PDA TR41病毒过滤.docx

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PDATR41病毒过滤

TableofContents目录

1Introduction简介9

2GeneralConcepts一般概念9

2.1SizeExclusion尺寸排除10

2.2OtherRetentionMechanisms其他滞留方法11

2.3VirusRetentionProbabilityofReductionFactor（RF）病毒滞留可能性的减少因素（RF）11

2.4VirusSize/RetentionRating病毒大小/滞留量11

2.5ProteinSize/Sieving/PassageRating蛋白质大小/过滤/通过量11

3VirusFilterSelectionandCharacterization病毒选择和特性12

3.1FilterConstruction过滤器结构12

3.2FilterSystemConfigurations过滤系统配置12

3.3ParticulatesandExtractables微粒和萃取物13

3.4FilterCompatibility过滤兼容性14

3.5ProteinRecovery（Adsorption/Retention/Biocompatibility）蛋白质恢复（吸附/滞留/生物兼容性）15

3.6ThermalStressResistance热应力阻止16

3.7HydraulicStressResistance水应力阻力16

3.8ToxicityTesting毒性试验16

3.9Viral/PhageChallengeTesting病毒/噬菌体挑战试验16

3.10Cleaning/Sanitization/Sterilization清理/消毒/灭菌17

4PhysicalandMechanicalCharacteristics物理力学特性17

4.1FiltrationRateandClogging（Throughput）过滤速度及堵塞（通过量）17

4.2Fluid/Piping液体/管道17

4.3Fluid/Filter液体/过滤器17

4.4PhysicalandStructuralLimitations物理结构限制17

4.5Miscellaneous多样性17

5VirusFilterValidation/EvaluationStudies病毒过滤器/评估研究17

5.1FilterProperties过滤器属性18

5.2TestVirus测试病毒18

5.2.1VirusSelection病毒选择18

5.2.2VirusStockPreparationandMaintenance病毒库制备和维护19

5.2.3VirusSpike病毒峰值20

5.3Scaled-downModels缩小模型21

5.4OperatingConditionsforValidation,Revalidation,andNumberofRuns验证，再验证的运行条件和运行次数21

5.5RawMaterialsandEquipment原材料和设备22

5.5.1VirusFiltrationDevicesandConfigurations病毒过滤设备和配置22

5.5.2IntegrityTestingduringDevelopment研发期间的完整性测试22

5.5.3MembraneLotSelection膜批选择22

5.5.4Feedstream原料流23

5.5.5FiltrationConditions过滤条件23

5.6VirusAssaysandAssayValidation病毒分析试验和分析验证23

5.6.1AssayMethodValidation试验方法验证23

5.7EstablishingRepresentativeWorst-caseProcessConditions确定代表性的最坏工艺条件24

6IntegrityTesting完整性测试25

6.1Manufacturer'sChecklist生产商检验单26

6.2VirusRetentionIntegrityTests病毒滞留完整性测试27

6.2.1DextranRetention葡聚糖滞留27

6.2.2GoldParticleRetention金颗粒滞留27

6.2.3Gas-LiquidPorosimetry气-液测量仪29

6.2.4ManualBubblePointorLeakTesting人工起泡点或检漏测试29

6.2.5ManualForward/DiffusiveFlow人工顺流/扩散流29

6.2.6ManualPressureHold/Decay人工压力保持/下降30

6.2.7AutomatedIntegrityTestInstrumentsforGasPorosimetry-basedTestMethods基于气体测量仪测试法的自动完整性测试仪器30

6.2.8LiquidandLiquid-liquidPorosimetry液体和液-液测量仪31

6.3RelationshipbetweenIntegrityTestsandVirus/PhageRetention完整性测试和病毒/噬菌体截留之间的关系31

6.4FailureAnalysis/Troubleshooting故障分析/处理31

7Sterilization灭菌32

7.1SteamSterilization蒸汽灭菌32

7.2AutoclaveSterilization高压蒸汽灭菌32

7.3Sterilize-in-Place（SIP）在线灭菌32

7.4IrradiationSterilization辐射灭菌33

7.5GasSterilization气体灭菌33

APPENDIXA:

VirusRetentionandProteinPassageNomenclatureClassification附录A：

病毒截留和蛋白质通过的术语分类34

APPENDIXB:

