分子生物学复习题.docx
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分子生物学复习题
分子生物学复习题
1958年,英美国两位科学家(Crick)和(Watson)提出DNA双螺旋模型。
真核把染色体上的蛋白质主要包括(组蛋白)和非组蛋白。
•
•转座子(transposon,Tn)是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位(可以位因子);
•分为两大类:
插入序列(IS)和复合型转座子。
•
C值(Cvalue):
一种生物单倍体基因组DNA的总量(碱基对数);
•
在两个相近的物种中,它们的C值会相差100倍。
表明许多DNA序列可能不编码蛋白质,是没有生理功能的。
多顺反子mRNA:
原核生物DNA序列中功能相关的蛋白质基因,往往在基因组的一个或几个特定部位,形成功能单位或转录单元。
•
DNA的二级结构分两大类:
一类是右手螺旋,如A-DNA和B-DNA;另一类是左手螺旋,即Z-DNA;
A-T丰富的DNA片段常呈B-DNA,它是普遍存在的结构。
DNA的一级结构是指()
A.各核苷酸中核苷与磷酸的连键性质
B.DNA分子由数目庞大的C、A、U、G四种核苷酸通过3',5'-磷酸二酯键连接而成
C.各核苷酸之间的连键性质及核苷酸的排列顺序
D.核糖与含氮碱基的连键性质
E.DNA的双螺旋结构
弱化子:
在trpmRNA5端trpE基因的起始密码前有一个长162bp的mRNA片段被称为前导区,其中123-150位碱基序列如果缺失,trp基因表达可提高6-10倍,而因为转录终止发生在这一区域,并且这种终止是被调节的,这个区域就被称为弱化子。
关于色氨酸操纵子前导序列叙述错误的是()
A.前导序列有相邻的两个色氨酸密码子
B.前导肽的翻译对tRNATrp的浓度很敏感
C.前导序列有4个片段能以两种不同方式进行配对
D.2-3配对,不形成转录终止机构
E.3-4配对,不形成转录终止机构
真核细胞与原核细胞在基因转录存在的差异。
①在真核细胞中,一条成熟的mRNA链只能翻译出一条多肽链;
②真核细胞DNA与组蛋白和大量非组蛋白结合,只有一小部分DNA是裸露的。
③真核细胞的基因中间还存在不被翻译的内含子;
④真核生物能够有序地根据生长发育阶段的需要进行DNA片段重排;
⑤真核生物中,基因转录的调节区则大得多。
⑥真核生物的RNA在细胞核中合成,只有经转运穿过核膜,到达细胞质后,才能被翻译成蛋白质。
⑦许多真核生物的的基因只有经过复杂的成熟和剪接过程,才能被顺利地翻译成蛋白质。
以下关于转录终止子的叙述,正确的是()
A.由终止因子RF参与完成终止
B.DNA链上的终止信号含GC富集区和AA富集区,
C.终止信号含GC富集区和AT富集区
D.终止信号需ρ因子辅助识别
E.以上描述均不正确
大肠杆菌中存在DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V
DNA聚合酶I具有聚合和校正活性;
DNA聚合酶Ⅲ具有合成和修复活性,是大肠杆菌DNA链延长反应的主导要聚合酶。
一、RNA转录的基本过程
1、模板识别
2、转录起始
3、转录延伸
4、转录终止
AUG的重要性在于()
A.作为附着于30S核糖体位点B.作为tRNA的识别位点
C.作为肽链的释放因子D.作为肽链合成的终止密码子
E.作为肽链的起始密码子
下列关于σ因子的叙述正确的是()
A.参与识别DNA模板上转录RNA的特殊起始点
B.参与识别DNA模板上的终止信号
C.催化RNA链的双向聚合反应
D.是—种小分子的有机化合物
E.参与逆转录过程
原核生物RNA聚合酶中σ因子是负责模板链的选择和转录的起始;
原核生物启动子包括-10bpPribnow区TATA区和-35bp处的TTGACA区。
大肠杆菌RNA链合成的方向是()
A.3′→5′ B.C→N C.N→C D.5′→3′E.3′→5′或5′→3′
真核生物基因启动子包括于转录起始点上游-30~-25bp处Hogness区(TATA区)和在起始位点上游-78~-70bp处CAAT区。
绝大多数真核生物mRNA5'端有()
ApolyAB帽子结构C起始密码D终止密码EPribnow盒
增强子:
核生物基因启动子上游的DNA重复序列,不是启动子的一部分,但能增强转录的起始,若将之取出插至DNA分子任何部位,就能保持基因的正常转录。
习惯上,将TATA区上游的保守序列称为上游启动子元件(upstreampromoterelement,UPE)或上游激活序列(upstreamactivatisequence,UAS)。
DNA以半保留方式进行复制,若一完全被标记的DNA分子,置于无放射标记的溶
液中复制两代,所产生的四个DNA分子的放射性状况如何?
