实验动物总结.docx

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实验动物总结

名词解释：

实验动物（laboratoryanimal）：

指经人工培育，对其携带的微生物、寄生虫进行严格控制，遗传背景明确，可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学研究的动物。

实验用动物：

是指一切用于实验的动物，除了符合严格要求的实验动物外，还包括家畜和野生动物等。

实验动物与实验用动物：

遗传控制不同,微生物控制等级不同,培育的形质和目标不同。

人类疾病的动物模型：

是指医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。

实验动物标准化：

遗传质量标准化微生物质量标准化环境标准化营养标准化

按遗传控制标准，实验动物分为：

近交系（CH3），突变系（裸鼠），杂交系（F1），封闭群（远交系）（KM，NIH,ICR小鼠，wister大鼠）

按基因型分：

1、同基因型动物（如近交系、F1代）

2、不同基因型动物（如封闭群）

按微生物控制程度分级：

普通级，清洁级，SPF级，无菌级（2001年版的国家标准中，大小鼠取消普通级动物，犬、猴只分普通级和SPF级，豚鼠、地鼠和兔仍然分4级）

SPF动物定义：

除清洁动物应排除的病原体外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原，简称无特定病原体动物。

（屏障环境中饲养，种子群来源于无菌动物或剖腹产动物。

饲养管理同清洁动物）

无菌动物的特点：

形态学及生理学特点：

①形态学：

盲肠肥大（增大5～6倍），肠壁薄，易发肠扭转。

心脏、肝脏、脾脏相对较小。

②生理学:

血中无抗体，巨噬细胞吞噬能力弱。

体内不能合成维生素B和K。

无菌鸡生长较快、无菌豚鼠和无菌兔生长较慢。

无菌大小鼠与普通大小鼠生长速度相同。

（3）饲养要求：

隔离环境中饲养，种子群来源于剖腹产动物或无菌卵的孵化。

由于肠道无菌，饲养困难，应注意添加各种维生素。

每2～4周检查一次动物的生活环境和粪便标本。

悉生动物：

悉生动物是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物，又称已知菌动物。

植入一种细菌的动物叫单菌动物；植入两种细菌的动物叫双菌动物；植入三种细菌的动物叫三菌动物；植入多种细菌的动物叫多菌动物。

（由于肠道接种有利于消化吸收的细菌，故饲养较无菌动物容易，形态学和生理学方面与普通动物无异。

）

近交系：

经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。

特点：

1、其基因纯合度达到98.6%，个体差异小，似同卵双生反应一致重复性好，用少量动物即可获得精确度很高的实验结果，个体相互之间可以接受皮肤、器官移植。

2、隐性基因纯合使许多病态性状得以暴露，可获得大量先天性畸形及先天性疾病的动物模型.如高血压、白内障、糖尿病.动物模型。

缺点：

出现近交衰退。

近交衰退（名解）是近交过程中动物群体由于基因分离与纯合发生一系列不利于个体或群体发育的变化和现象。

F1代动物：

两个无关近交系杂交形成的第一代动物。

特点：

虽然基因杂合，但个体之间基因杂合的一致,个体差异小。

除具有近交系的优点,还具有生命力强耐受性强,可长期进行观察，具有杂交优势，个体相互之间可以接受皮肤、器官移植。

封闭群动物（远交系）：

在封闭条件下交配繁殖，以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群，5年以上不从外部引新血缘或至少繁殖四代以上，保持了一定杂合性和群体遗传特征。

