免检期末总结 S范文.docx
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免检期末总结S范文
一，名词解释
1免疫免疫（immunity）是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
2免疫应答是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应，并以排出或分解该抗原为目的反应过程。
3免疫细胞凡参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞统称为免疫细胞，按免疫细胞在体内的作用不同分为淋巴细胞、免疫辅助细胞和免疫应答细胞三大类。
4抗原抗体反应抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。
5血清学反应体外抗原抗体反应中的抗体主要来源于血清，其检测多以血清为实验材料，故体外抗原抗体反应亦称为血清学反应。
6亲和力（affinity）抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力。
是抗原抗体间固有的结合力。
7亲合力（avidity）抗体结合部位与抗原分子多表位之间结合的总强度。
8特异性：
抗原与抗体结合反应的专一性。
分子基础:
抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性。
9交叉反应（crossreactions）两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应
抗原抗体反应的特点：
特异性，可逆性、比例性、阶段性
10可逆性：
抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性。
11比例性：
抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系。
前带（prezone）：
抗体过量
后带（postzone）：
抗原过量等价带（equivalencezone）：
抗原抗体比例合适
12阶段性第一阶段：
特异性结合阶段，反应快，不可见
第二阶段：
反应可见阶段，反应慢，出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象。
抗原抗体反应的影响因素：
抗原的理化性状、表位种类和数目
抗体的来源、特异性、亲和力、效价
电解质:
生理盐水或缓冲液
酸碱度:
pH6～pH9
温度:
15℃～40℃，37℃最适
13免疫原：
进入机体后能被免疫系统识别，产生免疫应答，生成抗体或活化淋巴细胞的物质。
14免疫佐剂：
预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质称为免疫佐剂,简称佐剂。
15多克隆抗体（polyclonalantibody,pcAb）：
天然抗原刺激多种B淋巴细胞克隆产生的多种抗体的混合物
16免疫间隔时间第一次和第二次间隔10～20天，三次及以后间隔7～10天
17凝集反应细菌、细胞等等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。
18凝集反应的阶段和特点
反应阶段：
抗原抗体的特异性结合阶段出现肉眼可见凝集阶段
反应特点：
IgM的作用比IgG大数百倍,易出现可见凝集
IgG与抗原结合后，常不出现凝集反应，称不完全抗体。
19直接凝集反应（directagglutination）：
颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。
方法评价：
半定量试验简便、快速敏感度低可有假阳性
20间接凝集反应（indirectagglutination）:
将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象
21协同凝集反应SPA能与IgG的Fc片段非特异性结合,同时不影响Fab片段的活性,所以当带有SPA的金黄色葡萄球菌与抗体混合,再加入适量的相应抗原,产生凝集现象。
22沉淀反应（precipitation）是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同。
23放射性核素：
原子核能自发衰变、释放能量并伴随射线发射的物质放射性核素衰变方式有α、β和γ3种，β和γ衰变及发射的射线可用于免疫标记技术。
β型放射核素：
3H14C和32P
γ型放射核素：
125I、131I、51Cr和60Go
24化学发光（chemiluminescence）：
伴随化学反应过程所产生的光辐射现象。
25直接化学发光一些化学反应能释放足够的能量把参加反应的物质激发到能发射光的电子激发态，若被激发的是一个反应产物分子，则这种反应过程叫直接化学发光
