高考生物二轮复习 第八单元 生物技术实践 专题一 微生物的培养应用及传统发酵技术.docx

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高考生物二轮复习第八单元生物技术实践专题一微生物的培养应用及传统发酵技术

第八单元生物技术实践专题一微生物的培养、应用及传统发酵技术

（时间：

40分钟　满分：

60分）

B级必测

1．（2016·南通、扬州、泰州二模）下列关于“腐乳的制作”叙述错误的是（　　）

A．制作腐乳时毛霉等多种微生物共同发挥作用

B．毛霉生长的最适温度为30℃－35℃

C．后期发酵时间长短与盐用量、卤汤成分等有关

D．封瓶时最好将瓶口通过酒精灯的火焰

解析　腐乳的制作原理：

起主要作用的是真菌中的毛霉，还有其他微生物，A正确；毛霉生长的适宜温度为15℃～18℃，B错误；后期发酵时间长短与盐用量、卤汤成分等有关，C正确；为防止杂菌污染，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，D正确。

答案　B

2．（2016·苏锡常镇二模）下图表示利用苹果制备果酒、果醋的流程图。

下列有关叙述错误的是（　　）

A．过程①接种人工培育的酵母菌可以提高苹果酒的品质

B．苹果醋可以为过程③提供所需菌种

C．过程①所需的最适温度低于过程②

D．整个发酵过程都必须在严格无菌条件下才能正常进行

解析　过程①接种人工培育的酵母菌可以减少杂菌污染的机会，提高苹果酒的品质，A正确；苹果原醋中含有醋酸菌，可以为过程③提供所需的菌种，B正确；过程①为果酒发酵，适宜的温度为18～25℃，过程②为果醋发酵，适宜的温度为30～35℃，C正确；果酒的发酵不需要严格灭菌，D错误。

答案　D

3．（2016·南通三模）下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是（　　）

A．应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基pH

B．实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触

C．待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板

D．使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃

解析　培养基冷却到50℃左右才能倒平板，C错误。

答案　C

4．（2016·盐城三模）下列有关微生物培养的叙述，错误的是（　　）

A．培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌

B．各种微生物培养基的配方中必须包含碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分

C．纯化培养微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法

D．以尿素为唯一氮源的培养基可以选择培养分解尿素的微生物

解析　培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌，A正确；琼脂是配制固体培养基时常用的凝固剂，液体培养基中不需添加琼脂，B错误；纯化培养微生物常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，C正确；绝大多数微生物不能利用尿素作氮源，但分解尿素的微生物可以分解尿素作氮源，所以，利用以尿素作唯一氮源的培养基可以选择培养分解尿素的微生物，D正确。

答案　B

5．（2016·南通、扬州、泰州二模）在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图。

有关叙述错误的是（　　）

A．接种前应对培养基进行髙压蒸汽灭菌

B．连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落

C．接种过程中至少需要对接种环灼烧5次

D．甲中a区域为划线的起始位置

解析　培养基一般用高压蒸汽灭菌，A正确；菌液经过连续划线，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落，B正确；在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，因此按照图中划线顺序（d→c→b→a），整个划线过程中需要对接种环进行灼烧的次数为5次，C正确；每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落更多，由图乙可知，d区域菌落多，为起始位置，D错误。

答案　D

6．（2015·南通市一模）下列关于实验室制作果酒、果醋、腐乳的叙述，错误的是（　　）

A．果酒制作过程中，不能对葡萄进行消毒处理，以保存野生菌种

B．果醋发酵温度较高，且发酵过程要特别注意氧气供应

C．腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和盐等，均可以抑制杂菌生长

D．果酒、果醋、腐乳制作的主要菌种都是有氧呼吸型真核生物

解析　传统发酵技术使用的是野生型酵母菌，主要附着在葡萄皮上，A正确；醋酸菌发酵的最适温度在30～35℃，属于需氧型微生物，B正确；腐乳制作过程最大问题是控制杂菌生长，前期发酵用盐，后期发酵用料酒及香辛料，既改变风味，又可抑制杂菌繁殖，C正确；果酒、腐乳制作都使用真菌，果醋发酵用的是细菌，D错误。

答案　D

7．（2016·常州期末）关于“果酒、果醋的制作”实验，下列叙述错误的是（　　）

A．一般含糖量较高的水果可用来制作果酒

B．适当加大接种量可以提高发酵速度，抑制杂菌生长繁殖

C．醋酸菌是嗜温菌，所以果醋发酵所需的最适温度较高

D．先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵

解析　果酒是水果本身的糖分被酵母菌发酵成为酒精的酒，含有水果的风味与酒精，在制作果酒时，一般选择含糖量较高的水果，A正确；适当加大接种量可以提高发酵速度，抑制杂菌生长繁殖，B正确；醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为30～35℃，所以果醋发酵所需的最适温度较高，C正确；果酒的制作的原理是酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵产生酒精，制作果醋的菌种是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，在氧气充足的条件下才能进行旺盛的生命活动，所以在果酒、果醋的制作过程中，先隔绝空气进行果酒发酵，然后供氧进行果醋发酵，D错误。

