44.TLC 是什么的简称 (A)
A薄层层析B 纸层析C 高效液相色谱 D气相色谱
45.方法中不属于生物样品的预处理方法的是(E)
B.消化分解B.提取C.分离D.浓缩E.结晶
46.不属于亲和层析的基质的性质是(D)
A.具有良好的物理化学稳定性B.能够和配体稳定的结合
C.基质的结构应是均匀的多孔网状结构D.基质应具有较好的疏水性
47.细胞克隆化的方法很多,下面正确的方法为(A)
A.毛细管法,有限稀释法B.活性炭吸附法C.BF分离技术D.重组免疫法
48.在探针制备中常用到某些荧光物质,以下哪项不是(A)
A.PNAB.TMRC.罗丹明D.Cy5
49.以下哪项不是核酸分子杂交促进剂(C)
A.PEGB.硫酸葡聚糖C.生物素D.硫氰酸胍
50.下列关于缓冲液的性质叙述错误的是(C)
A.溶液PH值距离其等电点越远,电泳的速度就越大
B.当缓冲液PH大于蛋白质分子的等电点时,其电泳方向指向正极
C.对两性分子而言,缓冲液PH并不影响其电泳方向
D.泳动度与溶液黏度是成反比关系
51.电流作功引起介质温度升高,造成的影响不包括(D)
A.样品和缓冲离子扩散速度增加,引起样品分离带的加宽
B.产生对流,引起待分离物的混合
C.如果样品对热敏感,会引起蛋白变性
.D.引起介质黏度升高,电阻下降
52.下列电阻分类依据不同于其他三种的为(A)
A.纸电泳B.板电泳C.薄层电泳D.柱电泳
53.凝胶的种类很多,常用的凝胶主要有
葡聚糖凝胶
聚丙烯酰胺凝胶
琼脂糖凝胶
多孔玻璃珠
多孔硅胶
聚苯乙烯凝胶(D)
A.
B.
C.
D.以上都是
54.下列哪种层析不是根据固定项基质形式分类的(B)
A.纸层析B.凝胶层析C.薄层层析D.柱层析
55.下列关于PRC反映的五要素说法正确的是(A)
A.引物、酶、dDTP、摸板、Mg2+浓度
B.引物、蛋白质、dNTP、摸板、Mg2+浓度
C.引物、温度、dNTP、模板、Mg2+浓度
D.引物、酶、dDTP、RNA、PH值
56.下列不属于PCR产物检测方法的是(D)
A.凝胶电泳分析B.分子杂交C.核酸序列分析D.高效液相色谱分析
57.物镜放大率要求根据实验要求的不同而不同,油浸物镜的放大倍率和NA值为(D)
A.1X—6X,NA值为0.04—0.15B.6X—25X,NA值为0.15—0.40
C.25X—63X,NA值为0.35—0.95D.90X—100X,NAZ值为1.25—1.40
58.下面选项中不是PCR反应要素的是(B)
A.温度B。
材料C。
时间D。
循环次数
59.在定性分析中,如用分光光度法,什么光谱较好(A)
A.红外吸收光谱B。
紫外吸收光谱C。
可见光谱D。
X射线
60.下列关于核酸探针的分类叙述错误的是(C)
A。
根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针
B。
根据是否使用放射性标记物的与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针
C.根据是否存在互补链,可分为互补链探针和非互补链探针
D.根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针
61.下列不是核酸分子杂交的影响的是(D)
A.核酸分子杂交促进剂B。
核酸分子杂交反应时间C.不同的反应条件D。
压力的影响
62.下列哪一项不属于芯片数据分析方法(C)
A.数据归一化分析B。
视图分析C.时间序列分析D.生物学分析
63.关于芯片杂交反应因素的影响不正确(B)
A.寡核苷酸探针低密度覆盖率使杂交信号减弱
B.长的杂交序列不容易区分碱基的错配,但形成的复合物稳定性差一些
C.GC含量不同的序列其稳定性也不同
D.选择合适长度的间隔序列,可使杂交信号增强
64.流式细胞仪的核心部件是(B)
A.激光管B。
流动室C。
透镜D。
压力感受器
65.不是流式细胞术常规检测时的样品制备方法的是(C)
A.直接免疫荧光标记法B。
间接免疫荧光标记法
C.最大化非特异性结合的方法D。
最小化非特异性结合的方法
66.不是流式细胞仪分析全血中血小板的优点的是(A)
A.减少了放射性污染B。
全血中血小板更接近生理状态
C.操作简便D。
检测血小板亚群灵敏度高
67.IRMA属(B)免疫标记测定,原理与ELISA极为相似。
A.气相B。
固相C。
液相
68.亲和素是一种(A),可由蛋清中提取,由四个亚基组成。
A.糖蛋白B。
脂肪酸C。
氨基酸D。
维生素
69.四乙基罗丹明为(C)粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮
A.绿色B。
蓝色C。
橘红色D。
黄色
