实验一渗透压对红细胞的影响.docx
《实验一渗透压对红细胞的影响.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验一渗透压对红细胞的影响.docx（16页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
实验一渗透压对红细胞的影响
实验一渗透压对红细胞的影响（示教）
日期年月日成绩教师签字
【目的】观察不同浓度的低渗溶液对红细胞的影响；加深理解血浆渗透压恒定的意义。
【原理】正常情况下，哺乳动物红细胞内的渗透压与血浆渗透压相等，约相当于0.9%Nacl溶液的渗透压。
因此，将红细胞置于等渗的Nacl溶液中，其形态和容积保持不变。
若红细胞置于低渗的Nacl溶液中，则水分进入红细胞使之膨胀甚至破裂发生溶血。
故临床上常用不同浓度的Nacl溶液来测定红细胞膜的渗透脆性。
开始出现溶血现象的低渗溶液浓度为该血液中红细胞的最小抵抗力最大脆性，出现完全溶血时的低渗溶液浓度为该血液中红细胞的最大抵抗力，最小脆性。
正常值；红细胞最大脆性为0.42%-0.46%Nacl溶液，最小脆性为0.32%-0.34%Nacl溶液。
【用品】抗凝血液，小试管及试管架、滴管、2毫升吸管、1%氯化钠溶液、蒸馏水
【步骤】
1、取小试管10支，标号，依次排放在试管架上。
2、先按照下表所列数量向试管内加蒸馏水，匀加至2毫升。
这样便制成了从0/7%直到0/25%共10种浓度的低渗溶液。
3、向10支试管中滴加抗凝血液，每管1滴，摇匀，静置于试管架上一小时。
。
试管号
试剂
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1%氯化钠
0.9
0.65
0.6
0.55
0.5
0.45
0.4
0.35
0.3
0.25
蒸馏水
0.1
0.35
0.4
0.45
0.5
0.55
0.60
0.65
0.70
0.75
氯化钠浓度
0.9
0.65
0.6
0.55
0.5
0.45
0.4
0.35
0.3
0.25
4、观察结果，所出现的现象可分为以下三种。
（1）试管内液体完全变成透明红色，说明全部红细胞破坏溶解，称为完全溶血。
记下最先开始出现现象的浓度（这表示最小脆性）
（2）试管内液体分上下两层，上层透明红色，表明部分红细胞已破坏溶解；下层为混浊红色，表明部分红细胞未溶。
记下最开始出现的盐溶液浓度（这表明红细胞最大脆性）
（3）试管内液体分上下两层，但上层液体为无色或极淡的红色，下层为混浊红色（说明红细胞完全没有溶解）。
【注意事项】
1、溶液配制必须准确，试管必须编号，避免血液凝固。
2、向试管内加入的血量应相同。
血液加入后应立即混匀，避免血液凝固。
【结果分析】
1、将实验结果做以下记录
被测者姓名性别室温（℃），最大红细胞脆性为（）%氯化钠溶液，最小脆性为（）%氯化钠溶液。
2、讨论
输液时为什么要采用等渗溶液？
实验二ABO血型测定
日期年月日成绩教师签字
【目的】学习用标准血清测定ABO血型的方法；观察红细胞凝集现象；加深理解血型的分型依据及检查血型在输血中的意义。
【原理】红细胞膜上的血型抗原与相应的血型抗体会发生凝集反应。
所以，用已知的凝集素（抗体）鉴定被检查者红细胞上的未知的凝集原（抗原），从而判定血型。
【用品】采血针、75%酒精棉球、玻片、A和B标准血清、干棉球、玻璃笔
【步骤】
1、取玻片一块，用玻璃笔在左上角写上A字，在右上角上写上B字。
2、在A侧一端加标准血清A一滴，在B侧滴加标准血清B一滴；二者切勿相混。
3、用75%酒精棉球消毒耳垂，以消毒过的采血针刺破皮肤，待血流出，用小玻璃棒两端分别取血加入A和B血清中混匀（切勿将A玻璃棒再放入B中）
4.静置10分钟后，观察是否发生凝集反应，如不能确定可放在低倍显微镜下观察30分钟后再最后确定。
5、根据有无凝集现象判断血型。
【结果分析】
姓名性别血型
