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微生物的形态结构及其与环境的关系

第二章微生物的形态结构及其与环境的关系

本章要点:

1.显微镜下微生物形态结构的观察及观察样品的制备

2.原核微生物(细菌、放线菌、蓝细菌)的大小、结构、形态、繁殖

3.真核微生物(原生、后生动物、真菌、藻类)的大小、形状、营养、繁殖

4.病毒的大小、结构、特点、培养、增殖

2.1微生物形态结构的观察

2.1.1显微镜

大约在16世纪末,荷兰的眼镜商詹森制造的显微镜是第一台复合式显微镜。

1665年,英国科学家罗伯特·胡克用他的显微镜(图2-1)观察软木切片的时候,惊奇的发现其中存在着一个一个“单元”结构,胡克把它们称作“细胞”图。

荷兰人安东尼·冯·列文虎克制造的显微镜(图2-2)让人们大开眼界,人们有时候把列文虎克称为“显微镜之父”。

2-1罗伯特·胡克的显微镜图2-2列文虎克的显微镜

2.1.2显微镜观察样品的制备

具体步骤为:

取一片干净的载玻片在实验台上,用一支滴管吸取试管中藻类培养液于载玻片的中央,用干净的盖玻片覆盖在液滴上(注意不要有气泡)即成标本片(如图2-3)。

2.2原核微生物

原核微生物的核原始且发育不全,核质裸露,与细胞质没有明显的界线,称为拟核或类核。

原核微生物没有细胞器,只有由细胞质膜内陷形成的不规则的泡沫结构体系,如中间体和光合作用层片及其它内折,也不进行有丝分裂。

2.2.1细菌

细菌是指一类单细胞、细胞细短、结构简单、细胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物,是一个完整的生命体。

细菌广泛分布于自然界中,相同或相似的物种通常遍布世界的各个角落。

一.细菌的形态与大小

细菌形态学包括细菌的形状、大小、结构以及彼此之间的空间关系。

就单个细胞而言,细菌的常见形状主要有球状、杆状和螺旋状三种,球状细菌简称球菌,杆状细菌简称杆菌,螺旋状细菌简称螺旋菌(图2-4)。

图2-4细菌的基本形状

细菌的形状和大小随种类不同而有很大差异,表示细菌大小的单位一般用微米(μm)。

球菌的大小用菌体直径,杆菌和螺旋菌以其宽度(即直径)×长度来表示。

细菌的形状和大小受多种因素的影响,如培养温度、培养时间、培养基组分与浓度等都可能引起细菌形状和大小的改变。

一般情况下,处于幼龄阶段或生长条件适宜时,细菌表现出特定的形状,但比成熟或老龄的细菌要大。

在较老的培养物中或不适宜的培养条件下,细胞尤其是杆菌常出现不正常的形状,如细胞膨大、出现梨形、产生分支、菌体伸长等不规则的形态。

若将老的培养物转移到新鲜培养基中或适宜的培养条件下,细胞又可恢复原来的形态。

培养基中渗透压的增加也会导致细胞变小。

二.细菌细胞的结构

原核细胞的结构包括基本结构和特殊结构。

前者包括细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体、核糖体、异染粒等,为多数原核细胞所共有,后者如鞭毛、菌毛、荚膜、芽孢等,仅为部分细菌或一般细菌在特殊环境下才有,其细胞结构如下(图2-5)。

图2-5细菌细胞结构

细胞壁是位于细胞表面,内侧紧贴细胞质膜的一层具有一定硬度和韧性,略具弹性的外被结构,约占细胞干重的10%~25%。

细胞壁由多层堆积的肽聚糖组成。

肽聚糖由N-乙酰基葡萄糖胺、N-乙酰基胞壁酸以及一些氨基酸、如丙氨酸、谷氨酸、赖氨酸或二氨庚二酸等组成。

细胞膜是一层柔软而富有弹性的具有选择性的半透性薄膜,其外侧紧贴于细胞壁内层,而内侧则包围着整个细菌的原生质,又称为原生质膜或质膜,其中含30%~40%的脂类,2%的多糖和60%~70%的蛋白质。