26间接化学发光若激发能传递到另一个未参加化学反应的分子D上，使D分子激发到电子激发态，D分子从激发态回到基态时发光，这种过程叫间接化学发光
27荧光（fluorescence）：
基态分子吸收一定波长的光后转为激发单重态，在迅速返回基态时发射出波长比激发光长的光。
28发射光谱:
指固定激发波长，在不同波长下记录的样品发射荧光的强度。
29激发光谱:
指固定检测波长，用不同波长的激发光激发样品，记录相应的荧光发射强度。
30荧光效率:
荧光物质将光能转变成荧光的百分率。
荧光效率=
31荧光寿命:
荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。
各种荧光物质的荧光寿命不同,镧系元素的鳌合物具有较常的荧光寿命
32荧光淬灭:
荧光物质在某些理化因素作用下，发射荧光减弱甚至消退，称为荧光淬灭。
紫外线照射、高温（≥20℃）、苯胺、酚、硝基苯、I-等。
33荧光抗体技术：
采用荧光素标记抗体与组织切片中的抗原反应，洗涤分离后，荧光显微镜下观察特异荧光，显示抗原抗体复合物的存在及其部位。
可对组织细胞中的抗原进行定性和定位检测，或对自身抗体进行定性和滴度的测定。
34活化生物素：
修饰生物素的羧基可衍生出带有各种活性集团的衍生物，称为活化生物素
35免疫磁株（immunomagneticbead，IMB）：
采用聚苯乙烯等高分子材料包裹三氧化二铁等金属铁颗粒形成微球体，微球体表面与抗原、抗体和核酸等生物大分子结合后，即成为兼有免疫配基和磁性的免疫磁株。
免疫磁株与细胞结合后可采用以下两种方法分离细胞①磁力架法②流式细胞分选法
36细胞因子是由活化的免疫细胞及某些基质细胞表达并分泌的活性物质，其主要生物学功能是介导和调节免疫应答及炎症反应，其化学本质是蛋白质或多肽。
37细胞粘附因子是介导细胞间及细胞与细胞外基质间粘附作用的分子，其化学本质为糖蛋白，可以细胞膜表面表达和可溶性两种形式存在。
38集落刺激因子指能够刺激多能造血干细胞和不同发育分化阶段的造血祖细胞增殖、分化的细胞因子的统称。
39趋化因子吸引白细胞向一定方向移行，也可刺激白细胞活化的小分子蛋白。
40当某一类Ig显著增加，含量≥30g/L，理化性质一致时，称为单克隆蛋白（monoclonalprotein）,即M蛋白。
M蛋白见于免疫增殖病,如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病和轻链病等。
41选择性蛋白尿指数SPI=（尿IG/血清IG）/（尿TRF/血清TRF）
42冷球蛋白的概念：
在低温下发生沉淀，加温后又复溶的免疫球蛋白，多数冷球蛋白以免疫复合物形式存在。
。
43自身免疫耐受（autoimmune-tolerance）:
正常情况下，机体免疫系统能识别“自我”，对自身组织成分不发生免疫应答反应，或仅产生微弱的免疫应答，此为自身免疫耐受。
44自身免疫（autoimmunity）:
是指机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应，出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。
45自身免疫病（autoimmunedisease，AID）：
因自身免疫反应导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。
46混合性结缔组织病自身免疫病通常由Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ超敏反应所引发，当两或两当两种或两种以上的自身免疫病出现混合的临床表现时，称为混合性结缔组织病
47自身抗体（autoantibody是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白，是自身免疫和自身免疫病重要特征之一，某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体
48抗核抗体（ANA）：
是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。
ANA的性质主要是IgG，也有IgM、IgA和IgD。
49类风湿因子（rheumatoidfactor,RF）为抗变性IgG的自身抗体，主要是IgM型。
50肿瘤抗原（tumorantigen）：
是指在肿瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。
51肿瘤特异性抗原（TSA）为肿瘤细胞所特有，只表达于肿瘤细胞，而不存在于任何处于不同发育阶段的正常细胞。
可由化学物质诱发、病毒诱发和自发引起。
52肿瘤相关抗原（TAA）指非肿瘤细胞所特有的抗原成分，也少量存在于正常细胞，但在肿瘤发生的机体可异常表达，可分为胚胎性抗原和分化抗原两种类型。
