应用微生物技术资料.docx

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应用微生物技术资料

2酿酒

1,酿造酒：

以粮谷，水果，或允许使用的野生植物为原料经酒精发酵后所得的发酵液，可直接饮用或过滤后饮用；如啤酒，葡萄酒，果酒，黄酒；

2,蒸馏酒：

蒸馏酿造酒所得的酒；酒精浓度较高，20%以上；含可溶性有机物很少，有独特的强烈香味；世界六大蒸馏酒：

中国白酒，白兰地，威士忌，伏特加，朗姆酒，金酒；

3,世界三大名酒白酒：

茅台酒法国可涅克白兰地英国苏格兰威士忌

4,配制酒：

以发酵酒，蒸馏酒或食用酒精为主要酒基，与各种可食用物质一起加工，浸泡，混合，勾兑制成的有独特风格的饮料酒；

5,白酒的发酵机理是：

以粮谷等淀粉质为原料，其中淀粉先经产生的酶糖化为，再经

菌在氧条件下酒精发酵，产生酒精；

6.制曲的流程是：

斜面，            种曲，帘子种曲，               ；

黑曲霉的特点是：

好氧，最佳生长温度28℃，生长28-32h时菌丝内糖化酶活性最强；设计方案利用黑曲霉生产糖化酶；

酒母制备的流程是：

斜面，液体试管，三角瓶液体种子，             ，酒母罐；

酵母是兼性厌氧菌，在有氧条件下               ，无氧条件下发酵产生酒精；

设计酒母制备的生产流程；

7,一、单项选择题

1、酿造酒按发酵类型分为单式发酵和复式发酵，单式发酵是以糖质为原料，经酵母菌直接发酵制成的酒精饮料，以下属于单式发酵的是（）。

A啤酒B葡萄酒C中国白酒D黄酒

2、茅台酒的制曲温度达60℃以上，云南白酒的制曲温度约为37℃，二者比较，酿造茅台酒所用酒曲的糖化发酵力（）

。

A强B弱C相同D无影响

3、大曲酒所用酒曲中，对大曲酒酿造起主要作用的菌种是（）。

A根霉，酵母B曲霉，酵母C曲霉，根霉D青霉，酵母

4、小曲酒所用酒曲中，对小曲酒酿造起主要作用的菌种是（）。

A曲霉，酵母B根霉，酵母C曲霉，根霉D青霉，酵母

5、纯生啤酒是鲜啤酒除菌后制成，其灭菌方法是（）。

A巴氏灭菌B辐射灭菌C过滤除菌D煮沸灭菌

6、酵母菌属于兼性厌氧菌，在无氧条件下，酵母菌的生命活动有（）。

A繁殖B分解糖为CO2和水C产生乙醇D产生醋酸

7、熟啤酒是鲜啤酒除菌后制成，其灭菌方法是（）。

A过滤除菌B巴氏灭菌C辐射灭菌D煮沸灭菌

二、不定项选择题

1、酵母菌属于兼性厌氧菌，在有氧条件下，酵母菌的生命活动有（）。

A繁殖B分解糖为CO2和水C产生乙醇D产生醋酸

2、酿造酒按发酵类型分为单式发酵和复式发酵，复式发酵是以淀粉为原料，先糖化再酒精发酵，以下属于复式发酵的有（）。

A啤酒B葡萄酒C中国白酒D黄酒

三、填空题

1、酿造啤酒时，要制备麦芽，其目的是（）。

2、酿造啤酒时，麦芽汁中加入酵母后，通入无菌空气，目的（）。

3、酿造啤酒时，要将麦芽，大米粉混合制备麦芽汁，其目的是（）。

3 微生物与发酵食品

1，利用微生物的作用制得的食品称发酵食品；

中国的酱油，腐乳，日本的纳豆，清酒，韩国的泡菜，意大利的萨拉米香肠，高加索地区的开菲尔奶，西方的面包，干酪，酸奶；

谷类，豆类，蔬菜，乳，肉等都可制作发酵食品；,

2，菌种：

曲霉：

好氧，最适温度28-32℃；

酵母：

兼性厌氧，最适pH4.5，最适温度28-32℃；

醋酸菌：

好氧，在含糖和酵母膏的培养基上生长；最适温度28-32℃，最适pH3.5-6.5；

3，乳酸的营养价值高

蛋白质变成人体中必需氨基酸和肽类；脂肪在酶的作用下，更易被人体消化；维生素B1，2，6，12增加，烟酸叶酸等物质增加，钙磷铁利用率大大得高，有利于防止婴儿佝偻病和老人骨质疏松病；

