Sysmex XN1000全自动血液分析仪标准操作程序.docx
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SysmexXN1000全自动血液分析仪标准操作程序
SysmexXN-1000全自动血液分析仪标准操作程序
1.检验目的
规范全自动血液分析仪XN-1000操作程序，确保血常规和体液常规检验结果准确。
2.授权操作人
经仪器培训的授权操作人。
3.仪器档案
3.1仪器基本资料
3.1.1仪器名称：
SysmexXN-1000全自动血液分析仪
3.1.2生产商：
3.1.2售后服务：
3.2仪器工作环境
3.2.1温度范围：
15～32℃。
3.2.2湿度范围：
35～85%RH。
3.2.3工作电源：
主机：
（220V/230V）±10%，50Hz/60Hz±2Hz。
气源：
（220V）±10%，50Hz±1Hz。
有保护性接地。
3.3仪器性能
3.3.1不精密度:
当人体末梢血液（用于NRBC的有核红细胞样本及用于PLT的稀释人末梢血，以及用于RET-He的RET#为0.020×106/uL或以上的新鲜血液）或质控品重复分析10次或以上时表示为差异系数（95%可靠性）。
对于NRBC、人体末梢血的异常样本至少重复分析5次以上。
①全血模式
WBC小于等于3.0%（大于等于40×102/μL）
RBC小于等于1.5%（大于等于400×104/μL）
HGB小于等于1.0%
HCT小于等于1.5%
MCV小于等于1.0%
MCH小于等于2.0%
MCHC小于等于2.0%
PLT-I小于等于4.0%（大于等于100×103/μL）
PLT-O小于等于6.0%（大于等于100×103/μL）
PLT-F小于等于2.50%（大于等于100×103/μL）；PLT-F小于等于5.0%（大于等于20×103/μL）
RDW-SD小于等于2.0%
RDW-CV小于等于2.0%
PDW小于等于10.0%
MPV小于等于4.0%
P-LCR小于等于15.0%
PCT小于等于6.0%
NEUT%小于等于8.0%（大于等于30.0NEUT%、WBC大于等于40×102/μL）
LYMPH%小于等于8.0%（大于等于15.0LYMPH%、WBC大于等于40×102/μL）
MONO%小于等于20.0%（大于等于5.0MONO%、WBC大于等于40×102/μL）
EO%小于等于25.0%或±1.5EO%以内（WBC大于等于40×102/μL）
BASO%小于等于40.0%或±1.0BASO%以内（WBC大于等于40×102/μL）
NEUT#小于等于8.0%（大于等于12.0×102/μL）
LYMPH#小于等于8.0%（大于等于6.0×102/μL）
MONO#小于等于20.0%（大于等于2.0×102/μL）
EO#小于等于25.0%或±1.2×102/μL以内
BASO#小于等于40.0%或±0.6×102/μL以内
②预稀释模式
WBC小于等于5.0%（大于等于4×103/μL）
RBC小于等于4.5%（大于等于4×103/μL）
HGB小于等于3.0%
HCT小于等于4.5%
MCV小于等于4.5%
MCH小于等于4.5%
MCHC小于等于6.0%
PLT小于等于12.0%（大于等于100×103/μL）
NEUT%小于等于16.0%（大于等于30.0NEUT%、WBC大于等于4×103/μL）
LYMPH%小于等于16.0%（大于等于15.0LYMPH%、WBC大于等于4×103/μL）
MONO%小于等于40.0%（大于等于5.0MONO%、WBC大于等于4×103/μL）
EO%小于等于40.0%（WBC大于等于4×103/μL）
BASO%小于等于50.0%或±1.5BASO%以内（WBC大于等于4×103/μL）
NEUT#小于等于16.0%（大于等于1.2×103/μL）
LYMPH#小于等于16.0%（大于等于0.6×103/μL）
MONO#小于等于40.0%（大于等于0.2×103/μL）
EO#小于等于40.0%
BASO#小于等于50.0%或±0.06×103/μL以内
3.3.2处理能力:
以下为独立单元的分析仪的数值。
XN-1000的处理能力相当于两个分析仪器的处理能力。
CBC：
100个样本／小时
CBC＋DIFF：
100个样本／小时（88样本/小时）
CBC＋PLT-F：
68样本/小时
CBC＋DIFF＋PLT-F：
68样本/小时（55样本/小时）
括号内为低值WBC模式下的处理能力。
3.3.3线性范围：
