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一起食物中毒案例的分析有答案

卫生检验综合技术-微生物检验部分课堂讨论

模块二:

细菌性食物中毒案例讨论

一、一起食物中毒案例的分析

目的要求:

1.掌握细菌性食物中毒实验室检测流程及检测技术

2.熟悉引起食物中毒的原因,食物中毒类型、临床表现、诊断及治疗处理原则

3.熟悉食物中毒的调查与处理的方法

4.了解食物中毒案例的分析方法

学时:

11学时

课程内容:

一、事件概述

B市C镇初级中学为政府公办初级中学,共有学生1132名,22个班级,83名老师,7名食堂工作人员。

其中寄宿生630名,走读生502名,周一至周五上课,周六至周日放假。

根据学校报告,6月5日下午17:

20开始,有学生出现腹痛、腹泻、呕吐、恶心和头痛、头昏等症状,到6月6日晨检发现有80余名左右出现同类症状,因这些学生在学校有共同就餐史,且发病时间非常集中,怀疑为食物中毒。

6月6日上午7:

30学校向C镇卫生院报告并组织患病学生就诊。

【问题1】C镇卫生院接到报告后,首先应当开展什么工作?

当卫生院同天接到数例相同症状体征的病人时,应如何考虑?

作何处理?

【参考答案】C镇卫生院接到报告后应第一时间奔赴现场核实情况,并及时开展救治。

当同一天接到数例相同症状体征的病人时,则考虑食物中毒的可能。

因此,对病人采取紧急处理的同时及时报告当地CDC或卫生执法监督机构。

 

镇卫生院接报告后立即赶赴现场进行核实,核实后于6月6日上午8:

30向B市疾病预防控制中心报告……

【问题2】B市疾病预防控制中心接到报告后,如果怀疑是食物中毒,应做何处理?

【参考答案】及时将事件报告给市卫生局和省疾控中心。

除了及时报告之外,还应:

对病人采取紧急处理,包括停止食用中毒食品;采取病人标本,以备送检;对病人的急救治疗;

对中毒食品的控制:

保护现场,封存中毒食品或疑似中毒食品;追回已售出的中毒食品或疑似中毒食品;

对中毒场所采取消毒处理

 

B市疾控中心立即将情况报告市卫生局,相关负责人于6月6日上午9:

20分到达现场。

同时B市疾控中心向省疾控中心报告,并立即调集流行病学、食品卫生学、微生物检验、理化检验等学科专业人员前往现场调查,上述专家于6月6日下午13:

00到达现场。

6月7日请省疾控中心专家一起,再次赶赴现场进行调查处置。

自6月5日17:

20出现首发病例后,截止6月7日11时,共发生符合病例定义的病例94例。

6月7日11时后无新发病例。

【问题3】什么是“符合病例定义的病例”,本次事件的病例定义是什么?

【参考答案】确定食物中毒患者的病例定义是国际通用的食物中毒的基本调查步骤。

但我国目前的法规没有给出明确的病例定义标准。

食物中毒患者的病例定义就是通过现场核实一起食物中毒事件的有关发病情况和进食情况,依据中毒病例的共同特征,提出该起物中毒事件引发病例的判定标准。

并以此为标准,对已发现或报告的可疑病例进行鉴别。

对尚未报告或就诊的符合病例定义的病人应进一步进行登记调查。

在实际工作中,病例定义以最先发病病人的临床症状与体征为依据,以后随着调查工作的逐步展开,在获得进一步的临床、流行病学和实验室资料后再修订,形成最终定义。

内容包括:

某一时间内,某一人群/地点(考虑暴露因素),主要症状和体征。

症状及体征必须有病理学意义,如肠道致病菌中毒者的定义应符合:

24小时腹泻3次以上并有大便性状的改变,或呕吐1次以上。

单独腹痛、恶心不能作为定义内容,否则将会造成调查分析的偏倚。

根据以上阐述,一个完整的食物中毒病例的定义应表述为:

