PDATR41病毒过滤.docx

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PDATR41病毒过滤

TableofContents目录

1Introduction简介9

2GeneralConcepts一般概念9

2.1SizeExclusion尺寸排除10

2.2OtherRetentionMechanisms其他滞留方法11

2.3VirusRetentionProbabilityofReductionFactor（RF）病毒滞留可能性的减少因素（RF）11

2.4VirusSize/RetentionRating病毒大小/滞留量11

2.5ProteinSize/Sieving/PassageRating蛋白质大小/过滤/通过量11

3VirusFilterSelectionandCharacterization病毒选择和特性12

3.1FilterConstruction过滤器结构12

3.2FilterSystemConfigurations过滤系统配置12

3.3ParticulatesandExtractables微粒和萃取物13

3.4FilterCompatibility过滤兼容性14

3.5ProteinRecovery（Adsorption/Retention/Biocompatibility）蛋白质恢复（吸附/滞留/生物兼容性）15

3.6ThermalStressResistance热应力阻止16

3.7HydraulicStressResistance水应力阻力16

3.8ToxicityTesting毒性试验16

3.9Viral/PhageChallengeTesting病毒/噬菌体挑战试验16

3.10Cleaning/Sanitization/Sterilization清理/消毒/灭菌17

4PhysicalandMechanicalCharacteristics物理力学特性17

4.1FiltrationRateandClogging（Throughput）过滤速度及堵塞（通过量）17

4.2Fluid/Piping液体/管道17

4.3Fluid/Filter液体/过滤器17

4.4PhysicalandStructuralLimitations物理结构限制17

4.5Miscellaneous多样性17

5VirusFilterValidation/EvaluationStudies病毒过滤器/评估研究17

5.1FilterProperties过滤器属性18

5.2TestVirus测试病毒18

5.2.1VirusSelection病毒选择18

5.2.2VirusStockPreparationandMaintenance病毒库制备和维护19

5.2.3VirusSpike病毒峰值20

5.3Scaled-downModels缩小模型21

5.4OperatingConditionsforValidation,Revalidation,andNumberofRuns验证，再验证的运行条件和运行次数21

5.5RawMaterialsandEquipment原材料和设备22

5.5.1VirusFiltrationDevicesandConfigurations病毒过滤设备和配置22

5.5.2IntegrityTestingduringDevelopment研发期间的完整性测试22

5.5.3MembraneLotSelection膜批选择22

5.5.4Feedstream原料流23

5.5.5FiltrationConditions过滤条件23

5.6VirusAssaysandAssayValidation病毒分析试验和分析验证23

5.6.1AssayMethodValidation试验方法验证23

5.7EstablishingRepresentativeWorst-caseProcessConditions确定代表性的最坏工艺条件24

6IntegrityTesting完整性测试25

6.1Manufacturer'sChecklist生产商检验单26

6.2VirusRetentionIntegrityTests病毒滞留完整性测试27

6.2.1DextranRetention葡聚糖滞留27

6.2.2GoldParticleRetention金颗粒滞留27

6.2.3Gas-LiquidPorosimetry气-液测量仪29

6.2.4ManualBubblePointorLeakTesting人工起泡点或检漏测试29

6.2.5ManualForward/DiffusiveFlow人工顺流/扩散流29

6.2.6ManualPressureHold/Decay人工压力保持/下降30

6.2.7AutomatedIntegrityTestInstrumentsforGasPorosimetry-basedTestMethods基于气体测量仪测试法的自动完整性测试仪器30

6.2.8LiquidandLiquid-liquidPorosimetry液体和液-液测量仪31

6.3RelationshipbetweenIntegrityTestsandVirus/PhageRetention完整性测试和病毒/噬菌体截留之间的关系31

6.4FailureAnalysis/Troubleshooting故障分析/处理31

7Sterilization灭菌32

7.1SteamSterilization蒸汽灭菌32

7.2AutoclaveSterilization高压蒸汽灭菌32

7.3Sterilize-in-Place（SIP）在线灭菌32

7.4IrradiationSterilization辐射灭菌33

7.5GasSterilization气体灭菌33

APPENDIXA:

VirusRetentionandProteinPassageNomenclatureClassification附录A：

病毒截留和蛋白质通过的术语分类34

APPENDIXB:

LargeVirusFilterExperimentalProtocol附录B：

大分子病毒过滤器的试验方案35

B.1LargeVirusFilterExperimentalDesign大分子病毒过滤器试验设计35

B.1.1Strategy策略35

B.1.2ModelVirus模型病毒35

B.1.3ModelProteins模型蛋白质35

B.1.4BufferSystem缓冲系统35

B.1.5Scaled-downModelFilters按比例缩小的模型过滤器35

B.1.6OperatingParameters运行参数36

B.1.7SetPointValuesforRelevantOperatingParameters相关运行参数的设定值36

B.1.8NomenclatureAcceptanceCriteria命名验收标准36

B.2PreparationofBacteriophageStocks噬菌群制备37

B.2.1Introduction简介37

B.2.2Equipment设备37

B.2.3Procedure程序38

B.2.3.1PlateMethod培养板的方法38

B.2.3.2BrothMethod肉汤方法38

B.2.4CrudePreparation原料制备38

B.2.5PureConcentrate（Coetzee,etal.（25））纯浓缩液38

B.3ProcedureForTheEstimationofBacteriophageNumbers噬菌体数估算程序39

B.3.1Introduction简介39

B.3.2Equipment设备39

B.3.3Procedure程序39

B.3.3.1PreparationofBacteriophageHost噬菌体寄主的制备39

B.3.3.2PreparationofDilutionTubesandSoftAgarforUseinPhageAssays噬菌体分析用的稀释管和软琼脂制备39

B.3.3.3PhageAssays噬菌体分析40

APPENDIXC:

FILTERVALIDATIONRECOMMENDATIONS附录C：

过滤器验证建议41

1Introduction简介

Scope:

ThisPDATechnicalReportaddressesvirusremovalfiltersthatretainvirusesbyasizeexclusionmechanism.Itexplainshowtheywork,theirselection,characterization,testing,andvalidation.Thisdocumentshouldbeconsideredasaguide;itisnotintendedtoestablishanymandatoryorimpliedstandard.范围：

此PDA技术报告陈述了病毒去除过滤器，该过滤器通过尺寸排除装置拦截病毒。

本报告解释过滤器的工作原理、选择、特征、测试及验证。

本文件应作为指南；并不打算建立任何强制性或暗指的标准。

Biotechnologicalandbiologicaltherapeuticproductsareoftenmanufacturedusingmaterialsofanimalorhumanorigin,includingculturedprimaryortransformedcells,milkorothercomponentsfromtransgenicanimals,naturalextracts,andhumanoranimalbloodplasmacomponents.Theseproductsareusuallyproteinsthataremanufacturedbycomplexmanufacturingprocesses.Althoughapprovedrecombinantbiotherapeuticshaveanexcellentsafetyrecord,theriskofcontaminationbyknownorunknownpathogensexists（e.g.,1-10）.生物技术和生物医疗制品常使用动物或人体器官的原料制造，这些原料包括培养的主要或改变的细胞、乳液或转基因动物成分、天然浸膏、人或动物的血浆成分。

这些产品通常是蛋白质，通过复杂的制造工艺生产出来的。

虽然经核准的重组体生物疗法拥有极好的安全记录，污染物风险还是存在已知或未知的病原体（见样例1-10）。

Virusfiltrationisperformedaspartofamanufacturer'soverarchingvirussafetystrategy.Inthiscontext,virusfiltration（size-basedremoval）isacomplementtovirusinactivation,bothofwhichcontributetovirusclearance（e.g.,11-20）.Implementationofvirusclearancecomplementsadditionalmeasuressuchascontroloverrawmaterialsandtestingofcellcultureorplasmafeedstocks.Collectively,thesemeasuresformtheframeworkofavirussafetystrategy.病毒过滤作为生产商病毒安全策略的一部分执行。

在这种环境中，病毒过滤（根据尺寸排除）是病毒失活的补充，两者都将促进病毒清理（见样例11-20）。

执行病毒清理增加了额外测量，如原材料控制和细胞培养或血浆原料的测试。

Theriskoftransmissionofcertaininfectiouspathogenscannotbecompletelymitigatedbydonorscreening,vaccinationofpatients,asinglevirusinactivationstep,or,inthecaseofcell-basedproducts,virustestingofcellbanksandrawmaterials.Itisdesirabletointroduceadditionalrobuststepsinbiotherapeuticpurificationprocessestohelpreduceoreliminateviruseswithoutcompromisingthemolecularintegrityoftheproducts.Virusremovalfilters（oftenincorrectlytermed"nanofilters"）arespecificallydesignedtoremovevirusesandotherbiomoleculesfromtheproduct（protein）solutionthroughasizeexclusionmechanism.转移特定传染病原体的风险无法通过供体过滤、患者接种、单个病毒失活步骤或者基于细胞的产品、细胞库和原材料的病毒测试完全缓解。