WBC0.00至440.0x109/L
RBC0.00至8.60x1012/L
HGB0.0至26.0g/dL，0.0至16.14mmol/L
HCT0.0至75.0%
PLT0至5000x109/L
WBC-BF0.000至10.000x109/L
RBC-BF0.000至5.000x1012/L
3.3.4携带污染：
WBC1.0%以下
RBC1.0%以下
HGB1.0%以下
HCT1.0%以下
PLT1.0%以下
NEUT#2.0%或0.05x109/L以下
LYMPH#2.0%或0.05x109/L以下
MONO#2.0%或0.03x109/L以下
EO#2.0%或0.03x109/L以下
BASO#2.0%或0.03x109/L以下
WBC-BF0.3%或0.001x109/L以下
RBC-BF0.3%或0.003x1012/L以下
3.4检测参数
3.4.1全血/低值白细胞/预稀释模式下的测定项目:
参数
首字母缩写
检测方法
1
白细胞
WBC
流式细胞计数
2
中性粒细胞百分比
NEUT%
流式细胞计数
3
淋巴细胞百分比
LYMPH%
流式细胞计数
4
单核细胞百分比
MONO%
流式细胞计数
5
嗜酸性粒细胞百分比
EO%
流式细胞计数
6
嗜碱性粒细胞百分比
BASO%
流式细胞计数
7
中性粒细胞绝对值
NEUT#
计算
8
淋巴细胞数绝对值
LYMPH#
计算
9
单核细胞数绝对值
MONO#
计算
10
嗜酸性粒细胞数绝对值
EO#
计算
11
嗜碱性粒细胞数绝对值
BASO#
计算
12
红细胞
RBC
鞘流DC检测方法
13
血红蛋白
HGB
SLS血红蛋白检测法
14
红细胞比积
HCT
RBC累积脉冲高度检测法
15
平均红细胞体积
MCV
由RBC和HCT算出
16
平均红细胞血红蛋白量
MCH
由RBC和HGB算出
17
平均红细胞血红蛋白浓度
MCHC
由HCT和HGB算出
18
红细胞分布宽度－标准差
RDW-SD
根据红细胞直方图算出
19
红细胞分布宽度－变异系数
RDW-CV
根据红细胞直方图算出
20
血小板
PLT
鞘流DC检测方法
21
血小板压积
PCT
根据血小板直方图算出
22
平均血小板体积
MPV
根据血小板直方图和PLT算出
23
血小板分布宽度
PDW
根据血小板直方图算出
24
大血小板比率
P-LCR
根据血小板直方图算出
3.4.2体液模式测定项目：
参数
首字母缩写
检测方法
1
白细胞-体液
WBC-BF
流式细胞计数
2
红细胞-体液
RBC-BF
流式细胞计数
3
单个核细胞绝对值
MN#
计算
4
多个核细胞绝对值
PMN#
计算
5
单个核细胞百分比
MN%
流式细胞计数
6
多个核细胞百分比
PMN%
流式细胞计数
3.5检验原理
对于白细胞，通过采用半导体激光的光学检测部并采用流式细胞术进行测定。
对于红细胞数及血小板数，通过RBC检测部并采用鞘流DC检测方法进行测定。
对于血红蛋白含量，通过HGB检测部并采用SLS血红蛋白检测方法进行测定。
3.5.1鞘流DC检测方法
在检测器内，样品喷嘴被设置于孔隙之前，并对准了两者的中心。
将稀释样品从样品喷嘴推出至圆锥形的腔内后，样本就会被鞘流液包裹，通过孔隙的中央部。
通过孔隙后，稀释样品被送入回收管中。
由此即可防止该区域中的血球回流，从而防止假性血小板脉冲的发生。
通过这种鞘流方式，即可提高血球计数的正确度和再现性。
此外，由于血球排成一列通过孔隙，因此，还可以防止异常血球脉冲的发生。
3.5.2使用半导体激光的流式细胞术
一个血样经过抽吸和测量并被稀释至指定的稀释比后，再进行染色。
然后该样本将被送入贯流分析池中。
这种液压聚焦单元改进了细胞计数的精确度和重现性。
同时，由于血细胞颗粒是排成一行通过贯流分析池的中心，故而防止产生异常血液脉冲并可减少对贯流分析池的污染。
半导体激光束将照射到通过该贯流分析池的血细胞上。
前向散色光和侧向散色光将被光电二极管接收，侧向荧光则由APD光电二极管接收。
光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。
a）前向散射光、侧向散射光
如果光的行进途中存在粒子等障碍物，则光就会以该物体为中心向各个方向扩散，这种现象被称为光散射。
通过检测这种散射光，就可获得有关微粒大小及材质的信息。
向血球粒子照射激光时也一样会发生由血球粒子形成的光的散射。
散射光的强度受粒径及观测角度等的影响，而本装置检测的是反映血球大小信息的前向散射光和反映血球内部信息（核的大小等）的侧向散射光。
b）侧向荧光