()
A.两个分子有放射性,两个分子无放射性B.均有放射性
C.两条链中的半条具有放射性D.两条链中的一条具有放射性
E.均无放射性
SD序列:
原核生物mRNA起始密码子AUG上游7~12个核苷酸处的一段保守区,该序列与16SrRNA3端反向互补,在核糖体-mRNA的结合过程中起作用。
关于核糖体RNA的叙述,哪个正确?
()
A.原核生物大亚基由5S、28S、5.8rRNA组成。
B.真核生物小亚基由16SrRNA组成。
C.16SrRNA与mRNA5端翻译起始区序列互补。
D.23SrRNA与5SrRNA之间可能不存在相互作用。
RNA的剪接使得基因表达过程增加了一个步骤,但DNA的实际编码序列没有发生变化。
RNA的编辑(RNAediting)是某些RNA,特别是mRNA前体的一种加工方式,如插入、删除或取代一些核苷酸残基,导致DNA所编码的遗传信息改变。
在蛋白质生物合成中,mRNA起着十分重要的作用,原因是它带有()
A.蛋白质生物合成的遣传信息B.氨基酸
C.高能键D.识别密码的结构E.各种辅因子
核酶(ribozymeie)是指一类具有催化功能的RNA分子,通过催化靶位点RNA链中磷酸二酯键的断裂,特异性地剪切底物RNA分子,从而阻断基因的表达。
不参与DNA复制的酶是()
A.核酶 B.引物酶 C.连接酶 D.解螺旋酶 E.拓扑酶
蛋白质表达过程主要包括:
①翻译的起始;
②肽链的延伸;
③肽链的终止及释放。
真核生物的转录特点是()
A.在细胞质内进行
B.需要σ因子辨认起始点
C.需RNA聚合酶
D.转录与翻译在同部位同时进行
蛋白质的翻译:
从起始密码子AUG开始,沿着mRNA5--3方向连续阅读密码子,直至终止密码子为止,生成一特定序列的多肽链蛋白质过程。
DNA复制和转录的叙述,错误的是
A.在体内只有一条DNA链转录()
B.两个过程新链合成方向都是5′→3′
C.两过程均需RNA为引物
D.复制的产物通常大于转录的产物
E.聚合酶都需要Mg2+
tRNA的作用是运载氨基酸的工具。
原核生物蛋白质生物合成中肽链延长所需的能量来源于()
A.ATPB.GTPC.GDPD.UTPE.CTP
氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸和tRNA连接在一起的反应。
原核生物的起始tRNA是fMet-tRNA,真核生物是Met-tRNA。
3个终止密码子是UAA、UAG或UGA。
1.密码子具有连续性、简并性、摆动性和普遍性及特异性的特征。
2.原核生物的启动子包括三个保守序列,即转录起点、TATA区和TTGACA区。
3.原核生物的RNA聚合酶全酶组份是α、β、β’、σ。
4.真核生物hnRNA内含子一般遵循GU-AG或GT-AG规则。
分子伴侣(molecularchaperone):
能能够在细胞内辅助新生肽链正确折叠的蛋白质。
•两类分子伴侣家族:
•1.热休克蛋白包括HSP70、HSP40等家族
•2.伴侣素包括HSP60和HSPl0
信号肽假说:
蛋白质跨膜转运信号是由mRNA编码的。
在mRNA起始密码子后,有一段编码疏水性氨基酸序列的RNA区域,被称为信号序列,由该信号序列编码的信号肽是蛋白质跨膜转运信号,能引导合成蛋白质跨膜转运。
蛋白质的降解的信号是具有泛蛋白(ubiquitin)序列。
质粒是细菌染色体外的遗传因子,能进行白我复制,可以作为转基因的载体。
哪种酶是大肠杆菌DNA复制中链延长反应的主导酶?