4，, 乳酸菌的保健作用

1）克服乳糖过敏现象（腹胀腹痛，肠道痉挛，下泄）；

2）改善微生态环境

产生具抗微生物活性的物质，如有机酸，过氧化氢，表现出抑菌活性；

很多乳酸菌产生细菌素，如链球菌属，嗜酸菌属，乳酸菌属；对大肠杆菌，沙门氏菌，金黄色葡萄球菌有明显抑制作用；

乳酸菌黏附于肠道黏膜，可防止病原菌附着于肠上皮细胞表面，定殖入侵肠道细胞；

3）抗癌作用

激活巨噬细胞，抑制肿瘤细胞；抑制引起癌变的酶；

 酸乳制造以牛乳为原料，添加适量砂糖，经巴氏杀菌后冷却，再加入纯乳酸菌发酵剂经保温发酵制得的产品；

二 菌种

一）菌种构成

乳酸菌：

使20-30%乳糖转变成乳酸，pH降低，pI（4.6），酪蛋白凝固，乳凝固；

柠檬明串珠菌，丁二酮乳酸链球菌：

分解氧化乳中所含柠檬酸酸盐，产生有芳香味的丁二酮；增加制品风味；

乳酸链球菌：

产生抗菌素，防止杂菌污染；

生产传统酸奶，多采用嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的混合发酵剂；

二）菌种的特性

1 嗜热链球菌

生理特性：

最适生长温度40-45℃，最低生长温度20℃，最高生长温度50℃；对抗生素非常敏感；

2保加利亚乳杆菌

最适生长温度40-43℃，最低22℃，最高生长温度52.5℃；

在嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌配合作用时，乳凝固时比使用单一菌株时缩短了，只需2-3h；

四 酸乳的生产工艺

原料配合，过滤均质，杀菌，添加发酵剂（纯培养物，母发酵剂，生产发酵剂），装罐，发酵，冷藏，酸乳；

1 牛乳的净化

新鲜优质牛奶，pH6.5，不得超过7；酸度反映牛乳新鲜度和稳定性的指标；酸度高的牛乳，新鲜度低；

不含抗菌素，防腐剂，消毒剂，有害微生物；

离心，除去牛乳中肉眼可见的异物；

2 牛乳脂肪含量的标准化

用分离机把稀奶油从全脂乳中分离出来；脱脂乳加全脂乳或稀奶油；

3 配料

添加脱脂奶粉，添加量1-3%；

加5-10%的糖，高温下边加边搅拌，使溶解更快；

4 浓缩

浓缩比加奶粉好；

减压浓缩，反渗透浓缩，超滤浓缩；

5 均质

以机械方法使乳脂肪球充分分散；与乳的加热同时进行；55-70℃，15-20MPa；

6 杀菌

1）低温长时间杀菌法（LTLT）

80-85℃，30min；90-95℃，5-10min；

2）UHT灭菌法

130-150℃，0.5-15s，可使牛乳的破坏降到最低；

7 接种

1）接种量2%；

2）接种方法

接种之前，发酵剂充分搅拌，使菌体从凝乳块中游离分散出来；自动接种，充分搅拌；

8 罐装

立即罐装到销售用的小容器中；

9 发酵

发酵室内，保温，加热，调控；

温度41-42℃；3h左右；

嗜热链球菌最适温度稍低于保加利亚乳杆菌；

若低于该温度，嗜热链球菌发育旺盛，酸味不足，风味较差；

若高于该温度，保加利亚乳杆菌发育旺盛，乳酸比例增大，出现刺激性较强的酸味，香味成分不足；

10 冷却

预冷却：

从42℃培养到pH5.2-5.3时，温度降到35-38℃继续培养，pH降到4.7；

冷藏：

0℃，12-20h；促进香味物质生成；后熟期；

如发酵乳制品是以牛羊马乳为原料，经乳酸菌，双歧杆菌，酵母菌等发酵制成的，使各种成分降解，增加了可溶性的磷和钙，并合成了水溶性的维生素，营养价值比鲜奶更高；具调整肠道菌群，提高蛋白质和维生素的代谢，防止便秘，产生抗菌素，缓解乳糖不适症，降低结肠癌的发病率，抗肿瘤，增强免疫系统，降低胆固醇的作用；

