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载脂蛋白与高脂血症

第一章前言

载脂蛋白E（apolipoproteinE，apoE）是由Shore等于1973年首先发现的[1],1975年Uterman将其分离并命名[2]。

作为乳糜微粒（Chylomicron，CM）、血浆极低密度脂蛋白（Verylowdensitylipoprotein，VLDL）、中等密度脂蛋白（Intermediatedensitylipoprotein,IDL）、高密度脂蛋白（Highdensitylipoprotein,HDL）等脂蛋白的组分，apoE通过低密度脂蛋白（Lowdensitylipoprotein,LDL）受体途径负责对脂蛋白残粒的摄取，是脂质代谢中的重要决定因素[3]。

它还是中枢神经系统的主要组分，对脑组织淀粉样蛋白的沉积与清除、微管蛋白稳定性的维持、细胞信号传导、免疫调节、葡萄糖代谢、氧化应激等都有潜在的作用[4]。

apoE基因具有多态性，其基因包含3种常见的等位基因：

ε2、ε3和ε4，产生六种表型E2/2、E3/3、E4/4、E2/3、E2/4、E3/4[5]。

apoE基因多态性的分布具有种族和地区差异。

对不同种族和地域的人群进行apoE基因多态性分布的研究，已成为近些年来apoE基因的研究热点之一[6]。

apoE基因多态性与心血管疾病、阿尔茨海默病（AD）、帕金森病、脑血管疾病等多种疾病密切相关，这些疾病的分布具有地域和种族差异。

人们认为不同种族和地域间，上述疾病的发病率不同与apoE基因多态性有关[7]。

大量研究证实ε4基因是引发大量疾病的危险基因，与ε4相反，ε2频率的升高对多种人体疾病具有保护作用[8,9]。

因此，研究不同人群apoE基因多态性的分布特征对疾病的预防和治疗有着理论和现实的双重意义。

国内外学者已对许多地区和民族的apoE基因多态性进行了研究，获得了大量数据。

宁夏是全国最大的回族聚居区，独特的历史渊源赋予了宁夏别于中国其他省份的回族资源。

目前宁夏回族apoE基因多态性的研究尚未见报道。

本课题研究目的之一是：

探明宁夏回族与汉族健康人apoE基因多态性的分布差异与特征；揭示宁夏回、汉族人群对一些疾病的遗传易感性；为两族人群的疾病防治提供理论及数据支持，也为宁夏回、汉族遗传数据库增添新的内容。

高脂血症是一种遗传因素与环境因素共同作用的多基因遗传病，是动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中、等疾病发生、发展的重要危险因素。

同时又与肾病、糖尿病、高血压等疾病相互影响，是当前危害人民群众身体健康的高发疾病。

apoE基因多态性与高血脂症的发生和发展有着密切的关系。

apoE2/2基因型被认为是Ⅲ型高脂蛋白血症发生的必要因素[10]。

大量人群调查发现ε4等位基因对应较高的血浆胆固醇和LDL浓度，是心血管疾病的风险因子，相反，ε2等位基因被认为对上述疾病具有保护作用。

因此，对apoE基因多态型的研究在筛选心血管疾病易感人群，并采取有效的保护和干预措施等方面都具有潜在的应用前景。

通过对人群的apoE基因型及血脂加以测定，可以早期预防和治疗高脂血症，这对预防动脉粥样硬化，减少心血管疾病的发生有重要意义[11]。

本课题的另一研究目的就是：

探明宁夏回、汉族高脂血症患者及健康对照组间apoE基因多态性的分布差异与特征；进一步研究apoE基因多态性与高脂血症的关系，在基因水平上探讨疾病根源；为宁夏回、汉族心脑血管疾病易感人群的筛选提供数据支持；为宁夏地区相关疾病易感者早期诊断和防治提供理论依据。