1、你是如何鉴定出自己的血型的？
2、临床输血时应遵循什么原则？
实验三影响血液凝固的因素（示教）
日期年月日成绩教师签字
【目的】了解血液凝固的基本过程及加速、延缓和防止血液凝固的因素。
【原理】血液凝固过程是一系列复杂的生化反应，可分为三个步骤，最终是血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白所致。
某种因素影响血液凝固过程使反应中断时，则起抗凝作用；使反应减慢时，则起缓凝作用；使反应加快时，则起促凝作用。
【用品】兔、哺乳动物手术器械用品、麻醉药、温水槽、冰水槽、试管6支、试管架、烧杯、10毫升注射器、脱脂棉球、石蜡油、柠檬酸钠、3%氯化钙、肝素。
【步骤】
血源准备：
取兔一只，称重，按公斤体重由耳缘静脉注入一定量麻醉药（20%氨基甲酸乙酯5ml/kg）麻醉后（肌张力消失，角膜反射消失），将动物仰卧固定于图解剖台上，剪去颈部手术术野区域的毛。
用手术刀沿颈部正中线切开皮肤约5-7厘米，再用止血钳分离皮下组织及肌肉，暴露气管，在气管两侧找到颈动脉鞘并游离出约4厘米的颈动脉，劲动脉头一侧丝线结扎，胸侧用动脉夹夹住，在二者之间穿一线备用。
再靠近头端结扎处稍下方，用眼科剪刀减一斜形切口，约为管径的一半，然后将动脉插管，经切口插入血管。
用线将动脉插管与动脉结扎牢固，以备放血。
1、纤维蛋白原在凝血过程中的作用
取兔动脉血十毫升，注入两个小烧杯，一杯静置，另一杯用竹签轻轻搅拌，数分钟后，竹签上结成红色血团，用水冲洗。
观察纤维蛋白的形状，并比较两杯的血凝情况。
2、
（1）取试管6支，用玻璃铅笔标号，在准备好下列表中所示实验条件。
（2）取血放开动脉夹，经动脉插管，向每只试管注入兔血一毫升，并分别用表计时。
（3）观察每隔30秒倾斜试管一次，当血液不再流动时，记录其凝血时间，填入表内，分析其原因。
各种条件凝血时间结果分析
1、加少许棉花于试管底部
2、均匀涂抹石蜡油于壁内
3、冰水槽
4、温水槽
5、肝素如不凝再加CACL2
6、加少许柠檬酸钠如不凝再加CACL2
【注意事项】
1、取血量要均等
2、准确记录凝血时间
[讨论]
（1）从第一实验你能得出什么结论？
（2）写出常用的体内外抗凝的物质和促凝的方法。
实验四胃肠运动的观察
日期年月日成绩教师签字
【目的】观察胃肠运动的各种形式以及神经和某些药物对胃肠运动的影响。
【原理】消化管运动的基本形式是蠕动，在整体内，神经和体液因素可以影响消化管平滑肌的生理特性。
【用品】家兔，兔解剖手术台，哺乳动物手术器械，保护电极，刺激器，台氏液、20%氨基甲酸乙酯、阿托品，新斯的明、0.1%乙酰胆碱，0.01%肾上腺素，生理盐水，恒温水浴锅，滴管，注射器等。
【实验步骤】
1、实验准备
1、将土用20%，氨基甲酸乙酯（5ml/㎏）麻醉，仰卧固定于兔解剖台上。
2、将腹部正中线部位的毛剪去，自剑突下沿腹壁正中线切开腹壁，打开腹腔。
3、在膈食管的末端找出迷走神经前支，穿上一条丝线备用。
4、用温热盐水纱布将小肠推向右侧，在左侧肾上腺的上腹后壁处，找出左侧内脏大神经，穿上一条丝线备用。
2、观察实验项目并记录实验结果，分析原因
1、观察正常情况下肠胃运动形式和紧张度
2、用电刺激连续刺激膈下迷走神经，观察小肠蠕动变化。
3、用电刺激连续刺激内脏大神经，观察小肠蠕动变化。
4、在一段肠管上滴加0.01%的乙酰胆碱5到10滴，观察小肠蠕动变化。
5、在一段肠管上滴加0.01%的肾上腺素5到10滴，观察小肠蠕动变化。
6、沿耳缘静脉注射新斯的明0.2-0.3㎎，观察胃肠运动变化。
7、在新斯的明作用的基础上，由耳缘静脉注射阿托品0.5㎎，在观察肠胃运动的变化。
【注意事项】
1、麻醉动物要保温，手术操作要轻巧，电刺激强度也要适中，不可过强。
2、为避免胃肠暴露时间过长，腹腔内温度下降，表面干燥而影响胃肠运动，应随时用温热盐水湿润胃肠。
【结果分析】将实验结果与分析做一下填空