每代近交系数增加量<1％。

在人类遗传研究、药物筛选、毒物实验等方面起着不可代替的作用等。

突变系动物：

指正常染色体的基因发生了变异，动物具有一种或多种遗传缺陷。

例如：

无胸腺裸鼠、严重联合免疫缺陷动物SCID小鼠。

为肿瘤、免疫疾病的研究提供了理想的材料。

实验动物生产与动物实验环境标准化：

1、普通级环境：

一级动物（普通级）

2、屏障系统：

二级动物（清洁级）

三级动物（SPF级）（亚屏障系统现已取消）

3、隔离系统：

四级动物（无菌级）

实验动物的选择，如：

对血压的影响，狗、猫、鼠易复制高血压模型。

过敏反应，变态反应：

豚鼠

呕吐反应：

狗

对皮肤的局部作用：

家兔、豚鼠、猪

致热反应：

兔，不能用狗（无汗腺或汗腺不发达）

动脉粥样硬化：

鸽、鸡、家兔

致癌作用：

小鼠、大鼠考虑到品种品系

放射病：

狗（不用兔，非常敏感）

免疫：

C57BL/6国际通用小鼠。

人类疾病动物模型的设计原则：

相似性：

复制的模型尽可能近似与人类疾病。

重复性，可靠性适用性和可控性易行性和经济性

动物模型的复制方法：

物理诱发方法：

放射线（萎缩性胃炎）、机械损伤

化学诱发方法：

致癌剂（Ｄ－氨基半乳糖致大鼠肝硬化）化学毒物、强酸强碱烧伤等

生物诱发方法：

细菌、病毒、寄生虫、生物毒素等

复合方法：

如用细菌加寒冷方法复制豚鼠慢性支气管炎

遗传工程方法：

AIDS、老年痴呆症的动物模型

实验动物中常见的人兽共患病有：

狂犬病、B病毒病、流行性出血热、淋巴细胞脉络丛脑膜炎、沙门氏菌病、结核、布氏杆菌病等。

动物福利普遍认同的五大标准：

①享有不受饥渴的自由（生理福利）

②享有生活舒适的自由（环境福利）

③享有不受痛苦伤害和疾病的自由（卫生福利）

④享有生活无恐惧和悲伤感的自由（心理福利）

⑤享有表达天性的自由（行为福利）

实验动物福利和伦理的基本原则：

坚决避免没有科学目的的动物实验

若有可能的替代方法，尽量应用替代方法，减少动物的使用量

若动物实验可引起实验动物的疼痛，应在实验前采取必要的措施以防范或减轻疼痛

对于一次性的动物实验，实验结束后，应该迅速采取相应措施，使其“安乐死”

在引起慢性疼痛的实验中，应尽可能地减轻其疼痛或消除其恐惧，实验结束后，必须进行特殊照料

实验动物的处死须采用比较人道的方式。

要求尽量采用使实验动物短时间无痛苦死亡的方式

主要有：

颈椎脱臼处死法断头处死法放血处死法空气栓塞处死法过量麻醉处死法CO2处死法

“3R”原则：

（名解）

Reduction（减少）尽可能少用实验动物，不应盲目增大动物样品数量或重复实验

Replacement（替代）使用发育级别较低的动物、使用细胞、细菌、离体器官等

Refinement（优化）改善实验条件、提高实验技术、提高仪器水平，以减轻动物痛苦

小鼠特点：

小鼠的下颌骨的喙状突较小，髁状突发达，胃容量小（1.0-1.5ml）（豚鼠胃容量20~30ml，大鼠胃容量4-7ml）。

小鼠尾巴负责散热和维持平衡，小鼠无汗腺

肺由5叶组成，右肺4叶（上、中、下和心后叶），左肺为一整叶，雌鼠为双子宫、呈“Y”形，新生小鼠赤裸无毛，全身为红色，闭眼，两耳与皮肤粘连，体重仅１.５g，体长２０mm左右，实验中最常用18g～22g的成年小鼠。

妊娠期19～21d，哺乳期20～22d，交配后10-12h，雌鼠在阴道口形成一个白色的阴道栓，可以利用阴道栓的出现作为计算妊娠起始时间的依据。

Ｃ５７ＢＬ／６：

１９３７年育成，１９７５年由日本国立肿瘤研究所引进我国。

黑色。

乳腺癌发病率低，对放射物质耐受力强。

是肿瘤学、生理学、遗传学研究常用品系。

有学者统计，是使用率最高的小鼠近交系。

封闭群：

ＫＭ白化小鼠，ICR白化小鼠，NIH白化小鼠

突变系小鼠：

突变系小鼠是指正常染色体的基因发生了突变，这种遗传变异造成后代的某个性状或生物反应与亲本不同，具有某种特殊性状表型的各种遗传缺陷的品系。

突变品系：

ob肥胖小鼠：

这种小鼠是由于ob基因单个基因缺陷所致，引起肥胖。

体重可达60g,出生4~6周就显示肥胖症,与人肥胖症相似。

裸鼠（无胸腺，Ｔ细胞功能的缺失，Ｂ细胞功能基本正常，成年裸鼠有较高水平的ＮＫ细胞活性，但幼鼠的ＮＫ细胞活性低下）

ＳＣＩＤ小鼠（严重联合免疫缺陷小鼠　Ｔ、Ｂ淋巴细胞自身不能分化成特异性功能淋巴细胞）

糖尿病小鼠

大鼠：

大鼠皮肤缺少汗腺（小鼠皮肤无汗腺），汗腺仅分布于爪垫上，主要通过尾巴散热。

大鼠对营养缺乏非常敏感，特别是维生素A和氨基酸供应不足时，可发生典型的缺乏症状。

大鼠胃容量4-7ml，胃中有一条皱褶，收缩时会堵住贲门口，这是大鼠不会呕吐的原因

对饲养环境中湿度极为敏感，相对湿度低于40%时，易患坏尾病（坏尾病：

空气干燥，相对湿度小于40%结合高温，可引起大鼠尾部皮肤环状缩小），还会引起哺乳母鼠食仔现象发生。

大鼠肝脏共分6叶，再生能力强，无胆囊。

Y型双角子宫，胸部和腹部各有3对乳头。

（小鼠5对，胸腹分别是3对和2对）

新鼠体重约5.5~10g,周身无毛,耳贴连皮肤,耳孔闭合.一般用体重为180g～220g的大鼠做实验（实验中最常用18g～22g的成年小鼠），大鼠妊娠期为19~23天，平均21天（小鼠妊娠期19～21d，哺乳期20～22d）