1.1apoE的结构

人apoE基因定位于19q13.2，基因全长3.7kb，由四个外显子和三个内含子组成，从5′端到3′端外显子长度分别为44bp、66bp、193bp和860bp,内含子长度分别为760bp、1092bp和582bp。

apoE基因第一个内含子位于5＇端非翻译区，在翻译起始密码子上游第23和24碱基之间。

第一内含子中的区域对apoE基因表达调控起着重要的作用，转录因子SP-1能够结合-161至-141处序列，调节上游调控元件的活性。

第二内含子切断编码apoE前体肽第4位氨基酸的密码子，第三内含子切断编码成熟蛋白质第61位氨基酸的密码子[12]。

apoE基因编码1163bp的mRNA，其mRNA转录起始点位于第一内含子上游44bp处，TATA盒元件位于转录起始点上游33bp处[13]。

人apoE蛋白由299个氨基酸组成，分子量为34.2kDa，含32个Arg和12个Lys，是一种富含精氨酸的碱性蛋白，主要在肝脏和脑组织合成，存在于血浆的CM、VLDL、IDL和部分HDL及其残粒中。

apoE蛋白具有稳定的二级结构。

据推算和测定，在介质中apoE有62%的α-螺旋，9％的β-片层，11%的β-转角和18%无规则卷曲[14]。

随着对apoE分子的不断深入研究，apoE的三级结构也逐渐被人们所了解。

apoE蛋白具有两个独立的高度双螺旋的结构域，即N端区和C端区，其间间隔一段无规卷曲片段即绞链区。

N端区（1-191）分子量为22kDa，较稳定。

该片段的136-158位肽段为受体结合位点，富含碱性氨基酸（赖氨酸和精氨酸），也属于肝素结合区。

研究表明apoE的130-160肽段在apoE与LDL受体的识别过程中发挥重要作用，特别是这一部位的碱性氨基酸如精氨酸（Arg）和赖氨酸（Lys）是apoE结合受体所必需的，这一区域中仅一个氨基酸的取代就能影响受体的结合活性。

C端区（216-299）分子量为l0kDa，螺旋程度很高，不稳定，是脂蛋白的结合区。

脂类和脂蛋白的结合区位于244-299位残基域。

研究表明，263-286位肽段可能在apoE与VLDL的结合中起关键作用。

此外，有证据指出，apoE的功能域之间可以互相影响[15,16]。

1.2apoE的功能

一般来说，载脂蛋白在脂代谢中的作用包括：

维持脂蛋白的结构完整性；在酶反应中作为辅助因子发挥作用；作为脂蛋白受体的配体等。

apoE作为载脂蛋白的一种，在脂代谢中不仅具有上述作用，还具有一些有别于其他载脂蛋白的独特作用[3]。

1.2.1血脂调节

apoE是CM、VLDL、IDL和部分HDL的结构蛋白，参与残粒代谢，调节所有含有apoE的脂蛋白的吸收，在脂类代谢中发挥关键作用。

作为LDL受体结合乳糜残粒过程中的配体，apoE对受体结合、血浆中乳糜残粒清除至关重要。

apoE还与VLDL甘油三酯的分泌分布有关。

apoE水平与甘油三酯的含量呈正相关[17]。

1.2.2神经系统修复

除作为血脂调节的关键因素外，apoE在神经生物学方面同样发挥重要作用，它是脑组织中最重要的载脂蛋白，由星形细胞和少突神经胶质细胞合成，存在于脑脊液（Cerebralspinalfluied,CSF）的HDL样脂蛋白残粒中，参与脑组织中脂质、胆固醇的运输与清除，对细胞膜及神经元网络的维持发挥作用。

在突触修复重建过程中，必须依靠apoE才能动员大量的胆固醇和磷脂来完成这一过程。

apoE直接参与神经系统脂质的再分配和胆固醇代谢的平衡。

apoE在神经损伤处原位合成，通过促进某些生长因子特别是CNTF（Ciliaryneurotrophicfactor,CNTF）的活性，促进神经损伤后的修复[18,19]。

1.2.3抑制血小板聚集

抑制血小板聚集的脂蛋白是含有apoE的HDL和富含apoE的VLDL，VLDL抑制血小板聚集的能力与apoE的含量呈正相关。

肝硬化患者的血清HDL抑制血小板聚集作用比正常血清HDL明显增强，而肝硬化患者血清HDL中apoE含量比正常人高，抑制血小板聚集功能与肝硬化原因和程度无关，而与血清中HDL的apoE含量有关，提示apoE有抑制血小板聚集功能的作用[20]。

1.2.4免疫调节

在淋巴细胞表面有apoE免疫调节受体，而含apoE的脂蛋白能与淋巴细胞免疫调节受体结合，使淋巴细胞对细胞分裂的刺激产生对抗，这可能是因为脂蛋白和受体的结合抑制了淋巴细胞活化所需要的早期转化过程，如对钙的摄取、磷酯酰肌醇循环和环核苷酸代谢等。

