医院感染微生物学监测PPT资料125页.ppt

医院感染微生物学监测PPT资料125页.ppt

《医院感染微生物学监测PPT资料125页.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《医院感染微生物学监测PPT资料125页.ppt（125页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

感染暴发或感染流行时，环境因素在感染中有流行病学意义,监测潜在的危险环境，证明有危险的病原体存在或证明危险病原体已被成功清除,当某项感染控制措施改变时，评价其效果；或根据要求，仪器设备或系统启用时进行监测,询证医学证据支持,采样后应尽快对样品进行相应指标的检测送检时间不得超过4h若样品保存于04时送检时间不得超过24h,采样和检查原则医院消毒卫生标准（2019）,不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查常规监督检查可不进行致病性微生物检测涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时应进行目标微生物的检测,采样和检查原则医院消毒卫生标准（2019）,采样和检查原则医院消毒卫生标准（2019）,可使用经验证的现场快速检测仪器进行环境、物体表面等微生物污染情况和医疗器材清洁度的监督筛查也可用于医院清洗效果检查和清洗程序的评价和验证,ATP荧光检测仪,医院消毒技术规范（2019）医院消毒卫生标准（2019）医院感染管理规范,监测内容,医院空气微生物学监测,物体表面微生物学监测,使用中消毒剂微生物学监测,医务人员手微生物学监测,压力蒸汽灭菌效果生物监测,环氧乙烷灭菌效果生物监测,医疗器械消毒效果监测,医院治疗用水的细菌学检测,血液透析液内毒素监测,采样时间,消毒后操作前,监测方法,沉降法,重力沉降（平板沉降法）静电沉降热沉降,浮游菌测定法,撞击式空气微生物采样法离心式空气微生物采样法洗刷式空气微生物采样法过滤空气微生物采样法温差空气微生物采样法静电或冲击空气微生物采样法,未采用洁净技术净化空气的房间：

平板暴露法,室内面积30m2设内、外、中对角线3点内、外点距离墙壁1m处,室内面积30m2设四角及中央共5点四角距离墙壁1m处,1、平板暴露法2、空气采样器法参照GB50333-2019（医院洁净手术部建筑技术规范）,采用洁净技术净化空气的房间：

手术区：

手术台及其周围的区域,级手术室（手术区百级，周围千级）：

手术台两侧边至少各外推0.9m两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域,级手术室（手术区千级，周围万级）：

手术台两侧边至少各外推0.6m两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域,级手术室（手术区域万级，周围十万级）：

手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域,级手术室（三十万级）：

不分手术区和周边区,周围区：

除去手术区以外的其他区域,平板暴露法,局部百级周围千级设置13点,局部千级周围万级设置9点,局部万级周围十万级设置7点,局部十万级周围三十万级设置5点,?

医院洁净手术部建筑技术规范GB50333-2019,当用沉降法测定沉降菌浓度时细菌浓度测点数既要不少于被测区域含尘浓度测点数又应满足沉降菌最少培养皿数,被测区域洁净度的级别最少培养皿数（90，30min计）100级131000级510000级3100000级2300000级2,局部千级设置5点周围万级设置4点,局部百级设置13点周围千级设置6点,局部万级设置3点周围十万级设置2点,局部十万级设置2点周围三十万级设置2点,操作方法,将平皿（直径9cm）放置在采样点处采样高度距离地面80-100cm采样时将平皿盖打开、扣放于平板旁,采样时，必须有2次空白对照第1次对用于检测的培养皿或培养基条做对比试验每一批做一个对照皿第2次是在检测时，每区或每室1个对照皿对操作试验做对照试验模拟操作过程但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖两次对照试验都必须为阴性整个操作过程都必须无菌操作,未采用洁净技术净化空气的房间暴露5min采用洁净技术净化空气的房间暴露30min,未采用洁净技术净化空气的房间类环境暴露15min、类环境暴露5min采用洁净技术净化空气的房间暴露30min,采样后盖好平皿盖子记录采样时间,采样平皿6h内送实验室培养置361恒温培养箱培养48h计数每个平板的菌落总数,若怀疑与医院感染有关时进行目标微生物检测,平板暴露法采样注意事项：

