3.生理条件下（左右），蛋白质分子中的_____________侧链和_____________侧链几乎完全带正电荷，但_____________侧链带部分正电荷。
4.测定蛋白质紫外吸收的波长，一般在____________，主要由于蛋白质中存在着______、
_、________氨基酸残基侧链基团。
5.皮肤遇茚三酮试剂变成色，是因为皮肤中含有所致。
的pk1（
—COOH）=，pk2（
—
）=，pk3（
—
）=，其pI为。
在pH=的溶液中电泳，Lys向极移动。
—Hasselbalch方程为。
8.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱（NaOH）来滴定上放出的。
9.一个带负电荷的氨基酸可牢固地结合到阴离子交换树脂上，因此需要一种比原来缓冲液pH值
和离子强度的缓冲液，才能将此氨基酸洗脱下来。
10.用试剂可区分丙氨酸和色氨酸。
二、选择题
1.区分极性氨基酸和非极性氨基酸是根据（）
A.所含的羧基和氨基的极性 B.所含氨基和羧基的数目
C.所含的R基团为极性或非极性 D.脂肪族氨基酸为极性氨基
2.下列哪一种氨基酸不属于人体必需氨基酸（）
A.亮氨酸 B.异亮氨酸C.苯丙氨酸 D.酪氨酸
3.下列哪一组氨基酸为酸性氨基酸：
（）
A.精氨酸，赖氨酸 B.谷氨酸，谷氨酰胺
C.组氨酸，精氨酸 D.谷氨酸，天冬氨酸
4.含硫的必需氨基酸是（）
A.半胱氨酸B.蛋氨酸C.苏氨酸D.亮氨酸
5.芳香族必需氨基酸包括（）
A.蛋氨酸B.酪氨酸C.亮氨酸D.苯丙氨酸
6.含四个氮原子的氨基酸是（）
A.赖氨酸B.精氨酸C.酪氨酸D.色氨酸
7.蛋白质中不存在的氨基酸是下列中的哪一种（）
A.赖氨酸B.羟赖氨酸C.酪氨酸D.鸟氨酸
8.在蛋白质中不是L-氨基酸的是（）
A.苏氨酸B.甘氨酸C.半胱氨酸D.谷氨酰胺
9.谷氨酸的PK值为,,;赖氨酸的PK值为,,;则它们的PI值分别为（）
A.2.19和B.和9.74C.和D.和
10.从赖氨酸中分离出谷氨酸的可能性最小的方法是（）
A.纸层析B.阳离子交换层析C.电泳D.葡萄糖凝胶过滤
11.用于确定多肽中N-末端氨基酸的是（）
A.Sanger试剂B.Edman试剂C.两者均可D.两者均不可
12.有一蛋白质水解物,在PH6时,用阳离子交换柱层析,第一个被洗脱的氨基酸是（）
A.ValB.LysC.AspD.Arg
13.下列那种氨基酸属于非编码氨基酸（）
A.脯氨酸B.精氨酸C.酪氨酸D.羟赖氨酸
14.可使二硫键氧化断裂的试剂是（）
A.尿素B.巯基乙醇C.过甲酸D.SDS
15.没有旋光性的氨基酸是（）
A.AlaB.ProC.GlyD.Glu
16.Sanger试剂是（）
A.苯异硫氰酸酯B.2,4—二硝基氟苯C.丹磺酰氯D.β—巯基乙醇
17.酶分子可逆共价修饰进行的磷酸化作用主要发生在哪一个氨基酸上（）
A.AlaB.SerC.GluD.Lys
18.当含有Ala,Asp,Leu,Arg的混合物在条件下进行电泳时，哪一种氨基酸移向正极（+）（）
A.AlaB.AspC.LeuD.Arg
19.下列哪种氨基酸溶液不使平面偏振光发生偏转（）
A.ProB.GlyC.LeuD.Lys
20.对哺乳动物来说，下列哪种氨基酸是非必需氨基酸（）
A.PheB.LysC.TyrD.Met
21.一个谷氨酸溶液，用5ml的1M的NaOH来滴定，溶液中的PH从上升到，下列数据中哪一个接近于该溶液中所含谷氨酸的毫摩尔数为（）
A.1.5B.3.0C.D.12
22.下列AA中含氮量最高的是（）
A.ArgD.Lys
23.下列在280nm具有最大光吸收的基团是（）
A.色氨酸的吲哚环B.酪氨酸的酚环C.苯丙氨酸的苯环D.半胱氨酸的硫原子
24.在生理pH值条件下，具有缓冲作用的氨基酸残基是（）
A.TyrB.TrpC.HisD.Lys
25.下列关于离子交换树脂的叙述哪一个是不正确的（）
A.是人工合成的不溶于水的高分子聚合物B.阴离子交换树脂可交换的离子是阴离子C.有阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类D.阳离子交换树脂可交换的离子是阴离子
26.下列哪种氨基酸可使肽链之间形成共价交联结构（）
B.SerC.GluD.Cys
27.下列氨基酸中哪个含有吲哚环（）
B.TyrC.TrpD.His