“×年×月×日,在×地食用过×餐(或×食品)的×人,“在食用后×小时至×小时之间产生”或者“从×时×分开始至×时×分产生”以下症状:

①具有一项及以上的客观症状;②具有一项及以上的主观症状;(某些极具典型特征性临床表现的中毒病例定义具有上述一项症状亦可)③有临床就诊记录或者实验室检查依据(如留样食品、环节采样、吐泻物检测报告等等)定义为该事件的病例。

本次事件的病例定义为:

2015年6月5日中餐在该校食堂就中餐,出现呕吐或24小时腹泻3次及以上,伴或不伴头昏、头痛、恶心、腹痛、发热等症状的学生作为本次食物中毒事件的病例定义。

【知识补充】病例定义的诊断分级是根据临床症状与体征和实验室结果将病例分为确诊、疑似、可疑、和不是4类:

确诊病例——指有当前和近期感染的明确的实验室证据(如血清学、细菌学、病毒学等),无论是否具有或已出现过临床症状和体征。

疑似病例——指有与疾病符合的临床症状和体征,有建议性但非结论性的实验室证据提示近期感染(如单份血清学检查)。

可疑病例——只有与疾病符合的症状和体征,但缺乏感染的实验室证据(阴性、缺乏、或未知)

【问题4】如果你是疾控中心工作人员到达现场开展流调工作,你认为食物中毒的现场流行病学调查必须包括哪些内容?

【参考答案】

调查应包括流行病调查和卫生学调查:

a)对病人、同餐进食者的调查(食物中毒个案调查登记表)

b)了解中毒发生的时间、经过、中毒人数及严重程度,初步确定可疑餐次和食品

c)对可疑食物加工现场的卫生学调查:

了解食品加工现场的工作人员健康状况、加工环节可能出现的原料问题、加工场所卫生及违规操作问题

d)采样进行现场快速检验和送实验室检验

e)根据初步调查结果提出可能的发生经过及防止中毒进一步扩散的控制措施

【知识补充】抢救病人与现场调查应同时进行的原则——立即抢救病人为首要任务,但同时应组织现场卫生学与流行病学调查

 

【问题5】与此同时,镇卫生院除实施常规治疗措施,还可以开展哪些临床实验室检验工作辅助诊断?

【参考答案】血常规和大便常规检查。

 

二、流行病学特征调查结果

自6月5日17:

20出现首发病例后,截止6月7日11时,共发生符合病例定义的病例94例。

6月7日11时后无新发病例。

1、病例定义:

2015年6月5日中餐在该校食堂就中餐,出现呕吐或24小时腹泻3次及以上,伴或不伴头昏、头痛、恶心、腹痛、发热等症状的学生作为本次食物中毒事件的病例定义。

2、首发病例:

刘某,女,13岁,125班走读生,于6月5日17:

20出现不适,主要为呕吐(3次)、腹痛,以脐周阵发性疼痛为主,并有头痛、头晕症状,6日8时左右前往**医院就诊,入院后出现体温升高(38.2℃),经积极治疗,患者已痊愈出院。

3、临床症状:

主要临床表现为头痛头晕、腹痛、腹泻(黄色水样便)、呕吐、恶心、乏力等症状,部分病例低热。

详见表1。

表1病例临床症状统计

症状

发热

腹痛

腹泻

恶心

呕吐

人数

8

83

52

60

81

百分比%

8.51

88.30

55.32

63.83

86.17

4、病例的三间分布

人群分布:

所有发病均为学生,无教职员工发病,女性多于男性,男女比例为1:

1.69(35/59)。

年龄最大16岁,最小12岁。

寄宿生64例,走读生30例。

班级分布:

学校22个班级均有病例发生,无明显班级聚集性。

时间分布:

病例潜伏期最短为5小时,最长为47小时。

中位数为13小时。

6月5日发病23例,6月6日发病70例,6月7日发病1例。

发病在时间上出现聚集性。

4、临床实验室结果

共收集了140人的血常规结果,白细胞升高39人,中性粒细胞升高的86人。

部分病例碱性磷酸酶升高。

收集了24人大便常规检查结果,粪便隐血试验(+)7人,个别伴有WBC或RBC。

三、现场卫生学调查结果

1、食堂基本情况

学校有两个食堂,分为学生和教师食堂,两个食堂共用一个加工制作间,就餐地点分学生和教职工食堂。

学校食堂有工作人员7名,其中4名无有效健康证明,3名有健康证明可查。

食堂工作人员自述近段时间身体无不适症状。

食堂加工制作间防蝇防鼠设施不齐全,卫生状况一般,食品冷藏设施容量不足,过夜食品(熟食)未进冷柜冷藏。

餐具无专用消毒设施,现有的消毒池用于洗菜,餐具保洁柜内有污物、霉斑。

食堂所有中、晚餐食用原料当天购买,前一天买第二天早餐的原料;所有米面、配料、鸡蛋等配料分段统一从相关食杂店采购。

2、发病前2天食谱调查研究

6月4日至5日学生的食谱如下表2:

表26月4日至5日该校食堂供应食谱

餐次

6月4日

6月5日

早餐

干豆角炒肉、豆笋、包菜

莴苣炒肉、香干、干菜蛋汤、黄瓜炒香肠

中餐

黄豆炒肉、火焙鱼、卤菜

莴苣炒肉、青辣椒炒蛋、包菜、豌豆肉骨汤

晚餐

小炒鸡肉、香干子、湘粉

辣椒炒肉、莴苣、豆腐

教师的菜谱除包菜改成蒸豆角外,其余与学生菜谱一致,另学生的青椒炒鸡蛋,教师则为干椒炒鸡蛋。

3、共同暴露餐次详细调查

所有学生和教职工均在学校就中餐。

寄宿生在学校就早、中、晚三餐。

走读生均在学校就中餐,均不在校进晚餐,有个别走读生在学校进早餐。

因此6月5日中餐为所有病例的共同暴露餐次。

据调查,病例大部分进食了食堂提供的四个菜,有的食其中1个或2个或3个,各不相同。

据部分病例反应,5日中餐的菜有异味。

对25名就中餐未发病的学生了解,多数也食用了中餐的每个菜,只因除汤菜以外其它三个菜感觉有异味,所以就食量很少。

4、可疑食物详细调查

鸡蛋:

经过对6月2日学校鸡蛋供应商了解,近段时间同样鸡蛋销售过十几个地方,其余地方均未反映出现相似情况。

进一步跟该省鸡蛋生产商电话了解,鸡蛋均为新鲜鸡蛋,且其余供应地方也未反映出现类似情况。

莴苣、包菜:

针对6月5日莴苣和包菜两位供应商进行了解。

两位供应商均为附近村农民。

到莴苣农户家及菜地进行了解查看,该农户称莴苣施肥的肥料为菜饼、沼气废渣,且最近20日未施肥,近段时间也未喷洒农药,菜地周围环境一般。

到包菜农户家及菜地了解查看,该农户称包菜施肥就是栽种前施了一次猪粪水,且近段时间未喷洒农药,菜地周围环境差,菜地旁为一养猪场,废水从菜地旁一条小沟排出,臭气熏天,遇大雨情况有废水漫入菜地的可能。

食用油:

6月4日食堂从一黄姓村民(C镇金田社区)处购进了380斤菜籽油,6月5日中餐使用了30-40斤左右,因学生反应油有异味,晚餐就停止使用该食用油。

经过对同样购买与学校6月5日中餐使用的同样食用油的8户居民进行调查,均表示未发现该食用油有异常,自身也未出现相似异常情况。

对油销售的村民进行调查,为一私人作坊,属土法生产油,生产工艺简陋,直接用菜籽经榨油机直接榨油,经二次榨油后再加热过滤,变成成品油。

现场原材料菜籽闻有霉味,卫生状况一般。

5、食品制作过程调查

经对学校食堂工作洗菜人员了解,称各种菜均分开清洗,且每种菜炒前至少经过两次清洗。

莴苣买入时已削粗皮,清洗后经切片机一端切片,用盐腌几分钟后再用水清洗后待炒,所有肉由切片机另一端切成,工作人员称每日进行绞肉机清洗,但无清洗记录和相应管理制度。

鸡蛋为两手各拿一只进行相撞,敲破后蛋液落入大盆内,等够用后再放入锅内进行炒制。

所有菜均分不同批次炒熟,加入的调料与平时无异。

老师的菜与学生的菜分不同批次炒熟。

每样菜品的炒制大概为5-10分钟左右。

6、饮用水卫生调查

学校水源有自来水和自备水源。

自来水仅用于新教学楼卫生间、新学生公寓。

学校自备水源为40米井,位于该校篮球场中,有井盖,井旁围栏有一缺口,水井口与地面相平,且水井所处地势较低。

井水通过水泵抽入20m高的水塔,再通过水塔管网供应学校各处(除新教学楼卫生间、新学生公寓),包括食堂用水。

学校自备水源未办理卫生许可证,未见管水人员健康证。

经校管水人员称,学校每学期开学前均对水塔内部进行清洗消毒;每周两次打开水塔底阀对管网进行冲洗;每周对水塔投漂白精片40片进行消毒,有消毒记录。

学生饮水为学校统一配备的直饮水,水源为自备水源,学校称直饮水机进行过清洗,但现场未见消毒记录。

由于6月5日上午学校停电,无法供应直饮水,学生饮水自行解决或在学校商店购买瓶装水喝,经对学校商店调查,所进水均为三证齐全,来源清晰。

【问题6】根据上述调查结果,哪些环节存在食品安全隐患?

【参考答案】据现场卫生学调查结果逐一分析,略。

 

【问题7】据上述资料,此事件是何种性质的食物中毒?

能否确定是何种化学物或细菌引起的食物中毒?

【参考答案】

表3细菌性与非细菌性食物中毒的区别

 

细菌性食物中毒

非细菌性食物中毒

病原体

细菌

动植物、化学物质、原因不明

中毒原因

主要为动物性食品

特殊食品或误食

有毒成分

活菌或肠毒素

特殊毒素或毒物

潜伏期

1~24h(肉毒1~5d)

快速,甚至仅数分钟

临床特点

多伴有发热,胃肠炎(肉毒除外)

胃肠炎症状,常伴有神经、血液系统症状

预后

良好

不及时治疗,预后差(常可引起死亡)

治疗

一般可用抗生素治疗(肉毒除外)

促排。

及时给予特效解毒剂

预防

防止污染,控制繁殖,彻底杀灭

加强宣教,防止误食

根据上述资料,初步判断是是细菌性食物中毒。

但不能确诊。

 

【问题8】要最终确诊为何种类型的食物中毒,最关键的工作是什么?

【参考答案】要最终确诊为何种类型的食物中毒,最关键的工作是要用实验室诊断资料,由于采样不及时或已用药或其他技术上、学术上的问题未能取得实验室诊断资料,可判断为原因不明食物中毒,必要时可由三名副主任医师以上的食品卫生医师进行评定。

 

【问题9】根据上述调查结果,你作为疾控工作人员,如何采样,需要采集哪些标本?

【参考答案】根据问题6分析需要采集的标本。

疾控部门共采集了末梢水、直饮水、剩余食物、留样食物、病例的呕吐物、粪便及肛拭子、食堂工作人员肛拭子、厨房用具、菜籽、菜籽饼、菜籽油、学校食用油等61个标本

以上采集的样品应开具采样单。

样品上应标明样品名称、编号、采样日期等。

 

【问题10】样品送达实验室后,你作为疾控卫生检验工作人员,如何开展检验工作?

开展哪些检测项目?

