家兔玻璃体液微量取样与一次取样的比较.docx
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家兔玻璃体液微量取样与一次取样的比较
家兔玻璃体液微量取样与一次取样的比较
【摘要1目的比较微量取样与一次取样的优劣。
方法36只家兔分为4组(每组9只),于死后12h取样:
i组于一次取
出所有vh;ii组微量取样50l,连续取15次;iii组左眼一次取样。
右眼微量重复取样
。
iv组双眼第1次微量取样.剩余一次
取出。
检测ca2+cl、l(+、na和p等含量,数据统计分析。
结果iii组左右眼、(iv)组先后两次取样配对t检验无差异(p>0
.05),
各组微量取样样本的变异系数、双眼差较小。
结论微量取样的操作影响较小、稳定性和重复性好
.更适合法医学研究和应
用。
【关键词】尸体化学;玻璃体液:
取样方法:
比较
【中图分类号】d919.1
【文献标识码】a
【文章编号】1007—9297(20XX)03—0208—03
acomparisonstudyofvitreoushumormicro-samplingandwhollysamplingonrabbits.zhangyu—zhuj,wanglan2.3.
liul,(departmentofforensicmedicine,ton#jimedicalcollegeofhuazhonguniversityofsciencearmtechno,whan
430030,chian)
[abstract]objectivetomakeacomparativestudyofwhollysamplingandmicro-samplingofvitreoushumor(vh).
methods
【作者简介】战玉祝(1968一),男,汉族,山东莒南县人,医学学士,副主任法医师
,研究方向:
临床法医学中的视觉、听觉的电生理研究以
及法医病理的死亡时间研究;tel~+86—531—86323203;e-mail:
james6803@21cn.com
【通信作者1刘良(1960一),男,汉族,山东沂水人,教授,博士生导师,主要从事法医病理学教学
、研究及检案。
法律与医学杂志20XX年第13卷(第3期)
thirty—sixrabbitsweredividedintofourgroups,eachofwhichcontainsnine.allweresampledat12hpostmortem.group1were
whollyextracted.groupi1weresubjectedtomultiplesampling.ofgroupiii,alllefteyeswerewhollysampledandallrighteyes
weremicro-sampled.alleyesofgroupivweremicro—sampledatfirstandalltheleftwerewholysampled.concentrationsofcalcium,
chloride,potassium,sodiumandphosphorusweredetectedandstatisticallyanalyzed.resultstherearenosignificantdifference
betweenwhollysamplingandmicro-samplingofthepair-matchedt—testofbetween-eyesingroupiiiandthetwicesanipiing
ingroupiv.ofmicro—sampling,thevariationsoftheboth-eyesandcoeficientofvariationweresmallerthanthoseofwhony
sampling.conclusionthemulti-micro-samplingoperationmakesmuchlessdistortonvh,andismorestableandrepeatable,
whichispromisingforforensicvhstudyandexamination.
【keywordslpostmortemchemistry;vitreoushumogsamplingmethodology;
comparisonstudy
取样方法对玻璃体液(vitreoushumor,vh)研究
有重要意义,[11传统采用一次取样vh,近年有研究使
用了微量取样。
迄今未见两取样方法比较研究,本实
验通过一次取样与微量取样的比较.旨在为vh研究
选择取样方法。
材料与方法
一
、实验动物及分组取材
健康家兔36只,雌雄混用,体重1.9~2.5,由华
中科技大学同济医学院实验动物中心提供。
耳缘静脉
空气栓塞处死,置于4~7℃恒温箱,随机分为4组(每
组9只),于死后12h取样:
i组根据coe推荐的方法,
用20g针头5iill注射器自外眦、角膜缘外约2mm
处缓慢进针,瞳孔观察针头位于中央时缓慢抽出所有
vh,摇匀后移液50l与去离子水1:
4稀释,编号入
ep管、-25℃冻存。
ii组微量重复取样:
用20g留置
针,入针后固定针头,用1ml注射器缓慢抽吸、移液
50l,重复取样15次,其余处置同i组。
iii组左眼一
次取样,同i组,右眼微量重复取样同ii组。
iv组双眼
微量取样1次,操作同ii组;换5iid注射器一次取出
剩余所有vh,同i组。
二、检测
同日检测i组、iv组1、2次取样和iii组左眼样
本,ii组和iii组右眼第1⋯5815次取样样本:
37ci=
水浴解冻,美国abbotyaeroset2000全自动生化分
析仪检测ca2+、cl一、i0.05),因此两取样方法获得的
样本总体无差异。
但是,一次取样的弥散程度大于微
量取样(表1),这印证了coe关于“取样方法不当可造
成vh含量分散”的观点。
这也反应在双眼浓度差上.
微量取样的双眼差较小、一次取样较大(表3)。
结果与有关报道都相吻合:
一次取样研究报道的
·210·
vh浓度变异程度和双眼问差异较大,而微量取样研
究所报道的差异则往往较小。
[7-91结合前期研究,[11分
析认为取样方法是造成差异的原因。
物质在vh、血液
和组织中含量不同,取样操作不当引起组织挫碎或污
染改变了vh样本含量。
coe方法的缺点之一是“尽量
取出所有vh”不好控制.实际操作时容易抽出邻近组
织(如视网膜),造成组分(如vh钾)含量的人为改变。
tagliaro[91也认为微量取样对眼球内壁组织的作用较
小.操作引起的损伤和组分改变也较小,取得的样本
更好。
二、微量取样的法医学意义
微量取样操作方法的文献少见,设计微量取样操
作时参考了coe方法的基本步骤。
为方便多次取材、
减少进针次数、保持针头位置和尽量减少污染等,采
用了留置针固定后定量(微量)移液的取材方法。
tagliaro等[914次取样50lvh获得了较好的死亡时
间推断精度,rognum等[111、poulsen等[121和bocaz—ben
eventi等【8】也采用微量取样的方法,并称死亡时间95%
预测区间更好。
结合本实验结果。
作者认为这与微量
取样的变异较小有关。
微量取样所体现的较小的双眼
差,也更符合实际。
111因此微量取样采集样本具有良好
的代表性,稳定性和重复性更好,也容易控制操作,更
适宜于vh的法医学研究与应用
综上所述,微量取样与一次取样总体无差别,但
不同取样操作可以造成样本均数变异系数的不同.比
较而言,微量取样的弥散程度较小,变异程度和双眼
差较小。
微量取样操作对样本的影响较小,其稳定性
和重复性较好,更适合法医学vh研究应用
参考文献
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