五，食醋

用粮食等淀粉质为原料，经微生物制曲糖化，酒精发酵和醋酸发酵等阶段酿制而成；

酿醋常用的微生物

一）淀粉水解微生物

曲霉：

黑曲霉：

AS3.4309；

宇佐美曲霉：

AS3.758；甘薯曲霉：

AS3.324；

二）酒精发酵微生物

酵母：

AS2.109，A2.399：

适于淀粉质原料；

AS2.1189，AS2.1190：

适于糖蜜原料；

K字酵母：

适于以高粱，大米，甘薯为原料酿制普通食醋；

三）醋酸发酵微生物

氧化酒精生成醋酸；好氧；最适温度28-32℃；最适pH3.5-6.5；

恶臭醋杆菌：

我国酿醋常用菌株之一；AS1.41；沪酿1.01；

许氏醋杆菌：

国外有名的速酿醋菌种；

奥尔兰醋杆菌：

法国奥尔兰地区用葡萄酒生产醋的主要菌种；

一）酿醋中的生化作用

1 淀粉水解：

转化为可发酵糖；

2 酒精发酵；

3 醋酸发酵：

乙醇氧化成乙酸；

醋酸菌能氧化醋酸为二氧化碳和水；因此发酵后期，乙酸不再上升时，加入食盐，抑制醋酸菌的分解；

食醋酿制工艺

一）工艺流程

糯米，粉碎，蒸煮，加酶制剂糖化，加酵母酒精发酵，得酒醅，拌麸皮，加成熟醋醋酸发酵，封醅，淋醋，浓缩，贮存，成品；

二）生产工艺

1 原料糯米；

2 糖化糯米粉碎后，加水，耐高温淀粉酶，打进蒸煮器连续蒸煮，冷却，加糖化酶糖化；

3 酒精发酵

1）前发酵期

有少量溶解氧，酵母细胞迅速繁殖；酒精产量不高；发酵醪表面平静，糖分消耗少；10h左右；

2）主发酵期

酵母停止繁殖，主要进行酒精发酵，二氧化碳逸出，有较强的二氧化碳泡沫响声，温度很快上升；控制在32-34℃；12h；

3）后发酵期

糖分大部分被消耗掉；酒精二氧化碳产生少，产生热量不多，温度逐渐下降，温度控制在30-32℃；40h；

4 醋酸发酵

1）麸皮与酒醅混合，要求无干麸，麸皮吸收酒醅和水分，疏松和包容空气的作用；再取当日已翻过的醋醅做种子，放于拌好麸的酒麸上，用糠覆盖，糠：

疏松酒醅，积存和流通空气，有利于醋酸菌好氧发酵；第2天开始，将糠，上层发热的醅与下面一层未发热的醅充分拌匀后，盖一层糠，10d；敞口操作，多菌种的混合发酵；

2）过杓结束，醋酸发酵已达旺盛期；每天将底部的潮醅翻上来，表面的热醋醅翻下去，要见底；

酒精越来越少，酸度越来越高，品温逐渐下降，待醋醅的酸度达最高值，酸度不再上升甚至略有下降时，立即封醅，转入陈酿阶段；

5 封醅

耙平压实，用塑料或尼龙油布盖好，四边用盐封住，不留空隙和细缝，减少醋醅中空气，控制过氧化，减少水分，醋酸及酒精挥发；

6 淋醋

将淋池，沟槽清洗干净，干醅放在下面，潮醅放在上面，离池口15cm，加食盐，米色，用上一批第2次淋出的醋将醋醅泡满，数小时后，拔去淋嘴上的小橡皮塞淋醋，醋液淋入池中，为头醋；