()
A.DNA酶合酶ⅠB.DNA聚合酶Ⅱ
C.DNA聚合酶ⅢD.DNA连接酶
15.DNA复制时,序列5'-TpApGpAp-3'将合成下列哪种互补结构?
()
A.5'-TpCpTpAp--3'B.5'-ApTpCpTp--3'
C.5'-UpCpUpAp--3'D.5'-GpCpGpAp--3'
E.3'-TpCpTpAp--3'
PCR扩增的步骤
1变性(denaturation):
将模板置96℃进行处理,使双链DNA在高温下解链成为单链DNA,
2退火(annnealing):
将温度降至55℃,使引物与模板的互补区结合;
3延伸(extension):
在72℃发生DNA延伸反应。
cDNA:
由于RNA分子容易降解,将mRNA反转录成稳定的DNA双螺旋(complementaryDNA,cDNA),称为cDNA。
SNP是(singlenucleotidepolymorphism)指基因组DNA序列中由于单个核苷酸(A,T,C和G)的突变而引起的多态性。
双向电泳技术是分离大量混合蛋白质组分的最有效方法。
原位杂交是对目标核酸进行定位的一种技术。
酵母单杂交系统是研究真核生物中DNA与蛋白质之间的互作用技术。
酵母双杂交系统研究真核生物中蛋白质与蛋白质之间的互作用技术。
真核生物的TATA框主要是使转录精确起始的作用。
一般将作为转录模板的DNA单链称为模板链,也称为反义链,而对应的非模板链称为有意义链。
RNA聚合酶忠实性较DNA聚合酶低,RNA聚合酶没有任何校对功能。
真核RNA聚合酶Ⅱ不是主要转录rRNA。
tRNA的种类决定携带氨基酸种类。
9.构成核小体的组蛋白有H1,H2A、H2B、H3、H4五种。
单核苷酸多态性指发生在基因组序列中由单个碱基的变化引起的一种DNA序列变化。
用来合成RNA的DNA模板会发生规律性变化,从而控制基因表达和生物体的发育,这是真核生物DNA水平上的基因表达调控。
如基因扩增。
真核生物核DNA同时启动多个复制原点进行复制。
DNA复制的叙述,错误的是()
A.引物酶的底物是NTP
B.DNA聚合酶的底物是dNTP
C.解螺旋酶能切断DNA再连接
D.拓扑酶切断一股或两股DNA链
RNAi技术:
利用双链小RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA从而阻断靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失的表型。
下列关于核酸的描述哪种是错误的?
()
A.核酸分子具有极性B.多核苷酸链有两个不相同的末端
C.多核苷酸链的3'-端为磷酸基D.多核苷酸链的5'-端为磷酸基
E.链的书写方向为5'→3'方向,其5'端总是在左边
负转录调控:
调节基因的产物是阻遏蛋白,起着阻止结构基因转录的作用。
操纵子模型主要内容
①Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码。
②该mRNA分子的启动区(P)位于阻遏基因(I)与操纵区(O)之间;
③操纵区是DNA上的一小段序列(仅为26bp),是阻遏物的结合部位;
④当阻遏物与操纵区相结合时,lacmRNA的转录起始受到抑制;
⑤诱导物通过与阻遏物结合,启动子能够顺利起始mRNA的转录。
分解代谢物基因激活蛋白(CRP)对乳糖操纵子表达的影响是()
A.正性调控B.负性调控
C.正性调控、负性调控都可能D.无调控作用
E.可有可无
葡萄糖代谢物阻遏效应:
当葡萄糖和乳糖同时存在于培养基中时,lac启动子表达受阻;当葡萄糖消耗完后,lac启动子表达启动。
合成阻遏蛋白的基因是下列中的哪一个?
()
A.LacZ B.操纵基因
C.调节子I基因 D.启动基因
弱化子:
在trpmRNA5’端trpE基因的起始密码前有一个长162bp的mRNA片段被称为前导区,其中123-150位碱基序列如果缺失,trp基因表达可提高6-10倍,而因为转录终止发生在这一区域,并且这种终止是被调节的,这个区域就被称为弱化子。
真核生物用多种调节蛋白发挥生物学效应的作用方式是()
A.提高RNA聚合酶的转录效率
B.提高DNA-蛋白质相互作用的特异性
C.降低DNA-蛋白质相互作用的特异性
顺式作用元件:
DNA中与转录启动和调控有关的核苷酸序列,统称为顺式作用元件
或不编码任何产物的DNA片段,可影响同一条DNA链上的基因表达。
下列有关阻遏物的论述,哪一项是正确的?