三、名词解释
1.α-氨基酸：
2.必需氨基酸：
3.层析
4.纸层析：
5.离子交换层析：
6.氨基酸的等电点：
四、问答题（课后题6，7，14，15）
生化测试二：
蛋白质
一、填空题
1.决定多肽或蛋白质分子空间构像能否稳定存在，以及以什么形式存在的主要因素是由
________来决定的。
2.用于测定蛋白质溶液构象的各种方法中，测定主链构象的方法有________和________,测定侧链构象的方法有________和________，能测定主链和侧链构象的有________。
3.测定蛋白质中二硫键位置的经典方法是___________。
4.从混合蛋白质中分离特定组分蛋白质的主要原理是根据它们之间的、、、、。
5.血红蛋白与氧结合是通过_______效应实现的.由组织产生的CO2扩散到细胞,从而影响Hb和O2的亲合力,这称为________效应。
6.蛋白质二级结构和三级结构之间还存在________和________两种组合体。
7.蛋白质多肽链主链构象的结构单元包括________、________、________等，维系蛋白质二级结构的主要作用力是_____键。
8.三肽val-tyr-ser的合适名字是_______________。
9.蛋白质的
—螺旋结构中，个氨基酸残基旋转一周，每个氨基酸沿纵轴上升的高度为nm，旋转度。
10.凡能破坏蛋白质___________和__________的因素，均可使蛋白从溶液中沉淀出来。
11.变性蛋白质同天然蛋白质的区别是__________，__________，__________，__________。
12.聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨力之所以很高,是因为它具有______,___,______三种效应。
13.交换层析分离蛋白质是利用了蛋白质的性质。
阴离子交换层析在层析柱内填充的交换剂上带电荷，可吸引带电荷的蛋白质，然后用带电荷的溶液洗柱将蛋白质洗脱下来。
14.当蛋白质分子中的一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体的结合能力，此效应称为。
当Hb的第一个亚基与O2结合后，对其他三个亚基与O2的结合具有作用，这种效应称为。
其氧解离曲线呈型。
15.胰岛素原由条肽链组成。
二、选择题
1.下列描述中哪些叙述对一直链多肽Met-Phe-Leu-Thr-Val-Ile-Lys是正确的（）
A.能与双缩脲试剂形成紫红色化合物B.由七个肽键连接而成
C.胰凝乳蛋白酶水解D.含有-SH
2.__________是一种去垢剂,常用在凝胶电泳中,以测定蛋白质的分子量（）
A.β-巯基乙醇B.盐酸胍C.碘乙酸D.十二烷基硫酸钠
3.以下氨基酸中哪一种可能会改变多肽链的方向和阻断a－螺旋（）
A.PheB.CysC.TrpD.Pro
4.免疫球蛋白分子中二重链之间，以及重链与轻链之间，均以如下一种键的形式相连（）
A.氢键B.疏水相互作用C.二硫键D.离子键
5.蛋白质分子中α螺旋的特点是（）
A.肽键平面完全伸展B.靠盐键维持稳定C.多为右手螺旋D.螺旋方向与长轴垂
6.为从组织提取液中沉淀出活性蛋白最有可能的方法是加入（）
A.硫酸铵B.三氯乙酸C.对氯汞苯甲酸D.氯化汞E.NH4Cl
7.下述哪种分离方法可得到不变性的蛋白质制剂（）
A.苦味酸沉淀 B.硫酸铜沉淀 C.常温下乙醇沉淀 D.硫酸钠沉淀 E.加热
8.有一个肽用胰蛋白酶水解得：
①H-Met-Glu-Leu-Lys-OH②H-Ser-Ala-Arg-OH③H-Gly-Tyr-OH三组片段，用BrCN处理得：
④H-Ser-Ala-Arg-Met-OH⑤H-Glu-Leu-Lys-Gly-Tyr-OH两组片段，按肽谱重叠法推导出该九肽的序列应为（）
A.3+2+1+4C.2+1+3+3+1+2+3
9.蛋白质变性后，不发生下列哪种改变（）
A.生物活性丧失 B.易被降解 C.一级结构改变 D.空间结构改变E.次级键断裂
10.两个不同蛋白质中有部分的一级结构相同（）
A.这部分的二级结构一定相同 B.这部分的二级结构可能不同 C.它们的功能一定相同 D.它们的功能一定不同 E.这部分的二级结构一定不同
11.带电颗粒在电场中的泳动度首先取决于下列哪项因素（）
A.电场强度B.支持物的电渗作用C.颗粒所带净电荷数及其大小，形状