这些观察提示apoE在免疫反应中可能有一定的调节作用[21]。

1.3apoE的基因多态性

1.3.1apoE的基因多态性的发现

apoE多态性是由Utermann等于1975年首先观察到的[1]。

Zannis等于1981年根据apoE表型提出apoE基因模型并确定了apoE基因在染色体上的定位。

研究表明apoE的合成是由位于一个基因位点上的ε2、ε3和ε4三个共显性等位基因所控制的，每一个等位基因对应于一个主要亚型E2、E3、E4，产生六种常见表型，即E2/2、E3/3、E4/4、E2/3、E2/4、E3/4。

另外还有极少见的亚型，一般认为次要亚型是由主要亚型翻译后，经唾液酸糖化修饰后转变而来[22]。

apoE这三种异构体的区别在于第112位和第158位半胱氨酸（Cys）和精氨酸（Arg）的互换，apoE4两个位点皆为Arg，apoE2皆为Cys，而apoE3第112位为Cys而158位为Arg。

虽然每二种亚型之间只有一个氨基酸的微小变化，但这一微小变化却引发了功能上的巨大改变[23]。

自然人群中，apoE3分布频率最高被认为是野生型，apoE2和apoE4则是由它变异而来的。

大量研究证实，apoE等位基因和表型的频率分布可能存在人种和地域的差别，但无性别差异。

中国人与日本人的apoE等位基因分布情况十分相似，ε3频率均高于欧美人。

等位基因ε4频率的分布，在非洲人及巴布比亚和新几内亚人中较高，而在亚洲人中较低，或许这正是欧美国家AD发病率高的一个潜在因素[7]。

1.3.2apoE的基因多态性影响脂类代谢的可能机制

apoE作为CM残粒受体和LDL受体的配体在脂质代谢中起重要作用。

apoE分子的N端区为受体结合区，其中130-160区域对LDL受体的识别尤其重要，特别是这一部位的碱性氨基酸如精氨酸（Arg）和赖氨酸（Lys）是apoE结合受体所必需的，这一区域中仅一个氨基酸的取代就能影响受体的结合活性。

apoE三种异构体的区别在于第112位和第158位半胱氨酸（Cys）和精氨酸（Arg）的互换。

apoE4两个位点皆为Arg，ApoE2皆为Cys，而ApoE3第112位为Cys而158位为Arg。

因而apoE4比apoE3多一个正电荷，apoE2则比apoE3少一个正电荷。

而这也正是apoE各亚型受体亲和力不同的原因。

与野生型相比，E2与受体结合力较弱，E4与受体结合力相对较强[24,25]。

众多的研究表明，apoE对人群血脂浓度的影响极为明显。

在apoE的各表形中，血浆胆固醇浓度由高到低的顺序是E4/4、E4/3、E4/2、E3/3、E3/2、E2/2，而甘油三酯的浓度由高到低的顺序是E2/2、E2/3、E3/4、E2/4、E4/4、E3/3。

关于apoE的基因多态性对脂类代谢的影响，公认的解释是：

CM残粒、大颗粒VLDL残粒是由apoE与肝受体连接，且IDL转化为LDL必须有apoE参与，由于E2与受体结合力低下，CM及VLDL残粒进入肝细胞减少，在体内蓄积，同时IDL转化为LDL减少，肝LDL受体反馈性上调，对LDL分解加速，其结果是血浆甘油三酯的浓度升高，而胆固醇浓度降低。

E4由于与受体结合力相对较强，致使CM及VLDL残粒分解加速，IDL向LDL转化增多，结果是CM与VLDL浓度下降，LDL水平升高，故胆固醇浓度升高[26,27]。

