最新天然药物化学实验指导.docx

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最新天然药物化学实验指导

天然药物化学实验指导

 天然药物化学实验指导

                      ---兰州大学天然药物化学教研室

天然药物化学实验须知

  一、每次实验以前，必须预习本实验内容，了解其操作程序和理论要点，切勿盲目进行实验，实验时须准备记录薄一本，随时正确记录每一实验应记的项目。

如原料用量，实验时发生的现象，反应结果，产品数量、熔点、沸点、产品纯度等，以作写正式报告的依据。

  二、实验所得产品，如不供下一实验用，应交给指导老师，并注明品名、数量、组别、姓名、日期。

  三、实验规则

  1．实验时不能阅读与本实验无关的书籍，不要高声谈笑，也不能擅自离开，严禁在实验室内吸烟及吃东西。

  2．实验室要经常保持整齐清洁，桌上不要乱放无用的仪器与药品。

火柴杆、废纸等不要乱抛在地上、废酸、碱液应倒入污水缸中，易燃烧及易挥发的废液应倒入水槽中，并立即用水冲掉。

  3．药品、仪器都是国家财产，须节约爱护使用，若有损坏，应填写仪器损坏单，报告指导教师，及时领取，并酌情赔偿。

  4．试剂、药品、公用用具，使用后立即放回原处，不可乱放，并应注意不可盖错试剂瓶塞，以免污染试剂。

  5．装有易燃性液体的瓶子，不得放在灯火近旁。

  6．加热乙醇、乙醚、石油醚、苯等易挥发可燃的液体时，应使用装有冷凝管的烧瓶，在水浴上进行加热，加热前应放入沸石1—2粒，或一端封死的毛细管，防止爆沸冲击，若在加热时未放沸石则应冷却后再加，不可热时追加，添加溶剂时应离开火源，稍冷后再添，并应重新加入沸石。

  7．实验过程中，万一遇见溶液着火，应立即用石棉布或其他物品把它盖上，使其隔绝空气而熄灭。

  8．实验完毕后，应将用过的仪器洗刷洁净放好，并应指定值班人员将实验室打扫干净，污水缸的废液拿到室外适当地方处理埋掉，离开实验室时，应检查门、窗、水电是否关好。

  9．严禁将实验室内的仪器、药品携带室外。

  以上须知清严格遵照执行。

实验一  薄层色谱（TLC）实验二  从三棵针中提取、分离小檗碱与小檗胺

实验三  从洋金花中提取分离东莨菪碱和莨菪碱实验四  大黄中蒽醌类化合物的提取分离

实验五  芦丁的提取与鉴定  实验六  甘草酸的提取  实验七  烈香杜鹃挥发油的含量测定

实验八  丹皮酚的提取、分离和制剂鉴别  实验九  预试验        附录一  常用溶剂的物理性质  附录二  常用溶剂的回收及精制方法  附录三  常用干燥剂性能的说明仪器清单

实验一  簿层色谱（TLC）

  薄层色谱是色谱法中应用最普遍的方法之一，具有分离速度快，效率高等特点。

适用于微量样品的分离鉴定，天然药物化学成分的研究中得到了越来越广泛的应用和发展。

  一、实验目的

  l、学习并掌握薄层板的制备和使用方法。

  2、了解薄层色谱的原理及应用范围。

  二、实验原理

  薄层色谱是把吸附剂（或载体）均匀地铺在一块玻璃板或塑料板上形成薄层，在此薄板上进行色谱分离，按分离机制可分为吸附，分配，离子交换和凝胶过滤色谱等。

  薄层色谱多数情况是一种吸附层析，利用吸附剂对化合物吸附能力的不同而达到分离，吸附剂吸附能力的大小与化合物极性大小有关。

化合物极性大，被吸附剂吸附得牢，Rf值小，反之，化合物极性小，Rf值大。

一个化合物在某种吸附剂上Rf值的大小主要取决于展开剂的极性大小，即展开剂极性大，化合物Rf值大，展开剂极性小，化合物的Rf值小。

  薄层板根据在制备过程中是干法制板还是湿法制板分为二种。

干法制板为软板，湿法制板为硬板。

  三、实验内容

（一）薄层板的制备

  1、干法：

取150—200目的色谱用中性氧化铝适量，散布在玻璃板上，用一根推捧匀速地从一端向另一端推进，使吸附剂均匀地在玻璃板上铺成一薄层（如图示），即可使用，薄层的厚度取决于推棒下层的塑料圈的厚度，一般以0.25mm为宜。

