新TPSA方法学验证报告.docx
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新TPSA方法学验证报告
总前列腺特异性抗原TPSA检测系统/方法的分析性能验证评价
验证的内容：
正确度、精密度、线性范围的确认、可报告范围的验证、干扰物质及参考区间的确认
验证人员：
王爱林马力张卫李琳
一、检测系统信息
项目：
TPSA仪器名称全自动电化学发光免疫分析仪
仪器型号Cobase601
试剂及厂商：
德国罗氏诊断有限公司
检测方法：
双抗体夹心法
二、厂商提供的相关参数
需验证参数
厂商参数
验证结果
分析灵敏度
0.003ng/ml
沿用厂家试剂说明书
线性范围
0.1-50ng/ml
0.02~88.80ng/ml
可报告范围
0.1-50ng/ml
0.02-97.68ng/ml。
参考区间
0-4ng/ml
已验证
三、验证过程
1、正确度：
目的：
评价仪器测量结果与真值的一致程度。
通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性。
评价方法：
参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准,最近一次参加卫生部室间质评
正确度验证试验数据记录表
项目名称/单位
前列腺特异性抗原（TPSA）/ng/ml
检测设备/编号
RocheE601/103
检测试剂/批号
Roche试剂/161439
校准品/批号
Roche校准品/158270
质控品/批号
Roche质控品（PCTM）/158274
检测方法
双抗体夹心法
最近一次参加的卫生部室间质评
回报日期：
样本
编号
我室
结果
靶值
PT允许范围
PT
得分
与靶值
偏倚
VIS允许范围
VIS
得分
201111
3.8
3.8
3.0-4.6
100%
0.00
-
-
201111
42.5
41.6
33.3-49.5
100%
2.16
-
-
201111
30.9
30.1
24.1-36.1
100%
2.66
-
-
201111
15.0
14.3
11.4-17.2
100%
4.9
-
-
201111
2.5
2.5
2.0-3.0
100%
0.00
-
-
判断标准：
<1/2CV总误差：
12.5%
正确度验证结果：
■满足要求□不满足要求
结论：
Cobase601分析检测系统所检测的项目TPSA正确度在允许范围内,保证检验结果准确可靠，可以满足临床需求。
统计者：
统计日期：
2精密度（Precision）
批内精密度
目的：
考察仪器检测方法的随机误差。
原理：
在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。
方法：
选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）20份，测量前先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定10次，测量结束后再做质控，质控结果在控制范围内，计算SD，CV，得到批内精密度。
标本来源：
高低值标本均为混合血清
结果：
本室TPSA批内精密度低值CV为：
1.4%高值CV为：
1.3%
结果判断方式：
依据卫生部临床检验中心室间质量评价标准的总误差（CV总误差）为评判标准
重复性精密度验证试验数据记录表
项目名称/单位
前列腺特异性抗原（TPSA）/u/nl
检测设备/编号
RocheE601/103
检测试剂/批号
Roche试剂/161439
校准品/批号
Roche校准品/158270
质控品/批号
Roche质控品（PCTM）/158274
检测方法
双抗体夹心法
重复性精密度数据
低值样本条码号：
混合样本
高值样本条码号：
混合样本
测定
次数
测定
结果
测定
次数
测定
结果
测定
次数
测定
结果
测定
次数
测定
结果
1
1.24
11
1.23
1
16.91
11
17.34
2
1.26
12
1.26
2
17.56
12
17.05
3
1.23
13
1.25
3
17.06
13
17.32
4
1.28
14
1.27
4
17.39
14
16.90
5
1.23
15
1.24
5
16.97
15
17.35
6
1.27
16
1.26
6
17.13
16
17.08
7
1.23
17
1.23
7
17.24
17
17.56
8
1.28
18
1.27
8
17.12
18
16.87
9
1.24
19
1.25
9
17.53
19
17.34
10
1.27
20
1.27
10
16.94
20
16.93
低浓度均值：
1.25标准差：
0.02变异系数：
1.4％
高浓度均值：
17.18标准差：
0.23变异系数：
1.3％
判断标准：
