第二十四章免疫诊断.docx
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第二十四章免疫诊断
Documentnumber：
BGCG-0857-BTDO-0089-2022
第二十四章免疫诊断
第二十四章免疫诊断
一、单项选择题
1.抗体分子上一个抗原结合部位与相应抗原决定基之间的结合强度被称为
A.吸引力B.亲和力C.亲合力
D.聚合力E.杀伤力
2.抗血清中的抗体所针对的特异性抗原是
A.独特型抗原B.异嗜性抗原C.细菌性抗原
D.同种型抗原E.同种异型抗原
3.常可用于测定血清抗体、补体含量的实验是
A.单向免疫扩散B.双向免疫扩散
C.免疫电泳D.凝集反应
E.免疫标记
4.下列哪项不是免疫标记技术的特点
A.提高了反应的灵敏度B.反应的特异性更强
C.能进行定量检测D.能进行定位检测
E.具有快速的优点
5.欲从外周血单个核细胞（PBMC）中获得纯化的淋巴细胞，最简单易行的去除单核细胞的方法是
A.密度梯度离心法B.流式细胞术
C.磁珠分离法D.玻璃平皿法
E.免疫荧光法
6.下列哪项不是细胞因子检测的意义
A.了解和鉴定抗原类型B.了解机体的免疫状况
C.确定细胞亚群D.监测移植排斥反应
E.了解自身免疫病的发生机制
7.辅助诊断伤寒病的肥达反应属于
A.直接凝集反应B.间接凝集反应
C.单向琼脂扩散D.双向琼脂扩散
E.酶联免疫吸附实验
8.用于测定细胞免疫功能的皮肤实验是
A.结核菌素实验B.肥大实验
C.锡克实验D.青霉素皮试
E.白喉抗毒素皮试
9.能与绵羊红细胞形成E花环的细胞是
A.B细胞B.T细胞C.NK细胞
D.巨噬细胞E.粒细胞
10.测定抗体形成细胞数的实验是
A.淋巴细胞转化实验B.E花环实验
C.细胞毒实验D.协同凝集实验
E.溶血空斑实验
11.对流免疫电泳中抗体向负极移动的原因是
A.抗体带正电荷B.抗体带负电荷
C.抗体不带电荷D.抗体的电泳作用大于电渗作用
E.抗体的电渗作用大于电泳作用
12.ELISA的双抗体夹心法，固相载体的标记物是
A.待检抗原B.已知抗原C.已知抗体
D.酶标抗体E.酶标抗原
13.用间接免疫荧光技术检测抗原，应将荧光素标记在*
A.被检抗原上B.已知抗体上C.抗Ig抗体上
D.Ag—Ab复合物上E.已知抗原上
14.溶血空斑实验的一个空斑代表
A.一个Th细胞B.一个Tc细胞
C.一个B细胞D.一个抗体形成细胞
E.一个NK细胞
15.可以评价肿瘤患者细胞免疫功能的指标是
A.CD2+/CD3+细胞比值B.CD3+/CD4+细胞比值
C.CD4+/CD8+细胞比值D.CD3+/CD8+细胞比值
E.以上都不是
16．下列免疫学测定方法敏感性最高的是：
A.沉淀反应B.凝集反应C.ELISA
D.放射免疫测定E.补体结合试验
17．影响抗原抗体反应的因素有：
A.电解质、pH值和反应体积、温度
B.温度、pH值和反应体积、抗原抗体比例
C.温度、电解质和反应体积、抗原抗体比例
D.电解质、pH值和温度、抗原抗体比例
E.电解质、pH值和反应体积、抗原抗体比例
18．抗原抗体反应最适宜的pH值为：
*
～6
～8～9
19．反向间接凝集试验是检测标本中哪种成分
A.抗体B.补体C.抗原
D.抗原-抗体复合物E.以上都不是
20．抗原与抗体结合力中起主要作用的是：
*
A.氢键B.共价键C.疏水作用
D.范德华引力E.静电引力
21．用免疫荧光技术间接法检测组织中的抗原，应将荧光素标记*
A.抗原B.相应抗体
C.抗免疫球蛋白抗体D.抗原-抗体复合物
E.抗C3抗体
22．用ELISA双抗体夹心法检测抗原A时，固相载体的包被物是：
A.酶标抗A抗体B．未标记的抗A抗体
C.酶标抗原AD.未标记的抗球蛋白抗体E.酶标抗球蛋白抗体
23．混合淋巴细胞培养可以检测下列哪种抗原*
A.HLA-A、B抗原B.HLA-DP抗原
C.HLA-DQ抗原D.HLA-DR抗原
E.HLA-C抗原