干法铺层方法

    干法铺板方法

2、湿法

（1）硅胶G薄层板的制备：

称取硅胶G12克，加蒸馏水34毫升，充分搅拌成糊状后，迅速分倒在四块5×20厘米的玻璃板上，铺匀，水平放置，待室温阴干后110℃活化一小时，备用。

（2）硅胶CMC—Na薄层板的制备：

称取CMC—Na（羧甲基纤维素钠）0．1克，加l毫升酒精湿润后，溶于17毫升蒸馏水中。

立即用力振摇，搅拌（如不溶可加热）全部溶解后，加人过200目筛的层析用硅胶5克，搅拌成糊状，均匀地铺在两块5×20厘米的玻璃板上，水平放置，室温阴干后，于110℃活化一小时，备用。

（二）薄层色谱

  l、制板：

取150目—200目的层析用氧化铝按上述干法制成薄层板（5×20厘米）一块。

  2、点样：

取管口平整的毛细管三支分别吸东莨菪碱，其若碱及二者混合的氯仿溶液，点在上述制好的薄层板上，点的直径一般为2—3毫米，点与点之间的距离一般为1．5厘米左右，样品点在离薄层一端为2厘米左右的起始线上，离板边约有l厘米的距离。

  3、展开：

点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿：

丙酮：

无水乙醇（8：

2：

0．5）上行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板上端有塑料盖垫起使与液面成15。

左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0．5厘米左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1厘米左右时，即可取出薄层板，标出溶剂前沿位置。

  4、显色：

取出的薄层板，立即喷洒改良碘化铋钾试剂，使其显色，计算Rf值。

  Rf=  起始线到样品斑点中心距离

    起始线到剂剂前沿距离

  四、实验说明及注意事项

  1、制薄层板用的玻璃应干燥、清洁。

  2、干法制板时，推捧用力要均匀，中间不要停顿，否则薄层厚度不均匀。

  3、点样时，样品浓度不要太大，点样量也不要太多，否则斑点拖尾。

若样品浓度太小，可待第一次点样溶剂挥干后再第二次点样。

  4、薄层板放于层析槽时，注意切不可将原点浸入溶剂中。

  5、层析后的薄层板，取出立即喷洒显色剂，否则溶液挥干后喷显色剂会吹散吸附剂。

但湿法制的硬板就不必如此。

  6、湿法制的硬板活化的温度和时间可依需要调整：

一般检识水溶性成分或一些极性大的成份，所用的薄层板只在空气中自然干燥，即可使用。

  五、参考文献

1、  中国医学科学院药物研究所：

薄层层析及其在中草药分析中的应用，1978。

2、  E．菜德雷，M•菜德雷合著：

陶义训、马立人、夏寿宣合译：

色谱法。

3、  全国高等医药院校试用教材：

中草药化学，1980。

4、  StahlE，td，ThinLayerChromatography2ndedu，1969。

5、  E．  Heffmann：

Chromatography3ndedu1975。

实验二  从三棵针中提取、分离小檗碱与小檗胺

三棵针为小檗属（Berberis）植物，种类繁多，是黄连、黄柏的重要代用品。

根中含多种生物碱，有季胺类生物碱，如小檗碱（Berberine）1.2—3％，根皮含3—5.5％，少量巴马亭（Palmatine）、药根碱（Jatrorrhigine）、非洲防己碱（Columbamine）、木兰花碱（Magnoflorine），有叔胺碱，如小檗胺（Berbamine）0．45—3.84％，尖刺碱（Oxyacanthine），异粉防己碱（1sotetrandrine）等。

