草莓茎尖培养的研究毕业设计论文.docx

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草莓茎尖培养的研究毕业设计论文

****院

毕业设计说明书（论文）

作者:

***

学号：

1111******

学院:

生命科学与化学工程学院

专业:

*******

题目:

草莓茎尖培养的研究

讲师

***

指导者：

（姓名）（专业技术职务）

***

副教授

评阅者：

（姓名）（专业技术职务）

2015

年

5

月

毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明

原创性声明

本人郑重承诺：

所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。

尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。

对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。

作者签名：

　　　　　日　期：

指导教师签名：

　　　　　日　　期：

使用授权说明

本人完全了解大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：

按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。

作者签名：

　　　　　日　期：

学位论文原创性声明

本人郑重声明：

所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。

除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。

对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。

本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。

作者签名：

日期：

年月日

学位论文版权使用授权书

本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。

本人授权　　　　大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。

涉密论文按学校规定处理。

作者签名：

日期：

年月日

导师签名：

日期：

年月日

注意事项

1.设计（论文）的内容包括：

1）封面（按教务处制定的标准封面格式制作）

2）原创性声明

3）中文摘要（300字左右）、关键词

4）外文摘要、关键词

5）目次页（附件不统一编入）

6）论文主体部分：

引言（或绪论）、正文、结论

7）参考文献

8）致谢

9）附录（对论文支持必要时）

2.论文字数要求：

理工类设计（论文）正文字数不少于1万字（不包括图纸、程序清单等），文科类论文正文字数不少于1.2万字。

3.附件包括：

任务书、开题报告、外文译文、译文原文（复印件）。

4.文字、图表要求：

1）文字通顺，语言流畅，书写字迹工整，打印字体及大小符合要求，无错别字，不准请他人代写

2）工程设计类题目的图纸，要求部分用尺规绘制，部分用计算机绘制，所有图纸应符合国家技术标准规范。

图表整洁，布局合理，文字注释必须使用工程字书写，不准用徒手画

3）毕业论文须用A4单面打印，论文50页以上的双面打印

4）图表应绘制于无格子的页面上

5）软件工程类课题应有程序清单，并提供电子文档

5.装订顺序

1）设计（论文）

2）附件：

按照任务书、开题报告、外文译文、译文原文（复印件）次序装订

指导教师评阅书

指导教师评价：

一、撰写（设计）过程

1、学生在论文（设计）过程中的治学态度、工作精神

□优□良□中□及格□不及格

2、学生掌握专业知识、技能的扎实程度

□优□良□中□及格□不及格

3、学生综合运用所学知识和专业技能分析和解决问题的能力

□优□良□中□及格□不及格

4、研究方法的科学性；技术线路的可行性；设计方案的合理性

□优□良□中□及格□不及格

5、完成毕业论文（设计）期间的出勤情况

□优□良□中□及格□不及格

二、论文（设计）质量

1、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范？

□优□良□中□及格□不及格

2、是否完成指定的论文（设计）任务（包括装订及附件）？

□优□良□中□及格□不及格

三、论文（设计）水平

1、论文（设计）的理论意义或对解决实际问题的指导意义

□优□良□中□及格□不及格

2、论文的观念是否有新意？

设计是否有创意？

□优□良□中□及格□不及格

3、论文（设计说明书）所体现的整体水平

□优□良□中□及格□不及格

建议成绩：

□优□良□中□及格□不及格

（在所选等级前的□内画“√”）

指导教师：

（签名）单位：

（盖章）

年月日

评阅教师评阅书

评阅教师评价：

一、论文（设计）质量

1、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范？