70.流体细胞术的英文缩写是(C)
A.IGSB.CSSC.FCMD.PCR
71.以下哪项不是核酸分子杂交促进剂(C)
A.PEGB.硫酸葡聚糖C.生物素D.硫氰酸胍
73.在常规紫外光测定时,紫外光波长集中于(B)区
A.小于190nmB.200~400nmC.400~800nmD.800nm以上
74.凝胶层析中最先流出的是(A)
A.大分子B.中等分子C.小分子D.吸附分子
二:
判断题
1.生物体上的某一部分作为样品,如果分布在一个部位,可以去此部分的全部作为样品(T)
2.SEM具有放大倍率高,分辨率高,景深大,试样制备简单但保真度较差的特点(F)
3.在定量分析中,朗伯比尔定律适用于可见光,红外光,紫外光,固体,气体,也适用于均匀非散射的液体(T)
4.不同物质其分子结构不同,对不同波长的吸收能力可能相同(F)
5.凝胶层析法是指混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小而被分离的技术(T)
6.大型或小型流式细胞仪都固定装置了一定孔径的流动室(F)
7.免疫电泳沉淀线的数目和分辨率受许多因素影响(T)
8.变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因(F)
9.只有DNA或蛋白质才能布置在玻璃表面上从而制的细胞芯片或组织芯片(F)
10.变性DNA固定在琼脂中,DNA能变性,但不能与其它互补核酸序列杂交(F)
11.在荧光抗体染色实验类型中,直接法具有特异性高,敏感度高,非特意荧光染色因素少的优点(×)
12.PCR的三个反应步骤反复进行,使DNA扩增,靶序列DNA片段的增加一直成指数形式(×)
13.模板核算的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一。
(√)
14.PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度,一般的循环次数选在30-40次之间,
15.循环次数越多,特异性产物的量亦随之增多(×)
16.薄层层析是在玻璃板上涂布一层支持剂,待分离样品点在薄层板的一端然后让推动剂从上流动,从而使各组分得到分离的物理方法。
(√)
17.根据流动相的形式分类,层析可以分为液相层析和气相层析(√)
18.亲和层析是利用某些生物分子之间专一可逆结合特性的一种高度专一的吸附层析类型。
(Y)
19.毛细管转移的优点是不需要脱嘌呤/水解作用,可直接转移较大的DNA片段(×)
20.玻片杂交,先制片,片子制好后不需染色,放在缓冲液中缓慢变性(√)
21.在电解质溶液中,带电粒子在电场作用下,以相同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现象叫电泳。
(F )
22.层析法是一种基于被分离物质的物理、化学及生物学特性的不同,使它们在某种基质中移动速度不同而进行分离和分析的方法。
(T )
23.PCR的三个基本反应步骤为
摸板DNA的变性
摸板DNA与引物的退火
DNA的复制。
(F )
24.常见的临床标本主要有组织,细胞和细菌三大类(T )
25.经荧光抗体染色的标本,可在普通显微镜下观察。
(F )
26.分子杂交的方法都必须有探针的存在。
(T )
27.探针的功能:
识别靶序列和携带报告分子。
(T )
28.流式细胞术是集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免役学于一体,同时具有分析和分选细胞的功能。
(T )
29.不论是单位点还是双位点IRMA,最后测得的放射性与受检验的量呈反比。
(F )
30.变性温度低,解链不完全是导致PCR失败的最主要原因(F)
三:
填空题
1.采集的生物样本药具有:
代表性,典型性和适时性
2.常见的紫外可见分光光度计类型有:
单光束分光光度计,双光束分光光度计,双波长分光光度计,光多道二极管阵列检测分光光度计
3.朗伯-比尔光吸收定律:
A=lg(1/T)=lg(I0/It)
4.基质体积是指:
凝胶颗粒实际骨架体积
5.散射光分为前向角或0°散射和侧向角或90°散射
6.ELISA的技术要点包括三个方面:
试剂制备,反应条件的选择,操作的标准化
7.影响电泳分离的主要因素待分离生物大分子的性质,缓冲液性质,电场强度,电渗,支持介质的筛孔
8.PCR反应条件三要素:
温度,时间,循环次数
9.在核酸杂交试验中,常用的指针标记方法为同位素标记法和生物素标记法
10.基因芯片技术主要包括四个基本技术环节:
芯片微阵列制备,样品制备,生物分子反应,信号的检测及分析
11.电泳装置主要包括电源和电泳槽两部分。