  小檗碱是一种常用的抗菌药，对菌痢、肠炎、上呼吸道感染等疾病有良好的疗效。

小檗胺有升白、降压、利胆及镇咳等作用，对预防和治疗白细胞减少疗效较好。

  一、实验目的

  l、了解小檗碱，小檗胺的结构与性质，掌握提取分离方法。

  2、了解小檗碱，小檗胺的鉴识反应及薄层色谱鉴别。

  二、实验原理

l、小檗碱（Berberine）又名黄连素

  黄色针晶，能缓缓溶于水（1：

20）、乙醇（1：

100），易溶于热水及热乙醇，难溶于乙醚、石油醚、苯及氯仿。

  2、小檗胺（Berbamine）

  白色或无色结晶，难溶于水，易溶于乙醇中，可溶于乙醚，氯仿、石油醚。

  本实验的提取分离原理是：

小檗碱、小檗胺的硫酸盐易溶于水，小檗碱的盐酸盐难溶于水，小檗胺的盐酸盐可溶于水，游离的小檗碱为季胺碱可溶于水，游离的小檗胺是叔胺碱，难溶于水。

因此，将植物原料用稀H2SO4溶液浸泡，然后用石灰乳调至pHl2左右，小檗碱游离而溶于水，小檗胺含酚羟基成钙盐也溶于水，粘液质及过量硫酸生成不溶性钙盐而沉淀析出，再加NaCl，并用盐酸调pH8左右时，小檗碱成难溶性的氯化小檗碱而析出，小檗胺游离析出，最后利用氯化小檗碱在热水中溶解度较大的性质与小碱胺分离。

  三、实验内容

（一）小檗碱与小檗胺的提取分离

  取三棵针粗粉100克，置1000毫升三角瓶内，加700毫升0.2％（V／V）的H2SO4溶液浸泡24小时，纱布过滤，再用400毫升酸水同法提取一次，合并两次滤液于搪瓷缸内，搅拌下加人石灰乳至pHl2，静置30分钟，抽滤，滤液中加入计算量（8％W／V）的NaCl，静置，待沉淀完全后，滴加浓HCl至PH8～8．5，于80℃热水中保温半小时，静置，抽滤，所得沉淀于60℃以下干燥，称重，置100毫升烧杯中，加入30倍量蒸馏水，加热至沸，趁热抽滤，滤液内含小檗碱，沉淀为小檗胺的粗品。

（二）精制：

趁热向上述滤液中滴加浓盐酸，调pH至2，静置氯化小檗碱沉淀析出，抽滤，60℃以上干燥，称重，计算得率（不得低于0.2％）

  上步所得沉淀，60℃以下干燥，称重，置50毫升烧杯中，加20倍量乙醇加热溶解，加入2％活性炭，再加热煮沸5分钟，热过滤，滤液蒸除乙醇，剩l／4量，冷却，滴加蒸馏水至不再析出沉淀为止，用5％NaOH调pH8—8.5，80℃水浴加热5分钟左右，放置，抽滤，干燥，再以10倍量乙醚溶解，过滤，回收乙醚，得白色小檗胺。

  （三）鉴识

  l、小檗碱的鉴识

（1）取氯化小檗碱水溶液数滴，加浓HNO31滴，观察现象，再滴加浓HNO3观察有何变化?