1、胃肠运动共有的形式是（）和（）；小肠特有的运动形式是（）
2、乙酰胆碱对胃肠运动的作用类似（）神经作用，可使胃肠运动（）。
肾上腺素对胃肠运动的作用类似于（）神经作用，可使胃肠运动（）。
3、新斯的明使胃肠运动（）注射阿托品后，因阻断了，（）受体，使胃肠运动（）。
实验五呼吸运动的调节
日期年月日成绩教师签字
【目的】加深理解二氧化碳增多，缺氧，切断迷走神经等因素对呼吸运动的影响。
【原理】正常情况下，呼吸运动按照一定的节律和深度活动。
呼吸运动具有节律性，其节律性活动主要来源于下位脑干，同时也受到体内外各种刺激的影响，正常呼吸节律性运动是在呼吸中枢参与下，通过多种传入冲动的作用，反射性地调节呼吸的频率和深度而完成。
加深理解呼吸运动的调节机制。
【用品】家兔一只，保护电极，记纹鼓，兔手术台，哺乳动物手术器械一套，气管插管一只，1ml、20ml、50ml注射器各一支，橡皮管一条（长约50厘米）、钠石灰、二氧化碳球胆、1.5%乳酸溶液、生理盐水，纱布和丝线。
【步骤】
1、实验过程
（1）麻醉与固定：
用25%氨基甲酸乙酯溶液4ml/㎏由耳缘静脉注入，在家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。
（2）手术：
在颈正中部做皮肤切口，长5㎝-6㎝，分离皮下组织及肌肉暴露气管，在其下穿一丝线。
于4、5气管软骨之间做一T形切口，插入气管插管并用丝线结扎固定。
（3）用玻璃针分离两侧迷走神经，并穿线备用，最后用温热生理盐水纱布覆盖于颈部创口部位。
2、观察以下项目，记录实验现象并作解释。
（1）观察实验条件下，呼吸运动曲线的频率和幅值。
（2）吸入二氧化碳对呼吸运动的影响：
取装有二氧化碳的球胆，将球胆出气管的针头靠近兔气管插管的侧管口，以增加吸入气中二氧化碳的浓度。
呼吸出现明显变化后，立即移走球胆出气胶管的针头，停止二氧化碳的输入，使动物恢复呼吸正常空气，观察呼吸运动与通气量有何变化？
（3）造成缺氧：
将气管插管的开口端通过钠石灰瓶与盛有一定量空气的气囊相连，使呼出的二氧化碳被钠石灰吸收。
随着呼吸的进行，气囊内的氧会越来越少，请记录家兔呼吸运动的变化。
（4）血液酸碱度改变对呼吸运动的影响：
用5ml注射器由耳缘静脉注入1.5%乳酸钠4ml，降低血液的ph值后，观察呼吸运动的变化。
（5）增大无效腔对呼吸运动的影响：
将气管插管一侧的开口连接约50㎝长的橡皮管，观察呼吸运动与通气量有何变化？
（6）增大气道阻力：
夹闭气管插管的一侧管，用止血钳来夹另一侧管一部分，呼吸运动发生什么变化？
（7）切断及刺激迷走神经对呼吸运动的影响：
切断一侧迷走神经，观察呼吸运动有何变化？
然后以中等强度频率重复脉冲刺激一次迷走神经近心端，观察刺激期间呼吸运动的变化。
【注意事项】
1、插气管插管前，将气管内清理干净，保证呼吸道通畅。
2、增加吸入气中二氧化碳时，不应过多过猛。
3、实验记录过程中不要随意按键盘或移动兔手术台以免影响实验进程。
实验六胸膜腔负压的测定（示教）
日期年月日成绩教师签字
【目的】直接观察动物胸膜腔内的负压，明确胸内负压的成因和维持条件。
【原理】在平静呼吸时，胸膜腔内的压力虽随呼吸和吸气而升降，但始终低于大气压力，故称为胸内负压；在紧闭口鼻用力呼气时，胸内压可高于大气压。
当胸膜腔与外界大气相通后，因外界空气进入胸膜腔而形成气胸，故此胸内压便与大气压相等不再显示负压。
本实验即利用水检压计验证胸内负压的存在与影响其变动的因素。
【用品】家兔、哺乳类动物手术器械、水检压计。
【实验步骤】
1、将空刺针头通过橡皮管与水检压计相连，检压计内水液略加红色墨水，以利观察液面波动。
检压计内液面应与刻度0一致，并调整检压计的高度，使刻度0与动物胸膜腔在同一水平。
2、自兔耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯（5㎎/㎏），待动物麻醉后，仰卧固定于兔解剖台上。
3、将
升级会员 