1.3.3apoE基因多态性与疾病的关系

apoE及其异构体与高脂血症和冠心病密切相关。

其三种异构体是人体多种重要疾病的决定因子[28]。

apoE2与LDL受体结合功能缺陷，导致的Ⅲ型高脂蛋白血症就是其中一个典型的例子[10]。

许多证据认为，apoE多态性是动脉粥样硬化早期及发展过程中个体差异的主要原因[11]。

大量人群调查发现ε4等位基因对应较高的血浆胆固醇和LDL浓度，是心血管疾病的风险因子，相反，ε2等位基因被认为对上述疾病具有保护作用。

经临床研究发现，患心血管疾病如心肌梗塞幸存者，或血管造影证明有动脉粥样硬化者，比其对照组的ε4等位基因频率高。

apoE3/4杂合子比E3/2和E3/3基因型者发生心肌梗塞年龄早。

一般认为apoE基因多态性是通过对血脂的影响而成为心血管疾病的危险因素的[8]。

ε4是阿尔茨海默病（AD）的风险因子。

1993年，Rose研究发现，晚发性家族型AD病人ε4频率增多，后续的研究又发现AD病人中，携带二个ε4等位基因的研究对象比携带一个ε4的研究对象发生AD年龄早，比不携带ε4等位基因的研究对象发生AD年龄更早。

与此同时，许多学者相继报道了百岁老人普遍携带ε2基因。

因此ε2等位基因似乎不仅可以保护人们免患AD，而且还与长寿有关。

apoE多态性影响AD病的机理，还有待于对脑代谢及神经元生长和分枝的更深入研究[29,30]。

apoE还与缺血性脑血管病（ICVD）、传染病、肾病综合症、糖尿病等疾病有关。

研究发现ICVD组E3/4表型频率明显高于对照组，E3/3表型频率明显低于对照组。

认为ε4等位基因可能是ICVD的一种遗传标记。

此外，对心脏架桥手术后，患者肾功能损伤的研究发现：

apoE4对心脏架桥术后肾功能的损伤具有保护作用，还发现apoE4基因携带者心脏架桥术后出现认知功能下降的比率较高[31,32]。

总之，apoE多态性对心脑血管疾病、阿尔茨海默病（AD）、糖尿病等疾病的研究具有重要的临床意义。

有学者认为，风险因子ε4及保护因子ε2之间的平衡，可作为基因分析应用于医学检验领域，协助临床疾病的诊断。

1.3.4apoE基因多态性的检测方法

apoE表型和基因型的检测方法很多，多年来先后采用等电聚焦电泳（IsoelectriFocusing，IEF）、免疫印迹法（Immunoblotting，即WesternBlotting）、双相电泳法（Two一dimensionalElectrophoresis）和基因分析技术进行检测。

由于apoE翻译后修饰会影响蛋白分析，目前研究者大多致力于从基因水平研究apoE基因型。

这些检测技术的发展为研究apoE基因多态性及其与相关疾病的关系提供了方便。

apoE基因分型的方法现大多采用单链构象多态性分析法（singlestrandconformationpolymorphism，SSCP）、等位基因核苷酸探针杂交法（Allele-specificoligonucleotidesprobe，ASOprobe）、等位基因特异性PCR法（Amplificationrefractorymutationsystem，ARMS）或聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分型法（Restrictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP）。

此外，变性梯度凝胶电泳，基因测序技术等也被应用于apoE多态性的研究[33,34]。

本文采用的是PCR-RFLP方法，其原理是：

由于等位基因上核苷酸的突变造成了限制性内切酶酶切位点的变化，从而引起了酶切片断长度的多态性。

apoE基因多态性是由于第112位和第158位半胱氨酸（Cys）和精氨酸（Arg）的互换所造成的。

这种差别导致了限制性内切酶酶切位点的不同，从而引起了DNA电泳后限制性片段长度上的多态性。

此方法结合了PCR扩增技术，具有所需的样本量少、可进行大批量操作、无放射性污染等优势。

能够方便、快速、准确地测定apoE的基因型，适合于面向人群的调查研究，是目前最常用的一种检测方法[35,36]。

1.4　apoE基因多态性与高脂血症

1.4.1高脂血症

血浆中的胆固醇和甘油三酯被称为血脂，血脂含量超过标准即为高脂血症。

1997年中华医学会血脂异常防治小组提出的“血脂异常防治计划”中规定：

正常人的血浆总胆固醇应低于5.2毫摩尔／升（mmol／L），总胆固醇浓度在5.2－6.2mmol／L视为危险，一般超过5.7mmol／L可诊断为高胆固醇血症；甘油三酯应低于1.7mmol／L，超出此标准可诊断为高甘油三酯血症；血浆中总胆固醇与甘油三酯同时升高，可诊断为混合性高血脂症[37]。

