北京海淀区海淀实验中学届高三月考生物试题含答案.docx
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北京海淀区海淀实验中学届高三月考生物试题含答案
海淀实验中学2017-2018学年度第一学期高三生物10月月考
理科2017-10-10(满分:
100分)
一、选择题(每题1分,共50分)
1.下列四种物质与其基本组成单位、主要功能的对应,有误的是()
A.肝糖原—葡萄糖—储存于肝脏细胞中的能源物质
B.胰岛素—氨基酸—促进组织细胞摄取和利用葡萄糖
C.tRNA—核糖核苷酸—转运特定的氨基酸到核糖体
D.抗体—氨基酸—与机体内各种抗原特异性结合
【答案】D
2.下列分子中不含氢键的是()
A.甘氨酸B.tRNAC.过氧化氢酶D.质粒
【答案】A
3.下列有关组成细胞的化合物的叙述,不正确的是()
A.适合形成氢键以及极性分子的特性使水成为重要的生命分子
B.酸、碱以及它们构成的缓冲系统帮助维持细胞内外的稳态
C.单体聚合成多聚体是细胞生命大分子构建的基本模式
D.三磷酸腺苷分子的分解与细胞中诸多放能反应相伴发生
【答案】D
4.下图虚线“○”中所对应的含义最接近的是()
A.①和⑥,④和⑤B.②和③,④和⑤
C.③和④,②和⑤D.①和③,⑤和⑥
【答案】B
5.据所示概念图作出的判断,下表对应Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ项都正确的是()
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
A
线粒体
叶绿体
核糖体
B
蛋白质
RNA
酶
C
真核生物
原核生物
自养生物
D
DNA
RNA
基因
【答案】A
6.科学家发现用脲和巯基乙醇处理RNA酶分子时,发现酶分子的多肽链伸展开来,酶分子丧失了所有的酶活性。
当除去制备物中的脲和巯基乙醇时,RNA酶分子恢复了正常的酶活性,并且重新形成的蛋白质在结构和功能上与实验开始时正确折叠的天然蛋白质不可区分。
由该实验不能推测的是()
A.折叠信息包含在氨基酸序列中B.天然构象可能是其最稳定构象
C.发生变性的蛋白质也能够复性D.折叠过程由某分子协助完成
【答案】D
7.下列关于原核细胞的叙述,正确的是()
A.农杆菌在拟核区转录出mRNAB.乳酸菌在细胞质基质中消耗氧气
C.蓝藻细胞的叶绿体内产生氧气D.大肠杆菌通过有丝分裂进行增殖
【答案】A
8.下图所示五种生物的叙述,正确的是()
A.a、b、e三种细胞的细胞壁都可用纤维素酶水解
B.a和b为低等植物细胞,细胞中的核糖体和叶绿体均含RNA
C.c伸出伪足和e出芽的现象都和细胞膜的流动性有关
D.d为原核生物,其遗传物质为RNA
【答案】C
9.下列关于细胞结构与功能的叙述,正确的是()
A.细胞膜上的载体和受体都能接受激素分子的信号
B.叶肉细胞的线粒体和叶绿体都能在内膜上合成ATP
C.浆细胞的内质网和高尔基体都参与抗体的加工、运输
D.酵母菌和大肠杆菌都在线粒体内分解丙酮酸产生CO2
【答案】C
10.蓝藻(蓝细菌)和毛霉细胞中都具有的结构是()
A.细胞膜和核糖体B.核糖体和拟核C.线粒体和内质网D.线粒体和高尔基体
【答案】A
11.细胞是生物体结构和功能的基本单位,关于细胞的叙述不正确的是()
A.凡是细胞中含有叶绿体的生物就一定是自养生物
B.原核细胞能发生碱基互补配对的细胞器只有核糖体
C.真核细胞中的细胞骨架都是由纤维素和果胶构成的
D.细胞质基质中含有多种酶,是许种代谢活动的场所
【答案】C
12.下列关于人体细胞的形态结构和功能的叙述,不正确的是()
A.胰腺细胞:
发达的内质网和高尔基体,与分泌功能有关
B.小肠绒毛上皮细胞:
细胞膜向肠腔突起,增加吸收面积
C.成熟红细胞:
没有细胞核,为运输氧气提供更多的空间