当光照射到经过荧光染色的血液细胞等的荧光材料上时，就会产生比入射光波长更长的光。
随着染色浓度的增加，荧光强度也随之增长。
通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色程度的信息。
荧光向所有方向散射；本仪器检测侧向发出的荧光。
3.5.3SLS血红蛋白检测方法
SLS血红蛋白检测方法与氧合血红蛋白检测方法一样，血液血红蛋白的转化反应迅速，且不含剧毒物，因此，适用于自动化检测方法。
此外，由于可进行高铁血红蛋白的测定，因此，对于类似控制血液般的含高铁血红蛋白的血液，也能进行正确的测定。
4．试剂：
4.1试剂名称：
4.1.1CELLPACKDCL（希森美康株式会社）
全血稀释液，用于测定红细胞和血小板的数目和大小的试剂，使用流体聚焦法（DC检测）测定。
有效成分:
氯化钠0.7%；Tris缓冲液0.2%；EDTA-2K0.02%氯化钠：
0.64%；
4.1.2CELLPACKDST（希森美康株式会社）
浓缩全血稀释液，用于测定红细胞和血小板的数目和大小浓缩稀释液使用，使用流体聚焦法（DC检测）测定。
有效成分：
氯化钠15.7%；甘氨酸缓冲液4.3%；EDAT-2K0.4%
4.1.3SULFOLYSER（希森美康株式会社）
不含氰化物的试剂，用于测定血液中的血红蛋白浓度。
溶解红血球，与血红蛋白相结合，形成稳定的高铁血色原（hemichrome）。
SULFOLYSER是一种溶血剂，用于采用比色法的血液分析。
有效成分:
十二烷基硫酸钠：
0.17%
4.1.4CELLPACKDFL（希森美康株式会社）
全血稀释液（低值PLT检测专用），用于与FluorocellRET配合来测定网织红细胞，或与FluorocellPLT配合来测定的血小板的试剂，两者均使用半导体激光，通过流式细胞计数法来测定。
有效成分:
麦黄酮缓冲液0.17%
4.1.5LysercellWNR（希森美康株式会社）
WNR溶血剂，与FluorocellWNR配合使用。
使红细胞溶血，并通过LysercellWNR和
FluorocellWNR辨别白血细胞（嗜碱细胞以外）、嗜碱细胞及有核红细胞，可测定白细胞
数、嗜碱性粒细胞数、嗜碱细胞比率、有核红细胞数及有核红细胞比率。
有效成分:
有机季铵盐0.20%；非离子型表面活性剂0.10%
4.1.6FluorocellWNR（希森美康株式会社）
WNR染色液，用于在稀释并溶血的血样中使有核细胞染色，以通过Sysmex全自动模块式血液体液分析仪测定血液中的白细胞数、有核红细胞数数和嗜碱性粒细胞数。
有效成分:
聚甲烯次甲基荧光染料0.005%；乙二醇99.9%
4.1.7LysercellWDF（希森美康株式会社）
WDF溶血剂，与FluorocellWDF配合使用。
通过LysercellWDF使红细胞溶血，并通过
FluorocellWDF使白血细胞成分染色，可测定嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞的数目和比率
有效成分:
有机季铵盐0.07%；非离子型表面活性剂0.17%
4.1.8FluorocellWDF（希森美康株式会社）
WDF染色液，用于在稀释并溶血的血样中使白血细胞染色，以测定血液中的白细胞分类计数。
有效成分聚甲烯次甲基荧光染料0.002%；甲醇3.0%；乙二醇96.9%
4.1.9FluorocellPLT（希森美康株式会社）
PLT荧光染色剂，PLT用于在稀释的血样中使血小板染色，以通过Sysmex全自动模块
式血液体液分析仪测定血液中的血小板数。
有效成分：
吖嗪色素0.003%；乙二醇99.9%
4.1.10CELLCLEANAUTO（希森美康株式会社）
清洗液，一种强碱清洗剂用来去除残留血液分析仪中的溶血剂、细胞残液及蛋白质。
有效成分:
次氯酸钠
4.1.11质控品（XNCHECK/XNCHECKBF） （希森美康株式会社）
质控血液，用于进行仪器的精度管理。
4.1.12校准品（XNCAL/XNCALPF）（希森美康株式会社）
XNCAL用于WBC、RBC、HGB、HCT、PLT及RET的仪器校准。
XNCALPF用于PLT-F的仪器校准（通过PLT-F通道获得的血小板数）。
4.2试剂的配置方法
4.2.1CELLPACKDCL直接使用
4.2.2CELLPACKDST需通过RU-20使用
4.2.3SULFOLYSER直接使用
4.2.4CELLPACKDFL直接使用
4.2.5LysercellWNR直接使用
4.2.6FluorocellWNR直接使用