D.溶液的pH值E.溶液的离子强度
12.关于离子交换色谱的描述下列哪一项不正确（）
A.离子交换剂通常不溶于水 B.阳离子交换剂常中离解出带正电的基团
C.阴离子交换剂常可离解出带正电的基团 D.阳离子交换剂常可离解出带负电的基团
E.可用于分离纯化等电点等于7的蛋白质
13.对于蛋白质的溶解度，下列叙述中哪一条是错误的（）
A.可因加入中性盐而增高B.在等电点时最大C.可因加入中性盐降低
D.可因向水溶液中加入酒精而降低E.可因向水溶液中加入丙酮降低
14.向血清中加入等容积的饱和硫酸铵溶液，可使（）
A.白蛋白沉淀B.白蛋白和球蛋白都沉淀C.球蛋白原沉淀
D.纤维蛋白原沉淀E.只有球蛋白沉淀
15.下列蛋白质中，具有四级结构的是（）
A.胰岛素B.细胞色素CC.RNA酶D.血红蛋白E.肌红蛋白
16.下列哪种蛋白质不含铁原子（）
A.肌红蛋白B.细胞色素CC.过氧化氢酶D.过氧化物酶E.胰蛋白酶
17.下列各项不符合纤维状蛋白理化性质的是（）
A.长轴与短轴在比值大于10B.易溶于水C.不易受蛋白酶水解
D.不适合用分子筛的方法测其相对分子质量E.其水溶液黏度高
18.血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于（）
A.O2分压的减少B.CO2分压的减少C.CO2分压的增加
D.N2分压的增加E.pH的增加
19.关于蛋白质三级结构的描述，下列哪项是正确的（）
A.疏水基团位于分子内部B.亲水基团位于分子内部
C.羧基多位于分子内部D.二硫键位于分子表面
20.镰刀型贫血病患者，Hb分子中氨基酸的替换及位置是（）
A.α链第六位Val换成GluB.β链第六位Val换成GluC.α链第六位Glu换成ValD.β链第六位Glu换成Val
21.下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时，最先被洗脱的是（）
A.牛胰岛素（分子量5700）B.肌红蛋白（分子量16900）C.牛β乳球蛋白（分子量35000）D.马肝过氧化物酶（分子量247500）
22.每分子血红蛋白可结合氧的分子数是（）
A．1B．2C．3D．4
23.免疫球蛋白是一种什么蛋白（）
A．糖蛋白B．脂蛋白C．铁蛋白D．核蛋白
24.特殊的羟-Pro和羟-Lys存在于下列哪种蛋白质中（）
A.胶原B.角蛋白C.肌球蛋白D.微管蛋白
三、是非题
1.蛋白质分子的一级结构决定其高级结构，最早的实验证据是蛋白质的可逆变性（）。
2.原胶原纤维中参与产生共价交联的是羟脯氨酸残基。
（）
3.a-螺旋中Glu出现的概率最高,因此poly（Glu）可以形成最稳定的a-螺旋。
（）
4.用重金属盐沉淀蛋白质时，溶液的PH值应稍大于蛋白质的等电点。
（）
5.phe-leu-ala-val-phe-leu-lys是一个含有7个肽键的碱性七肽。
（）
6.pH8条件下,蛋白质与SDS充分结合后平均每个氨基酸所带电荷约为个负电荷。
（）
7.在Hb分子中，其F8His和E7His都分别以第五和第六位与血红素中的Fe配位相结合。
（）
8.在蛋白质分子进化过程中，其空间结构的变化要比序列的变化更为保守。
（）
9.使亚基间缔合成一个蛋白质的主要作用力是次级键，而其中又以疏水基团之间的作用力最为普遍。
（）
10.二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构。
（）
11.任何一个蛋白质的紫外吸收的峰值都在280nm附近。
（）
四、名词解释（答案写在反面）
1.蛋白质变性
2.结构域
3.同源蛋白质
4.Edman降解
5.β-转角
6.蛋白质的超二级结构
7.肽平面
四、问答题
1.某八肽的氨基酸组成是2Lys,Asp,Tyr,Phe,Gly,Ser和Ala。
此八肽与FDNB反应、酸水解后释放出DNP—Ala。
用胰蛋白酶水解该八肽，得到两个三肽及一个二肽，其三肽的氨基酸组成分别为Lys,Ala,Ser和Gly,Phe,Lys。
用胰凝乳蛋白酶（糜蛋白酶）水解该八肽，释放出游离的Asp及一个四肽和一个三肽，四肽的氨基酸组成是Lys,Ser,Phe,Ala,三肽与FDNB反应后，经酸水解释放出DNP—Gly。
根据上述结果分析，写出该八肽的氨基酸排列顺序，并简述分析过程。
（分析过程写在反面）