布点应尽量避开高效送风口正下方,放置培养皿时应从最里面的房间或房间的最里面开始布点依次向外最后人员撤出,收集培养皿时从最外面的房间或房间的最外面开始最先布的点最后收,采样前关闭门窗无人走动的情况下静止10分钟后采样,对检测人员的要求：

着无菌的工作服、戴口罩、帽子操作前洗手或手卫生,手臂及头部不可越过打开的培养皿上方,行动及放置动作要轻尽量减少对空气流动状态的影响,每次采样人员不得超过2人,所带物品徐清洁后方可带入,结果计算,奥梅良斯基公式（奥氏公式）：

5分钟在100cm2的面积上降落的细菌数相当于10L空气中所含的细菌数,细菌数（cfu/m3）=,50000N,At,t-平皿暴露于空气中的时间（分钟）N-培养后，平皿上的细菌总数A-所用平皿的面积,（2019版消毒技术规范）,2019年消毒技术规范,平板暴露法按平均每皿的菌落数报告：

cfu/皿暴露时间,例如：

产房30m2放置平皿5个放置15min培养后5个平皿共长菌落15个该产房空气培养的结果为平均每皿的菌落数3cfu/皿15min,空气采样器法（浮游菌测定法）,二级撞击式空气采样仪,六级撞击式空气采样仪,八级撞击式空气采样仪,推荐使用六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器,6层有微小孔眼的铝合金圆盘圆盘下放琼脂平皿圆盘间有密封胶圈通过三个弹簧卡子把圆盘固定联在一起标准采样流量为1立方尺28.3L/min,提前联系需采样的科室安排好采样的时间以及房间的准备百级洁净房间至少已运行15分钟其余洁净度房间至少已运行40分钟,空气采样仪（浮游法）采样步骤和方法,采样仪需提前充电10小时,采样点:

洁净房间每间需要采样至少2个点一次采样需要2个空白对照,采样的布点：

中央区和周边区房间大于10m2每增加10m2增设一个采样点在平皿上要标注房间号和采样区域及采样时间,采样的高度：

将采样器置于室内中央0.8m1.5m高度,采样的角度：

在100级区域检测时，采样口应对着气流方向在其他级别区域检测时，采样口均向上,采样的时长：

百级中央区30分钟其余洁净房间均为10分钟（至少2分钟）采样时间不应超过30min,采样时要注意无菌操作：

操作者：

带口罩、帽子，穿隔离衣换鞋或穿鞋套；手卫生安装进气盖前需用酒精灯灭菌进气端盖正反两面,空白对照的设置：

空白对照1：

培养皿不打开空白对照2：

模拟操作过程但培养皿打开后又立封盖两次对照必须均为阴性。

被测区域洁净度级别最小采样量m3（L）100级0.6（600）1000级0.06（60）10000级0.03（30）100000级0.006（6）300000级0.006（6）,浮游菌法最小采样量,培养皿的准备要求,配置平皿的试验台需要使用水平仪提前校正保证加注培养基后平民内琼脂厚度均匀,需提前培养24h（为证实无菌）,空气采样器法计算公式,空气中菌落总数（cfu/m3）,采样器各平皿菌落数之和（cfu）,采样速率（L/min）采样时间（min）,1000,=,合格标准,类环境：

采用空气洁净技术的诊所，分洁净手术部和其他洁净场所,类环境：

非洁净手术部（室）；产房；导管室；血液病区、烧伤病区等保护性隔离区；重症监护病房；新生儿室等,类环境：

消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；母婴同室；血液透析中心（室）；其他普通住院病区,类环境：