24．双向免疫扩散试验中，如抗体浓度大于抗原浓度，则沉淀线：
A.靠近抗原孔B.靠近抗体孔C.在两孔中间
D.呈多条沉淀线E.以上都不是
25．对流免疫电泳中，抗体向负极移动的原因是：
A.抗体带正电B.抗体带负电C.电渗作用
D.电泳作用E.抗体不带电荷
26．SPA协同凝集试验中的抗体类别是：
E.IgD
27．免疫荧光抗体技术间接法是将荧光素标记在：
*
A.补体B.抗补体抗体
C.抗免疫球蛋白抗体D.特异性抗原
E.特异性抗体
28．在放射免疫测定中，已知抗体和同位素标记抗原的量一定，如果未标记的待测抗原量增多，则出现下列哪种现象*
A.标记的游离抗原增加，标记的免疫复合物减少，未标记的免疫复合物增加
B.标记的游离抗原增加，标记的免疫复合物减少，未标记的免疫复合物减少
C.标记的游离抗原增加，标记的免疫复合物增加，未标记的免疫复合物增加
D.标记的游离抗原减少，标记的免疫复合物增加，未标记的免疫复合物增加
E.标记的游离抗原减少，标记的免疫复合物增加，未标记的免疫复合物减少
29．外周血E花环阳性率约为：
%~30%%~40%%~50%
%~60%%~80%
30．用小鼠抗人CD3单克隆抗体检测T淋巴细胞，其结果代表的是：
淋巴细胞总数细胞数
细胞数+细胞数
+细胞数
31．B淋巴细胞形成EA花环是因为B淋巴细胞表面有：
的Fc受体B.补体受体
C.绵羊红细胞受体D.丝裂原受体
E.病毒受体
32．EAC试验中的"C"代表：
A.红细胞B.抗体C.抗原受体
D.补体E.抗原
33．与B淋巴细胞表面补体受体有关的试验是：
花环试验花环试验
花环试验D.细胞毒试验
E.混合淋巴细胞反应
34．外周血E花环阳性细胞总数代表的是：
A.CD4+T细胞数B.CD8+T细胞数
C.B淋巴细胞数D.NK细胞数
E.T淋巴细胞总数
35．人T淋巴细胞转化试验最常用的剌激因子是：
E.特异性抗原
36．溶血空斑试验检测的是哪类细胞的功能
淋巴细胞B.巨噬细胞
细胞淋巴细胞
细胞
37．评价病人T淋巴细胞功能的试验是：
A．血清免疫球蛋白的测定B．溶血空斑试验
C．淋巴细胞转化试验D．膜表面免疫球蛋白测定
E．E花环试验
38．用3H-TdR掺入法检测IL-2的活性，下列哪种说法是正确的*
A.测得的cpm值愈高，IL-2的活性愈差
B.测得的cpm值愈高，IL-2的活性愈高
C.测得的cpm值愈低，IL-2的活性愈高
D.测得的cpm值与IL-2的活性无关
E.以上都不是
39．依赖IL-2的细胞株是：
*
A.人胚肾细胞B.人肺癌细胞
C.Raji细胞D.小鼠肿瘤细胞
细胞
40．LPS可激发下列哪种细胞转化
淋巴细胞淋巴细胞
细胞噬细胞
细胞
41．检查体液免疫功能最常用的方法是：
A.血清免疫球蛋白的定量测定
B.溶血空斑试验
C.B淋巴细胞数目测定
D.淋巴细胞转化试验
E.SmIgG的测定
42．检测中性粒细胞杀菌功能的方法是：
*
A.四唑氮蓝还原试验B.白细胞计数
C.溶血空斑试验D.淋巴细胞转化试验
E.补体介导的细胞毒试验
43．下列哪种试验不能用于可溶性抗原的检测
A.间接凝集试验B.反向间接凝集试验
C.间接凝集抑制试验D．直接凝集试验
E.SPA协同凝集试验
44．关于间接凝集抑制试验的叙述，下列哪项是错误的
A.诊断试剂为己知抗原致敏的载体及相应的抗体
B.先将标本与试剂抗体混合，然后再加入抗原致敏的载体
C.出现凝集现象为阳性结果
D.用于检测标本中的抗体
E.可以定性检测标本中的抗原
45．下列哪项与抗原抗体的结合力无关*
A.静电引力B.氢键C.共价键
D.范德华引力E.疏水作用
46．单向琼脂扩散试验通常不用来检测：
47．下列哪项试验不是凝集反应
血型鉴定B.免疫妊娠试验
C.快速血浆反应素环状卡片试验
D.肥达反应E.病毒血凝试验
48．沉淀反应与凝集反应相比较，下列哪项是错误的
A.都是抗原抗体的反应
B.都需要电解质参与
C.沉淀反应的抗原是可溶性抗原或颗粒性抗原