【参考答案】根据卫生调查的结果,根据暴露的问题不同样本检测的项目亦不同。

分别进行霍乱、沙门氏菌、致病性大肠埃希菌、志贺菌、变形杆菌、蜡样芽胞杆菌等病原学检测和霉菌培养、有机磷类、杀虫菊酯类和氨基甲酸酯类农药、黄曲霉毒素B1、酸价、过氧化值等多项检测

 

四、对可疑病原体的病原学检测结果

疾控部门共采集了末梢水、直饮水、剩余食物、留样食物、病例的呕吐物、粪便及肛拭子、食堂工作人员肛拭子、厨房用具、菜籽、菜籽饼、菜籽油、学校食用油等61个标本,分别进行霍乱、沙门氏菌、致病性大肠埃希菌、志贺菌、变形杆菌、蜡样芽胞杆菌等病原学检测和霉菌培养、有机磷类、杀虫菊酯类和氨基甲酸酯类农药、黄曲霉毒素B1、酸价、过氧化值等多项检测。

结果如下:

1、从一名病例的粪便和3名病例的肛拭子中检出沙门氏菌。

2、从食品留样中的包菜和莴苣炒肉中检出沙门氏菌。

3、从食堂末梢水中检出细菌总数为6cfu/ml,大肠菌群为2MPN/100ml,学校直饮水样细菌总数为120cfu/ml。

4、菜籽霉菌计数1.5×104/g。

5、从菜籽、菜籽饼、菜籽油中检出抗蚜威(氨基甲酸酯类农药)。

【问题11】根据上述现场卫生学和流行病学调查及实验室检测结果,试分析造成此食物中毒的原因是什么?

说说你的理由?

【参考答案】根据现场卫生学和流行病学调查,结合临床表现、临床检验结果以及病人粪便、肛拭子标本及相关食物实验室检测结果,判定该事件为一起沙门氏菌引起的食物中毒事件,中毒餐次为6月5日中餐,可疑中毒食物为“包菜、莴苣炒肉”。

可疑中毒原因为食品被污染或食品加工环节交叉污染。

食用菜籽油异味可能导致部分进餐人员发生心因性反应而就医。

原因分析结果如下:

1、所有病例有共同就餐史,发病时间非常集中,发病曲线呈点源暴露模式。

2、发病潜伏期符合沙门氏菌食物中毒的特点。

病例潜伏期最短为5小时,最长为47小时。

中位数为13小时。

3、所有病例临床症状符合。

以头晕、头痛、腹痛、腹泻、恶心、呕吐、等为主要症状,腹泻以黄色水样便为主,部分有发热病例。

4、从病例标本和剩余食品中均检出沙门氏菌。

5、食堂工作人员有4名无健康合格证,食堂卫生状况一般,食堂炒制生熟不分,存在交叉污染的可能。

6、学校食用油由非正规渠道采购,私人榨油,生产作坊工艺简陋,菜籽闻有较重的霉味,霉菌计数达1.5×104/g。

同时从菜籽、菜籽饼、菜籽油中检出抗蚜威(氨基甲酸酯类农药),菜籽油中抗蚜威浓度为0.02mg/kg。

虽然抗蚜威含量不足以导致急性中毒,也不是此次事件的主要原因,但部分学生可能因油的异味而出现心因性反应而就诊。

7、虽然本次事件的水样中未直接检出沙门氏菌,但末梢水中检出大肠菌群、直饮水中细菌总数超标,且学校水源水不符合卫生学要求,可能成为水污染事件的隐患。

【问题12】明确事件原因后,还有哪些后续工作需要开展?