再加入第3次淋出的醋液浸泡数小时，淋出的醋为二醋，作为第一次浸泡用；

再加清水浸泡数小时，淋得三醋，用于醋醅的第2次浸泡；

淋醋时，不可一次将醋全部放完，边放边淋；将不同等级的醋放入不同的醋池，淋尽后出渣；

7 浓缩，储存

生醋经沉淀，高温浓缩，冷却到60℃，储存器陈酿1-6个月；

发生了酯化反应，如醋酸乙酯，醋酸丙酯，醋酸丁酯，乳酸乙酯；色泽变深；

第二节 酱油和酱制品

酱油：

以豆粕或豆饼为蛋白质原料，以小麦或麸皮为淀粉质原料，经蒸煮，微生物发酵，浸出后配制而成的一种调味品；

二 酱油生产中的微生物

一）主要菌种

1 曲霉

米曲霉：

Aspergillus oryzae；福建永春酱油曲中分离得到，上海酿科所紫外诱变，长期驯化；

较强的蛋白质分解能力，糖化能力；

酱油曲霉：

Aspergillus sojae；日本学者坂口从酱油中分离得到；碱性蛋白酶活力强；

2 酵母菌

鲁氏酵母：

赋予乙醇，酯类，琥珀酸等香气成分；

3 酱油乳酸菌

抑制有害微生物生长并产生酯类的前体；

与原料发酵成熟的快慢，成品颜色的浓淡及味道的鲜美有直接关系的微生物是米曲霉和酱油曲霉；

与酱油风味有直接关系的微生物是酵母菌和乳酸菌；

三 酱油酿造的基本原理

1 发酵中的生物化学变化

1）蛋白质的水解作用

蛋白质水解成胨肽氨基酸；成品酱油中氨基酸含量应达到全氮的50%以上；

2）淀粉的水解作用

淀粉被分解成葡萄糖，糊精，麦芽糖；

3）酒精发酵作用

酒精具清爽香气，可被氧化成有机酸，酯，对香气的形成有重要作用；

4）有机酸发酵作用

乳酸，醋酸，琥珀酸；适量有机酸可增加酱油的风味；

四 生产工艺

固态低盐发酵工艺

脱脂豆粕（豆饼），粉碎，加麸皮，加水，润料，蒸料，摊晾，加种曲制曲，保温发酵，加食盐水，浸油，加热配制，杀菌，包装；

4，基本技术

二 培养基及其制备

一）培养基的成分及来源

1 碳源：

糖：

多数微生物利用糖作碳源；

单糖优于双糖多糖，已糖优于戊糖，葡萄糖果糖优于甘露糖，半乳糖；纯多糖优于杂多糖；

葡萄糖是最易利用的碳源，速效碳源；但高浓度葡萄糖加速菌体代谢，溶解氧不能满足需要；中间代谢物如乳酸丙酮酸不能完全氧化，积累在菌体或培养基中，pH下降，微生物受到抑制；

