选修一2.1微生物的实验室培养(上新课用).ppt

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微生物的类群微生物的类群微微生生物物原核类原核类:

真核类真核类非细胞类:

非细胞类:

细菌、支原体、放线菌、蓝藻细菌、支原体、放线菌、蓝藻个体微小、结构简单个体微小、结构简单酵母菌、霉菌、食用菌酵母菌、霉菌、食用菌真菌:

真菌:

原生生物:

原生生物:

显微藻类、原生生物显微藻类、原生生物(如:

草履虫、变形虫等)如:

草履虫、变形虫等)如:

草履虫、变形虫等)如:

草履虫、变形虫等)病毒、类病毒、朊病毒病毒、类病毒、朊病毒微生物的共同特点:

微生物的共同特点:

基础知识基础知识1.1.细菌的形态细菌的形态细菌的外形与大小细菌:

细菌:

单细胞不分枝的原核微生物单细胞不分枝的原核微生物。

细菌细胞细菌细胞微小而透明微小而透明,通常用适当染料,通常用适当染料染染色色后显微镜观察后显微镜观察图图1-1常见的三种细菌典型形态常见的三种细菌典型形态A.球菌球菌B.杆菌杆菌C.弧菌弧菌细菌的构造细菌细胞由外向里依次有鞭毛鞭毛鞭毛鞭毛、菌菌(纤)毛纤)毛纤)毛纤)毛、荚膜荚膜荚膜荚膜、细胞壁细胞壁细胞壁细胞壁、细胞膜、细胞膜、细胞膜、细胞膜、细胞质细胞质细胞质细胞质,细胞质细胞质细胞质细胞质中又有液泡、储中又有液泡、储中又有液泡、储中又有液泡、储存性颗粒、核质存性颗粒、核质存性颗粒、核质存性颗粒、核质等等等等。

图图图图1-31-3细菌的结构细菌的结构细菌的结构细菌的结构*细胞壁结构特点:

坚韧且有弹性结构特点:

坚韧且有弹性结构特点:

坚韧且有弹性结构特点:

坚韧且有弹性细胞壁有哪些功能?

细胞壁有哪些功能?

固定细胞外形;固定细胞外形;固定细胞外形;固定细胞外形;ww保护细胞免受外力的损伤;保护细胞免受外力的损伤;保护细胞免受外力的损伤;保护细胞免受外力的损伤;ww阻拦大分子物质进人细胞阻拦大分子物质进人细胞阻拦大分子物质进人细胞阻拦大分子物质进人细胞;使细胞具有致病性及对使细胞具有致病性及对使细胞具有致病性及对使细胞具有致病性及对噬菌体的敏感性。

噬菌体的敏感性。

噬菌体的敏感性。

噬菌体的敏感性。

伤伤寒寒杆杆菌菌细细胞胞壁壁中中含含毒毒素素有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫做体,叫做芽孢芽孢。

芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环。

芽孢的壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。

例如,有的细菌的芽孢,煮沸境有很强的抵抗力。

例如,有的细菌的芽孢,煮沸33小时以后才小时以后才死亡。

芽孢又小又轻,可以随风飘散。

当环境适宜(如温度、水死亡。

芽孢又小又轻,可以随风飘散。

当环境适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌分适宜)的时候,芽孢又可以萌发,形成一个细菌.SARS病毒、病毒、禽流感病毒禽流感病毒朊病毒(蛋白质病毒)病毒的结构病毒的结构2、病毒的增殖:

、病毒的增殖:

真菌真菌如图是酵母菌电子显微如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构镜下的形态结构酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青霉生殖生殖直立菌丝直立菌丝营养菌丝营养菌丝腐生生活腐生生活孢子生殖孢子生殖放线菌放线菌链霉素、土霉素、四环素、链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素氯霉素、红霉素、庆大霉素微生物中发现了几千种抗生素,其中微生物中发现了几千种抗生素,其中2/32/3是是由放线菌产生的由放线菌产生的应用应用:

学学习目目标1说出出培培养养基基的的类型型、用用途途和和基基本本成分成分2举例例说明常用的消毒与明常用的消毒与灭菌方法。

菌方法。

3阐明明培培养养基基配配制制的的方方法法和和接接种种的的方法方法。

学习重点学习重点培养基的营养成分、无菌操作的基本培养基的营养成分、无菌操作的基本方法、配制培养基的基本步骤、常用方法、配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。

的微生物的接种方法。

学习难点学习难点配制培养基的基本步骤、常用的微生配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。

物的接种方法。

(1)根据你所掌握的知识,分析导致生产失败的根据你所掌握的知识,分析导致生产失败的根源是什么根源是什么?

(2)由此可见,研究和应用微生物的前提是什由此可见,研究和应用微生物的前提是什么?

么?

根源在于发酵物中混入了杂菌根源在于发酵物中混入了杂菌防止杂菌入侵,获得防止杂菌入侵,获得纯净的培养物纯净的培养物教材教材14页页-背景知识背景知识课题课题1微生物的实验室培养微生物的实验室培养微生物的实验微生物的实验室培养室培养条件条件:

(1)为培养的微生物)为培养的微生物提提供合适的营养和环境供合适的营养和环境条条件件

(2)确保其他微生物无法确保其他微生物无法混入混入研究和应用研究和应用微生物的微生物的前前提提防止杂菌入侵,获得纯净的培养物一、培养基作用、种类一、培养基作用、种类二、无菌技术二、无菌技术三、制备牛肉膏蛋白胨培养基三、制备牛肉膏蛋白胨培养基四、纯化大肠杆菌四、纯化大肠杆菌主要内容主要内容一、培养基一、培养基微生物生存的环境和营养物质微生物生存的环境和营养物质1.1.基本成分:

基本成分:

碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐碳源碳源无机碳源:

无机碳源:

有机碳源:

有机碳源:

COCO22、COCO3322-、HCOHCO33-牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等自养微生物自养微生物异养微生物异养微生物氮源氮源无机氮源:

无机氮源:

有机氮源:

有机氮源:

NHNH44、NONO33-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注:

含注:

含CHONCHON的的有机物有机物是是异异养型微生物的养型微生物的碳源碳源、氮源氮源、能源能源一、培养基一、培养基微生物生存的环境和营养物质微生物生存的环境和营养物质1.1.基本成分:

基本成分:

碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐碳源碳源无机碳源:

无机碳源:

有机碳源:

有机碳源:

COCO22、COCO3322-、HCOHCO33-牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等自养微生物自养微生物异养微生物异养微生物氮源氮源无机氮源:

无机氮源:

有机氮源:

有机氮源:

NHNH44、NONO33-牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注:

含注:

含CHONCHON的的有机物有机物是是异异养型微生物的养型微生物的碳源碳源、氮源氮源、能源能源1.1.基本成分:

基本成分:

碳源、氮源、水、无机盐碳源、氮源、水、无机盐2.2.特殊营养:

特殊营养:

维生素、碱基等维生素、碱基等(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)3.pH3.pH、氧气的需求:

、氧气的需求:

4.4.种类:

种类:

固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基有有无无凝固剂琼脂凝固剂琼脂分离分离鉴定鉴定工业工业生产生产化学成分:

化学成分:

物理性质:

物理性质:

天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基一、培养基一、培养基液体培养基:

液体培养基:

表面生长表面生长均匀混浊均匀混浊生长生长沉淀生长沉淀生长固体培养基固体培养基半固体培养基半固体培养基划分划分标准准培养基种培养基种类特点特点用途用途物理性物理性质化学成分化学成分天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基用途用途鉴别培养基培养基培养基的种类培养基的种类不加凝固不加凝固剂加凝固加凝固剂,如,如琼脂脂工工业生生产微生物分离、微生物分离、鉴定、定、活菌活菌计数、保藏菌数、保藏菌种种含化学成分不明确的天然物含化学成分不明确的天然物质工工业生生产培养基成分明确培养基成分明确分分类、鉴定定在培养基中加入某种化学物在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的以抑制不需要的微生物的生生长,促促进所需要的微生物的所需要的微生物的生生长培养、分离出特培养、分离出特定微生物定微生物在培养基中加入某种指示在培养基中加入某种指示剂或化学或化学药品品,用以用以鉴别不同种不同种类的微生物的微生物鉴别不同种不同种类微微生物生物选择培养基培养基液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基:

不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基:

不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基:

几种选择培养基举例:

几种选择培养基举例:

分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌分离固氮菌分离固氮菌分离自养型微生物分离自养型微生物唯一碳源为纤维素的培养基唯一碳源为纤维素的培养基分解纤维素的细菌分解纤维素的细菌选择培养基选择培养基加加入高浓度食盐的培养基入高浓度食盐的培养基:

分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基:

分离导入了目的基因的受体细胞分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核核苷的培养基苷的培养基:

分离杂交瘤细胞分离杂交瘤细胞编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g10g(NHNH44)22SOSO440.4g0.4gKK22HPOHPO444.0g4.0gMgSOMgSO449.25g9.25gFeSOFeSO440.5g0.5gCaClCaCl220.5g0.5gHH22OO100ml100ml44、右表是某微生物培、右表是某微生物培养基成分,请据此回答:

养基成分,请据此回答:

(11)右表培养基可培)右表培养基可培养的微生物类型养的微生物类型是是。

(22)若不慎将过量)若不慎将过量NaClNaCl加入培养基中。

加入培养基中。

如不想浪费此培养基,如不想浪费此培养基,可再加入可再加入,用于培养用于培养金黄色葡萄球菌。

金黄色葡萄球菌。

自养型微生物自养型微生物含碳有机物含碳有机物(33)若除去成分)若除去成分,加入(,加入(CHCH22OO),该培养),该培养基可用于培养基可用于培养。

(44)表中营养成分共有)表中营养成分共有类。

类。

(55)不论何种培养基,在各种成分都溶化后)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是分装前,要进行的是。

(66)右表中各成分重量确定的原则是)右表中各成分重量确定的原则是。

(77)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是的成分是。

自生固氮微生物自生固氮微生物3调整调整pHpH依微生物的生长需要确定依微生物的生长需要确定琼脂(或凝固剂)琼脂(或凝固剂)复习1.按物理形态、化学成分、用途分培养基有哪些种类?

2.各种培养基的具体配方不同,但一般都包括哪些成分?

牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基基。

1000ml1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方牛肉膏蛋白胨培养基的配方H2O定容至定容至1000mlNacl5g蛋白胨蛋白胨10g牛肉膏牛肉膏5g琼脂琼脂20.0g分析营养构成?

各成分主要提供何种营养成分析营养构成?

各成分主要提供何种营养成分分各种培养基的具体配方不同,但一般都包各种培养基的具体配方不同,但一般都包括哪些成分?

括哪些成分?

(1)水水

(2)碳源碳源:

CO2、糖类、脂肪酸、牛、糖类、脂肪酸、牛肉膏等,构成微生物的结构物质和肉膏等,构成微生物的结构物质和代谢物,并提供能量。

代谢物,并提供能量。

(3)氮源氮源:

N2、氨盐、硝酸盐、蛋白、氨盐、硝酸盐、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。

及含氮代谢物等。

(4)无机盐无机盐一一、培养基、培养基(小结)(小结)人们按着微生物对营养物质的不同需求,人们按着微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。

配制出供其生长繁殖的营养基质。

1、概念、概念2、培养基的营养构成及所需其它条件、培养基的营养构成及所需其它条件1)、一般都含有水、碳源水、碳源、氮源氮源、和、和无机盐。

无机盐。

2)、还需要满足微生物生长对pHpH、特、特殊营养物质以及氧气的要求殊营养物质以及氧气的要求碳源氮源(nitrogensource)生长因子生长因子微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生微生物生长不可缺少的微量有

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