D.卵细胞:
体积大,有利于细胞与环境进行物质交换
【答案】D
13.下图为一种溶质分子跨膜运输的示意图。
下列相关叙述,不正确的是()
A.载体①能够逆浓度运输溶质分子B.载体②具有ATP水解酶的活性
C.载体①和②转运溶质分子方式不同D.载体②转运溶质分子不消耗ATP
【答案】B
14.下列关于生物大分子的叙述不正确的是()
A.糖原、脂肪、蛋白质和脱氧核糖都是细胞内的生物大分子
B.在小麦细胞中由A、G、T、C四种碱基参与构成的核苷酸最多有7种
C.细胞中氨基酸种类和数量相同的蛋白质不一定是同一种蛋白质
D.M个氨基酸N条肽链构成的蛋白质分子完全水解共需(M-N)个水分子
【答案】A
15.下面的细胞器中,发生有机物合成作用的是()
①核糖体②线粒体③内质网④溶酶体⑤叶绿体
A.①③⑤B.①②③⑤C.①③④⑤D.①②③④⑤
【答案】B
16.水痘—带状疱疹病毒初次感染能引起婴幼儿及学龄前儿童患水痘。
该病毒由DNA、蛋白质外壳和囊膜组成,囊膜主要来自寄主细胞膜,也含有一些病毒自身的糖蛋白。
下列有关水痘—带状疱疹病毒的叙述,不正确的是()
A.囊膜表面的糖蛋白与病毒侵染宿主细胞有关B.病毒的蛋白质外壳在人体细胞的核糖体上合成
C.可以刮取患病部位细胞用PCR方法检测病毒D.病毒的DNA和蛋白质都会直接引起免疫
【答案】D
17.下列物质运输途径在人体造血干细胞中可能存在的是()
A.吸收的葡萄糖:
细胞膜→细胞溶胶(细胞质基质)→线粒体
B.合成的细胞膜蛋白:
高尔基体→核糖体→细胞膜
C.合成的DNA聚合酶:
核糖体→细胞溶胶(细胞质基质)→细胞核
D.转录的mRNA:
细胞核→细胞溶胶(细胞质基质)→高尔基体
【答案】C
18.下列有关质壁分离和质壁分离复原的叙述,正确的是()
A.在质壁分离和质壁分离复原过程中,主要是观察细胞中液泡体积的变化
B.在质壁分离现象中,与细胞壁发生分离的“质”是指细胞质
C.将洋葱根尖分生区细胞放在0.3g/mL的蔗糖溶液中,观察到质壁分离现象
D.能否发生质壁分离和质壁分离复原也可作为判断动物细胞是否为活细胞的依据
【答案】A
19.下列关于ATP的叙述,正确的是()
A.ATP分子由腺嘌呤、脱氧核糖和磷酸组成
B.细胞缺氧时细胞质基质中不能合成ATP
C.细胞代谢加快时ATP与ADP间的转化加快
D.线粒体、叶绿体合成的ATP均可用于物质跨膜运输
【答案】C
20.下列有关生物体内酶的叙述,不正确的是()
A.酶的基本单位是氨基酸或核糖核苷酸B.酶为反应过程供能从而降低反应活化能
C.离开活细胞的酶可以有催化能力D.酶的专一性由其特定的分子结构决定
【答案】B
21.酶抑制剂分竞争性抑制剂和非竞争性抑制剂,两者作用特点如下图甲所示,下图乙表示相应的反应速度。
下列有关叙述不正确的是()
A.曲线a表示没有酶抑制剂存在时的作用效果
B.曲线a、b反应速率不再增加是受酶浓度的限制
C.曲线c表示在竞争性抑制剂作用下酶的活性降低
D.竞争性抑制剂与该酶催化的底物结构相似
【答案】C
22.下图是细胞中糖类合成与分解过程示意图。
下列叙述正确的是()
(CH2O)+O2
CO2+H2O+能量
A.过程①只在线粒体中进行,过程②只在叶绿体中进行
B.过程①和②中均能产生[H],二者还原的物质不同
C.过程①释放的能量全部储存在ATP分子中
D.过程②产生的(CH2O)中的氧全部来自于H2O
【注意有①、②】
【答案】B
23.下图中甲、乙为植物叶肉细胞中的两种膜结构。
下列有关叙述中,不正确的是()
A.甲、乙分别存在于叶绿体和线粒体中
B.甲膜中的色素分子可用无水乙醇提取
C.乙中的[H]来自葡萄糖在线粒体中的分解
D.甲、乙上生化反应由各自不同的酶催化
【答案】C
24.植物细胞不一定具有的代谢过程是()
A.水的光解B.ATP与ADP转换C.氨基酸脱水缩合D.[H]的生成
【答案】A
