专题二细胞工程测试题基础知识填空和高考题汇总.docx
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专题二细胞工程测试题基础知识填空和高考题汇总
专题二细胞工程测试题
第一部分：
基础知识填空
细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过或水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的或的一门综合科学技术。
根据操作对象的不同，可分为和两大领域。
（一）植物细胞工程
1.理论基础（原理）：
具有某种生物的任何一个细胞，都具有的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有的特点。
2.植物组织培养技术：
是转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序
（1）过程：
的植物器官、组织或细胞――→愈伤组织―→试管苗―→植物体
注：
脱分化即
所需条件为避光，细胞进行分裂。
再分化是指已经脱分化的细胞，在一定条件下，分化出根和芽，形成完整植株的过程。
所需条件为光照，细胞进行分裂和分化。
（2）条件：
、、含有全部营养的培养基、光照、适宜pH等。
当生长素和细胞分裂素比例不同时，产生的效果不同。
当生长素含量高于细胞分裂素时，诱导脱分化和的形成；当生长素含量低于细胞发裂素时，诱导再分化和的形成；当二者比例适中时，愈伤组织只分裂不分化
（3）概念：
植物组织培养就是在和条件下，将的植物器官、组织、细胞，培养在人工培植的培养基上，给予，诱导其产生、，最终形成。
（此种繁殖方法为无性繁殖）
3.植物体细胞杂交技术
（1）过程：
（2）在进行体细胞杂交之前，必须先利用和去除细胞壁，获得具有活力的。
植物体细胞杂交关键是诱导的融合。
此融合过程体现了细胞膜的特点，即。
（3）诱导融合的方法：
物理法包括等。
化学法一般是用作为诱导剂。
（4）获得杂种细胞后，利用方法将杂种细胞培育成杂种植株。
（5）概念：
植物体细胞杂交就是将的植物体细胞，在一定条件下融合成，并把培育成新的植物体的技术。
（此种繁殖方式为无性繁殖）
（6）意义：
克服了的障碍，培育出自然界中没有的、具有优良品质的新品种。
4.植物细胞工程的实际应用
A植物繁殖的新途径
微型繁殖：
可以保持的遗传特性，高效快速地实现种苗的。
作物脱毒：
采用进行组织培养来获得脱毒苗（因为植物分生区附近的病毒极少或没有）。
人工种子：
以植物组织培养得到的、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。
优点：
完全保持优良品种的遗传特性，不受季节的限制，方便储藏和运输。
B作物新品种培育
单倍体育种：
优点：
过程：
植株（AaBb）通过减数分裂得到花粉（四种类型）→对花粉进行花药离体培养（技术是植物组织培养）→得到单倍体植株→对其幼苗时期进行处理→得到了正常的纯合二倍体植株（四种类型）。
C突变体利用：
在组织培养中会出现突变体，从有用的突变体中选育出新品种（如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体）。
处理方法是对植物的进行化学或物理的诱变处理。
D细胞产物的生产：
通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。
细胞产物包括、、、、、等。
（二）动物细胞工程
1.动物细胞培养
（1）概念：
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的，将它分散成，然后放在适宜的中，让这些细胞。
（2）原理：
。
（3）流程：
取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→分散成单个细胞（用或）→制成→转入培养瓶中进行→细胞贴壁成单层→细胞增殖→铺满瓶壁→→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理→分瓶继续培养→传代10～50代→增殖缓慢→继续传代→其中少数细胞获得不死性（发生突变）,朝着等同于癌细胞的方向发展
（4）细胞贴壁和接触抑制：
悬液中分散的细胞很快就，称为细胞贴壁。
细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面时，细胞就会
，这种现象称为细胞的接触抑制。
（5）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为，以保持细胞正常的
（6）动物细胞培养需要满足以下条件
①：
培养液应进行处理。
通常还要在培养液中添加一定量的，以防培养过程中的污染。
此外，应定期更换培养液，防止
②：
合成培养基成分：
糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
通常需加入等天然成分。
③：
适宜温度：
哺乳动物多是；pH：
。
④：
95%＋5%。
O2是所必需的，
CO2的主要作用是。
（7）动物细胞培养技术的应用：
①可以借助动物细胞的大规模培养来生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、等。
②通过动物细胞培养技术来培养基因工程常用的受体细胞。
③培养的动物细胞还可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。
④用于生理、病理、药理等方面的研究。
2.动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1）动物核移植是将动物的一个细胞的，移入一个已经的中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
用核移植的方法得到的动物称为。
哺乳动物核移植可以分为
（比较容易）和（比较难）。
（2）原理：
。
（3）选用去核卵母细胞的原因：
卵母细胞比较大，容易操作；卵母细胞细胞质多，营养丰富，可提供胚胎发育所需营养；含有使体细胞核表达出全能性所必需的的物质。
（4）体细胞核移植的大致过程（课本48页图2-21）
高产奶牛（提供体细胞）―→细胞培养
注发育胚胎移植分娩
显微操作入重组细胞―→胚胎―――→代孕动物―→克隆动物
MⅡ中期的卵母细胞――――→去核
克隆动物需要用到、技术
（5）体细胞核移植技术的应用：
①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；
②保护濒危物种，增大存活数量；
③生产珍贵的医用蛋白；
④转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为异种移植的；
⑤人的核移植胚胎肝细胞经过诱导分化，形成相应的组织、器官后，可以用于组织器官的移植等。
（7）体细胞核移植技术存在的问题：
