高效液相色谱仿真实验.docx
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高效液相色谱仿真实验
高效液相色谱仿真实验
一、实验概述:
以液体做流动相的色谱称为液相色谱。
人们把已经比较成熟的气相色谱理论应用于液相色谱,使液相色谱得到了迅速的发展。
随着其他科学技术的发展,出现了新型的高压输液泵、高效的固定相和柱填充技术、高灵敏度的检测器,加上计算机的应用,使得液相色谱实现了高效率和高速度。
这种分离效率高、分析速度快的液相色谱称为高效液相色谱(Highperformanceliquidchromatography,HPLC)。
二、实验装置:
Agilent(安捷伦)1100系列液相色谱系统简介:
Agilent1100系列HPLC组件和系统,将Agilent长期的化学分析经验与领先的计算机技术结合,把网络技术引入了实验室。
从1996年以来,在全球已经安装了超过130,000台1100组件和55,000多套化学工作站数据处理系统,成为目前单一型号市场占有率最高的液相色谱系统。
本仿真软件是模拟用Agilent化学工作站的数据处理系统进行样品分析和数据采集(色谱图)的过程。
注:
本软件只是模拟分析的过程和容,并不涉及其原理,所以实验中的参数调节对结果并没有影响,而真实实验结果是随参数的变化而变化的,这一点需要特别注意!
实验主界面:
化学工作站界面:
三、实验操作:
第一步:
选取实验
点击主菜单上的“实验选取”,会出现如下的对话框:
用鼠标左键点中你要做的实验,此文件名会出现在对话框的“文件名”一栏的文本框
中,在此实验文件上面双击左键或者点击“打开”按钮打开实验文件。
第二步:
确认操作条件
点击主菜单上的“操作条件”,会出现如下的操作条件列表:
在实验调节过程中,请以此列表的条件为准进行调节,否则不能正确输出色谱峰。
第三步:
加入试剂
点击仪器上的自动进样器部分(当鼠标移到仪器的各部分时会出现相应的说明),出现如下画面:
点击下面的试剂小瓶,会自动放置到自动进样器的托盘中。
完成后,点击主界面上的电脑启动化学工作站。
第四步:
编辑方法
击主界面上的电脑启动化学工作站开始编辑方法。
所谓方法就是一个参数集,它包括分析一个样品所需要的所有的参数:
数据采集参数、数据分析参数和命令行或者宏指令。
点击菜单“方法→编辑方法”开始编辑方法(注意:
此时不可以改变方法的参数,可改变的参数将在下面特别说明):
然后会出现下面的窗口让你选择编辑方法的容:
用鼠标点击复选框选择要编辑的方法的容,然后点击“确定”按钮开始方法编辑,点击“取消”按钮终止方法编辑。
开始方法编辑后,系统会根据你选择的容分别依次显示每一部分的具体容,点击“确定”按钮进入下一部分,点击“取消”按钮终止方法编辑。
完成方法编辑后,系统会回到主操作界面,此时色谱柱已经开始升温,在图形界面中会有显示,如下图中红色圆圈标示区域所示:
特别说明:
对于本实验要改变的参数,可以点击化学工作站软件界面中央的图示的进样器、溶剂系统、色谱柱、检测器等部分,会弹出各部分参数窗口,此时可以按照实验要求的参数进行调节(实验参数可以点击主界面上左边菜单中的“实验数据”按钮察看)。
进样器:
溶剂系统:
色谱柱:
检测器:
编辑方法完成后,在启动系统之前,请返回液相色谱仪,打开二元泵系统,调节Purge阀,观察使回路无汽泡。
第五步:
调节Purge阀
点击仪器上的二元泵系统部分(当鼠标移到仪器的各部分时会出现相应的说明),出现如下画面:
图中蓝色方框部分就是Purge阀,此时是关闭的,用鼠标点击蓝色方框部分,会出现Purge阀的放大画面,然后点击Purge阀会自动逆时针方向旋转打开Purge阀。
打开Purge阀后,右边的试剂瓶的导管当中会有气泡流出,待没有气泡再流出之后,再次点击Purge阀会自动逆时针方向旋转关闭Purge阀。
然后进行下一步“启动系统”。
第六步:
启动系统
完成方法编辑后,点击菜单“设备→系统开”或者图中红色圆圈指示的按钮“开启系统”:
启动系统后,在图形界面中会有显示,如下图中红色圆圈标示区域所示:
同时在色谱峰显示区域开始走基线,开始的时候系统不稳定,基线变化很厉害,等到基线走平稳表示系统稳定后,可以开始进样运行方法。
第七步:
进样、运行方法
等到状态指示栏显示“Ready”后,表明系统已经准备完毕。
点击菜单“运行控制→运行方法”开始进样和分析,或者点击图中红色圆圈所指示的“Start”按钮或者按“F5”键:
开始进样后,在图形界面中会有显示,如下图中红色圆圈标示区域所示:
待色谱图出完后,样品分析完毕。
第八步:
完成实验报告
样品分析完成后,点击化学工作站界面上的红色方框部分,或者点击主界面左边菜单中的“实验数据”调出实验报告:
根据得出的保留时间、峰高、半峰宽等实验数据,可以计算分离度等相关参数。
如果计算机安装了打印机,可以点击右上角“打印报表”按钮打印实验报告。
第九步:
实验完毕(仿真实验不作要求)
完成方法编辑后,点击菜单“设备→系统关”,系统就会自动关闭,不须人工干预。