12.凝胶层析是根据分子大小这一物理特性进行分离纯化的。
13.PCR反应特点为特异性强、灵敏度高、简便快速、对标本纯度要求高。
14.分光光度计法包括质谱分析法和远红光谱分析法。
15.双链DNA探针的合成方法主要有切口平移法和随机引物合成法。
16.芯片分为原位合成和(直接点样)。
其中原位合成途径有光蚀刻法和喷印法。
17.流式细胞仪主要有哪两种类型:
临床型和综合型。
18.流式细胞仪在使用前调试的项目主要是激光强度、液流速度和测量区的光度。
19.可作ELISA载体的物质很多,最常用的是聚苯乙烯。
20.朗伯-比尔光吸收定律:
A=lg(1/T)=lg(I0/It)
21.电泳按其分离原理不同可分为区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚集电泳。
22.在反相液相色谱的分离过程中,极性大的组分先流出色谱柱,极性小的组分后流出色谱柱。
23.酶免疫技术一般分成酶免疫组化技术、酶免疫测定。
24.ELISA的技术要点包括三个方面:
试剂的制备、反应条件的选择、操作的标准化
25.在凝胶层析中小分子由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而被滞留,大分子被排阻在凝胶颗粒外面,在颗粒之间迅速通过
四:
简答题
1.简述荧光计与比色计的区别?
答:
⑴在比色计中光源,比色杯和光电池三者排列成一条直线;在荧光计中三者须排列成三角形
⑵比色计中用钨丝灯;荧光计必须用汞灯
⑶比色计中只有一个光源,只需要一个滤光板;荧光计中有两种辐射,三个滤光板:
滤光板1用于过滤紫外线,除去可见光,滤光板2用于过滤荧光,以除去其它颜色的荧光,滤光板3可滤去荧光中夹杂的紫外线
2.简述PCR技术的基本原理
答:
①模板DNA的变性:
模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。
②模板DNA与引物的退火:
模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合
③引物的延伸:
DNA模板—引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性—退火—延伸三过程,可获得更多的半保留复制链,可成为下次循环的模板
4.影响电泳分离的因素
答:
①待分离生物大分子的性质②冲液的性质:
pH值;离子常数;溶液粘度
3电场强度:
强度大,速度快④电渗:
方向一制,速度快
5支持介质的塞孔,塞孔大,速度快
5.分子杂交的基本原理是什么?
、
答:
应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子。
6.PCR引物的设计原则有哪些?
答:
①引物应用核酸序列保守区内设计并具有特异性②产物不能形成二级结构
③引物长度一般在15——30碱基之间④J+C含量在40%-60%之间
⑤碱基要随机分布⑥引物自身不能有连续四个碱基的互补
⑦引物之间不能有连续四个碱基的互补⑧引物5‘端可以修饰
⑨引物3‘端不可修饰⑩引物3’端要避开密码子的第三位
7.荧光抗体技术作为标记的荧光素应符合什么要求?
(1)应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基因,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除;
(2)应广效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率
(3)荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明
(4)与蛋白质结合不影响蛋白质原有的生化免疫性质
(5)标记方法简单,安全无毒
(6)与蛋白质的结合物稳定易于保存
8.芯片杂交技术的影响因素有哪些?
(1)寡核苷酸探针密度影响
(2)支持介质与杂交序列间的间隔序列长度的影响
(3)杂交序列长度的影响(4)GC含量的影响
(5)探针浓度的影响(6)核酸二级结构的影响
9.比色计与荧光计两种装置有哪些不同点?
⑴在比色计中光源,比色杯和光电池三者排列成一条直线;在荧光计中三者须排列成三角形
⑵比色计中用钨丝灯;荧光计必须用汞灯
⑶比色计中只有一个光源,只需要一个滤光板;荧光计中有两种辐射,三个滤光板:
滤光板1用于过滤紫外线,除去可见光,滤光板2用于过滤荧光,以除去其它颜色的荧光,滤光板3可滤去荧光中夹杂的紫外线
备注:
上面是生物制药三个班共同出的预测题,里面可能有许多重题,请大家复习时留意!
最后祝大家考个好成绩!