□优□良□中□及格□不及格

2、是否完成指定的论文（设计）任务（包括装订及附件）？

□优□良□中□及格□不及格

二、论文（设计）水平

1、论文（设计）的理论意义或对解决实际问题的指导意义

□优□良□中□及格□不及格

2、论文的观念是否有新意？

设计是否有创意？

□优□良□中□及格□不及格

3、论文（设计说明书）所体现的整体水平

□优□良□中□及格□不及格

建议成绩：

□优□良□中□及格□不及格

（在所选等级前的□内画“√”）

评阅教师：

（签名）单位：

（盖章）

年月日

教研室（或答辩小组）及教学系意见

教研室（或答辩小组）评价：

一、答辩过程

1、毕业论文（设计）的基本要点和见解的叙述情况

□优□良□中□及格□不及格

2、对答辩问题的反应、理解、表达情况

□优□良□中□及格□不及格

3、学生答辩过程中的精神状态

□优□良□中□及格□不及格

二、论文（设计）质量

1、论文（设计）的整体结构是否符合撰写规范？

□优□良□中□及格□不及格

2、是否完成指定的论文（设计）任务（包括装订及附件）？

□优□良□中□及格□不及格

三、论文（设计）水平

1、论文（设计）的理论意义或对解决实际问题的指导意义

□优□良□中□及格□不及格

2、论文的观念是否有新意？

设计是否有创意？

□优□良□中□及格□不及格

3、论文（设计说明书）所体现的整体水平

□优□良□中□及格□不及格

评定成绩：

□优□良□中□及格□不及格

教研室主任（或答辩小组组长）：

（签名）

年月日

教学系意见：

系主任：

（签名）

年月日

毕业设计说明书（论文）中文摘要

本实验以‘章姬’（‘Akihime’）和‘丰香’（‘Toyonoka’）这两个品种的匍匐茎尖为试材，诱导出丛生芽后进行增殖培养和生根培养，研究不同激素浓度及组合对茎尖增殖和生根的影响。

结果表明，最适宜章姬增殖的培养基为MS+0.8mg/L6-BA+0.1mg/LNAA；最适宜丰香增殖的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA。

最适宜章姬草莓生根的培养基是1/2MS+0.5mg/LIBA；最适宜丰香草莓生根的培养基是MS+0.5mg/LIBA。

关键词草莓，茎尖培养，快繁

毕业设计说明书（论文）外文摘要

TitleRapidPropagationSystemResearchofMeristemCultureforStrawberry

Abstract

Thestolontipsof‘Akihime’and‘Toyonoka’weretestedinmultiplicationcultureandroottingcultureafterinducedthebuds.Theimpactofdifferenthormonevarietyandconcentrationonmultiplicationandroottingofstrawberrywasstudied.TheresultshowedthatMS+0.8mg/L6-BA+0.1mg/LNAAwasthebestmultiplicationmediumof‘Akihime’,andMS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAAwasthebestmultiplicationmediumof‘Toyonoka’.1/2MS+0.5mg/LIBAwasthebestroottingmediumof‘Akihime’,andMS+0.5mg/LIBAwasthebestroottingmediumof‘Toyonoka’.

Keywordsstrawberry,meristemculture,rapidpropagation

1引言

草莓（Fragaria×ananassaDuch.）是蔷薇科草莓属多年生草本植物,是浆果类水果，据2012年2月第七届世界草莓大会统计数据显示，我国草莓的栽培面积、产量和消费量均居世界第一位[1]。

草莓成熟浆果鲜红艳丽，柔软多汁，香味浓郁，酸甜可口，营养丰富，深受国内外消费者的欢迎。

据测定，草莓浆果含糖6%—12%，各种有机酸1%-1.5%，蛋白质0.4%-0.8%，每100g果实中含维生素C50-100mg，比苹果、葡萄等高10倍以上。

在生产中草莓育苗多采用分株繁值和匍匐茎繁值，繁殖速度慢且容易感染病毒，导致品质劣化、产量降低等退化现象，是限制草莓繁殖的瓶颈问题，并已经不能满足目前规模化生产的实际需求[2]。

利用组织培养技术对草莓进行组织培养，不但可以快速有效的繁殖大量优质草莓种苗，同时有利于品种提纯，满足规模化生产的需求。

草莓进行组培苗的脱毒生产，既可防治病害传播，又符合国际上植物检疫标准要求，扩大产品的流通，同时还保证了幼苗繁殖对气候的要求，缓和了淡旺季产品的供需矛盾。

世界上一些先进国家园艺植物组织培养技术的迅速发展从20世纪60年代就已开始，并随着生长、分化规律性探索逐步深化，得到了进一步的发展，获得了可观的经济效益。

目前，关于草莓的组织培养研究较多[3-5]，但根据现有资料来看，在诸如培养基成分及植物激素条件等技术环节方面尚存在着较大的差异，这可能是由于供试品种不同所致，这给草莓组培快繁技术的实际应用带来了不便。

