或译DNA定序是指分析特定DNA片段的碱基序列.docx

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或译DNA定序是指分析特定DNA片段的碱基序列

DNA定序

DNA测序(DNAsequencing,或译DNA定序)是指分析特定DNA片段的碱基序列,也就是腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C)与鸟嘌呤的(G)排列方式。

RNA测序则通常将RNA提取后,反转录为DNA后使用DNA测序的方法进行测序。

目前应用最广泛的是由FrederickSanger发明的Sanger双脱氧链终止法(ChainTerminationMethod)。

新的测序方法,例如454生物科学的方法和焦磷酸测序法。

Sanger测序法

Sanger(桑格)双脱氧链终止法是Sanger于1975年发明的。

测序过程需要先做一个PCR反应。

PCR过程中,双脱氧核糖核酸可能随机的被加入到正在合成中的DNA片段里。

由于双脱氧核糖核酸多脱了一个氧原子,一旦它被加入到DNA链上,这个DNA链就不能继续增加长度。

最终的结果是获得所有可能获得的、不同长度的DNA片段。

目前最普遍最先进的方法,是将双脱氧核糖核酸进行不同荧光标记。

将PCR反应获得的总DNA通过毛细管电泳分离,跑到最末端的DNA就可以在激光的作用下发出荧光。

由于ddATP,ddGTP,ddCTP,ddTTP(4种双脱氧核糖核酸)荧光标记不同,计算机可以自动根据颜色判断该位置上碱基究竟是A,T,G,C中的哪一个。

454生物科学和焦磷酸测序法

454测序法由454生物科学发明,是一个类似焦磷酸测序法的新方法。

2003年向GenBank提交了一个腺病毒全序列,使得他们的技术成为Sanger测序法后第一个被用来测生物基因组全序列的新方法。

454使用类似于焦磷酸测序的方法,有着相当高的读取速度,大约为5小时可以测两千万碱基对。

已测序的生物指其基因组已经被完全测序的生物。

其中部分生物的DNA序列已经被完全注释,功能性的片段(如基因等)已作图。

借助於基因组研究及高通量处理等技术,越来越多的生物的全部基因被人们获得。

自从1995年以来已经有150个基因组被解密,将近每个星期有新的物种添加进来。

已测序的生物列表

下表是目前爲止已经被相当完全测序的生物。

古菌

∙Aeropyrumperni'-ArchaeaausjapanischenThermalquellen

∙Archaeoglobusfulgidu'-Schwefel-Archaea

∙Halobacteriumspec'-ArchaeaausSalzseen

∙Methanobacteriumthermoautotrophicu'-MethanproduzierenderArchaea

∙Methanococcoidesburtoni'-k?

ltetoleranteundaerobeArchaeaausdemAceLake,Antarktis

∙Methanococcusjannaschi'-TiefseearchaeaanBlackSmokern

∙Methanococcusmaripalud'-ArchaeaausSalzseeninGeorgia

∙Methanogeniumfrigidu'-k?

ltetoleranteundaerobeArchaeaausdemAceLake,Antarktis

∙Methanopyruskandler'-TiefseearchaeaanBlackSmokern

∙Methanosarcinaacetivoran'-Archaeaaus?

lquellen,Kuhm?

genu.a.

∙Methanosarcinamaze'-ArchaeamitderF?

higkeitAcetatu.a.abzubauen

∙[equitans'-Archaeaanhei?

enQuellen,ParasitandererMikroorganismen

∙Pyrobaculumaerophilu'-Archaeaaushei?

enQuellen

∙Pyrococcusabyss'-TiefseearchaeaanBlackSmokern

∙Pyrococcusfuriosu'-TiefseearchaeaanBlackSmokern

∙Pyrococcushorikoshi'-TiefseearchaeaanBlackSmokern

∙Pyrolobusfumari'-TiefseearchaeaanBlackSmokern

∙Sulfolobussolfataricu'-Archaeaaushei?

enSchwefelquellen

∙Sulfolobustokodai'-Archaeaaushei?

enSchwefelquellen

∙Thermoplasmaacidophilu'-sehrs?

ureliebenderArchaea,reinigtBergwerkshaldenu.a.

∙Thermoplasmavolcaniu'-w?

rmeliebenderArchaea

细菌

∙[tumefaciens'-PflanzenpathogenesBakterium,tumorbildend

∙Aquifexaeolicu'-HyperthermophilesMeeresbakterium

∙[anthracis'-Anthrax-Erreger

∙[cereus'-ErregereinerLebensmittelvergiftung

∙Bacillushaloduran'-EnzymproduzierendesBakterium(Industriellgenutzt)

∙[subtilis'-EnzymproduzierendesBakterium(Industriellgenutzt)