()
A.阻遏物是代谢的终产物
B.阻遏物是阻遏基因的产物
C.阻遏物与操纵基因结合而阻碍转录的启动
D.阻遏物与RNA聚合酶结合而抑制转录
E.阻遏物妨碍RNA聚合酶与启动子结合
滚环复制:
在噬菌体中是很常见的,DNA的合成由对正链原点的专一性切割开始,所形成的自由5’端被从双链环中置换出来并为单链DNA结合蛋白所覆盖,使其3’-OH端在DNA聚合酶的作用下不断延伸。
在这个过程中,单链尾巴的延伸与双链DNA的绕轴旋转同步。
关于哺乳动物DNA复制特点的描述哪一项是错误的?
()
A.RNA引物较小B.冈崎片断较短
C.DNA聚合酶α、β、γ参与D.仅有一个复制起点
E.片断连接时,由ATP供给能量
卫星DNA:
用等密度氯化铯梯度离心法分离匀质DNA时,在主带附近出现的副带DNA。
一般含有高度重复的DNA序列,主要分布于染色体着丝粒的异染色质区。
端粒酶:
催化端粒中重复单元合成的一种核糖核蛋白酶,是一种反转录酶。
转录:
以DNA为模板合成RNA过程。
下列关于DNA转录的叙述哪一项是正确的?
()
A.因为DNA两条链是互补的,所以以两条链为模板时转录生成的mRNA是相同的
B.一条含有一个结构基因的DNA通常可转录两个mRNA
C.真核细胞中有些结构基因是不连续的,因为有些基因的顺序并不表达在相应的mRNA中
D.从特异基因转录生成的所有的RNA,其顺序可全部或部分翻译出来
E.一种蛋白质只能由两个基因决定,这两基因分布在同源染色体上
启始tRNA:
能特异性的识别起始密码子的tRNA.
氨基酸活化:
氨酰tRNA合成酶催化tRNA与氨基酸结合成AA-tRNA复合物的过程。
弱化作用:
在色氨酸操纵子中,mRNA转录也可通过前导肽基因的翻译来调节的。
弱化子对RNA聚合酶的影响依赖于前导肽翻译中核糖体所处的位置。
trpR基因产物称为辅阻遏蛋白。
辅阻遏蛋白与色氨酸结合形成有活性的阻遏物,与操纵区结合并关闭印mRNA转录。
调控trp操纵子表达两种方式:
一是trpR基因产物称为辅阻遏蛋白调控;二是弱化子调控。
关于RNA聚合酶和DNA聚合酶的叙述哪一项是正确的?
()
A.利用核苷二磷酸合成多核苷酸链
B.RNA聚合酶需要引物,并在延长的多核苷酸链5'-末端添加碱基
C.DNA聚合酶能同时在链两端添加核苷酸
D.DNA聚合酶只能以RNA为模板合成DNA
E.RNA聚合酶和DNA聚合酶只能在多核苷酸链的3'-OH末端添加核苷酸
断裂基因:
大多数真核基因都是由蛋白质编码序列外显子(exon)和非蛋白质编码序列内含子(intron)两部分组成的;所以,真核基因有时被称为断裂基因。
外显子和内含子的叙述,正确的是()
A.仅外显子在DNA模板上有相应的互补序列
B.hnRNA上只有外显子而无内含子序列
C.除去内含子及连接外显子的过程称为剪接
D.除去外显子的过程称为剪接
E.成熟的mRNA有内含子
画图说明真核基因的一般构造。
从DNA5端开始,按顺序包括以下顺式元件:
CAATbox、TATAbox、5端加帽位点、起始密码子ATG、信号肽序列、外显子、内含子、终止密码子、polyA信号等9个元件。
真核生物启动子(promoter)的组成?
