枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究.pdf

枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究.pdf

《枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究.pdf（3页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL20NO1时珍国医国药2009年第20卷第1期枳实提取物中类黄酮的高效液相色谱法测定及其抗氧化作用研究焦士蓉一，黄承钰（1西华大学生物工程学院，四川成都610039；2四川大学华西公共卫生学院，四川成都610041）摘要：

目的建立了枳实中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦丁、槲皮素含量的测定方法，同时测定了枳实提取物的抗氧化作用。

方法采用HPLC法，色谱柱：

PhenomenexGeminiC柱（150mm46mm，5txm），柱温37，流动相为乙腈一磷酸溶液，检测波长280，365nm，流速10mlmin。

采用DPPH测定枳实提取物的自由基清除能力。

结果进样量范围：

柚皮苷为11435717txg橙皮苷为00920459txg，新橙皮苷为11795895Ixg，芦丁为002401l8g，槲皮素为00790395txg。

柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的平均回收率分别为99604，100150，100249。

RSD分别为0515，4390，0774。

枳实提取物对DPPH清除作用是柚皮苷的176倍。

结论HPLC测定法简便、准确，可用于测定枳实类黄酮含量，同时枳实提取物具有较强的自由基清除作用。

关键词：

枳实；类黄酮；高效液相色谱法；抗氧化作用中图分类号：

R2842；R2855文献标识码：

A文章编号：

1008-0805（2009）01_（）207-I）2DeterminationofFlavoniodsinCitrusaurantiumLExtractbyHPLCanditsAntioxidantActivityJIAOshirong一，HUANGChengyu（1SchoolofBioengineeringofXihuaUniversity，Chengdu610039，China2SchoolofHuaxiPublicHealth，SichuanUniversity，Chengdu610041，China）Abstract：

ObjectiveToestablishanHPLCmethodfordeterminationofnaringin，hesperidin，neohesperidin，rutinandquercetininCitrusaurantiumLandtostudyantioxidantactivityMethodsThesampleswereextractedwithethano1Thechromatographicconditionswereasfollows：

PhenomenexGeminiC18column（150mmx46mm，51xm），columntemperatureat37，mobilephaseofacetonitrilephosphatesolution，detectionwavelengthat280nmor365nm，flowrate1OmlminInaddition，DPPHradicalscavengingwasemployedtomeasureantioxidantactivitiesResultsThecalibrationcurveswerelinearintherangeof114357171xgfornaringin00920459txgforhesperidin，11795895ixgforneohesperidin，00240118txgforrutinand00790395gforquercetinTheaveragerecoveriesofnaringin，hesperidin，neohesperidinwere99604，100150and100249respectivelyRSDwere05154390and0774respectivelyTheDPPHradicalscavengingactivityofCaurantiumLflavoniodswas176timesofnaringinConclusionThemethodissimple，accuratefordetectingflavoniodsinCaurantiumL，andtheCaurantiumLKeywords：

CitrusaurantiumL；Flavoniods；extracthasantioxidantactivitiesHighperformanceliquidchromatography；Antioxidantactivity枳实为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL及其栽培变种或甜橙CitrussineusisOsbeck的干燥幼果，具有破气除痞、化痰消积的功效，是中医临床常用药物。

关于测定枳实类黄酮的HPLC法大部分报道是测定柚皮苷、橙皮苷，而对于新橙皮苷、芦丁、槲皮素的测定，少有报道，同时对于枳实类黄酮的抗氧化作用未见报道。

本研究采用HPLC测定枳实中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、芦丁、槲皮素的含量，同时测定了枳实类黄酮对DPPH自由基的清除作用，为枳实药用的深入研究提供基础。

1材料、试剂与仪器枳实购买自成都荷花池中药材市场（经鉴定为酸橙幼果CitnaurantiumL）；芦丁（生物制品检定所，批号100080200306）、柚皮苷、新橙皮苷（sigma）；槲皮素、橙皮苷（Fluka）；2，2一二苯代苦味酰基（2，2一diphenyl一2一picrylhydrazyl，DPPH）（sigma）。

乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

WatersHPLC（waters515pump，water2487uV），752PC型紫外可见分光光度计。

2方法21枳实提取方法枳实提取物（CaurantiumLethanolextract，收稿日期：

200711-20；修订日期：

20081030基金项目：

四川省教育厅自然重点项目资助（No07ZA117）作者简介：

焦士蓉（1968），女（汉族），安徽安庆人，现任西华大学生物工程学院副教授，硕士学位，主要从事食品营养与卫生研究工作CEE）：

枳实粉碎，以70乙醇，料液比1：

30，温度80，回流提取3次，2h次，合并滤液，60C真空浓缩，冷冻干燥，得浅棕色粉末。

22枳实内黄酮的测定（I-IPLC法，芦丁、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、槲皮素为对照）色谱条件：

PhenomenexGeminiC。

（150mmx46mm，5Ixm），柱温37，流动相A：

100乙腈，B：

0075磷酸溶液，梯度洗脱：

015min，A（1520）；1520min，A（20一80）；2023min，A（80100）；2324min，A（10015）；2430min，A（15）。

流速10mlmin，检测波长分别是280，365nm，进样量lOlxl。

23DPPH的清除作用准确称取2，2一二苯代苦味酰基标准品20mg，无水乙醇溶解定容至500ml，得浓度为004mgml溶液。

取此溶液3ml，加入不同浓度的试样溶液1ml，室温，3Omin，测定吸光度值A，空白组以1ml无水乙醇代替试样，并按下式计算清除率：

DPPH清除率（）：

（1一A试羊A自）1003结果31线性关系的确定分别精密称取柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、芦丁及槲皮素对照品142920，147375，11466，2962，9880mg以甲醇：

二甲亚砜（1：

1）溶解并定容至50ml，得对照品储备液。

并将溶液稀释5倍后，分别以5，75，10jxl进样；将溶液稀释125倍后，分别以5，75，10txl