【参考答案】对学校食堂、学校饮用水进行了全面的整顿和消毒处理,对水井的井旁围栏缺口已进行了封闭,加强了学校饮食和饮水卫生管理。

停用6月5日中餐使用的食用油。

加强食品从业人员管理,无健康证不得上岗。

开展宣传教育活动。

 

五、回顾事件处置措施及过程

1、第一时间启动市级食品安全事故应急预案,成立领导机构,明确职责,组织落实,各成员单位各司其职,对事件的各个环节各个方面进行有效合理处置。

按照突发公共卫生事件相关政策、规定,进行了突发公共卫生事件网络直报,并按照要求向省、市各级相关部门与领导逐级进行报告。

2、开展科学高效的现场卫生学、流行病学调查,快速地评估了事件的整体情况、判断出事件性质、中毒餐次、可疑中毒食物及原因。

B市疾病预防控制中心和卫生监督所组成联合调查组,深入事件发生地对发病人员、学校食堂食品的来源、保存、清洗、制作加工、储存等环节进行详细的流行病学调查,对学校饮用水、食堂工作人员、就餐人员进行详细调查,掌握情况,积极开展病例对照流行病学调查,进一步查找事件原因。

并请省疾控专家对我市的调查处理工作进行现场指导。

3、全力开展病例的救治工作,积极安排就近的医疗机构专门对病例进行救治,各医院成立了专家牵头的救治小组,确保了没有发生重症病例和死亡病例。

4、对学校食堂、学校饮用水进行了全面的整顿和消毒处理,对水井的井旁围栏缺口已进行了封闭,加强了学校饮食和饮水卫生管理。

停用6月5日中餐使用的食用油。

5、对全体师生及学生家长进行了食品安全知识的宣传,认真做好中毒人员及家属的稳定工作,维护社会稳定。

6、及时向媒体公开事件处置的进展情况,积极引导,正面宣传报道中毒人数、救治情况、现场处置情况、后续保障、有效机制建立等相关的真实情况,减少猜疑,缩小影响。

7、按技术要求组织对全校各个领域的隐患排查,确保安全报上级主管部门批准后,快速有序组织学生复课。

8、及时向B市委市政府两办、总值班室及上级主管部门汇报事态进展情况,处置完毕后报事件概况、处置过程、问题分析、经验总结、工作建议,不断完善有效机制。

【问题13】假如你是疾控中心检验人员,当你接到标本后,你会如何设计本案的实验室检测方案,确定病原菌?

(注:

1~11题为课堂讨论题,第10题为课后作业,也可以作为实验设计方案)

【参考答案】略。

课后阅读思考题

一、一起O139群霍乱弧菌引起的食源性疾病暴发疫情分析

【案例】事件概况:

2012年7月,在甲、乙、丙三个市陆续出现剧烈腹泻和呕吐病例,腹泻粪便为水样便、患者无腹痛、里急后重和发热症状;首例患者出现在甲市,经省、市疾病预防控制中心联合处置,判定为一起由来自丙市农贸市场甲鱼污染O139群霍乱弧菌引起的食源性疾病暴发疫情。

事件经过:

7月某日,乙市村民张XX家举办寿宴,来自甲、乙、丙市的亲朋好友参加。

宴请食物中有用从乙市农贸市场购买并来自丙市农贸市场的甲鱼加工的菜品,第二天甲市朱XX发病,并出现上述症状,疾控中心接报后进行处置,最终确认了本起疫情。

【讨论题】请复述省市疾控中心从接到第一例患者发病报告后开始进行的诊断处理过程(不包括对疫情的控制措施),并简述如何确认致病病原和污染食品来源的方法和步骤。

【参考答案】

二、一例轮状病毒感染案例分析

【背景知识】

轮状病毒(RV)是引起婴幼儿腹泻的最主要病原。

能够造成人类腹泻的轮状病毒(RV)只有A、B、C组,人们较为熟悉的婴幼儿腹泻病毒是A组轮状病毒毒,B组至今只在我国曾有暴发流行,C组仅有个别发现。

轮状病毒在世界范围内分布广泛,国内外大量研究表明A组轮状病毒是引起婴幼儿非细菌性腹泻的重要病原体,其引起的腹泻具有较高的发病率,是导致婴幼儿发病甚至死亡的重要原因。

【案例】

患儿,半岁,女。

以突然发病出现发热、水样腹泻和呕吐等症状于2012年11月5日急诊入院,询问病史患儿为早产1个月,人工喂养,体检轻微脱水症,蛋花样粪便,体温38℃。

提示:

患儿起病急,出现发热、水样腹泻和呕吐等症状,发病时间为深秋,体检轻微脱水征,蛋花样粪便。

患儿可能为轮状病毒所致腹泻。

【讨论题】你作为检验人员,如何进行采样并进行实验室检验确诊?