常用的封闭群大鼠：

SD大鼠，Wistar大鼠，longE大鼠，其余为近交系大鼠，突变系大鼠中最著名的的是SHR大鼠（自发性高血压大鼠），最适合筛选高血压药物的模型

在生物医学研究中，大鼠的用量仅次于小鼠，药物，行为学，老年病学，心血管（大鼠是研究高血压的首选动物），营养代谢研究（大鼠对营养物质缺乏很敏感），口腔医学研究（建立龋齿动物模型），老年病学研究。

豚鼠：

豚鼠胆小、温驯、对外界刺激极为敏感，豚鼠喜活动、爱群居，干燥清洁环境。

体型短粗，无尾，头大颈粗两眼明亮，耳壳教薄，对抗生素极为敏感。

由于缺乏左旋葡萄糖内酯氧化酶，因此不能合成维生素C，胃容量20~30ml，（小鼠胃容量小1.0-1.5ml）

妊娠期为59~72d，啮齿类动物中妊娠期最长者，哺乳期2~3周，新生鼠出生后既能活动，新生仔体重约80g，生后即能活动，有被毛，眼耳张开，有门齿，几小时后即可自己采食。

一般用体重为200g～250g的豚鼠做实验。

FMMU白化豚鼠（南方医）：

全身白色，眼睛红色，由于这种豚鼠血管和免疫反应较好，因此在皮肤急、慢性毒性试验和皮肤刺激反应一定要用白化豚鼠。

这种豚鼠还广泛用于药理和毒理学的研究。

豚鼠生物医学研究应用：

1）药物学研究

1、皮肤刺激实验

2、致畸研究

3、药效评价实验：

平喘药和抗组胺药

（2）免疫学研究（3）传染病研究

（4）耳科学研究（5）营养代谢研究

豚鼠在生物医学研究中的作用：

1.免疫学研究：

过敏反应及皮肤刺激实验；2.药物研究；3.传染病研究；4.耳科学研究5.其他应用：

豚鼠剪断迷走神经引起肺水肿实验较其他动物更佳；是研究维生素C生理功能的最好模型；豚鼠血管反应敏感是研究出血性炎症和血管通透性实验常用模型；豚鼠对缺氧耐受力强，是研究缺氧耐受性及耗氧量测试常用模型。

豚鼠饲养：

豚鼠的饲养主要是饲料中一定要有足量的纤维素和维生素C（4-5mg/100g），有清洁安静的环境，温度控制在1８～２２℃之间。

地鼠：

有颊囊，具有贮藏食物的习性，地鼠颊囊是缺少组织相容性抗原的免疫学特殊区，是进行组织培养、人类肿瘤移植和观察微循环改变的良好区域。

颊囊具有极强的贮藏能力。

妊娠期为14-17天，是啮齿类动物中妊娠期最短者。

哺乳期20-25天。

雄鼠成熟时体重为100g左右，雌鼠120g左右。

易产生真性糖尿病，易培育成糖尿病模型动物（高脂高糖饮食）。

皮肤移植反应特别，非近交系封闭群地鼠个体之间的皮肤相互移植均可存活，不同种群动物之间皮肤移植，则不能存活并被排斥。

生物医学研究应用：

1、肿瘤移植、筛选、诱发和治疗等研究2、细菌、病毒和寄生虫的研究3、生殖生理和遗传学研究4、糖尿病研究

兔：

喜欢独居，群居性差，喜干厌湿，食粪特性，体温变化十分灵敏：

兔正常体温在38.0-39.6℃之间，兔的体温变化十分灵敏，最易产生发热反应，表皮薄，真皮厚。

兔生长发育迅速，仔兔初生无毛，全身裸露，眼睛紧闭，耳闭塞无孔，脚趾相连，体重约为50g。

兔在正常生命活动中有两次换毛现象，一种是年龄性换毛，一种是季节性换毛。

兔是刺激性排卵动物，妊娠期为29-36天，哺乳期40-45天，一年四季均可交配繁殖。

兔的胸腔构造很特别，暴露心脏时不需要做人工呼吸。

饲养：

兔舍温度