解释现象。

（2）取氯化小檗碱水溶液数滴，加锌粒少许，再加浓H2SO4数滴，观察现象并解释。

  （3）取氯化小檗碱水溶液数滴；加5％NaOH2～3滴，再加丙酮数滴，现察现象并解释。

  2、小檗胺的定性

（1）取小檗胺结晶少量，置白瓷板上，加5％HC12滴使溶解再加固体硝酸钠使之饱和，移入毛细管中观察。

（2）取l～2粒KMn04置白瓷板上，加5％HCl数滴使溶解，再加少量小檗

胺结晶，观察颜色变化。

  （四）薄层色谱

  层析板：

硅胶G板，110℃，活化半小时。

  展开剂：

氯仿—甲醇—氨水（15：

4：

0.5）

  样品：

氯化小檗碱乙醇液

  氯化小檗碱标准品液

  小檗胺乙醇液  

  小檗胺标准品液

  显色：

碘蒸汽或改良磺化铋钾

  四、实验说明及注意事项：

  1、用硫酸浸泡时，硫酸的浓度以0.2％为宜，此时生成的硫酸小檗碱在水中溶解度较大，若加入过量，小檗碱就形成酸式硫酸盐，水中溶解度就降低（1：

100），影响小檗碱的提取量。

  2、冷浸时间不宜过长，次数也不宜过多，否则浸出的杂质量也相对增加，冷浸一般24小时可浸出92％的成分,所以浸出两次即可。

  3、在pH～8.5时小檗胺沉淀较完全，但不易凝聚，故80℃保温，使凝聚而沉降。

  4、小檗碱精制时调pH至2，是为了使小檗胺等叔胺型生物碱留在溶液中除去，以便得到较纯的小檗碱，操作时若溶液己冷却析出结晶，就应加热成澄明溶液再用盐酸调pH2。

  五、参考文献

  l、沈阳药学院：

植物化学教程1979年

  2、贵阳医学院药学系，贵州药讯，1980年5期2页

  3、中药声，1979年278页

  4、中草药化学，全国高等医药院校试用教材，1980年7月

  5、韩秋生等，云南医药，1981．3（56）

  6．韩秋生等，药学通报，1981．3（13）

实验三  从洋金花中提取分离东莨菪碱和莨菪碱

  洋金花为茄科植物毛花蔓陀罗（DatuminnoxiaMiller）的花，主要含生物碱，为中麻药方剂中的主药，临床上治疗气管炎有效。

  一、实验目的

  l、通过本实验掌握生物碱的一般提取分离方法。

  2、掌握氧化铝柱色谱分离莨菪碱和东莨菪碱的实验方法，从而了解柱色谱的一般实验操作技术。

  3、了解东莨菪碱和莨菪碱的检识方法。

  二、实验原理

洋金花中的主要化学成份

l、东食著碱（Scopolamine）又名：

莨菪胺、天仙子碱mp59℃（一水合物）。

2、莨菪碱（Hyoscyamine）又名：

天仙子胺mp108.5℃

3、莨菪酸（Tropicacid）mp118℃

4、去甲莨菪碱（Norhyoscyamine）mp142℃

5、曼陀罗碱（Meteloidine）mp141℃

  本实验是利用游离生物碱及其盐均能溶于乙醇的性质，用乙醇回流提取总生物碱，再利用东莨菪碱和莨菪碱碱性强弱不同，与碱性氧化铝吸附力强弱不同，用氧化铝柱色谱进行分离。

  三、实验内容

（一）提取总碱：

取洋金花粗粉50克，置1000毫升园底烧瓶中加95％乙醇300毫升，置水浴上回流提取1小时，倾出提取液，药渣再用95％乙醇200毫升不浴回流提取30分钟，倾出提取液，药渣再用95％乙醇200毫升回流提取30分钟，倾出提取液，三次提取液合并，用玻璃漏斗过滤，滤液回收乙醇至无醇味，浓缩液加1％盐酸l00毫升使溶解，抽滤，滤液用氯仿（40，20，20毫升）萃取脂溶性杂质，酸水液用10％NaOH调至pH9一l0用氯仿萃取（60，50，30，20毫升）四次，氯仿液用无水硫酸钠脱水干燥，回收氯仿得总碱。

（二）莨菪碱与东莨菪碱的分离

  这两种生物碱我们用碱性氧化铝干柱色谱进行分离，其操作步骤如下：

  1、装柱：

将色谱柱垂直固定在铁支架上，柱底填一块棉花，打开活塞，称取100—120目碱性氧化铝40克，经漏斗慢慢装入柱中，一边装填，一边用橡皮塞轻轻敲击色谱柱，使其装填均匀紧密，最后使吸附剂表面形成一水平面。

  2、上样：

将上述所得总生物碱用少量氯仿溶解，用吸管小心将氯仿溶液加在吸附剂表面上，切勿破坏吸附剂平面，为了防止平面被损坏，可剪一直径同色谱柱内径大小一样的滤纸，小心放在吸附剂平面上，或在其上面加1—2厘米厚的石英砂，把氯仿溶液加到滤纸片上或石英砂上。

  3、展开（洗脱）：

加样完毕，立即小心加入氯仿（也应注意防止破坏吸附剂平面），展开洗脱，当溶剂前沿到达柱底部时，用50毫升锥形瓶收集洗脱液，并控制流速，使每分钟流出液为60一80滴，每瓶收集50毫升，更换锥形瓶，编上序号，并在柱上经常添加氯仿，使溶剂面始终高于吸附剂表面，东莨菪碱先洗脱下来，莨菪碱后洗脱下来。

