CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性.docx
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CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性
CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性
作者：
高绍芳李佃贵崔建从郭敏张纨
【摘要】目的探讨细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和抑癌基因PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及其相关性。
方法应用免疫组织化学染色SP法检测CyclinD1和PTEN在不同胃黏膜病变石蜡包埋标本的表达并进行相关性分析。
结果在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生和胃癌中CyclinD1的表达率逐渐增高，PTEN的表达率逐渐降低，且差异有统计学意义（P<0.05）;CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的阳性表达率呈负相关。
结论CyclinD1、PTEN在胃癌的发生、发展中起协同作用，对其进行联合检测有助于胃癌的早期诊断。
【关键词】胃癌;胃癌前病变;CyclinD1;PTEN;相关性
胃癌（GC）是我国高发的恶性肿瘤之一，近年研究发现其形成是一个多因素、多阶段、多基因作用的复杂过程〔1,2〕。
在各种致病因素作用下，胃黏膜在经历慢性浅表性胃炎（CSG）、萎缩性胃炎（CAG）、肠上皮化生（IM）、不典型增生（ATP）及GC的一系列贯序性形态学变化过程中，细胞趋向更为恶性的生物学行为。
细胞周期调控基因在其发生发展过程中起着一定的作用，他们的表达失衡是导致胃癌发生的机制之一，故本研究采用免疫组化法探讨细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和抑癌基因（PTEN）在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性，为研究胃癌发生机制及胃癌的早期诊断提供实验室依据。
1材料与方法
1.1研究对象选择河北医科大学中医院临床病理科保存的2004至2008年胃窦部病理活检组织存档蜡块，共223例，其中CSG35例，CAG（无IM）44例，CAG（伴IM）49例，ATG45例，GC50例。
其中男108例，女116例。
平均（58.6±12.3）岁。
其中GC组织标本均未经放射治疗和（或）化学治疗。
所用组织标本患者均签署知情同意书。
1.2试剂与方法鼠抗人单克隆抗体CyclinD1，鼠抗人单克隆抗体PTEN及免疫组化SP广谱超敏试剂盒（即用型）、DAB显色剂等均购自福州迈新生物技术开发公司。
石蜡切片常规脱蜡、水化，进行水浴抗原修复，继以免疫组化试剂盒进行检测。
操作步骤按说明书进行。
以阳性片及PB代替一抗，设阳性及阴性对照。
1.3免疫组化结果判定CyclinD1、PTEN阳性染色主要定位于细胞质中，为深浅不一的棕黄色颗粒，偶可见于细胞膜和（或）细胞核。
每张切片由两位观察者随机选择5个有代表性的10×40高倍视野，计数网格自测微尺内阳性细胞数占视野总细胞数的百分比，并按阳性细胞数的百分比对各蛋白阳性表达的程度予以分级。
阳性细胞<5%为阴性（
）;5%～25%为弱阳性（+）;25%～50%为阳性（）;>50%为强阳性（）。
1.4统计学方法采用线性趋势χ2检验进行各组间率的比较，应用Pearson四格表χ2检验进行相关样本的关联性分析。
所有数据均利用SPSS13.0统计学软件处理。
2结果
2.1CyclinD1蛋白、PTEN蛋白在胃黏膜各病变中的表达随着胃黏膜癌变的阶段性进展，CyclinD1蛋白表达的阳性率越来越大，PTEN蛋白表达的阳性率越来越小（均P<0.001），见表1。
表1CyclinD1、PTEN在胃黏膜各期病变的表达
2.2CyclinD1与PTEN表达的相关性经相关样本的关联性检验（χ2=189.233，P<0.001），列联系数C=0.678，可以认为二者有关联性，密切程度中等。
3讨论
胃癌的发生是一个多阶段、多步骤、逐渐演变的过程。
在各种致癌因子作用下，胃黏膜先发生癌前病变，一部分癌前病变可发展成早期胃癌，最后形成进展期胃癌。
在这一癌变过程中往往涉及到多种癌基因的激活和抑癌基因的失活。
原癌基因CyclinD1合成于G1早期，是细胞增殖G1～S期的重要控件。
其调控机制主要是通过对RB蛋白的灭活而释放E2F，以启动S期相关基因的转录，使其渡过G1→S调控点进入S期〔3〕。
研究发现，CyclinD1基因及其表达的异常在许多肿瘤细胞中存在〔4～6〕。
Wang等〔7〕研究发现，CyclinD1的表达在人食管基底细胞高度增生与非典型性增生间未见差异，从非典型性增生发展到鳞状细胞癌可见轻微增高。
本实验结果提示CyclinD1过度表达可能是关键性控件之一，是肿瘤形成的早期分子事件。
CyclinD1蛋白的检测可能对于胃癌前病变及早期胃癌的诊断有参考价值。
抑癌基因PTEN编码的蛋白具有双特异性磷酸酶活性，能使磷酸肌醇三磷酸（PIP3）去磷酸化而抑制PI3K/Akt（pAkt）信号传导途径，在调控细胞生长及维持细胞的增殖、分化和凋亡平衡中起重要作用〔8〕。
PTEN在胃癌发生发展不同阶段的表达呈递减趋势，李异玲等〔9〕的研究提示PTEN蛋白表达水平可作为判定胃癌病理生物学行为的客观指标。
本研究发现PTEN蛋白的表达随病理级别增加呈递减趋势。
总之，PTEN作为一种具有磷酸酶活性的抑癌基因，在胃癌早期发生过程中发挥着重要的作用。
CyclinD1和PTEN均为重要的细胞周期调控因子。
研究表明〔10〕CyclinD1在胃黏膜癌变多阶段中高表达，PTEN在胃黏膜癌变多阶段中低表达，但两者之间是否存在联系却未有研究报道。
本研究表明CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中表达呈负相关。
PTEN失表达与CyclinD1的高表达在胃癌的发生发展过程中可能具有协同作用，使肿瘤生长获得更大的生长趋势。
故此联合检测CyclinD1和PTEN比检测单一指标更有价值，能为临床检测和诊断胃癌及胃癌前期病变提供更多生物学信息，但他们之间具体相互作用机制有待深入研究。
【参考文献】
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9李异玲，田忠，傅宝玉.胃癌及癌前病变中PTEN及微卫星不稳定的变化及二者的关系〔J〕.世界华人消化杂志，2008;16（4）:
24705.
10米建强，杨海霞，冯笑山，等.胃癌及胃癌前期病变中PTEN蛋白的表达及意义〔J〕.山东医药，2008;48（3）:
378.
（注：
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