PDATR41病毒过滤.docx
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PDATR41病毒过滤
TableofContents目录
1Introduction简介9
2GeneralConcepts一般概念9
2.1SizeExclusion尺寸排除10
2.2OtherRetentionMechanisms其他滞留方法11
2.3VirusRetentionProbabilityofReductionFactor(RF)病毒滞留可能性的减少因素(RF)11
2.4VirusSize/RetentionRating病毒大小/滞留量11
2.5ProteinSize/Sieving/PassageRating蛋白质大小/过滤/通过量11
3VirusFilterSelectionandCharacterization病毒选择和特性12
3.1FilterConstruction过滤器结构12
3.2FilterSystemConfigurations过滤系统配置12
3.3ParticulatesandExtractables微粒和萃取物13
3.4FilterCompatibility过滤兼容性14
3.5ProteinRecovery(Adsorption/Retention/Biocompatibility)蛋白质恢复(吸附/滞留/生物兼容性)15
3.6ThermalStressResistance热应力阻止16
3.7HydraulicStressResistance水应力阻力16
3.8ToxicityTesting毒性试验16
3.9Viral/PhageChallengeTesting病毒/噬菌体挑战试验16
3.10Cleaning/Sanitization/Sterilization清理/消毒/灭菌17
4PhysicalandMechanicalCharacteristics物理力学特性17
4.1FiltrationRateandClogging(Throughput)过滤速度及堵塞(通过量)17
4.2Fluid/Piping液体/管道17
4.3Fluid/Filter液体/过滤器17
4.4PhysicalandStructuralLimitations物理结构限制17
4.5Miscellaneous多样性17
5VirusFilterValidation/EvaluationStudies病毒过滤器/评估研究17
5.1FilterProperties过滤器属性18
5.2TestVirus测试病毒18
5.2.1VirusSelection病毒选择18
5.2.2VirusStockPreparationandMaintenance病毒库制备和维护19
5.2.3VirusSpike病毒峰值20
5.3Scaled-downModels缩小模型21
5.4OperatingConditionsforValidation,Revalidation,andNumberofRuns验证,再验证的运行条件和运行次数21
5.5RawMaterialsandEquipment原材料和设备22
5.5.1VirusFiltrationDevicesandConfigurations病毒过滤设备和配置22
5.5.2IntegrityTestingduringDevelopment研发期间的完整性测试22
5.5.3MembraneLotSelection膜批选择22
5.5.4Feedstream原料流23
5.5.5FiltrationConditions过滤条件23
5.6VirusAssaysandAssayValidation病毒分析试验和分析验证23
5.6.1AssayMethodValidation试验方法验证23
5.7EstablishingRepresentativeWorst-caseProcessConditions确定代表性的最坏工艺条件24
6IntegrityTesting完整性测试25
6.1Manufacturer'sChecklist生产商检验单26
6.2VirusRetentionIntegrityTests病毒滞留完整性测试27
6.2.1DextranRetention葡聚糖滞留27
6.2.2GoldParticleRetention金颗粒滞留27
6.2.3Gas-LiquidPorosimetry气-液测量仪29
6.2.4ManualBubblePointorLeakTesting人工起泡点或检漏测试29
6.2.5ManualForward/DiffusiveFlow人工顺流/扩散流29
6.2.6ManualPressureHold/Decay人工压力保持/下降30
6.2.7AutomatedIntegrityTestInstrumentsforGasPorosimetry-basedTestMethods基于气体测量仪测试法的自动完整性测试仪器30
6.2.8LiquidandLiquid-liquidPorosimetry液体和液-液测量仪31
6.3RelationshipbetweenIntegrityTestsandVirus/PhageRetention完整性测试和病毒/噬菌体截留之间的关系31
6.4FailureAnalysis/Troubleshooting故障分析/处理31
7Sterilization灭菌32
7.1SteamSterilization蒸汽灭菌32
7.2AutoclaveSterilization高压蒸汽灭菌32
7.3Sterilize-in-Place(SIP)在线灭菌32
7.4IrradiationSterilization辐射灭菌33
7.5GasSterilization气体灭菌33
APPENDIXA:
VirusRetentionandProteinPassageNomenclatureClassification附录A:
病毒截留和蛋白质通过的术语分类34
APPENDIXB:
LargeVirusFilterExperimentalProtocol附录B:
大分子病毒过滤器的试验方案35
B.1LargeVirusFilterExperimentalDesign大分子病毒过滤器试验设计35
B.1.1Strategy策略35
B.1.2ModelVirus模型病毒35
B.1.3ModelProteins模型蛋白质35
B.1.4BufferSystem缓冲系统35
B.1.5Scaled-downModelFilters按比例缩小的模型过滤器35
B.1.6OperatingParameters运行参数36
B.1.7SetPointValuesforRelevantOperatingParameters相关运行参数的设定值36