【参考答案】

 

模块三:

微生物检测方法学评价

一、大肠菌群经典三步法和LST两步法的比较与评价

目的要求:

1.掌握微生物方法学评价方法

2.了解基本科研思路

学时:

9学时

课程内容:

《GBT5750.12-2006生活饮用水标准检验方法微生物指标》中大肠菌群采用经典三步法:

自行回忆

在《GBT4789.3-2010食品卫生微生物学检验标准大肠菌群计数》中大肠菌群的检测采用两步法:

【讨论题】1、微生物学检测方法中,经常会用“显色”这一手段使结果判断更加容易、简单,并能减少人为因素引起的漏检、误检。

月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤、煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤均不含指示剂,能否添加指示剂增加实验结果的辨别性?

2、月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤、煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤这两种培养基相对于乳糖胆盐蛋白胨水有什么特别之处?

3、如何设计实验评价这两种方法对大肠菌群的检测能力?

【参考资料】

1、两步法大肠菌群MPN计数较三步法的优势有:

⑴两步法操作更简单,适合批量检测;⑵两步法检出的概率大乳糖发酵培养基基本上不具备修复已损伤的细胞的作用,而月桂基硫酸盐胰蛋白胨则可以;⑶两步法减少了人为的误差三步法需要挑选菌落,受人主观的影响很大,没有挑对或挑取的不够多都会导致假阴性结果,而两步法采取增菌液接种,会减少假阴性。

2、乳胨水培养基:

乳糖10g,蛋白胨20g,胆盐5g,0.04%溴甲酚紫25mL,蒸馏水1000mL,pH7.4。

BGLB培养基:

乳糖10g,蛋白胨10g,胆盐20g,煌绿0.0133g,蒸馏水1000mL,pH7.2。

LST培养基:

胰酪胨20g,氯化钠5g,乳糖5g,磷酸氢二钠2.75g,磷酸二氢钠2.75g,月桂基硫酸钠0.1g,蒸馏水1000mL,pH6.8±0.2。

3、实验表明LST培养基的菌量明显比乳胨水、BGLB培养基多,证明LST培养基更有利于大肠菌群的生长和检出,因此适宜作大肠菌群初发酵培养基。

从营养角度分析有以下的原因:

(1)乳胨水和BGLB的氮源为蛋白胨,LST为胰蛋白胨。

胰蛋白胨含有的氨基酸种类齐全,是一种极易被大多数微生物吸收的良好氮源和碳源,因而LST的胰蛋白胨较蛋白胨更利于大肠菌群的吸收利用。

(2)3种培养基均以乳糖作为主要碳源,同时提供大肠菌群检测发酵产气的主要基质。

三者的乳糖与蛋白胨质量比是:

乳胨水培养基1:

2,BGLB培养基1:

1,LST培养基1:

4。

以上实验的数据表明,LST较乳胨水、GBLB培养基更利于大肠菌群生长。

(3)LST培养基中抑制剂为十二烷基硫酸钠,乳胨水和BGLB培养基中均为胆盐,它们均能抑制革兰氏阳性菌,但十二烷基硫酸钠有表面活性作用,该物质为抑制剂,能较好地抑制革兰氏阳性菌生长,有利于提高革兰氏阴性菌活性和分散菌体的作用,利于大肠菌群选择性地发育。

 

课后思考题

一、请设计实验方案比较不同的鉴定培养基分离沙门菌的差异

常见的沙门菌鉴定培养基有:

XLD、SS、HE、BS等

二、大肠菌群作为粪便污染指

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