淀粉为长效碳源，利用较慢，高浓度不会对微生物产生不利影响；

油脂：

豆油，菜籽油；某些霉菌和放线菌可利用油脂作碳源；

有机酸：

单细胞蛋白，氨基酸，维生素和某些抗生素的生产可利用乙酸盐，柠檬酸盐作碳源；

醇，烃：

一些甲烷氧化菌只利用甲烷和甲醇作碳源；

2 氮源

有机氮：

黄豆饼粉，花生饼粉，棉籽饼粉，玉米浆，蛋白胨，酵母粉，鱼粉；含丰富蛋白质，氨基酸，含少量糖类，脂肪，生长因子；微生物在有机氮源培养基中生长旺盛；

无机氮：

氨水，硫酸铵，氯化铵，硝酸盐；速效氮源；引起pH变化；铵盐利用后，pH下降，称生理酸性盐；硝酸盐利用后pH上升，称生理碱性盐；氨水作补充氮源，调节pH；

生理酸性物质

（NH4）2SO4→2NH3+2H2SO4

生理碱性物质

NaNO3+4H2→NH3+2H2O+NaOH

玉米浆：

是制玉米淀粉的副产物；

将玉米粒先用亚硫酸浸泡，浸泡液浓缩即制成黄褐色的液体，叫玉米浆；

二）培养基的类型

1）选择性培养基

如分离能分解纤维素或石蜡油的微生物，以纤维素或石蜡油为唯一碳源的选择培养基；

分离产胞外蛋白酶的微生物，以蛋白质做唯一氮源的选择培养基；

分离酵母菌，霉菌，培养基中加青霉素，四环素，链霉素，抑制细菌放线菌；

分离革兰氏阴性细菌，加染料亮绿或结晶紫，抑制革兰氏阳性细菌；

根据某种微生物的特殊营养需求或其对某化学物理因素的抗性而设计的培养基，使混合菌样中的劣势菌变优势菌；

2）鉴别培养基

添加能与某菌的无色代谢物发生显色反应的指示剂；如伊红美蓝乳糖培养基；

2 按培养基用途划分

1）孢子培养基

使微生物形成大量的孢子；

营养不能太丰富，特别是有机氮源要低些；

麸皮培养基，大（小）米培养基，葡萄糖（淀粉）无机盐蛋白胨培养基；

2）种子培养基

供孢子萌发生长的培养基；

营养成分丰富完全；包括有机无机氮源，有机氮源有利于刺激孢子萌发，无机氮源易利用，利于菌体快速生长；蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，蒸馏水1000ml，琼脂20g， pH7.0。