25.希尔从细胞中分离出叶绿体,并发现在没有CO2时,给予叶绿体光照,就能放出O2,同时使电子受体还原。
希尔反应是:
H2O+氧化态电子受体→还原态电子受体+1/2O2。
在希尔反应的基础上,阿尔农又发现在光下的叶绿体,不供给CO2时,既积累NADPH也积累ATP;进一步实验,撤去光照,供给CO2,发现NADPH和ATP被消耗,并产生有机物。
下列关于希尔反应和阿尔农发现的叙述不正确的是()
A.光合作用释放的O2来自于水而不是CO2
B.NADPH和ATP的形成发生在叶绿体类囊体膜上
C.希尔反应与CO2合成有机物的过程是两个过程
D.光合作用的需光过程为CO2合成有机物提供ATP和NADPH
【答案】B
26.研究棉花光合产物从叶片的输出对叶片光合速率的影响,研究方法不当的是()
A.摘除部分棉铃,测定临近叶片CO2吸收速率的变化
B.环割枝条阻断有机物的运输,测定该枝条叶片CO2吸收速率的变化
C.对部分叶片进行遮光处理,测定未遮光叶片CO2吸收速率的变化
D.“嫁接”更多的叶片,测定叶片中CO2吸收速率的变化
【答案】D
27.下列关于葡萄糖
丙酮酸
CO2过程的叙述,不正确的是()
A.①②过程可在蓝藻和某些细菌中进行
B.②过程可在线粒体或细胞质基质中进行
C.葡萄糖中的能量经①过程全部转移至丙酮酸中
D.酵母菌细胞在有氧和无氧条件下均可进行②过程
【答案】C
【注意有①②】
28.下列细胞呼吸在生产生活中运用的实例中,正确的是()
A.蔬菜水果的储存尽量保持低温、无氧B.农田适当松土性状根部细胞氧气供应
C.泡菜坛初期不密封促进乳酸菌繁殖D.包扎伤口选用完全不透气的胶布密封
【答案】B
29.下列关于高中生物学实验的叙述中,不正确的是()
A.用二苯胺试剂染色观察DNA在细胞中的分布
B.用双缩脲试剂检测豆浆溶液中是否含有蛋白质
C.用苏丹Ⅲ染液染色观察花生子叶细胞中的油脂
D.用黑藻叶片制作装片观察叶绿体的形态和分布
【答案】A
30.为达到实验目的,必须在碱性条件下进行的实验是()
A.测定胃蛋白酶分解蛋白质的最适温度B.利用双缩脲试剂检测生物组织中的蛋白质
C.利用重铬酸钾检测酵母菌培养液中的酒精D.观察植物细胞的质壁分离和复原
【答案】B
31.下列生物学实验及操作,不合理的是()
选项
实验
实验操作
A
叶绿体色素的提取和分离
加入二氧化硅,防止研磨时色素受破坏
B
观察细胞质壁分离和复原现象
撕取紫色洋葱的外表皮作为观察材料
C
探究酵母菌种群数量的变化
摇匀酵母菌培养液后取样并显微镜计数
D
探究果胶酶的最适用量
各实验组保持除果胶酶量以外的变量相同
【答案】A
32.下表是根据实验目的,所需选用的试剂与预期的实验结果,正确的一组是()
实验目的
试剂
预期的实验结果
A
观察DNA和RNA在细胞中的分布
二苯胺试剂
使DNA被染成绿色
B
检测植物组织中的脂肪
双缩脲试剂
脂肪颗粒被染成红色
C
观察根尖分生组织细胞的有丝分裂
龙胆紫溶液
改变细胞膜的通透性,易于染色
D
观察口腔上皮细胞中的线粒体
健那绿染液
将活细胞中的线粒体染成蓝绿色
【答案】D
33.下列生物学实验操作,不合理的是()
A.试管中加入层析液,使液面高度低于滤液细线
B.解离的洋葱根尖先用龙胆紫染色,然后进行漂洗
C.进行大肠杆菌计数前,将浓度较大的培养液梯度稀释
D.DNA粗提取时,通过控制NaCl浓度去除杂质
【答案】B
34.关于生物工程和技术的说法正确的是()
A.从某生物cDNA文库中获取的目的基因,不含基因中的启动子
B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C.抗虫基因成功地插入到植物细胞染色体上即说明能正常表达
D.植物组织培养的过程中需要用到纤维素酶和果胶酶
【答案】A
35.MyoD是成肌细胞分化为骨骼肌细胞过程中的一种关键蛋白。
