物在消毒后采样。
清洁区根据现场情况确定。
2.采样面积：
面积＜100cm2时，取全部表面；
面积≥100cm2取100cm2
3.采样方法：
用5cm×5cm的灭菌规格板放在物体表面，用浸有生理盐水采样液的1支棉拭子，在规格板内横竖往返各涂抹5次，随之转动棉拭子；
连续采4个规格板；剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检；
不规则物体表面直接涂抹采样；
物体表面采样由近及远。
医疗用品采
升级会员 