成功率非常；克隆动物存在着问题，表现出缺陷；对克隆动物食品的安全性问题也存有争议等。
3.动物细胞融合
（1）动物细胞融合也称，是指动物细胞结合形成细胞的过程。
融合后形成的具有原来细胞遗传信息的细胞，称为。
（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，即。
诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有聚乙二醇（PEG）、、电刺激等。
（3）动物细胞融合的意义：
克服了，利用细胞融合技术而发展起来的，为制造开辟了新途径。
4.单克隆抗体
（1）抗体：
一个B淋巴细胞只分泌一种。
从血清中分离出抗体的方法不仅。
（2）单克隆抗体的制备过程：
特定抗原
注射
小鼠―→浆细胞融合择性培养基克隆化培养小鼠腹腔内
骨髓瘤细胞→多种融合细胞―→杂交瘤细胞――→分泌所需抗体单克
抗体检测杂交瘤细胞体外培养隆抗体
对小鼠注射特定的（目的使小鼠产生了）→提取B淋巴细胞（即），同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取→促使它们细胞融合→在特定的选择培养基上筛选出→然后对它进行和,筛选出能够的→最后将杂交瘤细胞在做大规模培养或，从细胞培养液或中可得到大量的单克隆抗体。
（3）单克隆抗体制备过程所利用的技术有：
、
（4）与植物原生质体融合相比，特有的诱导方法是。
（5）杂交瘤细胞的特点：
既能，又能。
（6）单克隆抗体的优点：
。
（7）单克隆抗体的作用：
作为，具有准确、高效、简易、快速的优点。
用于和：
主要用于，把抗癌细胞的单克隆抗体跟、或细胞毒素相结合，制成“”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物带到
所在的位置，在杀死癌细胞，是一种、的新型药物。
第二部分：
细胞工程专题高考题汇总
（2013重庆卷）2．题2图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。
下列有关叙述，正确的是
A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞
B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成
C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性
D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
【答案】D
【解析】①是获得已经免疫的B细胞，A项错误；胰蛋白酶使得组织块分散为单个细胞，B项错误；③同时具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性，C项错误；④经筛选后获得能够获得分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D项正确。
【试题评价】本题考查单克隆抗体制备流程相关只是和考生的识图能力，属理解层次，较易得分。
（2013新课标卷II）40.[生物——选修3：
现代生物科技专题]（15分）
甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。
某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。
回答下列问题：
（1）为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用______酶和____酶去除细胞壁，获得具有活力的________，再用化学诱导剂诱导二者融合。
形成的融合细胞进一步培养形成_______组织，然后经过_______形成完整的杂种植株。
这种培养技术称为________。
（2）上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_______。
假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是__________。
（3）这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。
经植物组织培养得到的__________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
【答案】：
（1）纤维素酶果胶酶原生质体愈伤再分化（或分化）植物体细胞杂交
（2）体细胞中含有三个或三个以上染色体组的个体在减数分裂过程中，前者染色体联会异常，而后者染色体联会正常
（3）胚状体、不定芽、顶芽、腋芽
【解析】：
本题考查植物体细胞杂交。
（1）为了培养新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用纤维素酶和果胶酶处理，获得具有活力的原生质体A、B，再用化学诱导剂聚乙二醇诱导融合形成杂种细胞，进一步培养形成愈伤组织，经过再分化形成根、芽，长成完整植株，以上获得杂种植株的方法叫植物体细胞杂交，能克服远缘杂交不亲和的障碍。
（2）植物A、B体细胞杂交形成的杂种植株是四倍体，且该杂种植株减数分裂能形成正常配子，理论上是可育的；但如果将甲和乙有性杂交形成的二倍体，减数分裂由于不存在同源染色体无法联会，无法形成正常配子，不可育。
（3）在植物组织培养至胚状体阶段，可包裹上人工种皮制备人工种子。
（2013天津卷）9.（15分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。
用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。
再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。
流程如下图。
据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是。
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是。
原生质体经过再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和植株的根尖，通过、、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。
下图是用该引物对双亲及再生植株1—4进行PCR扩增的结果。
据图判断，再生植株1—4中一定是杂种植株的有。
（6）对杂种植株进行接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
【答案】
（1）纤维素酶和果胶酶
（2）叶绿体
（3）保持原生质体完整性细胞壁
（4）双亲（或花椰菜和黑芥）解离漂洗
（5）1、2、4（6）黑腐病菌
【解析】
（1）过程①表示原生质体的制备，要用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁
（2）用于融合的两个细胞，一个是黑芥苗的叶肉细胞，一个是花椰菜的根部细胞，其中供体细胞特有的结构是叶绿体，可通过观察叶绿体的有无作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体没有细胞壁的保护，需要加入适宜浓度的甘露醇以保证渗透压的稳定，以避免原生质体吸水或失水破坏原生质体的完整性；原生质体通过细胞壁杂声形成杂种细胞，进而形成愈伤组织。
（4）分析再生植株染色体变异类型，需要将再生植株细胞染色体和黑芥苗与花椰菜细胞中的染色体制片观察进行比较，制片的基本程序是解离、漂洗、染色、制片。
（5）根据图谱，花椰菜含有碱基对为300和600的DNA片段，黑芥还有碱基对为1000、1300和1500的片段，再生植株3,只含有长度为300和600的片段，与花椰菜一致，1、2、4既含有花椰菜DNA片段，又含有黑芥DNA片段，为杂种植株。
（6）对杂种植株接种黑腐病菌，能正常生长的即为具有高抗性的杂种植株。
【试题评价】本题以抗黑腐病花椰菜的培育为信息载体，综合考查了植物细胞工程、细胞分裂装片的制作观察、PCR图谱的识别等相关内容，同时也考查了考生识图获取信息的能力，具有一定难度。
（2013山东卷）35.（8分）【生物——现代生物科技专题】
科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：
（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为，培养的细胞在贴壁成长至充链满培养皿底时停止分裂，这种现象称为
（2）图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为，也可从灰鼠体内取出卵子，通过后进行早期胚胎培养获得。
（3）图中重组囊胚通过技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用方法保存。
（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的分离培养获得，iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向后用于疾病的细胞治疗。
【答案】
（1）原代培养接触抑制
（2）冲卵体外受精（3）胚胎移植冷冻（或低温）
（4）内细胞团细胞诱导分化
【解析】
（1）原代培养指将动物组织用酶处理成单个细胞后进行的初次培养。
接触抑制指贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止裂增殖的现象。
（2）将早期胚胎从母牛子宫中冲洗出来的方法叫冲卵。
（3）暂不进行胚胎移植的胚胎可放入—196℃的液氮中冷冻保存。
（4）胚胎干细胞简称ES或EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞。
iPS与ES细胞一样，可通过诱导定向分化修补某些功能异常的细胞来治疗疾病。
（2013海南卷）31.【生物——选修3：
现代生物科技专题】（15分）
单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-Ⅰ）可引起水疱性口唇炎。
利用杂交瘤技术制备出抗HSV-Ⅰ的单克隆抗体可快速检测HSV-Ⅰ。
回答下列问题：
（1）在制备抗HSV-Ⅰ的单克隆抗体的过程中，先给小鼠注射一种纯化的HSV-Ⅰ蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生了反应，再从小鼠的中获取B淋巴细胞。
将该B淋巴细胞与小鼠的细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是。
（2）若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的中使其增殖，再从中提取、纯化获得。
（3）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV-Ⅰ蛋白，其原因是该抗体具有和等特性。
【解析】
（1）由题意可知，单纯疱疹病毒Ⅰ型可引起水泡性口炎，病毒蛋白HSV-Ⅰ可以作为一种抗原刺激机体通过免疫反应产生特异性抗体。
在单克隆抗体的制备过程中，首先应注射纯化的HSV-Ⅰ蛋白作为抗原，一段时间后对小鼠血清进行检测，如果抗HSV-Ⅰ蛋白的抗体检测为阳性，说明小鼠体内通过体液免疫产生了特异性抗体。
此时可以从小鼠的免疫器官中，如脾脏、骨髓、淋巴结等部位获取已免疫的B淋巴细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，经过筛选检测获得能稳定的产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
已免疫的B淋巴细胞具有产生特异性抗体的特点，而骨髓瘤细胞能无限增殖，因此获得的杂交瘤细胞具有既能无限增殖又能产生特异性抗体（抗HSV-Ⅰ蛋白的抗体）的特点。
（2）获得大量单克隆抗体途径有两种：
体外培养和体内培养。
体外培养即通过动物细胞培养技术获得大量的杂交瘤细胞，进而产生大量的单克隆抗体；体内培养即将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中增殖，最后从小鼠的腹水中提取、纯化单克隆抗体。
（3）单克隆抗体是通过细胞融合技术单一的B淋巴细胞核杂交瘤细胞融合而获得的，因此融合后的细胞只能产生一种特异性抗体，所制备的单克隆抗体具有特异性强，灵敏度高的特点。
【试题点评】本题以疱疹病毒为素材切入，综合考查了学生对单克隆抗体的制备原理、过程及其特点的理解。
旨在考查学生的理解和应用能力。
（课标Ⅰ卷）40.[生物——选修3：
现代生物科技专题]（15分）
某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。
若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。
回答下列问题：
（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的。
达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是小鼠，理由是。
（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有，体系中出现多种类型细胞的原因是。
（3）杂交瘤细胞中有个细胞核，染色体数目最多是条。
（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是。
【答案】
（1）四YY小鼠的抗体效价最高
（2）B淋巴细胞相互融合形成的细胞，骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到100%
（3）1100
（4）不能无限增殖
【解析】