B.1.8NomenclatureAcceptanceCriteria命名验收标准36
B.2PreparationofBacteriophageStocks噬菌群制备37
B.2.1Introduction简介37
B.2.2Equipment设备37
B.2.3Procedure程序38
B.2.3.1PlateMethod培养板的方法38
B.2.3.2BrothMethod肉汤方法38
B.2.4CrudePreparation原料制备38
B.2.5PureConcentrate(Coetzee,etal.(25))纯浓缩液38
B.3ProcedureForTheEstimationofBacteriophageNumbers噬菌体数估算程序39
B.3.1Introduction简介39
B.3.2Equipment设备39
B.3.3Procedure程序39
B.3.3.1PreparationofBacteriophageHost噬菌体寄主的制备39
B.3.3.2PreparationofDilutionTubesandSoftAgarforUseinPhageAssays噬菌体分析用的稀释管和软琼脂制备39
B.3.3.3PhageAssays噬菌体分析40
APPENDIXC:
FILTERVALIDATIONRECOMMENDATIONS附录C:
过滤器验证建议41
1Introduction简介
Scope:
ThisPDATechnicalReportaddressesvirusremovalfiltersthatretainvirusesbyasizeexclusionmechanism.Itexplainshowtheywork,theirselection,characterization,testing,andvalidation.Thisdocumentshouldbeconsideredasaguide;itisnotintendedtoestablishanymandatoryorimpliedstandard.范围:
此PDA技术报告陈述了病毒去除过滤器,该过滤器通过尺寸排除装置拦截病毒。
本报告解释过滤器的工作原理、选择、特征、测试及验证。
本文件应作为指南;并不打算建立任何强制性或暗指的标准。
Biotechnologicalandbiologicaltherapeuticproductsareoftenmanufacturedusingmaterialsofanimalorhumanorigin,includingculturedprimaryortransformedcells,milkorothercomponentsfromtransgenicanimals,naturalextracts,andhumanoranimalbloodplasmacomponents.Theseproductsareusuallyproteinsthataremanufacturedbycomplexmanufacturingprocesses.Althoughapprovedrecombinantbiotherapeuticshaveanexcellentsafetyrecord,theriskofcontaminationbyknownorunknownpathogensexists(e.g.,1-10).生物技术和生物医疗制品常使用动物或人体器官的原料制造,这些原料包括培养的主要或改变的细胞、乳液或转基因动物成分、天然浸膏、人或动物的血浆成分。
这些产品通常是蛋白质,通过复杂的制造工艺生产出来的。
虽然经核准的重组体生物疗法拥有极好的安全记录,污染物风险还是存在已知或未知的病原体(见样例1-10)。
Virusfiltrationisperformedaspartofamanufacturer'soverarchingvirussafetystrategy.Inthiscontext,virusfiltration(size-basedremoval)isacomplementtovirusinactivation,bothofwhichcontributetovirusclearance(e.g.,11-20).Implementationofvirusclearancecomplementsadditionalmeasuressuchascontroloverrawmaterialsandtestingofcellcultureorplasmafeedstocks.Collectively,thesemeasuresformtheframeworkofavirussafetystrategy.病毒过滤作为生产商病毒安全策略的一部分执行。
在这种环境中,病毒过滤(根据尺寸排除)是病毒失活的补充,两者都将促进病毒清理(见样例11-20)。
执行病毒清理增加了额外测量,如原材料控制和细胞培养或血浆原料的测试。
Theriskoftransmissionofcertaininfectiouspathogenscannotbecompletelymitigatedbydonorscreening,vaccinationofpatients,asinglevirusinactivationstep,or,inthecaseofcell-basedproducts,virustestingofcellbanksandrawmaterials.Itisdesirabletointroduceadditionalrobuststepsinbiotherapeuticpurificationprocessestohelpreduceoreliminateviruseswithoutcompromisingthemolecularintegrityoftheproducts.Virusremovalfilters(oftenincorrectlytermed"nanofilters")arespecificallydesignedtoremovevirusesandotherbiomoleculesfromtheproduct(protein)solutionthroughasizeexclusionmechanism.转移特定传染病原体的风险无法通过供体过滤、患者接种、单个病毒失活步骤或者基于细胞的产品、细胞库和原材料的病毒测试完全缓解。
将附加的稳定步骤引入生物疗法提纯工艺,以帮助减少或消除病毒,而不损害产品中分子的完整性。
病毒移除过滤器(常被错误地叫做“纳米技术”)是通过尺寸排除装置移除病毒和产品(蛋白质)中其它生物分子溶液。