由核心启动子和上游启动子两个部分组成。
①核心启动子(corepromoter)指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游的TATA盒。
②上游启动子元件(UPE)包括通常位于-70bp附近的CAAT盒(CCAAT)和GC盒(GGC-CCG)等。
试述B型DNA双螺旋的特征。
右手螺旋
核糖磷酸在外侧,碱基在内侧
一周螺旋,10个碱基,3.4nm螺距
碱基互补配对
有大沟小沟
病毒基因组都是单倍体(逆转录病毒除外)
噬菌体(细菌病毒)的基因是连续的,而真核细胞病毒的基因是不连续的
比较原核生物与真核生物转录的不同之处。
原核只有一种RNA聚合酶,而真核细胞有三种聚合酶;
启动子的结构特点不同,真核有三种不同的启动子和有关的元件;
真核的转录有很多蛋白质因子的介入:
顺式作用元件;反式作用因子
真核mRNA单顺反子,原核生物mRNA多顺反子
基因中被转录的非编码序列()
A.内含子B.外显子C.多顺反子D.单顺反子E.UsnRNP
真核生物转录生成的mRNA属于()
A.内含子B.外显子C.多顺反子D.单顺反子E.UsnRNP
原核生物的转座子类型有哪些?
请简要说明各类型的特征。
(1)插入序列(IS):
最简单的转座子,只含有转座所必需的元件:
两端有反向重复序列,中间有编码转座所需的酶的基因(至少有2个,编码转座酶)
(2)复合转座子(含插入序列的转座子):
是一类带有某些抗药性基团(或其他宿主基因)的转座子,其两翼往往带有两个相同或高度同源的的IS序列组成
(3)转座子(TnA)家族:
除了和它的转座作用有关的基因外,还带有其他基因的转座因子,往往没有IS序列
简述肽链的延伸(肽键的形成)过程。
1.进位:
aa进入受位,反应需GTP,Mg2+,EF-Tu
2.成肽(转肽与脱落):
50s大亚基上的给位有转肽酶活性,催化给位的甲酰蛋氨酸与受位新进的aa结合形成肽键,同时给位上的tRNA脱落。
(
3.转位(移位):
反应需EF-G,GTP,Mg2+参与。
核蛋白体向mRNA3‘端移动一个密码子的距离,受位进入一个新密码子,带肽键的tRNA由受位移至给位.去氨酰-tRNA被挤入E位
蛋白质生物合成时()
A.由tRNA识别DNA上的三密码
B.氨基酸能直接与其特异的三联体密码连接
C.tRNA的反密码子能与mRNA上相应密码子形成碱基对
D.在合成蛋白质之前,氨基酸密码中碱基全部改变,才会出现由一种氨基酸置换另一种氨基酸
E.核蛋白体从mRNA的5'端向3'端滑动时,相当于蛋白质从C端向N端延伸
葡萄糖效应(代谢物阻遏效应)?
当细菌在含有葡萄糖和乳糖的培养基中生长时,则优先利用葡萄糖,而不利用乳糖。
只有当葡萄糖耗尽后,细菌生长经过一段时间后,才开始利用乳糖.
顺式作用因子主要指结构基因上游的DNA启动子序列,包括由核心启动子和上游启动子两个部分组成。
反式作用因子:
能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上,参与调控靶基因转录效率的蛋白质。
主要包括以下几种结构蛋白质:
(1)螺旋—转折—螺旋结构
(2)锌指结构
(3)亮氨酸拉链结构
哪一项不适用于原核生物的蛋白质生物合成?
()
A.起动阶段消耗GTP
B.mRNA的帽子结构能促进mRNA与核糖体结合。
C.起始因子有IF1、IF2、IF3三种
D.延长因子有EFTu、EFTs和EFG
E.核蛋白体大亚基有"给位"和"受位"
简述并画图说明真核细胞原始转录产物及其主要加工剪接过程。
由DNA转录生成的原始转录产物——核不均一RNA(hnRNA),即mRNA的前体,经过5端加“帽”和3端酶切加多聚腺甘苷酸,再经过RNA的剪接,编码蛋白质的外显子部分就连接成为一个连续开环读码框(ORF),通过核孔进入细胞质,作为蛋白质合成的模板。
酵母双杂交系统的原理?
真核生物转录调控因子往往由两个相互独立的结构域构成:
其中DNA结合结构域(bindingdomain,BD)和转录激活结构域(activationgdomain,AD)是转录激活因子发挥功能所必需的。
单独的BD能与特定基因的启动区结合,但不能激活基因的转录,而由不同转录调控因子的BD和AD所形成的杂合蛋白却能行使激活转录的功能。