3）发酵培养基

供菌体生长繁殖合成产物的培养基；菌体在半饥饿状态下更有利于产物合成；速效与迟效营养搭配，速效少用，迟效多用；流加或补料；A2培养基：

葡萄糖5g，蛋白胨5g，牛肉膏5g，淀粉20g，酵母粉5g，黄豆粉10g，CaCO33g，CoCl20.002%，蒸馏水1000ml，pH7.5。

3无机盐和微量元素

磷酸盐，硫酸盐，氯化钠，氯化钾，微量元素如镁铁钴锌锰；低浓度时对微生物有促进作用，高浓度则表现出明显的抑制作用；

功能：

构成菌体原生质的成分（磷硫等）；

作为酶的组分或某些酶的辅酶或酶的激活剂，如镁铁锰锌钴；

调节细胞的渗透压和影响细胞膜的通透性，如氯化钠，氯化钾；

参与产物的生物合成；

需求量很低；天然培养基的碳氮源本身含一定量的微量元素，配制时一般不需单独加入；磷酸氢二钾，硫酸镁；

三）培养基配制基本原则

1 适宜营养成分

根据微生物类型选择：

牛肉膏蛋白胨培养基（普通肉汤培养基）培养细菌；

高氏一号合成培养基培养放线菌；

麦芽汁培养基培养酵母菌；

查氏合成培养基培养霉菌；

一 无菌操作技术

一）灭菌方法

1 干热灭菌

1）灼烧灭菌法：

接种环，接种针或其他金属用具，试管和三角瓶口；

2）干热空气灭菌法：

烘箱，干燥箱的热空气170℃杀死微生物；玻璃器皿如吸管平板，金属用具等，凡不适于用其他方法灭菌而又能耐高温的物品；

2 湿热灭菌

1）常压蒸汽灭菌：

常压条件下，在不能密闭的容器内灭菌；

不具备高压蒸汽灭菌情况下，或不宜高压蒸煮的物质如糖液，牛奶，明胶；

温度不超过100℃，大多数微生物被杀死，芽孢细菌短时间不能杀死；

常压蒸汽持续灭菌：

持续加热6-8h；

间歇灭菌：

芽孢100℃短时间内不会失活而微生物营养体半小时即被杀死，芽孢萌发后耐热性消失，通过反复培养反复灭菌；操作：

先用100℃，30-60min杀死营养体，然后将含芽孢的培养基室温24h，使其萌发，再灭菌一次；经2次培养3次反复蒸煮，达到完全无菌；

2）高压蒸汽灭菌：

穿透力强，效果最好；

常用于培养基的灭菌；

培养基中某些成分分解氧化，酸度增加，pH下降0.2-0.3；

葡萄糖等营养物质破坏，并形成一引起浑浊和沉淀；葡萄糖溶液分别灭菌，压力尽可能低些；

3 过滤除菌

含菌液体或气体通过细菌滤器，使杂菌留在滤器或滤板上；

细菌过滤器是由孔径极小，能阻挡细菌的陶瓷，硅藻土，石棉或玻璃粉制成；

为加快过滤，抽气减压；

用于多汁不宜用湿热灭菌的液体物质，如抗生素，血清，糖；发酵工业中无菌空气的制备；

4 紫外线杀菌

260nm波长的紫外线；

穿透力弱，只用于表面杀菌和空气灭菌；实验室，接种室，接种箱，手术室，药厂的包装室；对眼黏膜及视神经有损伤作用，对皮肤有刺激作用；

5 化学药剂消毒杀菌

杀菌剂：

如重金属离子，某些强氧化剂；

抑菌剂：

磺胺类，抗生素制剂；

二）灭菌在微生物工业的应用

1 培养基的灭菌

1）温度

高温湿热短时灭菌；

不但灭菌时间短，而且培养基成分破坏小；

但温度高，对设备要求严格；120℃；

2）操作方式

①分批灭菌：

配制好的培养基置发酵罐中，通入蒸汽，达到预定温度后维持一段时间，再冷却到发酵所需温度；

适于小型发酵工厂；操作简单易行，投资少，灭菌效果好；

缺点：

加热和冷却所需时间长，营养破坏大；不适合大规模生产过程的灭菌；

②连续灭菌：

在发酵罐外连续不断地加温，保温，再冷却，把灭菌培养基加入已灭菌发酵罐的灭菌方式；

如培养基输入加热塔，灭菌温度132℃，塔内停留20-30秒；维持罐5-7min；图1-4；

优点：

高温短时灭菌，对营养破坏小；加热快，冷却快，灭菌时间短；

缺点：

设备投资大；当培养基含固体颗料或易产生较多泡沫时，易造成局部灭菌不充分与管道堵塞；

3）影响灭菌的因素

①培养基成分：

培养基中所含糖类，油脂，蛋白质含量高，增加培养基的黏度，影响热的传入，微生物死亡速率慢；

高浓度的盐增加渗透压，促进热的传导，降低微生物的耐热性，易于灭菌；

②培养基的物理状态：

颗粒大和结块的传热效果差，灭菌困难，有时需提高灭菌温度，延长灭菌时间；

③pH：

6-8时，微生物最耐热；小于6时，氢离子易渗入细胞内，促使其死亡；pH越低，灭菌时间越短；

④培养基中污染菌的数量，耐热性：

杂菌数量多，灭菌时间长；营养体，酵母，霉菌的菌丝体对热敏感，孢子和芽孢耐热性强；

⑤泡沫：