感染性疾病科门诊和病区；普通门急诊及其检查、治疗（注射、换药等）室,类环境,洁净手术部：

要求符合GB50333要求,类区域：

细菌总数4cfu/15min平皿,、类区域：

细菌总数5cfu/5min平皿,浮游菌测定法的优点,能够采集浮游在空气中的微生物粒子这种粒子可随人们呼吸道运动进入呼吸道因而更具有卫生学意义,采样效率高采样量准确采样时不受粒径大小、沉降速度和气流的影响能准确的表示出空气中细菌的实际含量,采样时间,消毒后,采样方法,5cm5cm灭菌规格板放在被检物体表面用蘸有生理盐水的棉拭子1支在规格板内横竖往返各涂擦5次并随之转动棉拭子被采表面100cm2，取全部面积被采样表面100cm2，取100cm2剪去手接触部分将棉拭子投入装有10ml无菌检测用洗脱液的试管中送检门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样,采样物体表面有消毒剂残留时采样液应含有相应中和剂,检测方法,倾注法,充分振荡采样管取不同稀释倍数的的洗脱液1.0ml接种平皿（每一标本接种2个平皿）将冷却至4045的融化营养琼脂培养基（4548）每皿倾注15-20ml（15-18ml）361恒温箱培养48h计数菌落数,怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测,涂抹法,将采样试管充分振荡或在混匀器上混匀30s取100ul接种于平皿均匀涂布361恒温箱培养48h计数菌落数,怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测,结果计算,规则物体表面,小型物体表面,例如：

手术室手术床，面积100cm2采样面积100cm2,涂抹法接种培养48h后平皿上的菌落数为10cfu手术床的菌落总数=（10100）/100=10cfu/cm2,倾注法接种培养48h后平皿上的菌落数为100cfu手术床的菌落总数=（10010）/100=10cfu/cm2,合格标准,使用中消毒液染菌量监测,证明被污染的消毒剂可以成为医疗机构感染和流行传播的媒介已有50年的历史已经有报告证明污染的消毒剂导致医院感染的例子,消毒剂溶液中长菌常见有下列几种原因：

消毒剂的配制问题,消毒剂的外源性污染,消毒剂的储存问题,消毒剂本身成分的问题,美国CDC医疗机构消毒灭菌指南2019,采样及操作方法,1、涂布法,用无菌吸管吸取消毒液1ml加入9ml相应中和剂中充分振荡或在混匀器上混匀30s取200ul接种于培养基平皿表面均匀涂布,每份样品同时做2个平行样一个平皿置于20培养7d观察真菌的生长另一平皿置于35恒温培养箱培养72h计数菌落数,怀疑与医院感染暴发相关时进行目标微生物检测,消毒剂染菌量（cfu/ml）=每个平皿上的菌落数50,结果计算,2、倾注法,用无菌吸管吸取消毒液1ml加入9ml相应中和剂中充分振荡或在混匀器上混匀30s分别取500ul接种于2个灭菌平皿内加入已溶化的4548普通营养琼脂1518ml边倾注边摇匀待琼脂凝固,一个平皿置于20培养7d观察真菌的生长另一平皿置于361恒温培养箱培养72h计数菌落数,怀疑与医院感染暴发相关时进行目标微生物检测,消毒剂染菌量（cfu/ml）=每个平皿上的菌落数20,结果计算,中和剂,在微生物杀灭实验中用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂,中和剂选择原则,本身对菌无影响,生成物对菌无影响,确能去除杀菌因子,常用消毒剂的中和剂,合格标准,皮肤黏膜消毒剂染菌10cfu/ml,灭菌剂染菌量0cfu/ml,消毒剂染菌量100cfu/ml,对未使用的低效消毒剂和皮肤黏膜用消毒剂使用前应按照使用中消毒液染菌量的方法进行细菌检测未检出细菌为合格,消毒剂有效浓度的监测,使用中消毒液的有效浓度应该符合使用要求连续使用消毒液应定期进行有效浓度测定每日使用，每日监测；每周使用，每次使用前监测；,遵循WS/T313,中华人民共和国卫生部行业标准医务人员手卫生规范,手术室产房母婴室新生儿室口腔科器官移植病房层流洁净病房烧伤病房血液透析室导管室ICU感染性疾病科等部门,医疗机构应每季度对,医务人员手进行消毒效果监测,当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生相关时应及时进行监测并进行相关致病微生物的检测,1、采样时间,手卫生后,接触病人或诊疗操作之前,2、采样方法,棉拭子法,被检人员五指并拢用蘸有含相应中和剂的棉拭子在双手手指屈面从指根到指尖往返涂擦2次一只手的涂擦面积约30cm2并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手接触的部分将棉拭子投入10ml含相应中和液的试管中立即送检,3、检测