目前高脂血症的分类有多种形式，最为广泛采用的是WHO1970年建议的五型分类方法它是据脂蛋白纸上电泳及血脂测定分成I－V型，其中：

I型，电泳见CM增高，血脂以甘油三脂增高明显为特点；Ⅱ型，又分成Ⅱa与Ⅱb两种亚型：

（1）Ⅱa电泳见LDL增高，血脂分析仅见总胆固醇中度增高；

（2）Ⅱb除LDL增高外，还见VLDL增高，血脂中甘油三脂及总胆固醇均中等增高；Ⅲ型，电泳见宽β带，以IDL增高为主，血脂分析亦见总胆固醇与甘油三脂中等度增高；Ⅳ型，电泳见VLDL增高，血脂以甘油三脂中等度增高为特点；Ⅴ型，电泳见CM及VLDL均增高，血脂分析除甘油三脂中等度升主高外，总胆固醇亦轻度升高[38]。

高脂血症是动脉粥样硬化、冠心病、脑卒中、等疾病发生、发展的重要危险因素，同时又与肾病、糖尿病、高血压等疾病相互影响，是当前危害人民群众身体健康的高发疾病。

因此，研究高脂血症发病的影响因素对防治高脂血症的发病，并进而减少相关疾病的发生、发展具有重要意义[38]。

1.4.2apoE基因多态性与高脂血症的关系　

高脂血症是遗传因素与环境因素共同作用的多基因遗传病。

载脂蛋白多态性、脂蛋白受体结合活性、代谢过程中酶的激活等是高脂血症遗传因素的分子基础。

apoE是CM、VLDL、IDL和部分HDL的结构蛋白，参与残粒代谢，调节所有含有apoE的脂蛋白的吸收，在脂类代谢中发挥关键作用。

作为LDL受体结合乳糜残粒过程中的配体，apoE对受体结合、血浆中乳糜残粒清除至关重要；apoE与VLDL甘油三酯的分泌分布有关，apoE水平与甘油三酯的含量呈正相关；apoE在血液胆固醇的转运中起中介作用，通过与肝细胞上的apoE受体相互作用，将周围组织中的胆固醇转运到肝脏进行代谢，从而影响血脂水平。

apoE不同表型与受体结合的活性不同，并且自身在体内的代谢速率存在明显差异，这些对血脂水平有明显的影响，并影响心脑血管的发病率。

所以，分析apoE的多态性，对研究脂质代谢及其相关疾病有十分重要的意义[17,26,27]。

apoE及其异构体与高脂血症及心血管疾病密切相关。

apoE2与LDL受体结合功能缺陷，导致的Ⅲ型高脂蛋白血症就是其中一个典型的例子。

研究发现绝大多数Ⅲ型高脂蛋白血症患者为E2/2表型，故E2/2表型被认为是Ⅲ型高脂蛋白血症发病的必要条件。

E2/2表型者无论其血浆总胆固醇浓度的高低如何，都伴有VLDL结构异常、血浆IDL浓度升高和LDL浓度降低。

apoE基因是决定血浆胆固醇水平的最重要的遗传因素之一。

胆固醇变异的14%－16%归因于apoE基因多态性。

大多数人群研究结果表明，与E3相比，E4有升高低密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白B水平的作用。

而E2恰好相反，具有降低低密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白Ｂ水平的作用[8,11]。

E2和E4均具有升高甘油三酯的作用。

目前尚未发现其它等位基因对人群血脂有如此影响[28]。

三种等位基因携带者血脂水平有如此差异，导致机体在同一环境中患高脂血症和冠状动脉病变的程度不同。

apoE的三种等位基因异构体在体内的代谢不同。

将用同位素标记的apoE2:

和apoE4注入E3/3表型的个体内，发现apoE2与VLDL、IDL和HDL结合较少，而是较多地存在于HDL中或游离在血浆中，并且其自身的分解代谢缓慢。

apoE4的体内代谢情况则恰恰相反。

apoE各表型在体内代谢的不同与临床上测定各表型者血浆apoE浓度有一致的关系：

E2/2表型者血浆apoE浓度最高，E3/3表型者居中，而E4/4表型者最低，apoE浓度在高甘油三酯血症中要比在高胆固醇血症中的高。

大量人群调查发现ε4等位基因对应较高的血浆胆固醇和LDL浓度，是心血管疾病的风险因子，相反，ε2等位基因被认为对上述疾病具有保护作用。

一般认为apoE基因多态性是通过对血脂的影响而成为心血管疾病的危险因素的[8,9]。

第二章材料与方法

2.1材料

2.1.1宁夏回、汉族健康样本来源：

用于分析的基因组DNA样本，为来源于宁夏回族自治区回、汉族体检健康人群，年龄在18岁～75岁之间，共183例；其中回族102例（男55例，女47例），汉族81例（男38例，女43例）。