D.两种反应均可用来定性或定量检测抗原或抗体
E.凝集反应的抗原是颗粒性抗原
49．下列哪项不是抗原抗体反应的特点
A.特异性B.不可逆性C.最适比例性
D.反应第一阶段是抗原抗体结合阶段
E．反应第二阶段是抗原抗体反应可见阶段
50．关于补体依赖的细胞毒试验，下列哪项是错误的*
A.抗原与抗体结合后激活补体
B.可见台盼蓝染色阳性细胞
C.死细胞体积增大
D.以计算活细胞百分率为结果
E.以计算死细胞百分率为结果
51．关于淋巴细胞参与的细胞毒作用，下列哪项是错误的
A.可由Tc细胞引起B.可由NK细胞引起
C.可由TIL细胞引起
D.常用的检恻方法是3H-TdR掺入法
E.可破坏靶细胞
二、多项选择题
1．抗原抗体反应除了与两者结构有关外，还与下列哪些因素有关
A.温度B.酸碱度C.离子浓度
D.抗原的量E.抗体的量
2．T细胞的非特异性激活剂包括
A.PHAB.ConAC.PWM
D.抗CD3单抗E.LPS
3．不能用于T细胞功能测定的实验是
A.溶血空斑实验B.皮肤实验
C.MTT法细胞增殖实验D.细胞毒实验
E.琼脂扩散实验
4．细胞因子检测的常用方法有
A.E花环实验B.ELISA法C.PCR法
D.凝集实验E.生物活性测定法
5．检测可溶性抗原可以用
A.直接凝集反应B.酶联免疫吸附实验
C.单向琼脂扩散实验D.协同凝集实验
E.反向间接凝集实验
6．只能定性不能定量的免疫学检测方法是
A.对流免疫电泳B.单向琼脂扩散
C.环状沉淀反应D.ELISA
E.荧光标记法
7．测定人血清IgG含量的方法有：
A.直接凝集反应B.补体结合反应
C.免疫比浊法D.单向琼脂扩散试验
E.免疫电泳
8．抗原抗体反应的特点是：
A.具有特异性B.为分子表面的结合
C.为不可逆结合D.比例适当时出现可见反应
E.结合反应分两阶段进行
9．用已知抗体检测抗原的方法有：
*
A.免疫荧光技术（直接法）B.免疫荧光技术（间接法）
C.ELISA（夹心法）D.ELISA（间接法）
E.反向间接血凝反应
10．细胞免疫功能的测定包括以下哪些
淋巴细胞数量测定
淋巴细胞数量测定
淋巴细胞功能测定
细胞的效应功能测定
E.细胞因子的测定
11．迟发型超敏反应的体内检测方法有哪几种
A.细胞毒试验B.混合淋巴细胞反应
C.皮肤试验D.淋巴细胞转化试验
E.接触性过敏试验
12．淋巴细胞亚群测定常用的方法有：
*
A.免疫荧光法B.流式细胞仪测定
C.酶免疫组化法D.放射免疫法
E.间接凝集法
13．淋巴细胞亚群测定可用于哪些临床疾病的辅助诊断和疗效观察
A.免疫缺陷病B.免疫增殖病
C.自身免疫病D.移植免疫
E.肿瘤
14．混合淋巴细胞反应可用于：
*
A.体外评价B淋巴细胞的功能
B.体外评价T淋巴细胞的功能
C.体内评价T淋巴细胞的功能
D.筛选骨髓移植的供体
E.测定外周血T淋巴细胞的数目
15．参与反向溶血空斑试验的主要试剂有哪些*
A.SPAB.绵羊红细胞
C.抗人Ig的抗体D.单个核细胞
E.补体
16．T淋巴细胞转化试验常用的检测方法有哪些*
A.流式细胞仪法B.形态学方法
C.51Cr释放法D．MTT检测法
E.3H-TdR掺入法
17．细胞因子的生物学活性检测方法有哪些*
A.单克隆抗体检测法B.依赖细胞增殖法
C.靶细胞杀伤法D.细胞因子诱导的产物分析
E.细胞病变抑制法
三、填空题
1．在免疫诊断中抗原抗体反应的基本原理是抗原抗体反应的_________和________。
2．抗原与抗体发生结合反应的物质基础，是抗原的__________与抗体的_________之间的结构互补性。
3．抗原抗体结合力的大小常用________或_______来表示。
4．ABO血型鉴定属于抗原抗体反应中的__________。
5．间接凝集实验是将_____________包被在乳胶颗粒表面，与相应抗体反应出现颗粒物凝集的现象。