将MgoD基因转入体外培养的成纤维细胞中表达,成纤维细胞就能表现出骨骼肌细胞的特征。
下列说法正确的是()
A.可用Ca2+处理成纤维细胞使其成为感受态B.MyoD基因只存在于骨骼股细胞中
C.骨骼肌细胞只表达MyoD的基因D.MyoD基因在正常成纤维细胞中不表达
【答案】D
36.图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,amp表示氨苄青霉素抗性原因,neo表示新霉素抗性基因。
下列叙述正确的是()
A.图甲中的质粒用BamHⅠ切割后,含有4个游离的磷酸基团
B.用PstⅠ和HindⅢ酶切,可以保证重组DNA序列的唯一性
C.在构建重组质粒时,可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA
D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
【答案】B
37.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述,不正确的是()
A.①→②利用两种不同限制酶处理,能避免抗虫基因的DNA片段自身环化
B.②→③可用氯化钙处理农杆菌,有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中
C.③→④用农杆菌侵染植物细胞,重组Ti质粒整合到植物细胞的染色体上
D.④→⑤用植物组织培养技术培养,具有抗虫性状的植株产生了可遗传变异
【答案】C
38.下列关于基因工程载体的叙述中,正确的是()
A.构建基因文库时不需要载体B.载体都是环状DNA分子
C.有一至多个限制酶切割位点D.只来自于原核细胞
【答案】C
39.从同一个体的浆细胞(L)和胰岛B细胞(P)分别提取它们的全部mRNA(L-mRNA和P-mRNA),并以此为模板合成相应的单链DNA(L-cDNA和P-cDNA)。
其中,能与L-cDNA互补的P-mRNA以及不能与P-cDNA互补的L-mRNA分别含有编码()
①胰岛素的mRNA②核糖体蛋白的mRNA③抗体蛋白的mRNA④血红蛋白的mRNA
A.①③B.②③C.①④D.②④
【答案】B
40.下列生物学过程中体现了细胞全能性的是()
A.转基因玉米种子萌发长成新植株B.小鼠的造血干细胞形成各种血细胞
C.小麦花粉培育成愈伤组织D.经体细胞杂交获得白菜-甘蓝杂种植株
【答案】D
41.下图为受精作用及早期胚胎发育示意图,下列叙述不正确的是()
A.①过程需依赖细胞表面糖蛋白识别B.②过程通过有丝分裂方式增殖
C.③过程细胞的“核/质”比逐渐变小D.④过程细胞的基因表达发生了差异
【答案】C
42.下列关于植物组织培养的叙述中,正确的是()
A.以一株植物的叶片或花药为外植体培育的植株基因型相同
B.培养过程中应给予适当光照以促进愈伤组织的光合作用
C.愈伤组织可作为植物体细胞诱变的材料是因为细胞全能性高
D.适应提高培养基中细胞分裂素的比例有利用愈伤组织分化成芽
【答案】D
43.紫草素具有抗菌、消炎效果。
在工业化生产中,取紫草植株部分组织诱导形成紫草愈伤组织,再转入紫草素形成培养基,然后再将细胞破碎后提取出紫草素。
下列相关叙述中,不正确的是()
A.工业化生产过程包括细胞的脱分化和再分化
B.愈伤组织在形成培养基中发生了一定程度的分化
C.紫草素在细胞内合成后被分泌到细胞外
D.紫草的愈伤组织细胞在低渗溶液中不会涨破
【答案】C
44.现代生物技术应用的叙述,不正确的是()
A.动物细胞培养技术可以克隆出动物个体B.植物组织培养技术可用于转基因植物的培育
C.单克隆抗体技术可用于制备“生物导弹”D.蛋白质工程可以改造自然界现有的蛋白质
【答案】A
45.科学家将含有人体α-抗胰蛋白酶基因的表达载体注射到羊的受精卵中,该受精卵发育的雌羊乳汁中含有α-抗胰蛋白酶。