  4、溶剂回收，按序号分别回收溶剂后，再氧化铝薄层检查，以氯仿—丙酮—乙醇（8：

2：

1）展开，改良碘化铋钾试剂显色。

相同部分合并。

  （三）检识反应及薄层检查

  1、生物碱沉淀反应

  分别取东莨菪碱，莨菪碱少量，置白瓷板中蒸发到干，加2滴稀HCl溶解，

分别加以下生物碱沉淀试剂：

（1）碘—碘化钾试液

（2）改良碘化铋钾试液

  （3）苦味酸试液

  观察结果：

  2、Vitali反应：

分别取东莨菪碱和莨菪碱少量，置于白瓷板中，加发烟硝酸5滴，于水浴上蒸干，放冷后，加10％KOH乙醇溶液2—3滴，观察颜色变化，并加以解释。

  3、薄层色谱

  吸附剂：

碱性氧化铝150一180目，干法铺板。

  展开剂：

氯仿—丙酮—乙醇（8：

2：

1）

  样品：

东莨菪碱氯仿溶液

    莨菪碱氯仿溶液

    东莨菪碱标准品

    莨菪碱标准品

  显色剂：

改良碘化铋钾，喷洒

  四、实验说明及注意事项

  l、装柱还可采用湿法：

将洗脱剂加到吸附剂中，搅拌成稀糊状，加到层析柱中，使吸附剂依重力自然下沉到柱底部，打开活塞使洗脱剂流出，但要保证溶剂表面始终高于吸附剂表面。

干法装柱操作简便、迅速、不受洗脱剂的限制，但柱效不高。

  2、柱色谱和薄层色谱用的氧化铝要注意活度，一般Ⅱ—Ⅲ级即可，活度不够就不能将样品中成分分开。

  五、参考文献

  1、赵承锻Chin．JPhysilvol9．77．1935

  2、林启寿等，药学学报，1卷2期95页，1953

  3、岛田克卫：

药学杂志，vol  75，609，1955

  4、中成药研究：

1979，l（1—7）

  5、中麻通讯：

1977．3（18—23）

实验四  大黄中蒽醌类化合物的提取分离

大黄为蓼科大黄属植物掌叶大黄（RheumPalmatumL），唐古特大黄（R．tanguticumMaxim．）或药用大黄（R．officinaleBaill）的根茎，主要含蒽醌类化合物，有泻下和抗菌作用，为常用中药之一。

  一、实验目的

  l、掌握梯度pH萃取法和提取分离大黄中各种蒽醌甙元的原理及实验方法。

  2、了解蒽醌类化合物的颜色反应及色谱检查方法。

  二、实验原理

  大黄中目前已知的主要成分：

  1、大黄酸（Rhein）

  mp321℃

2、大黄素（Emodin）mp254～6℃

3、芦荟大黄素（Aloe-emodin）mp223～5℃

4、大黄酚（Chrysophanol）mp193～6℃

5、大黄素甲醚（Physcion）mp203～7℃

  其甙有大黄酸葡萄糖甙（Rheinmonoglucoside）mp266℃；大黄素葡萄糖甙

（Fmodinmonoglucoside）mp189℃；芦荟大黄素葡萄糖（Aloe-emod-inmonog-

lucoside）mp239℃；大黄酚葡萄糖甙（chrysophyanolmonoglucoside）mp245℃；大黄素甲醚葡萄糖甙（Physcionmonoglucoside）mp235℃；番泻甙A、B、C、D、E（SennosideA.B.C.D.E）等。

  本实验是根据大黄中的蒽醌类甙元成分能溶于氯仿的性质，采用氯仿提取，又利用羟基蒽醌类化合物酸性强弱不同，用pH梯度法进行分离。

具有羧基或多个β位酚羟基的蒽醌可溶于5％碳酸氢钠溶液；具有一个β位酚羟基的蒽醌可溶于5％碳酸钠溶液，只具有α位酚羟基的蒽醌，酸性弱，只溶于氢氧化钠溶液。

  三、实验内容

（一）大黄中蒽醌甙元的提取分离

  1、大黄中蒽醌甙元的提取：

取大黄粗粉50克置于1000毫升园底烧瓶中，加20％H2SO430毫升，氯仿200毫升，水浴回流一小时，滤出浸液，药渣再加20％H2SO430毫升，氯仿200毫升，水浴回流45分钟，滤出浸液，合并所得浸液，回收氯仿至剩余氯仿约l00毫升，用蒸馏水洗至pH6。

  2、大黄酸的分离：

上得氯仿液用5％NaHCO3溶液萃取四次，（80、60、40、40毫升），合并NaHCO3液，用盐酸中和至不再析沉淀，析出棕黄色沉淀（若不出现沉淀，水浴上加热）抽滤，水洗70℃烘干，用少量冰醋酸重结晶，析出黄色针晶为大黄酸，抽滤烘干，称重。

3、大黄素的分离：

经NaHCO3溶液提取过的氯仿液，继用5％Na2CO3溶液萃取四次（80、60、40、40毫升）。

合并Na2CO3液，用盐酸中和至不再析出沉淀，析出棕黄色沉淀（若不出现沉淀，水浴上加热）抽滤，水洗，70℃烘干，用少量无水乙醇重结晶，析出橙色针晶为大黄素、抽滤，烘干，称重。