4.2.7LysercellWDF直接使用
4.2.8FluorocellWDF直接使用
4.2.9CELLCLEANAUTO直接使用
4.2.10质控品（XNCHECK/XNCHECKBF） 直接使用
4.2.11校准品（XNCAL/XNCALPF）直接使用
4.3试剂的保存方法
4.3.1CELLPACKDCL:
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为60天
4.3.2CELLPACKDST：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为60天
4.3.3SULFOLYSER：
1-30℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为60天
4.3.4CELLPACKDFL：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为60天
4.3.5LysercellWNR：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为60天
4.3.6FluorocellWNR：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为60天
4.3.7LysercellWDF：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为90天
4.3.8FluorocellWDF：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为90天
4.3.9CELLCLEANAUTO：
1-25℃保存，使用温度15-30℃。
4.3.10质控品（XNCHECK/XNCHECKBF）：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有
效期为7天，体液为30天。
4.3.11校准品（XNCAL/XNCALPF）：
2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为4小时。
5.操作程序
5.1开机程序
5.1.1测定前准备
按以下步骤开启仪器电源：
5.1.2确保以下设备的电源，相连设备的电源受IPU控制，所以，可以始终保持主电源开关打开分析仪器：
XN-1000；进样器；显示屏
5.1.3开启IPU的电源
开启仪器的电源，分析仪器将运行自检程序，请等待到自检完成。
如果IPU登录设定为打开，将显示登录对话框，输入用户名及密码，完成IPU登录。
5.1.3空白检查未通过时，单击帮助对话框中的【执行】，以再次进行自动冲洗和空白检查。
以下为空白允许值：
WBC＜0.10109/L,RBC＜0.021012/L,PLT＜0.3109/L,HGB＜1.0g/L。
5.2试剂更换程序
（1）试剂用完时仪器报警，并弹出故障对话框。
（2）取一桶/瓶试剂，打开桶/瓶的包装盖，将试剂瓶盖组件插入后拧紧（更换稀释液时需用稀释液桶支撑板卡住桶口）。
（3）扫描试剂条码,并执行“试剂更换”操作。
（4）试剂更换好后，进行空白测试，测试合格后继续进行样本的测试。
5.3校准程序
5.3.1执行校准前
执行校准前应检查连接到仪器的剩余试剂量。
如试剂用完，校准将停止。
如校准停止，应取消校准。
待更换试剂后再重启操作，从头开始。
5.3.2校准品
XNCAL：
用于WBC、RBC、HGB、HCT、PLT的分析仪校准。
XNCALPF：
用于PLT-F的分析仪校准（通过PLT-F通道分析的血小板数）。
5.3.3精度检查
如需进行精度检查，对每个分析仪使用一个新鲜常规血液样本且此样本应并满足以下条件：
•未服用任何药物的健康人的血液；
•添加适量抗凝剂的血液；
•每份样本的全血量不低于2.5mL。
5.3.4关于校准品校准
校准品校准通过手动分析来执行。
待分析的离散测试是自动分配的，无法更改。
另外，系统将根据所连接的分析仪类型指定不同的离散测试。
5.3.4校准步骤（除PLT-F以外的校准）
（1）确认分析仪器上的状态指示灯。
如果状态指示灯不亮绿灯，请等到亮起。
（2）如果管座未伸出，按模式切换开关。
管座将伸出。
（3）单击控制菜单上的更改测定模式按钮。
显示右边的对话框。
在校准品校准中，选择［全血］模式。
（4）单击［OK］。
对话框关闭。
（5）单击控制菜单上的分析仪器菜单按钮。