53补体（completment,C）是人和动物血清中的一组对热敏感、与免疫功能有关，经活化后具有酶活性的糖蛋白。
54组织细胞化学技术可显示组织细胞中核酸、蛋白、糖原、脂类、酶和无机盐等化学成分，从而显示细胞结构和化学成分的变化。
组织细胞化学染色在血液学和病理学研究中具有重要意义。
55免疫组织化学技术：
采用标记特异性抗体，在组织原位进行抗原抗体反应和标记物的呈色反应，对相应的抗原进行定性、定位和定量测定的一项免疫标记技术，也称免疫细胞化学技术。
56抗原修复:
免疫组化在制片的过程中由于广泛的蛋白交联而使其组织的某些抗原决定簇发生遮蔽、致使免疫细胞化学的信号减弱或消失，采用酶消化或加热等方法，使遮蔽的组织抗原决定簇重新暴露，称为抗原修复。
抗原修复的方法？
57免疫荧光组化技术:
用荧光素标记的已知抗体（或抗原）作为探针，对待测组织、细胞标本中的靶抗原（或抗体），进行定位、定性和定量测定的方法。
58酶免疫组织化学技术定义:
是在一定条件下，应用酶标抗体（抗原）与组织或细胞标本中的抗原（抗体）发生反应，催化底物产生显色反应，通过显微镜识别标本中抗原（抗体）的分布位置和性质，也可通过图像分析技术达到定量的目的。
二、填空
1免疫系统的三大生理功能包括免疫防御、免疫自稳 、和免疫监视 。
2免疫应答的过程主要分为：
识别阶段（recognitionphase）、活化阶段（activationphase）、效应阶段（responsephase）
3免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
免疫器官按功能不同，分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
4外周免疫器官包括淋巴结脾脏粘膜相关淋巴组织（扁桃体、阑尾等）
5淋巴细胞T细胞B细胞NK细胞
6免疫辅助细胞吞噬细胞和树突状细胞
7免疫应答细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞肥大细胞
8主要的免疫分子免疫球蛋白/抗体补体系统细胞因子粘附分子白细胞分化抗原（存在形式？
）
9临床免疫检验可分为免疫细胞与免疫分子的检测和体液中微量物质的检测两个部分。
10抗原抗体间结合的力静电引力：
作用较强范德华力:
作用最小氢键:
最具特异性疏水作用:
作用最大
11免疫学检测技术的类型按测定反应体系的物理状态分为:
均相免疫测定和非均相免疫测定（均相免疫测定的代表技术）
12颗粒性抗原细胞细菌寄生虫卵（静脉注射抗原免疫动物，无佐剂辅助可产生抗体）
13可溶性抗原蛋白分子多糖分子核酸分子（皮内或皮下注射，需和佐剂共同免疫动物来产生抗体）
14粗制抗原分离纯化的方法超速离心法选择性沉淀盐析高分子聚合物沉淀凝胶层析离子交换层析亲合层析
抗原纯化的方法有哪些？
纯化后的抗原主要鉴定哪些特性？
方法：
超速离心法，选择性沉淀，凝胶层析，离子交换层析和亲合层析。
鉴定：
蛋白含量测定，分子量测定，纯度鉴定和免疫活性鉴定。
15常用于动物实验的佐剂：
弗氏佐剂
弗氏不完全佐剂－羊毛脂与液体石蜡的混合物
弗氏完全佐剂－弗氏不完全佐剂加卡介苗
16动物采血法颈动脉采血法心脏采血法静脉采血法
17按原理，间接凝集反应可分为如下4种类型：
正向间接凝集试验（用抗原致敏载体--检测抗体）反向间接凝集试验（用抗体致敏载体----检测抗原）间接凝集抑制试验（用抗原致敏载体—竞争法检测抗原）协同凝集试验，将实验例子与分类联系起来。
18直接Coombs试验检测红细胞上抗体（不完全抗体）
间接Coombs试验检测血清中的抗红细胞抗体
19沉淀反应分两个阶段抗原抗体特异性结合阶段形成肉眼可见免疫复合物的阶段
20沉淀反应可分三类液体内沉淀试验-----絮状沉淀试验免疫浊度测定
凝胶内沉淀试验-----单向扩散试验双向扩散试验
凝胶免疫电泳技术-----对流免疫电泳火箭免疫电泳免疫固定电泳
21免疫浊度测定分类：
透射免疫比浊法散射免疫比浊法免疫胶乳比浊法
22常用的凝胶有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶。
23放射线的计量单位放射性活度（用贝可勒尔（Becquerel,Bq）表示）
放射性比活度（用Bq/g或Bq/mmol表示）放射性浓度（用Bq/ml或Bq/l表示）
24直接化学发光剂吖啶酯
酶促反应发光剂鲁米诺及其衍生物
25免疫标记技术按标记物可分为：
酶免疫技术、荧光免疫技术、放射免疫技术、化学发光免疫技术、胶体金标记技术
按反应体系和标本分类：
免疫组化（组织切片）、免疫测定（液体）、固相膜免疫测定（以膜为载体）
26免疫标记技术的特点高敏感性、高特异性 仪器检测、自动化分析
27荧光抗体标记方法:
搅拌法、透析法
28荧光抗体技术的技术类型：
直接法和间接法
29荧光免疫分析技术类型：
非均相荧光免疫测定------时间分辨荧光免疫测定、荧光酶免疫测定
均相荧光免疫测定------荧光偏振免疫测定
30荧光抗体技术的应用：