∙Bacteroidesthetaiotaomicro'-Darmbakterium

∙Bifidobacteriumlongu'-Darmbakterium

∙Blochmanniafloridanu'-BakteriuminSymbiosemitErnteameisen

∙[bronchiseptica'-ErregerchronischerInfektionenderAtemwege

∙[parapertussis'-ErregervonmildemKeuchhusten

∙[pertussis'-ErregervonKeuchhusten

∙Borreliaburgdorfer'-Borreliose-Erreger

∙Bradyrhizobiumjaponicu'-Kn?

llchenbakteriumderSojabohne

∙[melitensis'-ErregerdesMaltafiebers

∙Brucellasui'-potentielleBiowaffederUSA,wirktabtreibend

∙Buchneraaphidicol'-BakteriuminSymbiosemitBlattl?

usen

∙Burkholderiamalle'-ErregerdesRotzesbeiHuftieren,auchhumanpathogen(EinsatzalsBiowaffe)

∙Burkholderiapseudomalle'-ErregerderMelioidose,voralleminSüdostasien

∙[jejuni'-ErregereinerLebensmittelvergiftung

∙Caulobactercrescentu'-Sü?

wasserbakterium

∙Chlamydiamuridaru'-AtemwegsinfektionenbeiMausundMeerschweinchen

∙Chlamydophilacavia'-AugenentzündungenbeiMeerschweinchen

∙Chlamydiatrachomati'-ErregerderHarnr?

hrenentzündung

∙[pneumoniae'-ErregereinerBronchitis

∙Chlorobiumtepidu'-GrünesSchwefelbakterium

∙Chromobacteriumviolaceu'-humanpathogenesBakterium(DiarrhoeundandereErkrankungen)

∙Clostridiumacetobutylicu'-Aceton-undButanol-produzierendesBakterium

∙[perfringens'-ErregerDiarrhoeetc.

∙[tetani'-Tetanus-Erreger

∙[diphtheriae'-ErregerderDiphtherie

∙[jeikeium'-nosokomialpathogenerHautbewohner

∙Corynebacteriumefficien'-BakteriumzurProduktionvonAminos?

urenu.a.

∙[burnetti'-ErregerdesQ-Fieber

∙Deinococcusradioduran'-extremstrahlungstolerantesBakterium

∙Desulfotaleapsychrophil'-extremk?

ltetolerantesBakteriumdesarktischenEismeeres

∙Desulfovibriovulgari'-Bakteriumaus?

lfeldern,wirtschaftlicherSch?

dling

∙[faecalis'-Darmbakterium,Modellorganismus

∙[coli'-Darmbakterium,Modellorganismus

∙Fusobacteriumnucleatu'-VerbreitetesBakteriumimZahnbelag

∙[ducreyi'-ErregerdesSchanker

∙[influenzae'-ErregereinerErk?

ltung

∙Helicobacterhepaticu'-ErregerchronischerHepatisundvonLebergeschwürenbeiM?

usen.

∙[pylori'-ErregervonMagengeschwüren

∙[plantarum'-Milchs?

urebakterium

∙[lactis'-K?

sebakterium

∙''Legionellapneumophila-ErregerderLegion?

rskrankheit

∙''Leifsoniaxyli-einpflanzenpathogenesBakterium

∙Leptospirainterrogan'-ErregerderLeptospirosis

∙Listeriainnocu'-nichtpathogeneListeria-Art

∙Listeriamonocytogene'-ErregereinerLebensmittelvergiftung

∙Mannheimiasucciniciproducen'-symbiotischesBakteriumimMagenvonKühen

∙Mesoplasmafloru'-BakteriummitextremkleinenGenom

∙Mesorhizobiumlot'-Kn?

llchenbakteriumbeiLotus-Arten

∙[leprae'-ErregerderLepra

∙[bovis'-ErregerderRindertuberkulose

∙[paratuberculosis'-ErregerderRinderkrankheitJohne'sDesease

∙[tuberculosis'-ErregerderTuberkulose

∙Mycoplasmagallisepticu'-ErregereinerchronischenAtemwegserkrankungbeiGeflügel

∙Mycoplasmagenitaliu'-ErregervonInfektionendesGenitaltraktes

∙Mycoplasmapenetran'-ErregervonEntzündungendesHarn-undGenitaltraktessowiederAtemwege,evtl.assoziiertmitdemHI-Virus(AIDS)

∙Mycoplasmapneumonia'-ErregereinerBronchitis

∙Mycoplasmapulmoni'-ErregervonInfektionendesHarn-undGenitaltraktessowiederAtemwegebeiM?

usen

∙Neisseriameningitidi'-ErregerderMeningitis(Hirnhautentzündung)

∙[europaea'-Nitratbakterium

∙Oceanobacillusiheyensi'-Tiefseebakterium

∙[multocida'-ErregervonVogelcholera,AnsteckenderKaninchenschnupfen,H?

morrhagischemFieberbeiWeideviehundArthritisbeiSchweinenundMenschenu.a.