<1/4CV总误差：
6.25%
重复性精密度验证结果：
■满足要求□不满足要求
结论：
本室所检测项目TPSA低值、高值重复性精密度均在允许范围内，可接受。
检测者：
王爱林、李琳检测日期：
2011-07
审核者：
审核日期：
日间精密度：
目的：
考察目前实验室检测方法批间精密度
原理：
在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。
方法：
新鲜混合血清（高值、低值）分装20份冷冻，每天取两份随标本连续测定10天，测定前定标做质控，测定结束做质控，且结果在控制范围内，计算CV，SD，得到日间精密度。
结果：
本室TPSA日间精密度平均低值CV：
2.3%平均高值CV：
2.2%
结果判断方式：
依据卫生部临床检验中心室间质量评价标准的总误差（CV总误差）为评判标准
日间精密度验证试验数据记录表
项目名称/单位
前列腺特异性抗原（TPSA）/ng/ml
检测设备/编号
RocheE601/103
检测试剂/批号
Roche试剂/161439
校准品/批号
Roche校准品/158270
质控品/批号
Roche质控品（PCTM）/158274
检测方法
双抗体夹心法
低值质控品批号：
混合样本
高值质控品批号：
混合样本
测定
天数
测定
结果
测定
天数
测定
结果
测定
天数
测定
结果
测定
天数
测定
结果
1
1.49
11
1.46
1
12.43
11
12.82
2
1.50
12
1.48
2
12.58
12
12.46
3
1.44
13
1.45
3
12.32
13
12.53
4
1.46
14
1.48
4
12.47
14
12.64
5
1.52
15
1.48
5
12.38
15
12.86
6
1.47
16
1.42
6
11.95
16
12.52
7
1.42
17
1.46
7
12.26
17
12.06
8
1.38
18
1.48
8
12.18
18
11.97
9
1.44
19
1.43
9
12.44
19
12.28
10
1.46
20
1.41
10
12.0
20
12.04
低浓度均值：
0.46标准差：
0.03变异系数：
2.3％
高浓度均值：
12.36标准差：
0.27变异系数：
2.2％
判断标准：
<1/3CV总误差：
8.33%
日间精密度验证结果：
■满足要求□不满足要求
结论：
本室所检测项目TPSA低值、高值日间精密度均在允许范围内。
检测者：
王爱林、李琳检测日期：
审核者：
审核日期：
3线性范围（Linearityrange,AMR）
目的：
在确定某项目检测上限的同时检测其上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。
标本要求：
高值标本可使用病人混合血清。
一般地样本的高值推荐在AMR上限的90％，低值推荐在AMR下限的10％，但这不是绝对的规则。
最好有5个或以上的系列浓度的实验样品，数据点数不得低于4个，浓度范围遍布整个预期可报告范围。
方法：
a）以50ul为一个体积单位，将高值标本与低值标本以3：
1、2：
2、1：
3的体积比例混合，加上高低值标本共5个标本按照由低到高测定，记录结果。
b）线性统计：
以直接测定结果计算得出的相应浓度为X，以通过稀释测定结果为Y，回归方法学统计，得到a、b及r值。
c）结果判断：
若b在0.97-1.03范围内，r2>0.95，作a与0有无显著性差异的t检验，如果P>0.05，则可直接判断线性范围在实验已涉及浓度。
若b不在0.97-1.03范围内，a较大，舍去高值或低值组数据，另做回归统计，直至缩小的分析范围其回归方程的a和b的判断符合要求，则该范围为线性范围。
线性范围验证试验数据记录表
项目名称/单位
前列腺特异性抗原（TPSA）/ng/ml
检测设备/编号
RocheE601/103
检测试剂/批号
Roche试剂/161439
校准品/批号
Roche校准品/158270
质控品/批号
Roche质控品（PCTM）/158274
检测方法
双抗体夹心法
厂家声明线性范围：
0~120ng/ml，线性方程：
Y=bX+a，R2＞0.95
样本编号
配制比例
测定值1
测定值2
测定均值
预期值
差值
1
4L
0.02
0.02
0.02
0.02
0
2
3L+1H
23.23
24.66
23.95
22.22
1.73
3
2L+2H
46.12
47.52
46.82
44.41
2.41
4
L+3H
68.23
69.11
68.67
66.60
2.07
5
4H
88.79
88.81
88.80
88.80
0
平均斜率b
1.174
采用线性回归，以预期值为X，以按比例稀释的实测均值为Y，得线性方程：
Y=1.0015X+1.174
线性回归散点图：
计算每一稀释度测定均值和预期值的差值。
以预期值为横轴，差值为纵轴，制作线性差异图。