①自身抗体检测（抗核抗体均质型）（抗核抗体斑点型）（抗核抗体核膜型）②病原体检测（细菌、寄生虫）③免疫病理检测（肿瘤）④细胞表面抗原和受体检测⑤特殊应用：
流式细胞术
31均相酶免疫测定主要用于检测小分子抗原或半抗原
32ELISA的反应系统组成和实验的原理。
反应系统：
Ø固相的支持物
Ø固相的抗原或抗体
Ø酶标记的抗原或抗体
Ø酶作用的底物
Ø待测标本
ØELISA检测仪
原理：
基本原理是：
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。
在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。
加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。
由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。
33常用的固相膜玻璃纤维素（fiberglass）膜、尼龙（nylon）膜、聚偏氟乙稀（polyvinylidenefluoride，PVDF）膜、硝酸纤维素（nitrocellulose，NC）膜
34DIGFA和GIGA的应用：
感染性疾病的诊断、妊娠、排卵的诊断、肿瘤标志、心肌标志
药物检测
35免疫印迹分拿三个阶段进行，实验的原理，说明一抗β-actin染色在实验中的意义。
三个阶段：
vSDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
v电转移
v酶免疫检测
实验原理：
①蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳时，它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。
在凝胶系统缓冲液中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠（sodiumdodecylsulfate,简称SDS），且分离胶缓冲液在pH8.3的情况下，蛋白质电泳迁移率主要取决于它的分子量，而与所带电荷和形状无关。
②经过SDS－PAGE分离的蛋白，在转移电泳条件下，由电场的阴极向阳极泳动，被转移到微孔膜上，即蛋白印迹到固相膜上；酶标记的抗体与膜上抗原反应，并在加入酶底物显色或发光，显示抗原和抗体特异性结合的条带。
β-actin为细胞内的管家蛋白，其染色做为内参照。
36亲合素、链霉亲合素标记被标记物：
酶、胶体金、异硫氰酸荧光素（FITC）
●标记方法:
A/SA标记HRP：
过碘酸钠法、戊二醛标记
37外周血单个核细胞分离：
Ficoll分离液法主要用于分离PMNC的单次差速密度
梯度离心分离法。
38淋巴细胞的分离：
贴壁黏附法、吸附柱过滤法、磁铁吸引法、Percoll分离液连续密度梯度离心法
39T细胞和B细胞的分离:
E花环沉降法、尼龙毛柱分离法
40目前多以CD3-、CDl6+、CD56+作为NK细胞的典型标志
CD19（B细胞的标志）CD40（成熟B细胞）CD80/86（活化的B细胞）
41可用于检测淋巴细胞转化的方法有形态学检查法、3H–TdR掺入法和MTT比色法
42中性粒细胞功能的检测：
细胞趋化功能的检测、吞噬和杀菌功能的检测
43根据结构和功能，细胞因子分6类：
白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、趋化因子、生长因子
44IFN是病毒等作用于细胞后产生的一类具有抗病毒、免疫调节、抗肿瘤等多功能糖蛋白。
45.概念Ig是指由浆细胞合成和分泌的一组具有抗体活性的蛋白质
46.异质性：
（分类、型的依据）
按照重链分为五类，分别是IgA、IgM、IgD、IgG和IgE；
按照轻链分为两型：
K型和λ型。
47.分布：
模型：
mIgD和mIgM，成熟B细胞的mIg为？
分泌型:
抗体
48.量：
Ig占血浆蛋白总量的20%;
血浆含量最多的Ig是IgG;
IgA主要分布在胃肠道和支气管分泌液
机体发生Ⅰ型超敏时，IgE升高;
5类Ig按含量由高向低排列（mg/L,μg/ml）为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。
49Ig亚类含量：
IgG1＞IgG2＞IgG3＞IgG4（掌握）
50M蛋白检测方法：
蛋白区带电泳、免疫比浊法、免疫电泳、免疫固定电泳
51异常单克隆免疫球蛋白临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等。
52自身免疫病按器官特异性分为两类：
系统性自身免疫病、器官特异性自身免疫病
53器官特异性：
桥本甲状腺炎、1型糖尿病、重症肌无力、自身免疫性肾小球肾炎
非器官特异性：
系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风湿关节炎