LargeVirusFilterExperimentalProtocol附录B：

大分子病毒过滤器的试验方案35

B.1LargeVirusFilterExperimentalDesign大分子病毒过滤器试验设计35

B.1.1Strategy策略35

B.1.2ModelVirus模型病毒35

B.1.3ModelProteins模型蛋白质35

B.1.4BufferSystem缓冲系统35

B.1.5Scaled-downModelFilters按比例缩小的模型过滤器35

B.1.6OperatingParameters运行参数36

B.1.7SetPointValuesforRelevantOperatingParameters相关运行参数的设定值36

B.1.8NomenclatureAcceptanceCriteria命名验收标准36

B.2PreparationofBacteriophageStocks噬菌群制备37

B.2.1Introduction简介37

B.2.2Equipment设备37

B.2.3Procedure程序38

B.2.3.1PlateMethod培养板的方法38

B.2.3.2BrothMethod肉汤方法38

B.2.4CrudePreparation原料制备38

B.2.5PureConcentrate（Coetzee,etal.（25））纯浓缩液38

B.3ProcedureForTheEstimationofBacteriophageNumbers噬菌体数估算程序39

B.3.1Introduction简介39

B.3.2Equipment设备39

B.3.3Procedure程序39

B.3.3.1PreparationofBacteriophageHost噬菌体寄主的制备39

B.3.3.2PreparationofDilutionTubesandSoftAgarforUseinPhageAssays噬菌体分析用的稀释管和软琼脂制备39

B.3.3.3PhageAssays噬菌体分析40

APPENDIXC:

FILTERVALIDATIONRECOMMENDATIONS附录C：

过滤器验证建议41

1Introduction简介

Scope:

ThisPDATechnicalReportaddressesvirusremovalfiltersthatretainvirusesbyasizeexclusionmechanism.Itexplainshowtheywork,theirselection,characterization,testing,andvalidation.Thisdocumentshouldbeconsideredasaguide;itisnotintendedtoestablishanymandatoryorimpliedstandard.范围：

此PDA技术报告陈述了病毒去除过滤器，该过滤器通过尺寸排除装置拦截病毒。

本报告解释过滤器的工作原理、选择、特征、测试及验证。

本文件应作为指南；并不打算建立任何强制性或暗指的标准。

Biotechnologicalandbiologicaltherapeuticproductsareoftenmanufacturedusingmaterialsofanimalorhumanorigin,includingculturedprimaryortransformedcells,milkorothercomponentsfromtransgenicanimals,naturalextracts,andhumanoranimalbloodplasmacomponents.Theseproductsareusuallyproteinsthataremanufacturedbycomplexmanufacturingprocesses.Althoughapprovedrecombinantbiotherapeuticshaveanexcellentsafetyrecord,theriskofcontaminationbyknownorunknownpathogensexists（e.g.,1-10）.生物技术和生物医疗制品常使用动物或人体器官的原料制造，这些原料包括培养的主要或改变的细胞、乳液或转基因动物成分、天然浸膏、人或动物的血浆成分。

这些产品通常是蛋白质，通过复杂的制造工艺生产出来的。

虽然经核准的重组体生物疗法拥有极好的安全记录，污染物风险还是存在已知或未知的病原体（见样例1-10）。

Virusfiltrationisperformedaspartofamanufacturer'soverarchingvirussafetystrategy.Inthiscontext,virusfiltration（size-basedremoval）isacomplementtovirusinactivation,bothofwhichcontributetovirusclearance（e.g.,11-20）.Implementationofvirusclearancecomplementsadditionalmeasuressuchascontroloverrawmaterialsandtestingofcellcultureorplasmafeedstocks.Collectively,thesemeasuresformtheframeworkofavirussafetystrategy.病毒过滤作为生产商病毒安全策略的一部分执行。

在这种环境中，病毒过滤（根据尺寸排除）是病毒失活的补充，两者都将促进病毒清理（见样例11-20）。

执行病毒清理增加了额外测量，如原材料控制和细胞培养或血浆原料的测试。

Theriskoftransmissionofcertaininfectiouspathogenscannotbecompletelymitigatedbydonorscreening,vaccinationofpatients,asinglevirusinactivationstep,or,inthecaseofcell-basedproducts,virustestingofcellbanksandrawmaterials.Itisdesirabletointroduceadditionalrobuststepsinbiotherapeuticpurificationprocessestohelpreduceoreliminateviruseswithoutcompromisingthemolecularintegrityoftheproducts.Virusremovalfilters（oftenincorrectlytermed"nanofilters"）arespecificallydesignedtoremovevirusesandotherbiomoleculesfromtheproduct（protein）solutionthroughasizeexclusionmechanism.转移特定传染病原体的风险无法通过供体过滤、患者接种、单个病毒失活步骤或者基于细胞的产品、细胞库和原材料的病毒测试完全缓解。