细胞质是在细胞膜以内,除核物质以外的无色透明、粘稠的复杂的胶体,亦称原生质。

它由蛋白质、核酸、多糖、脂类、无机盐和水组成。

细菌作为原核微生物,其核没有核膜包裹,没有核仁和固定的形态,故称为拟核或核质体等。

它由脱氧核糖核酸(DNA)纤维组成,即由一条环状双链的DNA分子高度折叠缠绕形成的。

拟核携带着遗传信息,是重要的遗传物质。

2.2.2古细菌

一.产甲烷菌

产甲烷菌是一群形态多样,具有特殊细胞成分,可代谢H2和CO2以及少数几种简单有机物生成甲烷的严格厌氧的古细菌。

产甲烷菌包括食氢产甲烷菌和食乙酸产甲烷菌2个生理类群,是厌氧食物链中的最后一组成员。

产甲烷菌广泛分布于自然界,常见于同氧气隔绝的厌氧反应器、底泥、沼泽、稻田、垃圾填埋场、反刍动物瘤胃等环境中。

二.极端嗜盐菌

极端嗜盐菌一般定义为能够在1.5mol/L盐度环境中生长的微生物,多数为严格好氧菌,也有兼性厌氧菌,常见于盐湖、盐场、盐腌食品等环境中。

三.极端嗜热菌

极端嗜热菌能够在100℃以上的水中生活,最适生长温度为80℃,分布于火山地区,富硫温泉、富硫水体中。

四.无细胞壁古细菌

无细胞壁古细菌又称热源体,类似于支原体,无细胞壁,生活于能自身发热的煤垃圾堆和酸热温泉中,适宜生长温度为55℃,适宜pH值为2。

五.硫酸盐还原菌

硫酸盐还原菌(SRB)是指一类能把硫酸盐、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等硫氧化物以及单质硫还原成硫化氢这一生理特征细菌的统称。

硫酸盐还原菌大多数是中温性的,一般在30℃左右,生长最适pH值一般在中性偏碱范围,培养基置备时一般灭菌前将pH值调至7.0~7.6范围。

2.2.3放线菌

一.放线菌的形态结构

放线菌的形态比细菌复杂,但仍属于单细胞原核微生物。

在显微镜下,放线菌呈分支丝状,这些细丝一样的结构叫做菌丝。

放线菌菌丝直径与细菌相似,小于1µm。

菌丝细胞的结构与细菌相似。

根据菌丝形态和功能的不同,放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和刨子菌丝三种。

链霉菌属是放线菌中最经常被分离到的属,如图2-6所示。

图2-6放线菌菌丝形态

二.放线菌的菌落特征

放线菌在固体培养基上形成与细菌不同的菌落特征。

放线菌菌丝相互交错缠绕形成质地致密的小菌落,干燥、不透明、难以挑取。

大量孢子覆盖于菌落表面时,形成粉末状或颗粒状的典型放线菌落,由于基内菌丝和孢子常有颜色,使得菌落的正反面呈现出不同的色泽。

放线菌主要通过形成各种孢子来繁殖后代,也能通过菌丝断裂繁殖。

2.2.4蓝细菌

蓝细菌为单细胞,可形成丝状或非丝状的群体,非丝状群体为板状、中空球状、立方形等各种形状。

蓝细菌细胞只有原始核,没有核膜和核仁,只有染色质、叶绿素,没有叶绿体、细胞核等细胞器。

原生质内含大量叶绿素α、胡萝卜素、藻胆素。

同化产物以蓝细胞淀粉为主,并含藻毒素。

细胞壁常由外界果胶质、内层纤维系两层组成。

单细胞及非丝状群体常具有个体或群体胶被。

丝状群体细胞壁外常具有胶鞘,有时具有层理和颜色。

蓝细菌分布较广,普遍生长在淡水、海水、潮湿土壤、树皮及岩石中。

耐高温和干燥,在沙漠的岩石缝隙中也能找到。

它在污水处理和水体自净中起着积极的作用,在氮、磷丰富的水体中生长旺盛,多喜生于含氮量较高,有机质较丰富的碱性水体中,一般喜较高的温度,在夏秋季节可大量繁殖,形成水华。

2.2.5其它原核微生物

支原体、立克次氏体、衣原体是与人类关系较为紧密的几种原核微生物,它们的性质介于细菌与病毒之间,都是致病菌或病原体(图2-7)。

2.3真核微生物

2.3.1原生动物

原生动物(Protozoa)属于原生生物界,是动物中最原始、最低等、结构最简单的单细胞动物,属于真核生物,广泛分布在海水、淡水和潮湿的土壤中,多为单细胞,细胞结构较复杂。

除常规的结构外,也具有特殊功能的结构。

一.细胞形态和结构

原生动物没有细胞壁,细胞的最外层是细胞质膜,细胞质膜的化学组成和功能与其他真核生物的膜相同。

原生动物有少量的内质网膜,还具有线立体、质体、细胞核和其它膜细胞器。

原生动物形态各异,其细胞大多数在10~300μm之间,少数细胞可达3~4mm。

体形大多为球形、卵球形。

二.原生动物的营养

原生动物主要进行动物性营养,即以固态食物为食,食物包括细菌、藻类、其他动物和碎屑等。

三.原生动物的繁殖

原生动物的繁殖可为无性繁殖和有性繁殖两类(一般进行无性繁殖)。

无性繁殖是最简单的细胞分裂,即细胞质和细胞核一分为二,即常常通过有丝分裂进行,类似于原核生物的二分裂。

严格地说,有性繁殖不是专门的繁殖方式,而是细胞核的更新现象。

四.原生动物的类群

根据运动方式的不同,原生动物可分为如下4个主要种群:

鞭毛虫纲、肉足纲、纤毛虫纲(废水生物处理系统中有2种完全不同的纤毛虫,即游泳型纤毛虫和固着型纤毛虫)、孢子虫纲。

2.3.2微型后生动物

一.轮虫

轮虫是多细胞动物中比较简单的一种,是软体动物,有头、躯干以及逐渐变细的足。

在废水生物处理过程中,轮虫可作为指示生物。

当活性污泥中出现轮虫时,往往表明处理效果较好,但数量太多,会大量撕扯生物絮体,则有可能破坏污泥的结构,使污泥松散而上浮。

二.甲壳类动物

水处理中遇到的多为微型甲壳类动物,这类生物的特点是具有坚硬的甲壳,通常有一对触角,通过鳃呼吸。

微型甲壳纲动物一般有一个较大的头,一个短躯干,而且与较大的甲壳纲动物相比,躯干附着器上的节数较少,常见的有水虱和剑水蚤。

三.其他小动物

水中有机淤泥和生物黏膜上常生活着一些小动物,如线虫和昆虫(包括其幼虫)等。

在废水生物处理的活性污泥和生物膜中都可发现线虫。

2.3.3真菌

真菌是指单细胞(包括无隔多核细胞)和多细胞,不能进行光合作用,靠寄生或腐生方式生活的真核微生物。

真菌与细菌、古细菌一起构成自然界的初级分解者,他们负责氧化死亡的有机物,分解产生无机物返回自然环境,通过其它生命形式的作用进入下一个循环。

真菌是异养的真核生物,具有丝状或管状结构,除了一些单细胞形式如酵母以外,真菌是由大量丝状物组成的。

一.霉菌

霉菌是一类丝状真菌,凡生长在营养基质上形成绒毛状、蜘蛛网状或棉絮状菌丝体的真菌,统称为霉菌。

霉菌以孢子的形式繁殖,可进行有性繁殖和无性繁殖,多数不能运动,但有些生殖细胞可运动。

1.霉菌的形态与结构

霉菌菌体均由分枝或不分枝的菌丝构成。

菌丝在显微镜下呈管状,直径约3-10μm,比一般的细菌和放线菌菌丝大几到几十倍。

根据菌丝是否存在隔膜,可将霉菌菌丝分为无隔菌丝和有隔菌丝两类(图2-8)。

图2-8霉菌菌丝

A.无隔菌丝;B.有隔菌丝两类

2.霉菌菌丝体及其分化

在固体培养基上,霉菌的菌丝依其生理功能的不同可分为两种:

一种是伸入培养基内负责吸收和输送营养的菌丝,称为基内菌丝或营养菌丝,另一种是与培养基表面相连接的伸向空中生长的菌丝,称为气生菌丝。

3.霉菌菌落形态

菌落一般呈圆形或近圆形,但外观差别很大,可归纳为棉絮状、绒毛状、蛛网状,越接近菌落中心,颜色一般也深,有些霉菌因产生色素,至使菌落背面也带有颜色。

二.酵母菌

酵母菌(yeast)一般泛指能发酵糖类并以芽殖或裂殖的方式进行无性繁殖的一类单细胞真菌。

它是人类实践中应用较早的一类微生物,与人类的生活生产关系密切。

1.酵母菌的形态与大小

酵母菌的细胞形态一般为球形、椭圆形、卵形或香肠形等,是无鞭毛不运动的单细胞真菌。

酵母菌细胞的大小一般为(3~10)µm×(5~20)µm,最长的可以达到100µm,其体积比细菌大20多倍。

2.酵母菌的细胞结构

酵母菌的细胞主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡和线粒体等构成(图2-9)

图2-9酵母菌细胞结构

3.酵母菌的繁殖和菌落形态

酵母菌的繁殖方式可分为无性繁殖和有性繁殖。

无性繁殖主要有芽殖、裂殖、产生无性孢子(节孢子、掷孢子、厚垣孢子)等方式,有性繁殖则以形成子囊和子囊孢子进行,酵母菌的无性繁殖主要以芽殖为主。

酵母菌菌落形态一般呈圆形或近圆形,边缘圆整,颜色均一,多呈乳白色或浅黄色,少数呈红色(如红酵母)。

菌落表面一般较湿润、光滑。

菌落隆起呈半圆形或圆形,菌落质地均匀,较粘稠,呈固态油脂状,容易挑起。

多数假丝酵母的菌落则较平坦,表面皱缩粗糙,边缘不整齐或呈缺刻状。

三.蕈菌

蕈菌(mushroom)又称为伞菌,是一类能形成形状、大小、颜色各异

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