54常见的ANA荧光图形：
均质性、斑点型、核膜型、核仁型
55类风湿因子的检测方法：
胶乳颗粒凝集实验、速率散射比浊法、ELISA
56肿瘤标志物的分类：
•细胞肿瘤标志物：
位于细胞中的物质或抗原，如激素受体、白血病表型。
•体液肿瘤标志物：
病理情况下，浓度增加时可在血液、尿液或其他体液中测得的物质，如AFP、CA19-9、CEA、CA15-3等。
•肿瘤表型标志物：
酶、胚胎性抗原、异位性蛋白、激素等。
出现于癌细胞转化和临床进展阶段。
•肿瘤基因标志物：
基因突变、基因表达异常等，出现于癌前起动阶段。
57正常血清AFP<20μg/L
原发性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L
病毒性肝炎与肝硬化患者一般在300μg/L
58正常血清CEA<5.0μg/L
59CA125是卵巢癌和子宫内膜癌的肿瘤标志物，正常人血清中CA125的临界值为35U/ml
60补体系统的组成：
固有成分、调节蛋白、补体受体
61免疫化学法的技术类型：
单向免疫扩散、火箭免疫电泳、免疫比浊、酶免疫技术
62免疫组织化学技术标本的来源:
活体组织：
切片机切片各种体液、穿刺液
培养细胞
常用固定剂：
乙醇甲醇甲醛多聚甲醛乙醚丙酮
制片方法:
冰冻切片石蜡切片
63抗原的保存与修复常用的方法：
酶消化法盐酸水解暴露抗原法微波炉恢复抗原法高压锅恢复抗原法煮沸恢复抗原法
何为抗原修复，抗原修复的方法有哪些？
三、简答
1佐剂的作用机制
①改变抗原物理性状，延缓其降解和排除，更有效刺激免疫系统。
②刺激单核-吞噬细胞系统，增强其处理和提呈抗原的能力。
③刺激淋巴细胞增殖和分化。
2多克隆抗体和单克隆抗体各自特点
多抗含识别同一抗原不同表位的多种抗体抗体类型多（IgG,IgM）需用高纯度的抗原免疫动物难以再生和标准化
单抗仅含识别单一表位的抗体单一类型的抗体使用不纯抗原可获得特异性抗体高度的再生性
3絮状沉淀试验原理：
絮状沉淀试验是将抗原与相应抗体混合，在电解质存在的条件下，抗原抗体结合形成肉眼可见的絮状沉淀物。
4免疫浊度测定原理:
当可溶性抗原与相应抗体特异结合，二者比例合适时，在特殊的缓冲液中它们快速形成一定大小的抗原抗体复合物，使反应液体出现浊度。
利用现代光学测量仪器对浊度进行测定从而检测抗原含量。
5影响免疫浊度测定的因素
1.抗原抗体的比例：
反应体系中保持抗体过量
2.抗体的质量：
特异性强、效价高、亲和力强的多抗；多用R型抗体
3.抗原抗体反应的溶液：
PH为6.5～8.5，PBS
4.增浊剂：
吐温-20，PEG等
6凝胶内沉淀试验原理：
可溶性抗原和相应抗体在凝胶中扩散，形成浓度梯度，在抗原抗体相遇并且浓度比例适当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。
7沉淀环直径d与待测标本含量c的两种计算方法
Mancini曲线：
大分子抗原（IgM）时间扩散＞48h，常数K＝C∕d2普通坐标纸曲线
Fahey曲线：
小分子抗原（IgG,IgA）扩散时间24h常数K＝logC∕d半对数坐标纸曲线
8火箭免疫电泳原理:
电泳时凝胶中抗体不移动，样品孔中的抗原向正极泳动，随着抗原量的逐渐减少，抗原泳动的基底区越来越窄，抗原抗体分子复合物形成的沉淀线逐渐变窄，形成一个形状如火箭的不溶性复合物沉淀峰，抗体浓度固定时，峰的高度与抗原量呈正相关。
单向免疫扩散＋电泳（定量检测技术）
9免疫电泳区带电泳＋双向扩散
10免疫固定电泳区带电泳＋沉淀反应
原理与免疫电泳不同之处，是将抗血清直接加于电泳后的蛋白质区带表面，抗原抗体在凝胶中直接发生沉淀反应，在适当位置形成抗原抗体复合物，经染色后，可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。
11单向扩散试验（平板法）定量试验
原理：
抗体与待测的抗原,在两者比例合适的部位结合形成沉淀环。
环的大小与抗原的浓度成正相关。
常用于临床检测的项目有IgG、IgA、IgM、C3、C4
12荧光免疫分析的基本原理将抗原抗体反应与荧光物质发光分析相结合，用荧光检测仪检测抗原抗体复合物中特异性荧光强度，对液体标本中微量或超微量物质进行定量测定。
13荧光酶免疫测定基本原理碱性磷酸酶标记抗体或抗原，固相载体包被抗原或抗体，酶分解4-MUP，脱磷酸根基团形成4-MU，360nm激发光照射，发出450nm荧光
14酶免疫技术的原理用酶标记抗原或抗体，抗原和抗体反应后，酶催化底物产生易于检测的，并被放大的信号,通过仪器检测信号来实现高敏感度检测抗原-抗体反应的目的。
15常用的酶及其底物：
①辣根过氧化物酶（HRP）
常用底物：
•邻苯二胺（OPD）：
反应显橙黄色，终止液作用后为黄色,应避光，致癌性。
最大吸收波长492nm。
•四甲基联苯胺（TMB）：
反应后呈蓝色，终止液作用后为黄色,无需避光，
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