（1）据图分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上，小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗体。
（2）融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的自身融合产物，由于细胞膜具有流动性，且诱导之后的细胞融合不具有特异性，故体系中会出现多种类型的细胞。
（3）杂交瘤细胞形成后，小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个细胞核。
小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条）和骨髓瘤细胞（染色体数目60条）融合后，染色体可达100条。
（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能恶性增殖的细胞，同时正常细胞的分裂次数是有限的。
（江苏卷）29.（9分）为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。
请回答下列问题：
（1）外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为。
（2）在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如右图所示。
细胞干重在12d后下降的原因有；培养液中蔗糖的作用是、。
（3）多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。
二倍体愈伤组织细胞经处理，会产生染色体加倍的细胞。
为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常采用纤维素酶和酶解离愈伤组织。
若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是、。
（4）为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。
下列说法正确的有（填序号）。
①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋②必须在光照条件下培养
③培养过程中需通空气④固定化后植物细胞生长会变慢
【答案】（9分）
（1）脱分化
（2）蔗糖浓度下降，pH降低提供能源调节渗透压
（3）秋水仙素（低温）果胶经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期
（4）①③④
【解析】本题考查的是植物组织培养、染色体变异及细胞固定化。
（1）外植体在人工、无菌条件下，经脱分化可形成愈伤组织。
（2）由图蔗糖浓度下降，可知外植体离体培养过程中需要消耗蔗糖，12天后蔗糖浓度变化不大；pH下降会影响酶的活性，愈伤组织细胞对物质的合成小于分解，细胞干重下降。
植物组织培养过程中，蔗糖既能维持一定的渗透压，又能提供植物细胞生命活动必须的营养物质（能量）。
（3）一定浓度的秋水仙素或低温都可抑制纺锤体的形成，使子染色体不能移向两极，从而使细胞中染色体数目加倍。
植物细胞间的成分主要是纤维素和果胶，可通过纤维素酶、果胶酶破坏细胞间的物质，从而使愈伤组织细胞分离。
在培养过程中，各个细胞所处时期不同，在用秋水仙素或低温处理后，一定时间内不同时期细胞分裂次数不同，从而会出现染色体为2n、4n、8n等的细胞，4n的细胞在有丝分裂后期着丝点分裂染色体数目加倍至8n；8n的细胞在有丝分裂中期能清晰看出8n条染色体。
（4）为了更好地获得次生代谢产物，应选用生长旺盛的愈伤组织。
愈伤组织不能进行光合作用，因此要通入无菌空气确保其正常的生命活动。
细胞的固定通常使用包埋法，由于包埋材料的影响，营养物质和氧气的扩散都受到一定的限制，所以固定化细胞生长速度慢。
（广东卷）29（16分）铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图17所示，请回答下列问题：
⑴选用新生营养芽为外植体的原因是，诱导外植体形成PLBs的过程称。
⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在，，。
⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。
若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。
同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：
①ABA的浓度梯度设置和添加方式：
设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。
因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基后按比例加入。
②实验进程和取样：
实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。
如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为。
③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：
当某3个样品（重复样）的时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
【答案】
（1）细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs（2分）；细胞的脱分化（2分）
（2）生长起始快（2分），快速生长时间较长（2分）；PLBs产量较高（2分）；（3）①灭菌、冷却（2分）；②75（2分）；③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大（3分）
【解析】【解析】
（1）新生营养芽分裂能力强，全能性容易表达；根据题干可知，PLBs类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。
（2）据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是光照有利于细胞增殖、叶绿体的形成和进行光合作用制造有机物。
（3）①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取样5次，4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复，因此每次取样需要记录15个样品中的数据，共需要测定样品数75③适量的ABA可提高生物碱产量，
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