2.试考虑一个由ala,arg2,glu2,asp2,gly,lys,ser,thr组成的十一肽，用Sanger试剂DNFB处理确定其N-末端为谷氨酸，经部分酸水解后得到下列各肽段：
（asp,glu）（glu,gly）（asp,glu,gly）（ala,asp）
（ala,asp,ser）（asp,glu,lys）（ser,thr）（asp,lys）
（arg,thr）（arg2,thr）（ala,asp,gly）（arg,lys）
请直接写出此十一肽的氨基酸全顺序。
（注：
给出的12个小肽段只表示氨基酸组成，而非顺序）
生化测试三：
酶
一、填空题
1.酶的活性中心有__________和_________两个功能部位，其中________直接与底物结合，决定酶的专一性，__________是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。
2.温度对酶活性的影响有以下两个方面，一方面，另一方面。
3.酶活力是指____________，一般用________________________表示。
4.磺胺类药物可以抑制____________酶，从而抑制细菌生长繁殖。
5.全酶有________和_________组成，在催化反应时，二者所起的作用不同，其中________决定专一性和效率，__________起传递电子、原子或化学基团的作用。
6.酶活性的快速调节方式包括_________和_________。
7.酶促反应的特点为______________、______________、____________、_____________。
二、选择题
1.竞争性可逆抑制剂的抑制程度与下列哪种因素无关（）
A.作用时间B.抑制剂浓度C.底物浓度D.酶与抑制剂亲和力的大小
E.酶与底物亲和力的大小
2.哪种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度（）
A.不可逆抑制作用B.竞争性可逆抑制作用C.非竞争性可逆抑制作用
D.反竞争性可逆抑制作用E.无法确定
3.酶的竞争性可逆抑制剂可以使（）
A.Vmax减小，Km减小B.Vmax增加，Km增加C.Vmax不变，Km增加
D.Vmax不变，Km减小E.Vmax减小，Km增加
4.下列常见抑制剂中，除哪个外都是不可逆抑制剂（）
A.有机磷化物B.有机汞化物C.有机砷化物D.氰化物E.磺胺类药物
5.溶菌酶在催化反应时，下列因素中除哪个外，均与酶的高效率有关（）
A.底物形变B.广义的酸碱催化C.邻近效应与轨道定向D.共价催化E.无法确定
6.在一酶反应体系中，若有抑制剂I存在时，最大反应速度为V’max，没有抑制剂时的最大反应速度为Vmax，若V’max=Vmax（E0-I0）/E0，则I为（）
A.竞争性可逆抑制剂B.非竞争性可逆抑制剂C.反竞争性可逆抑制剂
D.不可逆抑制剂E.不确定
7.关于变构酶下列哪一种说法是错的（）
A.变构效应剂多为酶的底物或产物B.存在催化与调节两个活性部位
C.反应符合米-曼氏方程式D.反应曲线呈S形E.一般由多个亚基组成
8.酶的活化和去活化过程中，酶的磷酸化和去磷酸化的位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上（）
A.天冬氨酸B.脯氨酸C.赖氨酸D.丝氨酸E甘氨酸
9.以Hill系数判断，具有负协同效应的别构酶（）
A．n>1B.n=1C.n<1D.n大于等于1E.n小于等于1
10．酶的抑制剂（）
A.由于引起酶蛋白变性而使酶活性下降B.使酶活性下降而不引起酶蛋白变性
C.只引起酶蛋白变性而可能对酶活性无影响D.一般为强酸，强碱E.都和底物结构相似
11．关于变构调节，正确的是（）
A.所有变构酶都有一个调节亚基，一个催化亚基
B.变构酶的动力学特点是酶促反应与底物浓度的关系呈s形而不呈双曲线形
C.变构激活和酶被激活剂激活的机制相同D.变构抑制与非竞争抑制相同
12．同工酶的叙述，正确的是（）
A.结构相同来源不同B.由不同亚基组成C.电泳迁移率往往不同D.对同一底物具有不同专一性
13．丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于（）
A反馈抑制B底物抑制C竞争性可逆抑制D非竞争性可逆抑制E反竞争性可逆抑制
14．下列叙述哪一种是正确的（）