6．免疫标记技术是用_______、_________或_______等标记物标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。
7．ELISA的双抗体夹心法是用_____包被固相，再加入______，然后加入_____，最后经显色用于免疫诊断的实验。
四、名词解释
1．抗血清（antiserum）
2．亲合力（avidity）
3．亲和力（affinity）
4．凝集反应（agglutination）
5．沉淀反应（precipitation）
6．单向免疫扩散（singleimmunodiffusion）
7．双向琼脂扩散（doubleimmunodiffusion）
8．免疫电泳（immunoelectrophoresis）
9．免疫比浊（immunonephelometry）
10．疫荧光法（Immunofluorescence）
11．酶联免疫吸附实验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）
12．疫组化技术（immunohistochemistrytechnique）
13．疫印迹（Westernblotting）
五、问答题
1．简述影响抗原抗体反应的主要因素。
2．简述抗原抗体反应的主要特点。
3．什么是免疫标记技术，简述优点和主要标记物。
4．T细胞增殖实验和细胞毒实验各有哪些常用方法
5．简述溶血空斑实验的原理和应用。
六、思考题
1．可用哪些方法定量检测血液或组织中的抗原
2．T细胞增殖实验和细胞毒性实验各有哪些基本方法
3．HIV感染者的诊断和病情监测可用哪些方法为什么
参考答案
一、单项选择题
1．B2．D3．A4．B5．D6．A7．A
8．A9．B10．E11．E12．C13．C14．D15．C41.A
二、多项选择题
1．ABCDE2．ABCD3．AE4．BCE5．BCDE
6．AC
三、填空题
1．特异性、可见性
2．抗原决定基、抗原结合部位
3．亲合力、亲和力
4．直接凝集反应
5．可溶性抗原
6．荧光素、酶、放射性核素
7．已知抗体、待检标本、酶标记抗体
四、名词解释
1．抗血清（antiserum）：
人或动物血清中的抗体具有同种型抗原特异性，将人Ig免疫动物或将动物Ig免疫异种动物，可制备出抗抗体，由此制备的血清称为抗血清。
2．亲合力（avidity）：
一个抗体分子与整个抗原之间的结合强度。
3．亲和力（affinity）：
抗体分子上一个抗原结合部位与相应的抗原决定基之间的结合强度。
4．凝集反应（agglutination）：
细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块。
5．沉淀反应（precipitation）：
血清蛋白质、细菌裂解液或组织浸液等可溶性抗原与相应抗体结合后形成沉淀物。
6．单向免疫扩散（singleimmunodiffusion）：
是将一定量的抗体混于琼脂凝胶中制成琼脂板，在适当位置打孔后将抗原加入孔中扩散，抗原在扩散过程中与板中抗体相遇，形成以抗原孔为中心的沉淀环。
7．双向琼脂扩散（doubleimmunodiffusion）：
是将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中，两者自由向四周扩散并相遇，在比例合适处形成沉淀线。
8．免疫电泳（immunoelectrophoresis）：
是先将待检血清标本作琼脂凝胶电泳，血清中的各蛋白组分被分成不同的区带，然后与电泳方向平行挖一小槽，加入相应的抗血清，与已分成区带的蛋白抗原成分作双向琼脂扩散，在各区带相应位置形成沉淀弧。
9．免疫比浊（immunonephelometry）：
是在一定量的抗体中分别加入递增量的抗原，经一定时间后形成抗原抗体复合物，用浊度计测量反应液体的浊度，并由此推算样品中的抗原含量。
10．免疫荧光法（Immunofluorescence）：