上述过程一般不会发生()
A.α-抗胰蛋白酶基因与载体间基因重组B.α-抗胰蛋白酶基因在乳腺细胞中大量扩增
C.RNA聚合酶识别乳腺特异表达基因的启动子D.乳腺细胞的高尔基体分泌α-抗胰蛋白酶
【答案】B
46.花椰菜(2n=18)易患黑腐病,造成减产,黑芥(2n=16)对黑腐病有较好的抗性。
研究者诱导花椰菜原生质体与紫外线处理的黑芥原生质体融合,得到染色体数分别为20、25和26的三个抗黑腐病的新品种,这三个新品种中均含有花椰菜的两个完整染色体组。
下列相关叙述中,合理的是()
A.需用胰蛋白酶处理花椰菜和黑芥获得原生质体B.染色体数为26的新品种一定是三倍体
C.三个新品种的抗病基因可能来自不同染色体D.三个新品种花椰菜均不能形成可育配子
【答案】C
47.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述,正确的是()
A.培养原理都是细胞的全能性B.都通过有丝分裂增加细胞数目
C.培养材料都必须取自分生组织D.都经过脱分化恢复细胞全能性
【答案】B
48.科研人员利用相关技术改变了胰岛素B链的第9位氨基酸,从而避免了胰岛素结合成无活性的二聚体形式。
下列相关叙述中,不正确的是()
A.该过程的操作对象是胰岛素分子B.可通过测定DNA序列确定突变是否成功
C.对胰岛素结构的改造属于蛋白质工程D.胰岛素的本质是蛋白质不宜口服使用
【答案】A
49.下列关于腐乳和泡菜制作的叙述中,正确的是()
A.主要是菌种都是原核生物B.制作过程都不必严格无菌操作
C.所用装置都需要密封D.所用菌种都需要人工接种
【答案】B
50.对如图所示农业生态系统的叙述,正确的是()
A.物质和能量循环利用是系统设计的原理
B.人和家禽家畜都属于该系统第二营养级
C.食物链的延长提高了营养级间的能量传递效率
D.通过建立沼气池提高了系统能量的利用率
【答案】D
二、简答题(每空1分,共50分)
51.(8分)研究分泌蛋白的合成及分泌过程中,科学家们做了下列实验。
请回答问题:
(1)豚鼠和胰腺腺泡细胞能够分泌大量的消化酶,可观察到这些细胞具有发__________。
(2)科学家将一小块胰腺组织放入含放射标记__________的培养液中短暂培养,在此期间放射性标记物被活细胞摄取,并掺入到__________上正在合成的蛋白质中。
组织内的放射性同位素可使感光乳剂曝光,固定组织后在显微镜下便可发现细胞中含放射性的位点,这一技术使研究者能确定__________________________________________________在细胞内的位置。
(3)科学家将短暂培养的胰腺组织洗去放射性标记物,转入不含放射性标记物的培养液中继续培养。
实验结果如图所示。
随着__________的变化,放射性颗粒数的百分比在不同细胞结构上有规律的变化,据此推测,分泌蛋白转移的途径是______________________________。
(4)细胞内部产生的蛋白质被包裹于膜泡之中,这些膜泡能够精准的运输。
为了确定参与膜泡运输的基因(sec基因),科学家筛选了两种酵母突变体,这两种突变体与野生型酵母电镜照片差异如下:
酵母突变体
与野生型酵母电镜照片的差异
sec12基因突变体
突变体细胞内内质网特别大
sec17基因突变体
突变体细胞内,尤其是内质网和高尔基体间积累大量的未融合小泡
据此推测,sec12基因编码的蛋白质的功能是与__________的形成有关。
sec17基因编码的蛋白质的功能是______________________________。
【答案】
(1)内质网和高尔基体
(2)氨基酸;核糖体;放射性标记物质(或“放射性标记蛋白质”)
(3)追踪时间;附有核糖体的内质网→高尔基体→分泌小泡
(4)内质网小泡;参与膜泡(或“小泡”)与高尔基体的融合