回归方程：
Y=1.0015X+1.174■b在0.97-1.03范围内□b不在0.97-1.03范围内
a的P值：
0.3395■a与0无显著性差异□a与0有显著性差异
R2：
0.9985■R2≥0.95□R2＜0.95
直线回归方程是否可接受■可接受□不可接受
线性范围延伸：
●在直线回归方程可接受基础上，如果验证的线性范围小于厂家申明的线性范围，将验证的上限扩展为（上限+上限*10%），验证下限扩展为（下限-下限*90%）；
●若验证上限超出厂家声明上限，以厂家线性范围为准，若没有超出厂家声明上限，以自行验证为准；
扩展后的线性范围：
0.02-97.68ng/ml。
结论：
在标本状态良好无干扰的情况下，已验证TPSA测定结果在0.02~88.80ng/ml范围内呈线性，进行线性范围延伸后，可使用的线性范围为0.02-97.68ng/ml。
检测者：
李琳王爱林检测日期：
审核者：
审核日期：
4临床可报告范围（Clinicalreportablerange,CRR）
目的：
分析各稀释浓度的线性关系，确定最高稀释倍数，从而确保高值样本报告的准确性。
原理：
未经过任何处理的病人检验标本，通过检测系统检测得到的可靠结果范围。
方法;本实验室制定的PSA的可报告范围（CRR）沿用项目的检出限范围，以满足临床需求，不予以验证
5分析灵敏度（AnalyticalSensitivity）:
直接引用罗氏试剂说明书上提供的分析灵敏度：
0.600U/ml
6干扰物质
干扰物质对本项目的影响大小沿用厂商参数，详细内容见本项目SOP。
7参考区间（Referenceintervals）:
目的：
选择20份体检合格的健康人标本，在检测系统上进行测定，对结果进行统计并与仪器说明书提供的参考区间进行比较。
原理：
收集20例正常健康人血清标本及时检测，要求其年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许10%的数据超过所验证的参考范围，否则需建立参考范围。
验证范围：
0-4ng/ml
方法：
PSA标本的要求
1、体检合格健康的筛选者
2、脂血、溶血均勿用
3、禁止在临床检查（肛诊，尿道插管等）之后检验
4、
结果：
统计方式R=测定的结果在参考范围例数≥90%即合格
总测定例数
生物参考区间数据及验证记录表
项目名称/单位
总前列腺特异性抗原（TPSA）/ng/ml
检测设备/编号
RocheE601/103
检测试剂/批号
Roche试剂/159299
校准品/批号
Roche校准品/161204
质控品/批号
Roche质控品（PCTM）/158274
检测方法
双抗体夹心法
试剂说明书提供参考范围：
0-4ng/ml
各编号样本测定情况
序号
条形码号
性别
年龄（岁）
测定结果
1
1004419335
男
32
1.08
2
1004419199
男
56
0.813
3
1004419509
男
56
1.03
4
1004419967
男
37
1.19
5
1004419659
男
36
0.347
6
1004419284
男
54
1.11
7
1004420811
男
78
0.697
8
1004419236
男
55
1.18
9
1004419408
男
61
0.779
10
1004419775
男
36
1.21
11
1004419852
男
37
0.464
12
1004419839
男
41
1.01
13
1004419209
男
40
3.90
14
1004419280
男
59
0.340
15
1004427258
男
50
0.645
16
1004427438
男
56
0.975
17
1004427309
男
45
0.876
18
1004380611
男
40
1.08
19
1004429415
男
70
0.807
20
1004430111
男
39
1.04
结果判断：
R=测定的结果在参考范围例数≥90%即合格
总测定例数
R值：
100%■满足要求□不满足要求
结论：
厂家试剂说明书提供参考范围：
0-4ng/ml
本实验室所检测的20个标本其检测结果均在验证区间内，符合要求，故本实验室参考区间验证通过。
检测者：
检测日期：
审核者：
审核日期：
四、总结（Summary）
罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪检测系统的精密度、正确度、线性范围、可报告范围及生物参考区间通过验证。
通过以上各项性能验证室验的结论，罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪检测系统达到检测要求，保证检验结果准确可靠，可以满足临床需求
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