是用荧光素与抗体连接成荧光抗体，再与待检标本中的抗原反应，置荧光显微镜下观察，抗原抗体复合物散发出荧光，借此对标本中的抗原进行鉴定或定位。
11．酶联免疫吸附实验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）：
是用酶标记抗体，并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相载体表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除，最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。
12．免疫组化技术（immunohistochemistrytechnique）：
是用标记物标记的抗体与组织或细胞的抗原反应，结合形态学检查，对抗原做定性、定量、定位检测的技术。
13．免疫印迹（Westernblotting）：
是将凝胶电泳与固相免疫结合，把电泳分区的蛋白质转移至固相载体，再用酶免疫、放射免疫等技术测定这些蛋白，常用于病毒的抗体或抗原检测。
五、问答题
1．简述抗原抗体反应的基本原理和主要特点。
抗原与抗体发生结合反应的物质基础是抗原分子表面的抗原决定基和抗体分子表面的抗原结合部位之间结构的互补性，抗原抗体相互结合，在适宜条件下，出现可见反应。
主要特点有：
（1）抗原抗体间的结合具有高度特异性。
这种特异性是由抗原分子表面的抗原决定基和抗体分子的超变区决定的，抗原抗体之间的互补程度越高，亲和力越高。
（2）抗原抗体的结合为非共价键的可逆结合。
在一定条件下，抗原抗体复合物可以解离，解离后的抗原、抗体性质不发生改变。
（3）抗原和抗体只有在一定浓度范围内，比例适宜的条件下出现肉眼可见反应。
（4）适宜的温度、酸碱度、离子强度等能促进抗原抗体分子的紧密接触，增加分子间引力，促进分子聚合。
2．什么是免疫标记技术，简述其优点。
免疫标记技术是用荧光素、酶或放射性核素等标记物标记抗原或抗体，进行的抗原抗体反应。
主要优点是：
标记物与抗体或抗原连接后不改变抗原、抗体的免疫特性，使抗原抗体反应仍然具有特异性强的特点，另外，还提高了抗原抗体反应的灵敏度，从而能检测出微量的抗原或抗体，还具有反应快速、可定性、可定量，甚至定位等优点。
3．T细胞增殖实验和细胞毒实验各有哪些常用方法并简述其原理和特点
T细胞增殖实验常用3H-TdR掺入法和MTT法。
前者是根据3H-TdR能掺入细胞合成的DNA中，细胞增殖水平越高，掺入的3H-TdR越多，细胞培养结束后，用液体闪烁仪测定样品中的放射活性，用于判断细胞的增殖状况。
该法灵敏可靠，应用广泛，但需特殊仪器，并有放射性污染。
后者是根据细胞增殖时可利用MTT作为细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的底物，形成褐色的甲瓒颗粒并沉淀于细胞内或细胞周围，甲瓒生成量与细胞增殖水平正相关。
MTT法敏感性不如3H-TdR掺入法，但操作简单，无放射性污染。
细胞毒实验常用51Cr释放法、凋亡细胞检查法。
前者是用Na251CrO4，标记靶细胞，若待检效应细胞能杀伤靶细胞，则51Cr从靶细胞内释出，靶细胞被破坏越多，51Cr释放越多，用γ计数仪测定释出的51Cr放射活性，可计算出待检效应细胞的杀伤活性。
后者是根据靶细胞被效应细胞杀伤后，可发生细胞凋亡、DNA断裂的原理，用琼脂糖电泳等方法测定细胞凋亡，用于效应细胞杀伤活性的判断。
4．简述溶血空斑实验的原理和应用。
原理：
将绵羊红细胞、待检B细胞、补体及适量琼脂液混合，倾注平板，抗体形成细胞分泌的抗体与绵羊红细胞表面的抗原结合，在补体参与下发生溶血反应，在琼脂糖平板上形成肉眼可见的分散的溶血空斑，每一个溶血空斑中央含一个抗体形成细胞，因此空斑数目即为抗体形成细胞数。
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