液相色谱与质谱联用技术的各种模式探索LCMS样本.docx

液相色谱与质谱联用技术的各种模式探索LCMS样本.docx

《液相色谱与质谱联用技术的各种模式探索LCMS样本.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《液相色谱与质谱联用技术的各种模式探索LCMS样本.docx（8页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

液相色谱与质谱联用技术的各种模式探索LCMS样本

液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）各种模式摸索

摘要：

为了理解LC-MS重要构造和基本原理，学习LC-MS基本操作办法，以及掌握LC-MS六种操作模式特点及应用。

通过邻苯二甲酸酯液相色谱-质谱联用技术各种模式摸索办法，以及实验条件控制。

依照质谱图可以懂得诸多物质信息。

液相色谱-质谱联用技术具备辨别率高、质量范畴广、扫描快和敏捷度高长处。

核心词：

LC-MS模式摸索质谱图

AbstractTolearnthebasicprinciplesandthemainstructureofLC-MSandstudythebasicoperationofLC-MSmethods，masterfeaturesandapplicationtosixLC-MSmodeofoperation.Byliquidchromatography-massspectrometrytechniquestoexplorevariousmodesofapproach，aswellascontrollingtheexperimentalconditions.Accordingspectrumcanknowalotofinformationmaterial.Liquidchromatography-massspectrometrytechnologyhashighresolution，widemassrange，highsensitivityandfastscanningadvantages.

Keywords：

LC-MSModeExplorationSpectrum

近年来，随着工业生产和塑料制品广泛使用，邻苯二甲酸酯不断进入环境，普遍存在于土壤、底泥、大气、水体和生物体等环境样品中，成为环境中无所不在污染物。

而邻苯二甲酸酯类具备较弱环境雌激素成分，具备影响生物体内分泌和导致癌细胞增殖作用。

环境内分泌干扰物是指能变化机体内分泌功能，并对机体、后裔或（亚）种群产生有害效应环境物质。

由于环境内分泌干扰物对人和动物有种种不良影响，对环境内分泌干扰物研究成为关注焦点。

本次实验通过LC-MS六种办法，从混合物中测得邻苯二甲酸酯（DMP）。

液相色谱-质谱法（LC-MS）分析模式有六种：

分别是：

①全扫描模式方式（Scan）：

扫描质量范畴覆盖被测化合物分子离子和碎片离子质量，得到是化合物全谱，可以用来进行谱库检索，普通用于未知化合物定性分析；②选取离子监测模式（SIM）：

跳跃式地扫描某几种选定质量，得到不是化合物全谱。

重要用于目的化合物检测和复杂混合物中杂质定量分析。

③子离子扫描模式（Product Scan）：

第一种质量分析器固定扫描电压，选取某一质量离子（母离子）进入碰撞室，发生碰撞解离产生碎片离子，第二个质量分析器进行全扫描，得到所有碎片离子都是由选定母离子产生子离子，没有其他干扰。

重要用于化合物构造分析④母离子扫描模式（Precursor Scan）：

第一种质量分析器扫描电压选取母离子（如分子离子），进入碰撞室碰裂后，第二个质量分析器固定扫描电压，只选取某一特性离子质量，该特性离子是由所选取母离子产生，由此得到所有能产生该子离子母离子谱。

重要用于同系物分析；⑤中性丢失扫描模式（Neutral Loss）：

第一种质量分析器扫描所有离子，所有离子进入碰撞室碎裂后，第二个质量分析器以与第一种质量分析器相差固定质量联动扫描，检测丢失该固定质量中性碎片（如质量数15、18、45）离子对，得到中性碎片谱。

重要用于中性碎片分析。

⑥多反映监测模式（MRM）：

第一种质量分析器选取一种（或各种）特性离子，通过碰撞解离，到达第二个质量分析器再进行选取离子检测，只有符合特定条件离子才干被检测到，由于是两次选取，比单四极质量分析器SIM方式选取性、排除干扰能力、专属性更强，信噪比更高。

重要用于定量分析。

一、实验某些

1.仪器与试剂：

液相系统（VarianProStar）、Varian410自动进样器，Varian310LC-MS、VarianInertsil20RBAXEclipsC18（150mm*4.6mm,5μm）、甲醇、超纯水、原则溶液（用甲醇配制邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯）