∙[luminescens'-BakteriuminSymbiosemitinsektenpathogenenFadenwürmern

∙[gingivalis'-ErregervonParodontose

∙[marinus'-Meeresbakterium

∙Pseudomonasaeruginos'-alsOpportunistbeigeschw?

chtemImmunsystempathogen

∙Pseudomonasputid'-BodenbakteriumzumAbbauvonVerseuchungen

∙Pseudomonassyringa'-PflanzenpathogenesBakterium,u.a.Tomatensch?

dling

∙Ralstoniasolanacearu'-PflanzenpathogenesBakterium,WelkebeiHundertenverschiedenerPflanzenarten

∙Rhodopirellulabaltic'-RotesMeeresbakterium

∙Rhodopseudomonaspalustri'-Purpurbakterium

∙Rickettsiaconori'-ErregerdesMittelmeer-Fleckfieber

∙Rickettsiaprowazeki'-ErregerdesTyphus

∙Rickettsiasibiric'-ErregervonZeckenfieberinNordasien

∙Rickettsiatyph'-ErregerdesM?

usetyphus(auchhumanpathogen)

∙[typhi'-ErregerdesTyphusfieber

∙[typhimurium'-ErregerdesTyphusfieberbeiderMaus

∙Shewanellaoneidensi'-MetallabbauendesBodenbakterium

∙Shigellaflexneri'-evtl.UrsachevonPl?

tzlichemKindstod

∙[meliloti'-Kn?

llchenbakteriumdesAlfalfa

∙[aureus'-ErregervonScharlachfieberundToxinschocks

∙[epidermidis'-Hautbakterium,pathogenbeiWunden

∙[agalactiae'-ErregervonschwerenNeugeboreneninfektionen,Meningitisu.a.

∙[mutans'-ErregervonKaries

∙[pneumoniae'-ErregervonLungenentzündungen,MenigitisundBlutvergiftungen

∙[pyogenes'-ErregervonRheumatischemFieber,Toxinschocksu.a.

∙[avermitilis'-AntibiotikaproduzierendesBakterium(industriellgenutzt)

∙[coelicolor'-AntibiotikaproduzierendesBakterium(industriellgenutzt)

∙Thermoanaerobactertengcongensi'-Bakteriumaushei?

enQuelleninVolksrepublikChina

∙Thermotogamaritim'-sehrs?

ureliebendesBakterium,reinigtBergwerkshaldenu.a.

∙Thermusthermophilu'-hitzeliebendesBakteriumausJapan,findetEinsatzinderPCRundanderswo.

∙[pallidum'-ErregerderSyphilis

∙Tropherymawhipple'-ErregerderWhipple-Krankheit

∙Ureaplasmaurealyticu'-ErregervonInfektionendesHarn-undGenitaltraktes

∙[cholerae'-ErregerderCholera

∙[fischeri'-Leuchtbakterium,dasimMeerlebtundfürdieQualit?

tsbestimmungvonAbwasserverwendetwird

∙Vibrioparahaemolyticu'-ErregerschwererMagen-Darm-Entzündungen

∙Vibriovulnificu'-Meeresbakterium,kannzuErkrankungendurchVerzehrvonrohenMeeresorganismenführen.

∙[glossinidia'-ErregerderSchlafkrankheit

∙Wolinellasuccinogene'-BakteriumimKuhmagen

∙[axonopodis'-PflanzenpathogenesBakterium,erzeugtZitronenkrebsbeiZitrusfrüchten

∙[campestris'-PflanzenpathogenesBakterium,erzeugtSchwarzf?

ulebeiKreuzblütern

∙Xylellafastidios'-PflanzenpathogenesBakterium,schwererSch?

dlinginObst-,Nuss-undKaffee-PlantageninNord-undSüdamerika

∙[pestis'-ErregerderPest

蓝藻

∙Anabaenaspec.'-Fadenblaualge

∙Gloeobacterviolaceu'-primitiveBlaualge

∙Synechococcusspec'-Meeres-Blaualge

∙Synechocystisspec'-Meeres-Blaualge

oThermosynechococcuselongatu'-ThermophileBlaualge

真核生物

原生生物

∙Leishmaniainfantu'-一种利什曼原虫

∙Leishmaniamajo'-一种利什曼原虫

∙Plasmodiumfalciparum'-恶性疟原虫

∙Plasmodiumyoeliiyoeli'-约氏疟原虫,引起啮齿动物疟疾

∙Thalassiosirapseudonan'-一种海洋硅藻

∙Trypanosomabruce'-一种锥体虫

∙Trypanosomacongolens'-一种锥体虫

∙Trypanosomacruc'-一种锥体虫

∙Trypanosomaviva'-一种锥体虫

真菌

∙Ashbyagossypi'-感染柑橘类和棉花的真菌

∙Aspergillusfumigatu'-烟麴霉,人类致病菌

∙Aspergillusnidulan'-构巢麴霉

∙Debaryomyceshanseni'-耐盐的酵母

∙Encephal

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