Commerciallyavailablevirusremovalfiltershavedifferentmembranecharacteristicsparticulartoeachfilterorfiltertype.Thesecharacteristicsincludemembranematerial,membranesurfacegraftcharacteristics,porestructureandporesizedistribution,virusretentioncapacity,andproteintransmissionandadsorptionproperties.Virusfiltrationisconductedbyeitherdirect(alsotermeddead-endornormal)flowfiltration(DFF)ortangentialflow(alsotermedcross-flow)filtration(TFF).Selectionofthemodeoffiltration(DFForTFF)isusuallybasedonthecharacteristicsofthesolutiontobefilteredorprocessissuessuchaseaseofuse,easeofvalidation,andeconomics.商用病毒移除过滤器对每种过滤器或过滤器类型都有不同的膜特性。
这些特性包括膜材料、膜表面移植物特性、孔结构和孔径分布、病毒滞留能力以及蛋白质转移和吸附功能。
病毒过滤器管理通过直流(也叫做终端或正常)过滤器(DFF)或分流过滤器(TFF)。
过滤器模式的选择(DFF或TFF)通常根据过滤溶液的特性或工艺问题,如便于使用、便于验证且经济。
2GeneralConcepts一般概念
Virusfiltersarecastpolymericmembraneswithacomplexinternalporousstructure.Solutionspassthroughthisporenetworkwhileparticlescarriedalongbythefluidmayberetainedonthemembranesurfaceorpenetratesomedistanceintothemembranestructure.Retentionthatoccursbecauseparticlesaretoolargetopassthroughaporeisreferredtoassievingorsizeexclusion.Traditionalasymmetricsurface"skinned"ultrafiltrationmembranesthatcontainpinholedefects,whilestillsuitableforproteinconcentration,maynotprovideconsistenthighclearanceforlargeviruses(21).病毒过滤器使用复杂的内部多孔结构消除高分子膜。
溶液穿过该孔状网,而液体携带的微粒会滞留在膜的表面或穿透至膜的结构中。
发生滞留是因为微粒太大而无法穿过气孔,这就是所谓的筛分或尺寸排除。
传统的非对称表面“表层”超滤膜包含小孔缺陷,但仍然适用于蛋白质浓度,可能不会持续提供大分子病毒的高清除度(21)。
Smallerparticlescapableofpassingthroughaporemayalsobecapturedbyadsorptiontomembraneporesurfaces.Retentionbyadsorptionmayinvolveavarietyofdifferentforcesatdifferentadsorptionsiteswithinthemembranestructure.Adsorptionofviruses,whenitoccurs,isasecondaryphenomenon,whilesize-basedexclusionisconsideredtobethemainmechanismofclearancebyfiltration.更小的可能通过小孔的微粒也会被膜孔表面吸附。
吸附滞留包括膜的结构中多种不同吸附点的吸附力量。
发生滞留时,病毒的吸附是一个次要现象,而根据尺寸排除被认为是通过过滤器清理的主要方法。
Terminology术语
MinimumExposureTime:
Theshortestperiodforwhichatreatmentstepwillbemaintained.最小暴露时间:
维持处理步骤的最短时间
NonspecificModelVirus:
Avirususedforcharacterizationofviralclearanceoftheprocesswhenthepurposeistocharacterizethecapacityofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivatevirusesingeneral,i.e.,tocharacterizetherobustnessofthepurificationprocess.非特定病毒模型:
一般来说,当用来描述生产工艺病毒移除和/或灭活的能力时,病毒具有工艺病毒清理的特性,即描述提纯工艺的稳定性。
ProcessCharacterizationofViralClearance:
Viralclearancestudiesinwhichnonspecificmodelvirusesareusedtoassesstherobustnessofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivateviruses.病毒清理的工艺特性:
在病毒清理研究中,非特定病毒模型用来评估生产工艺的稳定性。
ProcessEvaluationStudiesofViralClearance:
Viralclearancestudiesinwhichrelevantand/orspecific"model"virusesareusedtodeterminetheabilityofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivatetheseviruses.病毒清理的工艺评估研究:
在病毒清理研究中,相关和/或特定“模型”病毒用来确定生产工艺移除和/或使病毒灭活的能力。
RelevantVirus:
Virususedinprocessevaluationstudiesthateitheristheidentifiedvirus,orofthesamespeciesasthevirus,knowntoorlikelytocontaminatethecellsubstrateoranyotherreagentsormaterialsusedintheproductionprocess.相关病毒:
用于工业评估研究的病毒要么是已识别的病毒,要么是同类病毒,已知或可能污染细胞培养基或任何其它反应物或用于