章姬（‘Akihime’）是日本静岗市民间育种家荻原章弘先生于1990年育成的鲜食品种，于1997年由贵州省农业科学院园艺研究所引入我国[6]。

该品种生长势旺盛，浆果早熟，果实大而艳丽，果形奇特，外观美，整齐，畸形果少，果肉柔软多汁、细腻，果实成熟后风味极佳，丰产、优质、休眠浅、栽培容易，是适应大棚促成栽培的优良品种[7]。

丰香（‘Toyonoka’）为日本品种,1989年由莱阳农学院引进，早熟丰产，适应性强，果实香气浓郁、糖度高、酸味适中、风味极佳,为多年少见的优良品种，目前已成为我国草莓促成栽培和半促成栽培的主要品种之一[8]。

这两个品种均有很大的市场竞争力，但是售价较高。

本研究以这两个品种为试材，通过研究不同激素组合对其增殖与生根的影响，建立其组培快繁体系，为扩大其栽培面积、降低生产成本、加快推广速度提供技术支持。

2材料与方法

2.1材料

供试材料为青岛果树所果树茶叶研究所露地栽培草莓品种‘章姬’（‘Akihime’）和‘丰香’（‘Toyonoka’），田间采集草莓匍匐茎尖进行试验。

2.2方法

2.2.1外植体的灭菌、接种

茎尖脱毒根据朱建华、彭世勇的方法[9]，并略有改动。

选取健壮无病的草莓匍匐茎尖1-2cm，流水冲洗1-3h后，在超净台上用75%酒精灭菌30s，无菌水冲洗3遍，再用0.1%升汞浸泡8min，无菌水冲洗3-5次，将材料在无菌滤纸上吸干，于双目解剖镜下剥取带有1-2个叶原基的生长点，迅速接种于芽诱导培养基（MS+0.5mg/L6-BA+0.05mg/LNAA）[10]上。

每瓶培养基接种1个外植体，接种40d后即可获得草莓组培苗。

培养条件：

光照强度2000-4000lx，16h光照，温度（25±1）℃。

2.2.2茎尖增殖培养

以MS为基本培养基，加入蔗糖30g/L，琼脂7g/L，附加6-BA与NAA的不同浓度组合，调整培养基pH为5.8，各种浓度组合详见图的说明，以MS培养基为对照，共12个处理。

将培养基在116℃下灭菌30min后备用。

初代培养40d后，选取长势一致的健壮组培苗，切去老叶后接入上述增殖培养基，每种处理设8次重复，每重复4个外植体，后置于温度为（25±1）℃，光照16h的组培室中培养，40d后调查生长情况。

用直尺测量草莓组培苗的株高，并统计其增殖系数。

增殖系数=增殖苗数/接种苗数×100%。

2.2.3生根培养

在原有实验的基础上，基本培养基以1/2MS为主，加入蔗糖30g/L，琼脂7g/L，附加不同浓度的NAA及IBA，调整培养基PH为5.8，各种浓度详见图的说明，同时比较基本培养基为MS与1/2MS时的生根情况，共11个处理。

将培养基在116℃下灭菌30min后备用。

选择株高2cm左右、长势一致、生长健壮的草莓组培苗，将其接入上述生根培养基中，每种处理设8次重复，每重复4个外植体。

45d后观察草莓苗的生根情况。

待苗长至高3-4cm、根5-6条时，挑选长势良好的壮苗进行驯化移栽。

先将生根草莓苗的组培瓶瓶盖打开，在室内放置1-2d后，将组培苗根部附着的培养基洗净，栽植于无菌基质中。

基质采用草炭：

蛭石：

珍珠岩=2:

1:

1的比例混合（121℃，20min灭菌）。

小苗栽植后立即浇透水，置于培养箱中。

培养箱设置温度25±2℃，湿度保持80%-85%。

待苗长至20cm高时可移栽至大田。

3结果与分析

3.1不同激素处理对草莓组培苗增殖的影响

图1不同激素浓度对草莓组培苗增殖的影响。

A：

增殖系数；B：

苗高

Fig.1Theimpactofdifferenthormoneconcentrationonstemtipsproliferationofstrawberry.A:

proliferationcoefficient;B:

heightofplantlets

表1草莓增殖系数方差分析的F值

变异来源

F值

章姬增殖系数

158.375**

丰香增殖系数

427.715**

表2草莓苗高方差分析的F值

变异来源

F值

章姬苗高

30363.852**

丰香苗高

10359.132**

图1-A结果表明，不同处理对草莓组培苗增殖影响显著。

对于品种章姬和丰香，处理MS+0.8mg/L6-BA+0.1mg/LNAA增殖系数最高，章姬增值系数达到2.88，丰香增值系数达到5.75。

图1-B结果表明，添加植物激素对草莓品种的苗高有抑制作用，各个处理的苗高均显著低于对照的苗高。

在添加激素的各个处理中，对于草莓品种章姬，处理MS+0.8mg/L6-BA+0.1mg/LNAA与处理MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA苗高最高，达2.7cm；对于品种丰香，处理MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA苗高最高，达1.63cm。

综合增殖系数与苗高两种因素，可以认为，最适宜章姬增殖的培养基为MS+0.8mg/L6-BA+0.1mg/LNAA，在此培养基上章姬的增殖系数达到2.88，苗高达到2.7cm，并且苗健壮，长势好（图2-A）；最适宜丰香增殖的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA，在此培养基上章姬的增殖系数达到4.5，苗高为1.63cm（见图2-B），由此可以看出不同基因型的草莓增殖其所需激素浓度不同。

图2草莓丛生芽增殖。

A：

‘章姬’；B：

‘丰香’

Fig.2Strawberrystemtipsproliferation.A:

‘Akihime’;B:

‘Toyonoka’

3.2不同生长调节剂及浓度对草莓生根的影响

图3不同生长调节剂及浓度对草莓生根的影响

Fig3Theimpactofdifferenthormonevarietyandconcentrationonroottingofstrawberry

A：

各个处理中章姬的生根情况；B：

各个处理中丰香的生根情况；C：

根数；D：

根长

A:

roottingof‘Akihime’;B:

roottingof‘Toyoroka’;C:

numberofroots;D:

lengthofroots

表3草莓根数方差分析的F值

变异来源

F值

章姬根数

993.84**

丰香根数

1035.94**

表4草莓根长方差分析的F值

变异来源

F值

章姬根长

19564.40**

丰香根长

27420.788**

由图可知，各个处理对草莓生根的影响差异显著。

对于品种章姬，处理1/2MS+IBA0.5mg/L根数最优，达到31.5根（图3-A,C）;对于品种丰香，处理1/2MS+NAA0.1mg/L根数最优，达17根（图3-B,C）；各个处理对草莓根长的影响差异显著。

对于品种章姬，在处理MS+IBA0.5mg/L根长最优，为10.85cm（图3-A,D）；对于品种丰香，处理MS+IBA0.5mg/L时根长最优，为6cm（图3-B,D）。

综合根数及根长两个因素，可以认为，最适宜章姬草莓生根的培养基是1/2MS+IBA0.5mg/L，根数达到31.5根，根长为7.6cm；最适宜丰香草莓生根的培养基是MS+IBA0.5mg/L，根数达15根，根长为6cm。

4讨论

在草莓的组织培养中，花药培养也是一种脱毒微繁的途径，但是草莓花药培养整体分化效率不高，主要限制因素是花药愈伤分化能力低[11]，因此茎尖分生组织脱毒微繁仍然是草莓生产上除传统繁殖方法外种苗最主要的来源[1]。

果树组织培养的成功与否，最主要的影响因素还在于适宜的激素种类和浓度配比[12]。

BoxusP认为草莓组培快繁中，在MS培养基中添加6-BA及其他激素通常可以取得较好的效果[13]。

陈振光[14]认为草莓茎尖培养激素用量宜低,6-BA浓度过高,形成的芽丛生长会停滞,成莲座状。

在晁慧娟[15]、薛其勤[16]等人对草莓快繁的研究中均只讨论了各种激素对增殖系数的影响，本文认为增殖系数与苗高对于草莓的增殖同等重要,随着增殖系数的提高,细胞分裂素的浓度增加,但幼苗的生长却慢慢转弱，导致组培苗小[8]且玻璃化现象严重难以生根成活[17]。