2.条件设立：

色谱条件：

流动相（80%甲醇+20%水）、流速（0.7ml/min）、扫描时间（10min）;离子源模式：

电喷雾电离（ESI）、正离子模式；扫描条件：

Detector：

1000V；Needle：

5000V；Shield：

600V；Spray Chamber Temperature：

50℃；Nebulizing Gas Pressure：

55psi；Drying Gas Pressure：

18psi，Drying Gas Temperature （℃）：

300℃，Capilary Voltage50（V），Coll.Energy 20（v）

3.实验测定：

①开机，启动电脑选取systemcontrol,打开二元泵，脱气机，自动进样器电源，按下wash按钮，洗针，等待联机②建立办法，点击工具栏“vieweditmethods”图标，选取“createanewmethodflie”,点击next,至fish，参数设立（梯度表，自动进样，质谱有关参数设立），激活办法，在“systemcontrol”界面上，用‘file/activatemethod激活办法，启动电喷雾，点击“turnsprayon”③进样办法，点击“file/newsamplelist”，建立新样品表，设立进样次数，进样体积，进样盘位置，文献位置，开始测定。

并再次确认用法④关机：

关泵，关电喷雾器及进样针，降压到10bar一下，关闭二元泵，脱气机，自动进样器，电源，清洁喷雾针，shield及腔室输入standby，待机。

4.实验成果：

4.1全扫描模式（Q1=50m/z-400m/z，capli=50,Req.Dwell=0.5）

图一

图二

4.2选取离子检测模式（Q1=163m/z、217m/z、capli=50,Req.Dwell=0.5）

图三

图四

4.3子离子扫描模式（Q1=195.1m/z、217m/z、Q3=50m/z-200m/z、capli=25,Req.Dwell=0.5）

图五

二、成果分析与总结：

1.成果分析：

①从图一和图二可知，全扫描模式下，只有两个峰浮现，质荷比分别为217m/z，245m/z，浮现这种因素也许有：

噪声过大，导致其她峰无法测出；等梯度洗脱时，极性小，峰流出时间变快，导致没有较好分开。

这两个峰分别是查阅文献值DMP（194m/z）、DEP（222m/z）中性结合氢（1m/z），再结合因在玻璃容器中Na（21m/z），因此才会在质谱图中显示质荷比分别为217m/z，245m/z。

②从图三和图四可知，选取性扫描模式下，由于梯度洗脱因素，导致依然只有两个峰，质荷比为217m/z，245m/z。

而在图四中，尚有162.9m/z，查阅文献值DMP子离子是163m/z，阐明产生了子离子。

③从图五可知，子离子模式下，质荷比为162.8m/z，查阅文献值DMP子离子是163m/z，阐明是子离子模式。

④从五张图中，可以懂得扫描时间都在5min左右，扫描时间较短，并且图谱可读性较强。

2.实验总结：

进入实验室，就看到大型仪器，通过机械和化学知识，创造出这样仪器，感觉很神奇。

接着学姐就跟咱们解释了诸多关于这方面知识，解说很详细。

同步也帮着咱们巩固了课本上知识，懂得三重四极杆也就是普通LC/MS/MS,一种MS就是一种四极杆，但是第二个四极杆普通作碰撞室，因此只有两个MS做质量分析器，即只有MS/MS,但是普通都叫三重四极杆。

本次实验虽然自己没有操作，但是对于实验仪器操作和重要原理有了更深理解，此外对于Q1控制，以及图谱分析有了更深理解。

但是由于数据15天后来才出来，诸多东西或者细节都忘了差不多。

好记性不如烂笔头，但愿下次可以多记住写下某些核心知识点。

3.实验拓展：

①结合HPLC等其他色谱分析技术及实验，可知LC-MS具备辨别率高、质量范畴广、扫描快和敏捷度高、图谱扫描可读性高长处，当前LC-MS重要是在生物大分子分析中起到了强大作用，为药物分析与生物制品检测发展到了很大作用。

②接口选取：

ESI适合于中档极性到强极性化合物分子，特别是那些在溶液中能预先形成离子化合物和可以获得各种质子大分子（如蛋白质）APCI不适合可带各种电荷大分子，其优势在于弱极性或中档极性小分子分析；正、负离子模式选取：

选取普通原则为：

正离子模式：

适合于碱性样品，可用乙酸或甲酸对样品加以酸化。

样品中具有仲氨或叔氨时可优先考虑使用正离子模式。

负离子模式：

适合于酸性样品，可用氨水或三乙胺对样品进行碱化。

样品中具有较多强伏 电性基团，如含氯、含溴和各种羟基时可尝试使用负离子模式；

4.实验建议：

①增长梯度洗脱这一程序，由于等度洗脱对于混合物分离效果太差，因此在开放实验中必然要用到等梯度洗脱②调节缓冲溶剂，观测不同峰型③将样品放在不同材质瓶中，观测与否结合其她电子。

参照文献：

《仪器分析实验讲义》实验四