家兔玻璃体液微量取样与一次取样的比较.docx

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家兔玻璃体液微量取样与一次取样的比较

家兔玻璃体液微量取样与一次取样的比较

【摘要1目的比较微量取样与一次取样的优劣。

方法36只家兔分为4组（每组9只），于死后12h取样：

i组于一次取

出所有vh；ii组微量取样50l，连续取15次；iii组左眼一次取样。

右眼微量重复取样

。

iv组双眼第1次微量取样．剩余一次

取出。

检测ca2+cl、l（+、na和p等含量，数据统计分析。

结果iii组左右眼、（iv）组先后两次取样配对t检验无差异（p>0

．05），

各组微量取样样本的变异系数、双眼差较小。

结论微量取样的操作影响较小、稳定性和重复性好

．更适合法医学研究和应

用。

【关键词】尸体化学；玻璃体液：

取样方法：

比较

【中图分类号】d919．1

【文献标识码】a

【文章编号】1007—9297（20XX）03—0208—03

acomparisonstudyofvitreoushumormicro-samplingandwhollysamplingonrabbits．zhangyu—zhuj，wanglan2．3．

liul，（departmentofforensicmedicine，ton#jimedicalcollegeofhuazhonguniversityofsciencearmtechno，whan

430030,chian）

[abstract]objectivetomakeacomparativestudyofwhollysamplingandmicro-samplingofvitreoushumor（vh）．

methods

【作者简介】战玉祝（1968一），男，汉族，山东莒南县人，医学学士，副主任法医师

，研究方向：

临床法医学中的视觉、听觉的电生理研究以

及法医病理的死亡时间研究；tel~+86—531—86323203；e-mail：

james6803@21cn．com

【通信作者1刘良（1960一），男，汉族，山东沂水人，教授，博士生导师，主要从事法医病理学教学

、研究及检案。

法律与医学杂志20XX年第13卷（第3期）

thirty—sixrabbitsweredividedintofourgroups，eachofwhichcontainsnine．allweresampledat12hpostmortem．group1were

whollyextracted．groupi1weresubjectedtomultiplesampling．ofgroupiii，alllefteyeswerewhollysampledandallrighteyes

weremicro-sampled．alleyesofgroupivweremicro—sampledatfirstandalltheleftwerewholysampled．concentrationsofcalcium，

chloride，potassium，sodiumandphosphorusweredetectedandstatisticallyanalyzed．resultstherearenosignificantdifference

betweenwhollysamplingandmicro-samplingofthepair-matchedt—testofbetween-eyesingroupiiiandthetwicesanipiing

ingroupiv．ofmicro—sampling，thevariationsoftheboth-eyesandcoeficientofvariationweresmallerthanthoseofwhony

sampling．conclusionthemulti-micro-samplingoperationmakesmuchlessdistortonvh，andismorestableandrepeatable，

whichispromisingforforensicvhstudyandexamination．

【keywordslpostmortemchemistry；vitreoushumogsamplingmethodology；

comparisonstudy

取样方法对玻璃体液（vitreoushumor，vh）研究

有重要意义，[11传统采用一次取样vh，近年有研究使

用了微量取样。

迄今未见两取样方法比较研究，本实

验通过一次取样与微量取样的比较．旨在为vh研究

选择取样方法。

材料与方法

一

、实验动物及分组取材

健康家兔36只，雌雄混用，体重1．9～2．5，由华

中科技大学同济医学院实验动物中心提供。

耳缘静脉

空气栓塞处死，置于4～7℃恒温箱，随机分为4组（每

组9只），于死后12h取样：

i组根据coe推荐的方法，

用20g针头5iill注射器自外眦、角膜缘外约2mm

处缓慢进针，瞳孔观察针头位于中央时缓慢抽出所有

vh，摇匀后移液50l与去离子水1：

4稀释，编号入

ep管、-25℃冻存。

ii组微量重复取样：

用20g留置

针，入针后固定针头，用1ml注射器缓慢抽吸、移液

50l，重复取样15次，其余处置同i组。

iii组左眼一

次取样，同i组，右眼微量重复取样同ii组。

iv组双眼

微量取样1次，操作同ii组；换5iid注射器一次取出

剩余所有vh，同i组。

二、检测

同日检测i组、iv组1、2次取样和iii组左眼样

本，ii组和iii组右眼第1⋯5815次取样样本：

37ci=

水浴解冻，美国abbotyaeroset2000全自动生化分

析仪检测ca2+、cl一、i0．05），因此两取样方法获得的

样本总体无差异。

但是，一次取样的弥散程度大于微

量取样（表1），这印证了coe关于“取样方法不当可造

成vh含量分散”的观点。

这也反应在双眼浓度差上．

微量取样的双眼差较小、一次取样较大（表3）。

结果与有关报道都相吻合：

一次取样研究报道的

·210·

vh浓度变异程度和双眼问差异较大，而微量取样研

究所报道的差异则往往较小。

[7-91结合前期研究，[11分

析认为取样方法是造成差异的原因。

物质在vh、血液

和组织中含量不同，取样操作不当引起组织挫碎或污

染改变了vh样本含量。

coe方法的缺点之一是“尽量

取出所有vh”不好控制．实际操作时容易抽出邻近组

织（如视网膜），造成组分（如vh钾）含量的人为改变。

tagliaro[91也认为微量取样对眼球内壁组织的作用较

小．操作引起的损伤和组分改变也较小，取得的样本

更好。

二、微量取样的法医学意义

微量取样操作方法的文献少见，设计微量取样操

作时参考了coe方法的基本步骤。

为方便多次取材、

减少进针次数、保持针头位置和尽量减少污染等，采

用了留置针固定后定量（微量）移液的取材方法。

tagliaro等[914次取样50lvh获得了较好的死亡时

间推断精度，rognum等[111、poulsen等[121和bocaz—ben

eventi等【8】也采用微量取样的方法，并称死亡时间95％

预测区间更好。

结合本实验结果。

作者认为这与微量

取样的变异较小有关。

微量取样所体现的较小的双眼

差，也更符合实际。

111因此微量取样采集样本具有良好

的代表性，稳定性和重复性更好，也容易控制操作，更

适宜于vh的法医学研究与应用

综上所述，微量取样与一次取样总体无差别，但

不同取样操作可以造成样本均数变异系数的不同．比

较而言，微量取样的弥散程度较小，变异程度和双眼

差较小。

微量取样操作对样本的影响较小，其稳定性

和重复性较好，更适合法医学vh研究应用

参考文献

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