将附加的稳定步骤引入生物疗法提纯工艺，以帮助减少或消除病毒，而不损害产品中分子的完整性。

病毒移除过滤器（常被错误地叫做“纳米技术”）是通过尺寸排除装置移除病毒和产品（蛋白质）中其它生物分子溶液。

Commerciallyavailablevirusremovalfiltershavedifferentmembranecharacteristicsparticulartoeachfilterorfiltertype.Thesecharacteristicsincludemembranematerial,membranesurfacegraftcharacteristics,porestructureandporesizedistribution,virusretentioncapacity,andproteintransmissionandadsorptionproperties.Virusfiltrationisconductedbyeitherdirect（alsotermeddead-endornormal）flowfiltration（DFF）ortangentialflow（alsotermedcross-flow）filtration（TFF）.Selectionofthemodeoffiltration（DFForTFF）isusuallybasedonthecharacteristicsofthesolutiontobefilteredorprocessissuessuchaseaseofuse,easeofvalidation,andeconomics.商用病毒移除过滤器对每种过滤器或过滤器类型都有不同的膜特性。

这些特性包括膜材料、膜表面移植物特性、孔结构和孔径分布、病毒滞留能力以及蛋白质转移和吸附功能。

病毒过滤器管理通过直流（也叫做终端或正常）过滤器（DFF）或分流过滤器（TFF）。

过滤器模式的选择（DFF或TFF）通常根据过滤溶液的特性或工艺问题，如便于使用、便于验证且经济。

2GeneralConcepts一般概念

Virusfiltersarecastpolymericmembraneswithacomplexinternalporousstructure.Solutionspassthroughthisporenetworkwhileparticlescarriedalongbythefluidmayberetainedonthemembranesurfaceorpenetratesomedistanceintothemembranestructure.Retentionthatoccursbecauseparticlesaretoolargetopassthroughaporeisreferredtoassievingorsizeexclusion.Traditionalasymmetricsurface"skinned"ultrafiltrationmembranesthatcontainpinholedefects,whilestillsuitableforproteinconcentration,maynotprovideconsistenthighclearanceforlargeviruses（21）.病毒过滤器使用复杂的内部多孔结构消除高分子膜。

溶液穿过该孔状网，而液体携带的微粒会滞留在膜的表面或穿透至膜的结构中。

发生滞留是因为微粒太大而无法穿过气孔，这就是所谓的筛分或尺寸排除。

传统的非对称表面“表层”超滤膜包含小孔缺陷，但仍然适用于蛋白质浓度，可能不会持续提供大分子病毒的高清除度（21）。

Smallerparticlescapableofpassingthroughaporemayalsobecapturedbyadsorptiontomembraneporesurfaces.Retentionbyadsorptionmayinvolveavarietyofdifferentforcesatdifferentadsorptionsiteswithinthemembranestructure.Adsorptionofviruses,whenitoccurs,isasecondaryphenomenon,whilesize-basedexclusionisconsideredtobethemainmechanismofclearancebyfiltration.更小的可能通过小孔的微粒也会被膜孔表面吸附。

吸附滞留包括膜的结构中多种不同吸附点的吸附力量。

发生滞留时，病毒的吸附是一个次要现象，而根据尺寸排除被认为是通过过滤器清理的主要方法。

Terminology术语

MinimumExposureTime:

Theshortestperiodforwhichatreatmentstepwillbemaintained.最小暴露时间：

维持处理步骤的最短时间

NonspecificModelVirus:

Avirususedforcharacterizationofviralclearanceoftheprocesswhenthepurposeistocharacterizethecapacityofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivatevirusesingeneral,i.e.,tocharacterizetherobustnessofthepurificationprocess.非特定病毒模型：

一般来说，当用来描述生产工艺病毒移除和/或灭活的能力时，病毒具有工艺病毒清理的特性，即描述提纯工艺的稳定性。

ProcessCharacterizationofViralClearance:

Viralclearancestudiesinwhichnonspecificmodelvirusesareusedtoassesstherobustnessofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivateviruses.病毒清理的工艺特性：

在病毒清理研究中，非特定病毒模型用来评估生产工艺的稳定性。

ProcessEvaluationStudiesofViralClearance:

Viralclearancestudiesinwhichrelevantand/orspecific"model"virusesareusedtodeterminetheabilityofthemanufacturingprocesstoremoveand/orinactivatetheseviruses.病毒清理的工艺评估研究：

在病毒清理研究中，相关和/或特定“模型”病毒用来确定生产工艺移除和/或使病毒灭活的能力。

RelevantVirus:

Virususedinprocessevaluationstudiesthateitheristheidentifiedvirus,orofthesamespeciesasthevirus,knowntoorlikelytocontaminatethecellsubstrateoranyotherreagentsormaterialsusedintheproductionprocess.相关病毒：

用于工业评估研究的病毒要么是已识别的病毒，要么是同类病毒，已知或可能污染细胞培养基或任何其它反应物或用于