52.(10分)内质网在真核细胞生命活动中具有广泛的作用。
(1)内质网是蛋白质、糖类和__________的合成和加工场所。
(2)内质网等细胞器膜与核膜、细胞膜等共同构成细胞的__________,为多种酶提供附着位点。
(3)股肉细胞受到刺激后,内质网腔内的Ca2+释放到__________中,使内质网膜内外Ca2+浓度发生变化。
Ca2+与相应蛋白结合后,导致肌肉收缩,这表明Ca2+能起到__________(填“物质运输”、“能量转换”或“信息传递”)的作用。
(4)在病毒侵染等多种损伤因素的作用下,内质网腔内错误折叠或未折叠蛋白会聚集,引起上图所示的一系列应激过程:
__________与错误折叠或未折叠蛋白综合,后者被运出内质网降解。
内质网膜上的IREl蛋白被激活,激活的IREl蛋白__________HaclmRNA的剪接反应。
剪接的mRNA__________的Hacl蛋白作为转录因子通过__________进入细胞核,__________(填“增强”或“减弱”)Bip基因的表达,以恢复内质网的功能。
(5)当细胞内Ca2+浓度失衡或错误折叠、未折叠蛋白过多,无法恢复内质网正常功能时,引起细胞膜皱缩内陷,形成凋亡小体,凋亡小体被临近的吞噬细胞吞噬,在__________内被消化分解。
【答案】
(1)脂质
(2)生物膜系统
(3)细胞质基质;信息传递
(4)Bip;催化;翻译;核孔;增强
(5)溶酶体
53.(8分)线粒体不仅是细胞的“能量工厂”,也在细胞凋亡的调控中起重要作用,如下图所示。
(1)线粒体中的细胞色素c嵌入在线粒体内膜的__________中,参与有氧呼吸第__________阶段的化学反应。
(2)当紫外线、DNA损伤、化学功率等导致细胞损伤时,线粒体外膜的通透性发生改变,细胞色素c被释放到__________中,与蛋白A结合,在ATP的作用下,使______________________________,引起细胞凋亡。
(3)活化的C-3酶可作用于线粒体,加速细胞色素c的释放,从而加速细胞的凋亡,这是__________调节机制。
(4)细胞凋亡是细胞的的__________死亡,凋亡细胞解体后被吞噬细胞吞噬,由细胞内的__________将其消化。
【答案】
(1)脂双层;三
(2)细胞溶胶(或“细胞质基质”);C-9酶前体转化为活化的C-9酶,活化的C-9酶激活的C-3酶
(3)正反馈
(4)程序性(或“编程性”);溶酶体
54.(10分)为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用__________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。
在上述引物设计时,分别在引物中加入下图所示酶的识别序列,这样可以用______________________________酶处理两个基因后,得到__________端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入下图所示Ti质粒的T-DNA中,构建____________________并导入农杆菌中。
将获得的农杆菌接种在含____________________的固体平板上培养得到单菌落,再利用__________培养基振荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是__________,进一步筛选后获得转基因油菜。
(4)提取上述转基因油菜的mRNA,在__________酶的作用下获得cDNA,再依据____________________的DNA片段设计引物进行扩增,对扩增结果进行检测,可判断融合基因是否完成__________。
【答案】
(1)PCR;ClaI(限制酶)和DNA连接(