植物细胞工程试题库华农.docx

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植物细胞工程试题库华农

植物细胞工程试题库

第一章绪论

一、名词解释

1、植物细胞工程:

包括植物组织，器官培养技术，细胞培养技术，原生质融合技术与培养技术，亚细胞水平的操作技术等。

2、染色体工程：

按照人们预定的目标，采用类似于工程学的步骤，通过染色体操纵改变生物染色体级成并进而改变其遗传性的过程。

二、判断题

1、现代生物技术最大的特征是多学科性。

（√）

2、狭义的细胞工程是指细胞融合和细胞培养技术。

（√）

3、细胞学说是由Schleiden和Schwan提出的。

（√）

4、植物细胞全能性学说是由Haberlandt提出的。

（√）

5、植物细胞具有变异性。

（√）

6、细胞培养技术使多细胞生物的单细胞生命活动研究成为可能。

（√）

三、问答题

1、植物细胞工程研究的内容有哪些？

植物组织，器官培养技术，细胞培养技术，原生质融合技术与培养技术，亚细胞水平的操作技术

2、植物细胞工程在育种上的应用有哪些？

1.快速获得特殊倍性材料；2.克服远缘杂交不亲和；3.克服杂交胚早期夭折；4.导入外缘基因；5.突变体筛选；6.种质资源何在。

3、简述我国植物细胞工程取得的主要成就。

花药培养和单倍体育种研究处于国际前列；利用花粉单倍体培育新品种的技术途径在我国首先得以应用；引进和推广植物脱毒和快繁技术；原生质体培养再生植株的成功；植物细胞人工种子、植物细胞规模培养生产次生产物取得进展等。

第二章植物细胞全能性

1、植物细胞全能性:

每个植物的体细胞或性细胞都具有该植物的全套遗

基因，因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。

2、外植体:

从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。

3、培养基:

人工配制的用于培养植物材料的营养基质。

4、基本培养基:

只含有无机盐、蔗糖、维生素和水等最基本成分的合成培养基。

如Ms、White、Nitsch、N6等培养基。

5、中间繁殖体:

在离体培养过程中形成的具有一定形态结构的中间繁殖材料。

6、大量元素:

培养基中浓度超过0.5mmol/L的元素C、H、O、氮（N）、磷（P）、硫（S）钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）、九种大量元素

7、微量元素:

培养基中浓度低于0.5mmol/L的元素,铁（Fe）、硼（B）、锰（Mn）、铜（Cu）、锌（Zn）、钼（MO）、氯（Cl）

8、愈伤组织:

在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。

9、胚状体:

在离体植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一些体细胞,经过胚胎发生和发育过程,形成的与合子胚结构相类似的中间繁殖体。

14、继代培养:

更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料（愈伤组织.芽等）。

10、脱分化:

已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。

11、再分化:

脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程，重新形成各类组织和器官的过程。

12、器官发生:

指在离体培养下的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官的过程。

13、体细胞胚胎发生:

指体细胞在未经性细胞融合的情况下，模拟有性胚胎发生的各个阶段而发育出新个体的形态发生过程。

14、极性:

指植物的组织、器官甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化梯度的差异.极性是植物细胞分化的前提

15、细胞周期:

指连续分裂细胞从一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。

二、判断题

1、分化程度不同的植物细胞，其脱分化能力不同。

（√）

2、不是每一个植物细胞都能表达出全能性。

（√）

3、植物细胞全能性的表达程度是可以调控的。

（√）

4、所有的植物细胞都具有全能性。

（×）

5、胚状体和合子胚一样具有两极性。

（√）

6、生长素/细胞分裂素的比率平衡时有利于愈伤组织增殖。

（√）

7、离体培养条件下，植物细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的。

（√）

8、细胞周期运行的动力主要来自cyclin。

（×）------主要来自CDK,周期蛋白依赖酶

9、生长中心是愈伤组织中形成器官的部位，因此生长中心的细胞体积大。

（×）

10、体细胞胚胎发生是通过先芽后根的方式形成再生植株的。

（×）

11、生活细胞要表达全能性必须回复到分生状态。

（√）----或胚性细胞状态

12、细胞脱分化调控的实质是G0期细胞回复到分裂周期的调控过程。

（√）

13、在同一个培养体系中可以通过不同器官发生方式再生植株。

（√）

14、连续的光照有利于培养细胞微管组织的形成，而一定的昼夜光周期则有利于极性建立和形态发生。

（√）

15、植物体细胞胚胎发生是从合子开始的。

（×）

16、肌醇具有促进生长的作用，所以培养基中必须添加肌醇。

（×）

17、对愈伤组织诱导，被子植物比裸子植物敏感，单子叶植物比双子叶植物敏感。

（×）

18、幼叶比成熟叶易诱导形成愈伤组织。

（√）

19、致密型胚性愈伤组织适合于快速建立细胞悬浮系。

（√）

20、一般认为体细胞胚是多细胞起源的。

（×）

21、培养物缺钾时，生长缓慢，叶片变黄。

（√）

22、4-CPA具有促进细胞分裂的作用，而TDZ具有促进芽增殖的作用。

（√）

三、问答题

1、实现植物细胞全能性的条件是什么？

1）内在条件：

有生命力的核；完整的膜系统，如：

A、茎尖、根尖和形成层细胞;B、表皮细胞和各种薄壁细胞;C、特化细胞：

导管、筛管、气孔保卫细胞

2）组织或细胞和母体分离

3）外在条件：

温、光、水、气、营养

2、简述Skoog和Miller（1957）提出的有关植物激素控制器官形成的理论及意义。

Skoog和Miller等所提出的生长素和激动素比例决定根和芽分化的观点：

生长素/细胞分裂素的比例高，诱导形成根，而当生长素/细胞分裂素的比例低，诱导形成芽。

这种器官发生激素调控模式的建立为植物组织培养中植物器官的再分化奠定了理论基础。

3、植物组织培养培养基中的大量元素、微量元素都主要包括哪些，它们主要以哪些化合物的形式提供？

大量元素：

C、H、O、氮（N）、磷（P）、硫（S）钾（K）、钙（Ca）、镁（Mg）九种大量元素；微量元素:

铁（Fe）、硼（B）、锰（Mn）、铜（Cu）、锌（Zn）、钼（MO）、氯（Cl）。

C：

从培养基中加入的各种糖类获得，H和O主要从水中获得，氮（N）从有机氮，无机氮（硝态氮，铵态氮）中获得；磷通常以正磷酸（H2PO4–）形式被植物吸收，因此培养基配制时常采用KH2PO4；钾（K）由KCl、KNO3或者KH2PO4供给；钙（Ca）由CaCl2·2H2O和Ca（NO3）2·4H2O提供；镁（Mg）由硫酸镁（MgSO4·7H2O）提供；硫（S）由硫酸镁（MgSO4·7H2O）提供

4、蔗糖在培养基中有何作用？

作为碳源为植物提供能源，为有机化合物的合成提供碳架，细胞内调节渗透压，对形态的发生的特殊作用等。

5、生长素类物质大致可分为哪几类，目前植物组织培养中主要使用了哪些生长素，生长素在离体培养中有何作用？

1.吲哚类，2.奈酸类，3.苯氧羧酸类，

生长素中常用的吲哚乙酸、萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸、吲哚丁酸；2-（3-氯-苯氧）丙酸（3-CPA）；4-碘苯氧乙酸（ICPA）。