A所有辅酶都包含有维生素组分B所有的维生素都可以作为辅酶的成分
C所有的B族维生素都可以作为辅酶的成分D只有B族维生素可以作为辅酶的成分
E只有一部分B族维生素可以作为辅酶的成分。
15.关于酶的必需基团的错误描述是（）
A.可催化底物发生化学反应B.可与底物结合C.可维持酶活性中心的结构
D.可存在于酶的活性中心以外E.只存在于酶的活性中心
16.某一符合米曼氏方程的酶,当[S]=2Km时,其反应速度V等于（）
3Vmax2Vmax2Vmax
17.酶的非竞争性抑制作用的特点是（）
A.抑制剂与酶的活性中心结构相似B.抑制剂与酶作用的底物结构相似
C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关D.抑制作用不受底物浓度的影响
E.动力学曲线中Vmax不变,Km值变小
18.关于修饰酶的错误描述是（）
A.酶分子可发生可逆的共价修饰B.这种修饰可引起其活性改变
C.修饰反应可在各种催化剂催化下进行D.磷酸化和脱磷酸是常见的修饰反应
E.绝大多数修饰酶都具有无活性和有活性两种形式
19.有关全酶的描述下列哪一项不正确（）
A.全酶由酶蛋白和辅助因子组成B.通常一种酶蛋白和辅助因子结合
C.而一种辅助因子则可与不同的酶蛋白结合D.酶促反应的特异性取决于辅助因子
E.酶促反应的高效率取决于酶蛋白
20..酶的竞争性抑制作用的特点是（）
A.抑制剂与酶的活性中心结构相似B.抑制剂与酶作用的底物结构相似
C.抑制作用强弱与抑制剂浓度无关D.抑制作用不受底物浓度的影响
E.动力学曲线中Km值不变，Vmax变小
21.下列哪个过程是酶原的激活过程（）
A.前胶原→原胶原B.胰岛素原→胰岛素C.凝血因子I→IaD.凝血因子II→IIa
E.糖原合成D→I
22.已知两种酶互为同工酶（）
A.它们的Km的值一定相同B.它们的等电点相同C.它们的分子结构一定相同
D.它们所催化的化学反应相同E.它们的辅基一定相同
23.酶促反应的最适温度（）
A.随时间延长而升高B.是酶的特征性常数C.在人体内为50℃D.都不超过50℃
E.是在某条件下，酶促反应速度最大时的温度
三、是非题
1.Km是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶的底物无关。
（）
2.酶的最适PH值是一个常数，每一个酶只有一个确定的最适PH值。
（）
3.金属离子作为酶的激活剂，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。
（）
4.竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。
（）
5.正协同效应使酶促反应速度对底物浓度变化越来越敏感。
（）
6.从鼠脑分离的己糖激酶可作用于葡萄糖（Km=6X10-6mol/l）或果糖（Km=2X10-3mol/l），则该酶对果糖的亲和力更高。
（）
7.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的比活力和总活力。
（）
8.蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser，Thr和Tyr外，还有His，Cys，Asp等。
（）
四、名词解释
1.酶的变构调节
2.酶的活性中心
3.酶的活力单位
4.比活力
五、计算题
1.测定一种酶的活性得到下列数据：
底物的初浓度：
1nmol/10ml
反应时间：
10分钟
产物生成量：
50nmol/10ml
蛋白质浓度：
10mg/10ml
反应速度至少在10分钟内与酶活性呈正比，试问此酶的比活力（specificactivity）是多少
2.焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸，它的分子量为120000，由6个相同的亚基组成，纯酶的Vmax为2800单位/毫克酶。
一个活力单位规定为：
在标准的测定条件下，37℃，15分钟内水解10微摩尔焦磷酸所需的酶量。
问：
（1）毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物
（2）毫克酶中有多少摩尔的活性中心（假定每个
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