将附加的稳定步骤引入生物疗法提纯工艺，以帮助减少或消除病毒，而不损害产品中分子的完整性。

病毒移除过滤器（常被错误地叫做“纳米技术”）是通过尺寸排除装置移除病毒和产品（蛋白质）中其它生物分子溶液。

Commerciallyavailablevirusremovalfiltershavedifferentmembranecharacteristicsparticulartoeachfilterorfiltertype.Thesecharacteristicsincludemembranematerial,membranesurfacegraftcharacteristics,porestructureandporesizedistribution,virusretentioncapacity,andproteintransmissionandadsorptionproperties.Virusfiltrationisconductedbyeitherdirect（alsotermeddead-endornormal）flowfiltration（DFF）ortangentialflow（alsotermedcross-flow）filtration（TFF）.Selectionofthemodeoffiltration（DFForTFF）isusuallybasedonthecharacteristicsofthesolutiontobefilteredorprocessissuessuchaseaseofuse,easeofvalidation,andeconomics.商用病毒移除过滤器对每种过滤器或过滤器类型都有不同的膜特性。

这些特性包括膜材料、膜表面移植物特性、孔结构和孔径分布、病毒滞留能力以及蛋白质转移和吸附功能。

病毒过滤器管理通过直流（也叫做终端或正常）过滤器（DFF）或分流过滤器（TFF）。

过滤器模式的选择（DFF或TFF）通常根据过滤溶液的特性或工艺问题，如便于使用、便于验证且经济。

2GeneralConcepts一般概念

Virusfiltersarecastpolymericmembraneswithacomplexinternalporousstructure.Solutionspassthroughthisporenetworkwhileparticlescarriedalongbythefluidmayberetainedonthemembranesurfaceorpenetratesomedistanceintothemembranestructure.Retentionthatoccursbecauseparticlesaretoolargetopassthroughaporeisreferredtoassievingorsizeexclusion.Traditionalasymmetricsurface"skinned"ultrafiltrationmembranesthatcontainpinholedefects,whilestillsuitableforproteinconcentration,maynotprovideconsistenthighclearanceforlargeviruses（21）.病毒过滤器使用复杂的内部多孔结构消除高分子膜。

溶液穿过该孔状网，而液体携带的微粒会滞留在膜的表面或穿透至膜的结构中。

发生滞留是因为微粒太大而无法穿过气孔，这就是所谓的筛分或尺寸排除。

传统的非对称表面“表层”超滤膜包含小孔缺陷，但仍然适用于蛋白质浓度，可能不会持续提供大分子病毒的高清除度（21）。

Smallerparticlescapableofpassingthroughaporemayalsobecapturedbyadsorptiontomembraneporesurfaces.Retentionbyadsorptionmayinvolveavarietyofdifferentforcesatdifferentadsorptionsiteswithinthemembranestructure.Adsorptionofviruses,whenitoccurs,isasecondaryphenomenon,whilesize-basedexclusionisconsideredtobethemainmechanismofclearancebyfiltration.更小的可能通过小孔的微粒也会被膜孔表面吸附。

吸附滞留包括膜的结构中多种不同吸附点的吸附力量。

发生滞留时，病毒的吸附是一个次要现象，而根据尺寸排除被认为是通过过滤器清理的主要方法。

Terminology术语

MinimumExposureTime:

Theshortestperiodforwhichatreatmentstepwillbemaintained.最小暴露时间：

维持处理步骤的最短时间

NonspecificModelVirus:

Avirususedforcharacterizationofviralclearanceoftheprocesswhenthepurposeistocharacterizethecapacityofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivatevirusesingeneral,i.e.,tocharacterizetherobustnessofthepurificationprocess.非特定病毒模型：

一般来说，当用来描述生产工艺病毒移除和/或灭活的能力时，病毒具有工艺病毒清理的特性，即描述提纯工艺的稳定性。

ProcessCharacterizationofViralClearance:

Viralclearancestudiesinwhichnonspecificmodelvirusesareusedtoassesstherobustnessofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivateviruses.病毒清理的工艺特性：

在病毒清理研究中，非特定病毒模型用来评估生产工艺的稳定性。

ProcessEvaluationStudiesofViralClearance:

Viralclearancestudiesinwhichrelevantand/orspecific"model"virusesareusedtodeterminetheabilityofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivatetheseviruses.病毒清理的工艺评估研究：

在病毒清理研究中，相关和/或特定“模型”病毒用来确定生产工艺移除和/或使病毒灭活的能力。

RelevantVirus:

Virususedinprocessevaluationstudiesthateitheristheidentifiedvirus,orofthesamespeciesasthevirus,knowntoorlikelytocontaminatethecellsubstrateoranyotherreagentsormaterialsusedintheproductionprocess.相关病毒：

用于工业评估研究的病毒要么是已识别的病毒，要么是同类病毒，已知或可能污染细胞培养基或任何其它反应物或用于生产工艺的原料。

SpecificModelVirus:

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