植物组织培养中生长素一方面用于诱导愈伤组织的形成和生根，另一方面是与一定量的细胞分裂素配合共同诱导不定芽的分化、侧芽的萌发与生长以及某些植物胚状体的诱导。

6、在植物组织培养中，细胞分裂素有何作用？

在植物组织培养中细胞分裂素的主要功能是促进细胞的分裂和分化，打破顶端优势，诱导芽分化与增殖，促进组织和器官的不定芽发育。

7、影响器官发生的因素有哪些？

（1）外植体：

母体植株的遗传基础与生理状态，

（2）激素（激素调控理论），（3）培养基种类和培养方法（物理因素，化学因素），（4）环境条件（温度，光照）

8、影响体细胞胚发生的因素有哪些？

（1）、外源激素：

生长素特别是2，4-D；

（2）培养基：

低无机盐浓度和较高的硝态氮浓度；（3）基因型；（4）组织起源，距活体胚胎发育较近的组织和成熟及未成熟的胚胎在离体条件下更有利于细胞胚的诱导。

9、简述植物细胞脱分化的过程

启动阶段：

蛋白体的出现和细胞质增生；演变阶段：

细胞核移向中央、质体转化成原质体；脱分化终结期：

回复到分生细胞状态，细胞开始分裂

10、简述器官发生的过程

1.愈伤组织诱导，2.“生长中心”形成，3.器官原基和器官形成

11、培养基内加入活性炭的目的是什么？

应注意什么问题？

活性碳可以吸附非极性物质和色素等大分子物质，包括琼脂中所含的杂质、培养物分泌的酚和醌类物质、蔗糖在高在压消毒时产生的5-羟甲糖醛、激素等。

12、何谓胚状体?

与合子胚有何异同?

在离体植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或一些体细胞,经过胚胎发生和发育过程,形成的与合子胚结构相类似的中间繁殖体。

与合子胚相比体细胞胚子叶不规范，胚小、含水量高、对脱水敏感、没有休眠

13、胚状体的发育大约要经过哪几个时期?

体细胞胚的大多首先起源于一个胚性细胞，胚性细胞经过一次分裂形成二细胞原胚，最后经过球性胚、鱼雷形胚、心形胚和子叶形胚形成胚状体。

14、离体培养条件下，胚状体产生有几种方式?

（1）直接途径：

即不经过愈伤组织阶段，从外植体直接产生体细胞胚；

（2）间接方式：

外植体首先诱导产生愈伤组织，再在愈伤组织上产生体细胞胚。

15、离体培养条件下，茎、芽和根的再生方式大致有几种?

在组织培养中，通过茎芽和根而再生植株的方式大致有3种：

1.先芽后根：

多数植物；2.先根后芽：

颠茄；3.在不同部位分别形成芽和根，最后通过微管组织联系形成再生植株。

16、长期培养物形态发生潜力丧失的原因是什么？

1.由于细胞或组织内激素关系的改变成的。

当改变外部的处理条件时这种内在潜力能得到恢复。

2.经过长期培养后，由于培养细胞中发生染色体结构、数目变异、基因突变、染色体重排、DNA的甲基化等自发体细胞变异，这种由遗传原因造成的形态发生潜力丧失是不可逆的。

第三章基本设备和基本技术

一、基本概念

1、灭菌是指用物理或化学的方法，杀死或者去除物品上所有生活的微生物的方法。

2、消毒是指用消毒剂对活的植物材料进行处理，以杀死其上所有生活的微生物的方法。

3、继代周期从接种培养开始到下一次接种继代所经历的时间（周或天）

4、生长曲线在一个继代周期内中间繁殖体生长变化的曲线

5、接种经表面消毒的试验材料按不同的要求经过剪切和整理后，移至培养基上培养的过程。

6、启始脱分化时间外植体接种到第一个外植体开始形成中间繁殖体所经历的时间

二、判断题

1、接种器械一般采用照射灭菌。

（x）

2、IAA通常采用湿热灭菌。

（x）

3、紫外照射灭菌的时间为5h。

（x）

4、油污严重的器皿应采用酸洗法。

（x）

5、过滤灭菌微孔滤膜的直径以0.22m为宜。

（√）

6、用于灭菌的抗生素浓度通常为40-50mg/L。

（√）

7、采用氯化汞对外植体进行消毒，时间越长越好。

（x）

8、大量元素一般用感量为0.001g天平称量。

（x）

9、培养室通常采用紫外线灭菌。

（√）

三、问答题

1、怎样洗涤污染的培养瓶？

p25

3、简述高压灭菌锅的工作原理和使用方法.原理是通过较强的蒸汽压力及高温使蛋白质变性，从而杀灭微生物。

4、简述

培养基中铁盐母液的配制方法。

配法是将5.57克的硫酸亚铁和7.45克的乙二胺四乙酸二钠分别溶于蒸馏水中,加热溶解,然后两者混合,冷却后定容至1升,再加热制成稳定溶液,用时每配1升培养基取5毫升。

5、生长素和细胞分裂素母液如何制备？

生长素类（NAA、IBA等）先用1—2毫升95%酒精将其溶解,