以上研究个体均无血缘关系，追溯3代均为同一民族个体，且在宁夏地区居住三代以上。

根据知情同意原则，常规抽取外周静脉血，用以进行基因组DNA的提取。

2.1.2宁夏回、汉族高脂血症样本来源：

选择宁夏不同地区的高脂血症患者130例，年龄在18岁～80岁之间，其中回族30例（男19例，女11例），汉族100例（男46例，女54例）。

以上研究个体均无血缘关系,追溯3代均为同一民族个体，且在宁夏地区居住三代以上。

高脂血症的诊断以1997年中华医学会血脂异常防治小组提出的“血脂异常防治计划”为依据，并排除糖尿病、甲状腺疾病、肾脏疾病、肝脏疾病等干扰。

根据知情同意原则，常规抽取外周静脉血，用以进行基因组DNA的提取。

2.1.3主要试剂：

2.1.3.1DNA提取试剂盒（PUREGENEDNAIsolationKit；Gentra,U.S.A）：

内含红细胞裂解液、白细胞裂解液、蛋白质沉淀液和DNA水化液

2.1.3.2琼脂糖凝胶电泳试剂

（1）1×TAE电泳缓冲液：

内含40mmol/LTris-乙酸和1mmol/LEDTA（pH8.0）

（2）电泳上样缓冲液：

内含0.25%（W/V）溴酚蓝、0.25%（W/V）二甲苯青和40%（W/V）蔗糖

（3）电泳级琼脂糖：

购自上海生工生物工程技术服务有限公司

（4）溴化乙锭（EB）：

终浓度为0.5μg/ml

（5）DNA标准物：

①分子大小标准物：

pUC18DNA/MspⅠ（大连Takara公司）

②DNA定量标准物：

LowDNAMassLadder（InvitrogenInc.U.S.A）

2.1.3.3PCR反应试剂（大连TaKaRa公司）：

（1）PCR反应试剂盒：

内含GCBuffer、1mmol/LdNTP及LATaqDNA聚合酶（5U/μl）

（2）PCR引物（上海生工生物工程技术服务有限公司），引物序列参考文献[35]：

Forward:

5’-ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC-3’

Reverse:

5’-TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA-3’

2.1.3.4限制性内切酶（Promega公司）：

HhaⅠ（10U/μl）

2.1.3.5聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂：

（1）TBE电泳缓冲液：

内含Tris、硼酸和EDTA（pH8.0）

（2）上样缓冲液：

内含0.25%（W/V）溴酚蓝、0.25%（W/V）二甲苯青和40%（W/V）蔗糖

（3）30％丙烯酰胺溶液（Acr：

Bis＝29:

1）

（4）10%（W/V）过硫酸铵

（5）N、N、N’、N’、四甲基乙二胺（TEMED）

（6）分子大小标准物：

pUC18DNA/MspⅠ（大连Takara公司）

（7）硝酸银染色试剂：

①固定液：

内含10%无水乙醇和0.5%冰乙酸，临用时配制

②染色液：

内含0.2%（W/V）硝酸银，临用时配制

③显色液:

内含0.4%甲醛（V/V）和1.5%NaOH（W/V），临用时配制

2.1.4主要仪器：

1.3.1FFG02HSD型PCR仪（美国惠泽公司）

1.3.2DYY-8B型稳压电泳仪，DYY-32A型水平电泳槽，DYCZ-24A型垂直电泳槽（北京六一仪器厂）

1.3.3凝胶电泳图像分析系统（Bio-Rad，U.S.A）

1.3.4台式高速离心机（Eppendrof，Germany）

1.3.5VXH-3型振荡器（上海跃进医疗器械厂）

1.3.6DZKW—D型水浴锅（国产）

1.3.7PB303-E型电子