4、芦荟大黄素，大黄素甲醚和大黄酚混合物的分离：

经Na2CO3提取过的氯仿液，再用5％NaOH溶液提取四次（80、60、40、40毫升），合并NaOH液，用盐酸中和至不再析出沉淀，析出黄色沉淀，抽滤，水洗，70℃烘干，称重。

  5、芦荟大黄素的分离：

4得沉淀物溶于少量氯仿（约30毫升），用0．25％NaOH溶液提取三次（20、10、10毫升），合并提取液用盐酸中和至中性，析出棕黄色沉淀，抽滤，70℃烘干，用少量乙酸乙酯重结晶，析出棕黄色针晶为芦荟大黄素，抽滤，烘干，称重。

  6、大黄素甲醚和大黄酚混合物的分离：

经0.25％NaOH提取过的氯仿液再用5％NaOH提取三次（20、10、10毫升），合并提取液，用盐酸中和至中性，析出黄色沉淀，抽滤。

水洗，70℃烘干，用少量乙酸乙酯重结晶，得大黄素甲醚和大黄酚混合物，抽滤，烘干，称重。

（二）颜色反应及色谱检查

  l、取以上各产物少量，分别于试管中，加5％NaOH溶液数滴，观察颜色变化。

  2、取以上各产物少量，分别于试管中加浓H2SO4数滴，观察颜色变化。

  3、取以上各产物少量，分别于试管中，加少量甲醇溶解，再滴加醋酸镁的甲醇溶液数滴，观察颜色变化。

  4、薄层色谱：

  吸附剂：

硅胶G板，105℃，活化二小时。

  展开剂：

氯仿—乙酸乙酯—醋酸（4：

1：

0.2）

  检品：

各产物的乙醇液

  显色：

可见光下观察色斑，紫外灯下观察萤光斑点。

  四、实验说明及注意事项

  1、大黄中蒽醌的存在形式以结合状态为主，游离状态的仅占小部分，为了提高游离蒽醌的得率，在提取过程中采取酸水解和萃取相结合的方法。

  2、两相萃取时，不可猛力振摇，只能轻轻旋转摇动，时间可长一些，以免造成严重乳化现象而影响分层，氯仿液用水洗时，尤其易乳化，可加入氯化钠盐析，使两层分离。

  五、参考文献

  1、林启寿：

中草药成分化学，1977，195

  2、中药志：

上册，27页，1977

  3、苏州市中医院，中草药通讯，1977，5（15）

  4、何丽一等，药学学报，1980、19（555）

实验五  芦丁的提取与鉴定

芦丁（Rutin）亦称芸香甙（Rutinoside），广泛存在于植物界中，其中以槐花米（为槐树SophorajapnicaL.的花蕾）和乔麦叶中含量较高，本实验以槐花米为原料提取芦丁，其含量为12—16％。

  芦丁为维生素P类药物，有助于保护毛细血管的正常弹性，临床上主要作防治高血压的辅助药物，还有调整毛细管壁的渗透作用，临床上作毛细血管性止血药，此外，对于放射性伤害所引起的出血症也有一定治疗作用。

  一、实验目的

  l、以芦丁为例学习黄酮类化合物的提取方法；

  2、掌握黄酮类成分的主要性质及黄酮甙，甙元和糖部分的鉴定方法。

  二、实验原理

  槐花米中的已知成分

  l、芦丁（Rutin）

  mpl77—178℃

  淡黄色小针状结晶

  溶解度：

冷水1：

8000  热水1：

200

      冷乙醇1：

300  热乙醇1：

30

  难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、及石油醚等溶剂

  2、槲皮素（Quercetin）

  mp316℃，313—14℃

  （含2分子结晶水）即芸香甙元，黄色结晶

  溶于热乙醇（1：

60），冷乙醇（1：

650），可溶于甲醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮、吡啶，不溶于石油醚、乙醚、氯仿和水中,实验室以稀硫酸水解，乙醇重结晶而制得。

  3、还含有皂甙，其粗制品为白色粉末，经酸水解后得二种皂甙元及糖部分，这两种皂甙元是白桦酯醇（Betulin）和槐花米双醇（Sophoradiol），另外还含槐花米甲素、槐花米乙素，槐花米丙素等。

  本实验是利用芦丁在热水中和冷水中溶解度相差较大的性质，用热水提取