答案　D

8．（2016·南京六校联考）下列有关微生物实验室培养的叙述，正确的是（多选）（　　）

A．在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊

B．灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等都属于无菌技术

C．样品中活菌数量统计时，接种方法应采用划线法

D．用平板培养基培养微生物时，应将平板倒过来放置

解析　琼脂属于多糖，在熔化琼脂时，需要控制火力并不断搅拌，以免发生焦糊，A正确；灭菌和消毒都属于无菌技术，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，静止的空气常用紫外线照射等都属于无菌技术，B正确；样品中活菌数量统计时，接种方法应采用稀释涂布平板法，C错误；用平板培养基培养微生物时，为防止水蒸气凝集滴入培养基造成干扰或污染，应将平板倒过来放置培养，D正确。

答案　ABD

9．（2015·宿迁市下学期质检卷）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。

下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母培育的过程，请分析回答下列问题：

（1）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用________将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，瓶中液体经适当稀释后，接种于________培养基上，适宜条件下培养，获得各种菌落。

（2）将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖作为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌__________________________________________________________________。

从存活的酵母菌提取DNA，并用PCR技术大量扩增目的基因。

（3）将目的基因连接到一种穿梭质粒（可以在大肠杆菌中复制和在酿酒酵母中表达的质粒）上。

该质粒具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。

大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含________的培养基上进行筛选。

将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖，应选择缺乏________能力的酿酒酵母作为受体菌。

（4）对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如下图所示。

据图分析，将转基因酿酒酵母接种在________为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的________被快速消耗，随着发酵继续进行，酿酒酵母能够________________________，说明所需菌株培育成功。

解析　

（1）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，必须使用无菌水将葡萄皮上的野生酵母菌冲洗到无菌的三角瓶中，防止水中杂菌污染；常用的微生物分离方法有平板划线法和稀释涂布平板法，采用的培养基必须是固体培养基，才能分离出单个菌落。

（2）以木糖为唯一碳源的培养基是选择培养基，可以筛选出能利用木糖的酵母菌，不能在该培养基上生存的酵母菌缺乏木糖发酵途径。

（3）转入重组质粒的大肠杆菌对氨苄青霉素有抗性，故可以培养在含有氨苄青霉素的培养基上进行筛选，可以筛选出含有目的基因的受体菌；以缺乏尿嘧啶合成酶的酵母菌作为受体细胞，可以利用缺乏尿嘧啶的培养基筛选出导入质粒的酵母菌菌株。

（4）分析题图，图示实验结果表明，葡萄糖和木糖为该培养基的碳源；最初培养基中的葡萄糖被快速消耗，随着发酵继续进行，转基因酿酒酵母能够利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响，说明所需菌株培育成功。

答案　

（1）无菌水　固体

（2）不能利用木糖发酵（或缺乏木糖发酵途径）

（3）氨苄青霉素　尿嘧啶合成

（4）葡萄糖和木糖　葡萄糖　利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响

10．（2016·苏锡常镇二模）柴油是重要的燃料油之一，也因泄露与不当排放等造成了严重的环境污染。

科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5g，加入含100mL培养基M的锥形瓶中，在30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤连续培养5次，分离获得醋酸钙不动杆菌DB（一种柴油降解菌）。

利用该菌，科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件，获得实验结果如下图。

请回答下列问题：

（1）为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以________为唯一碳源，还要考虑无机盐的________和比例。

（2）在实验过程中，科研人员“30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次”的主要目的是__________________________________________________________________。

（3）在分离醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用________（填接种方法）在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种，接种完，对接种环进行________灭菌处理。

培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的________进行重复培养，直到分离出单一菌株。

（4）据图分析，若某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将__________________________________________________________________，

并添加浓度为________的表面活性剂，以有利于提高对柴油的降解效果。

解析　

（1）为了从被污染土壤样品中分离得到能分解柴油的醋酸钙不动杆菌DB，应选用以柴油为唯一碳源的培养基培养土壤样品中的微生物，同时还要考虑培养基中无机盐的种类和比例。

（2）利用以柴油为唯一碳源的培养基连续培养分离到的醋酸钙不动杆菌DB，目的是使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加。

（3）利用接种环进行微生物接种的方法是平板划线法。

接种结束后必须通过灼烧灭菌法对接种环严格灭菌，以防止残留在接种环上的微生物污染环境。

由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群体叫菌落。

（4）分析图1、图2实验结果可知，当柴油浓度为4000mg/kg左右、表面活性剂浓度为6mg/g左右时，醋酸钙不动杆菌DB对柴油的降解效率高，故应对被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000mg/kg左右，同时添加浓度为6mg/g左右的表面活性剂，以提高对柴油的降解效果。

答案　

（1）柴油　种类　

（2）使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加（或“使柴油分解菌富集”）　（3）平板划线法　灼烧　菌落　（4）被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000mg/kg左右　6mg/g

A级自悟

11．（2016·南通一模）下列有关果酒、果醋和腐乳制作实验的叙述，错误的是（　　）

A．通过控制发酵温度，可抑制其他微生物的生长繁殖

B．都是利用微生物胞内酶催化获得最终产品