本研究结果表明，在相同培养条件下，增值系数存在品种间的显著差异。

颜昌敬[18]报道草莓组培苗较易生根,它可以在无激素的培养基上正常长出大量根系,加入0.01mg/L的NAA,反而减少根的发生量。

本试验中生根培养基中使用NAA也发现减少生根,根系生长不健壮,结果表明1/2MS+IBA0.5mg/L是‘章姬’和‘丰香’草莓最适合的生根培养基,这可能是因为IBA有诱导生根的作用,也可能与品种有关。

结论

本实验以‘章姬’和‘丰香’这两个品种的匍匐茎尖为试材，诱导出丛生芽后进行增殖培养和生根培养，研究不同激素浓度及组合对茎尖增殖和生根的影响。

得出以下结果：

最适宜章姬增殖的培养基为MS+0.8mg/L6-BA+0.1mg/LNAA，在此培养基上章姬的增殖系数达到2.88，苗高达到2.7cm；最适宜丰香增殖的培养基为MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/LNAA，在此培养基上章姬的增殖系数达到4.5，苗高为1.63cm。

最适宜章姬草莓生根的培养基是1/2MS+IBA0.5mg/L，根数达到31.5根，根长为7.6cm；最适宜丰香草莓生根的培养基是MS+IBA0.5mg/L，根数达15根，根长为6cm。

致谢

经过半年的忙碌,很感慨!

我在长舒一口气后开始写我的毕业论文的致谢辞了。

论文的完成标志着我的大学四年即将结束,也意味着,新的生活又将开始了。

最近的半年我并行着找工作和写论文。

其间的起起伏伏、悲喜得失,今天想来仍旧唏嘘不已。

　　首先,在此我衷心感谢园景系的各位领导、老师,在你们的领导和关怀下,我就快顺利毕业了。

为此学生特表感谢!

　　其次,感谢我的导师***老师对我的指导和教诲。

短短几个月的时间里,你开阔的思维、敏锐的洞察力以及详细的修改意见给我很大的启发,对我今后的学习工作以及为人处事都有很大的帮助,然而我唯一的遗憾是自己不够主动,错过了许多与您交流的机会,真希望今后有机会能够弥补,真心感谢老师的孳孳教诲。

　　再次,我真诚的感谢我的班主任老师,在这大学四年的时光里,我让你伤心过,可很少让你开心过,曾经我有点想不开,是你耐心的开导给了我继续的勇气,学生从心里衷心地向你说声：

谢谢!

还有你平时对我们在待人处事、学习生活方面的孳孳教诲和关心,学生对你的感谢真的难以用语言来表达,只能说：

谢谢!

　　还有,感谢我大学的其他任课老师,是你们的耐心细致的教诲,丰富了我的专业知识,真所谓：

“传道受业解惑也。

”学生借此机会深表感激!

　　另外,感谢班级里的小伙伴们,是你们丰富了我的大学生活,给了我很多帮助,虽然曾经有些小打小闹,可我们都开心的过到了最后,特别是我的宿舍哥儿们,今后大家再能在一起打游戏的机会很少了,可我希望每个人都不要放下鼠标哦,因为我们曾经都同声说过：

“Ilovethisgame!

”加油!

还要感谢我要好的她,在我忙碌的时候很少陪伴你,可你不但不责怪我,反而默默地支持我,给我力量!

　　最后,感谢我的爸爸妈妈，你们辛苦了,儿子在远方祝愿你们平安快乐!

参考文献

1张玲,岳生梅等.外源激素对‘章姬’草莓茎芽萌发和增值的影响.上海农业学报，2013,29（5）:

63-66.

2肖君泽,黄益鸿,姜放军等.‘章姬’草莓花药组织培养脱毒快速繁殖技术的研究.江西农业学报,2011,23（10）:

49-50,54.

3孟静静,徐平丽,郭峰,等.‘丰香’草莓高效脱毒及快速繁殖技术的研究.安徽农业科学,2009,37（35）:

17346-17347.

4郑晓峰.草莓组培育苗外植体的选择及茎尖组培快繁技术.中国南方果树,2008,37（6）:

58-60.

5朴日子,曹后男,宗成文.影响‘达赛莱克特’草莓茎尖培养因素的研究.延边大学农学学报,2009,31（3）:

184-187.

6邓明琴,雷家军.中国果树志--草莓卷.北京:

中国林业出版社,2005.

7乔荣,钟霈霖,王天文.草莓新品种章姬的品种特性及主要栽培技术.种子,2003（3）:

90-9