泡沫的空气形成隔热层，空气导热差，包裹在泡沫中的微生物不易被杀死；

葡萄糖是速效碳源，使用时应注意什么；

配制培养基时，常加入的无机盐有；

举例：

生理酸性盐，生理碱性盐；

常压蒸汽灭菌时，为杀死芽孢，方法有；

高压蒸汽灭菌后，培养基的pH一般会；

葡萄糖高压灭菌后会受到破坏，解决办法有；

微生物工业上，培养基灭菌采用温时；

培养基中含有机物浓度高时，灭菌时间应；

绘制连续灭菌流程图；

微生物工业上，空气除菌流程包括；

按用途划分，培养基分为，，；

发酵的一般流程是；

常用的孢子培养基有；

培养细菌，放线菌，霉菌，酵母菌常用的培养基分别是；适宜的pH分别是；

按终产物分，微生物发酵分为；按物料进出方式分，微生物发酵分为；

如何分离纤维素酶产生菌；

如何对无菌室进行灭菌；

固体料要抢温接种，堆积起温，原因是什么；

稳定培养基pH的方法有；

绘制通风发酵池示意图；

5，生物农药

苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis，Bt）：

革兰氏阳性，周生鞭毛或无鞭毛，能形成芽孢的杆状细菌；生长发育过程中，伴随着芽孢的产生会有伴孢晶体产生；

好氧，需要足够空气才能生长好，形成芽孢；

对营养要求不高，所需营养为动植物蛋白的衍生物；

温度适应范围广，10-40℃都能生长，28-32℃最合适；温度较高，生长速度快，但产生伴孢晶体的量不一定多；

适于微碱性条件，最适pH7.5，pH8.5能形成芽孢，pH5不能形成；

2杀虫机理：

鳞翅目，双翅目，鞘翅目的幼虫；苏云金杆菌经昆虫口侵入，在碱性肠道中被水解成毒性短肽，肠道壁细胞被破坏，肠壁穿孔，血液pH由6.8升到8，虫体全身麻痹；芽孢和细菌大量侵入血腔；细菌大量繁殖，产生败血症死亡；

症状：

食欲减退，停止取食，行动迟钝，上吐下泻，1-2d死亡；死后虫体软化变黑，腐烂发臭；

Bt菌种分离方法；

Bt液体（固体）发酵方法：

一）白僵菌

对多种农林害虫具致死作用；达707种；

大面积用于防治：

松毛虫，玉米螟，水稻叶蝉等害虫；

感染途径：

皮肤，口腔，气孔；

孢子发芽时分泌的一种几丁质酶破坏和溶解昆虫的表皮，使发芽管侵入体腔；侵入昆虫肌肉的菌丝可损坏其运动机能；在昆虫体内菌丝能直接吸收昆虫体液为养料，菌丝大量吸收水分，昆虫尸体硬化，故又有硬化病之称；

最适生长温度25℃，相对湿度20-50%有利于孢子的成熟，孢子萌发要求湿度90%以上；

6，饲料

饲料：

禾本科作物：

玉米秸，稻草秸，小麦秸，高粱秸；

豆科作物：

大豆秸，豌豆秸，蚕豆秸，花生蔓；

其他作物：

马铃薯蔓，红薯蔓；

为反刍动物越冬贮藏的饲料有干草料和青贮料；干草料营养物质损失大；

微生物饲料：

利用微生物个体繁殖或其新陈代谢活动来生产和调制的饲料；

包括提供反刍动物的青贮饲料，提供各种动物蛋白质的单细胞蛋白，作为动物饲料添加剂使用的微生物酶制剂及益生菌剂；

微生物饲料：

利用微生物个体繁殖或其新陈代谢活动来生产和调制的饲料；

包括提供反刍动物的青贮饲料，提供各种动物蛋白质的单细胞蛋白，作为动物饲料添加剂使用的微生物酶制剂及益生菌剂；

应用微生物技术题库

王栋老师指定唯一试题库，仅供内部参考使用

一、单项选择题

1、酿造酒按发酵类型分为单式发酵和复式发酵，单式发酵是以糖质为原料，经酵母菌直接发酵制成的酒精饮料，以下属于单式发酵的是（B）。

A啤酒B葡萄酒C中国白酒D黄酒

2、茅台酒的制曲温度达60℃以上，云南白酒的制曲温度约为37℃，二者比较，酿造茅台酒所用酒曲的糖化发酵力（B）。

A强B弱C相同D无影响

3、大曲酒所用酒曲中，对大曲酒酿造起主要作用的菌种是（B）。

A根霉，酵母B曲霉，酵母C曲霉，根霉D青霉，酵母

3、小曲酒所用酒曲中，对小曲酒酿造起主要作用的菌种是（B）。

A曲霉，酵母B根霉，酵母C曲霉，根霉D青霉，酵母

4、纯生啤酒是鲜啤酒除菌后制成，其灭菌方法是（C）。

A巴氏灭菌B辐射灭菌C过滤除菌D煮沸灭菌

5、酵母菌属于兼性厌氧菌，在无氧条件下，酵母菌的生命活动有（C）。

A繁殖B分解糖为CO2和水C产生乙醇D产生醋酸

6、熟啤酒是鲜啤酒除菌后制成，其灭菌方法是（B）。

A过滤除菌B巴氏灭菌C辐射灭菌D煮沸灭菌

二、不定项选择题

1、酵母菌属于兼性厌氧菌，在有氧条件下，酵母菌的生命活动有（A、B）。

A繁殖B分解糖为CO2和水C产生乙醇D产生醋酸