显示右边的菜单。
（6）单击［校准］-［校正器校正］。
（7）混匀装有校准品的试管。
（8）将试管放入样品管的管座中。
（9）按下分析仪上的开始开关。
一旦手动分析开始，管座将被拉入分析仪中，连续执行11次分析。
分析完成后管座将伸出。
请等到所有分析完成。
（10）重新执行手动分析。
第9步的分析结果将显示在［校正器校正］分析对话框中。
如果未满足以下条件，则无法按下［校正器校正］分析对话框中的［校准］按钮。
•所有分析结果都正常。
•所有校准参数都在可重现性标准（精度限制）以下。
需要重新执行的分析的次数将显示在［校正器校正］分析对话框中。
你选择次数，然后重新执行手动分析。
（11）单击［校正器校正］分析对话框中的［校准］。
出现下面所示的对话框。
（12）单击［OK］。
如果某校准参数满足以下所有条件，此参数将在画面出现后自动被勾选。
此外，您也可以手动选择或清除复选框。
1）80%≤新补正率≤120%
2）新补正率－当前补正率±5%
3）范围值≤最大范围
4）容许误差率≤误差率≤容许最大误差率
如果校准参数满足1）到3）的所有条件，并且误差率小于容许误差率，则校准将不包括此参数，因为无需进行校准。
如果校准参数未能完全满足1）到3）的所有条件，且误差率大于容许误差率，则不能执行校准。
执行校准时将不包括此校准参数。
（13）单击［OK］。
补偿率已更新，此校准过程将记入校准品校准记录中。
5.3.5执行校准品校准（PLT-F）
根据所使用的仪器配置的不同，此功能不一定可用。
（1）确认分析仪器上的状态指示灯。
如果状态指示灯不亮绿灯，请等到亮起。
（2）如果管座未伸出，按模式切换开关。
管座将伸出。
（3）单击控制菜单上的更改测定模式按钮。
出现右边所示的对话框。
在校准品校准（PLT-F）中，选择［全血］模式。
（4）单击［OK］。
对话框关闭。
（5）单击控制菜单上的分析仪菜单按钮。
出现下面所示的菜单。
（6）选择［校准］-［校正品校正（PLT-F）］。
出现右边所示的对话框。
（7）混匀装有校准品的试管。
（8）将试管放入样品管的管座中。
（9）按下分析仪上的开始开关。
一旦手动分析开始，管座将被拉入分析仪中，连续执行11次分析。
分析完成后管座将伸出。
请等到所有分析完成。
（10）重新执行手动分析。
第9步的分析结果将显示在［校正品校正（PLT-F）］分析对话框中。
如果未满足以下条件，则无法按下［校正品校正（PLT-F）］分析对话框中的［校准］按钮。
•所有分析结果都正常。
•所有校准参数都在可重现性标准（精度限制）以下。
需要重新执行的分析的次数将显示在［校正品校正（PLT-F）］分析对话框中。
选择次数，然后重新执行手动分析。
（11）单击［校正品校正（PLT-F）］分析对话框中的［校准］。
（12）单击［OK］。
出现右边所示的对话框。
选中校准参数旁的复选框，以将此参数包括在校准品校准（PLT-F）中。
清除复选框
表示在校准品校准（PLT-F）中不包括此校准参数。
如果满足以下所有条件，PLT-F复选框将在画面出现后自动被勾选。
此外，您也可以手动选择或清除复选框。
1）80%≤新补正率≤120%
2）新补正率－当前补正率≤±5%
3）范围值≤最大范围
4）容许误差率≤误差率≤容许最大误差率
如果满足1）到3）的所有条件，并且误差率小于容许误差率，则校准将不包括此参数，因为无需进行校准。
如果未能满足1）到3）的所有条件，且误差率大于容许误差率，则不能执行校准。
（13）单击［OK］。
补偿率已更新，此校准过程将记入校准品校准记录中。
5.4质控程序
5.4.1质控品名称及贮存条件：
质控品（XNCHECK/XNCHECKBF），由Sysmex公司提供质控品有低、中、高3个水平。
在2-35℃保存，使用温度15-30℃，开封后有效期为7天，体液为30天。
5.4.2频率：
每日早晨开机后测定1次质控，三个水平。
5.4.3质控文件的建立
（1）质控文件的导入
根据以下路径导入质控文件:
计算机/OS（C:
）/ProgramFiles/Sysmex/Download/Assay
（2）导入文件后，进行质控操作。
操作流程如图示：
5.4.4质控操作
（1）准备质控品，并在室温下放置10分钟。
（2）将全血质控品颠倒混合10次以上，使用手动或进样模式执行质控分析。
（3）测定全血质控品，确认质控结果。
（4）质控品数据自动传输到瑞美质控系统，查看质控结果，所有项目在控
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