第二章植物组织培养.docx
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第二章植物组织培养
第二章植物组织培养
一、名词解释
1.植物组织培养
2.离体培养（试管培养）
3.植株培养
4.器官培养
5.组织培养
6.细胞培养
7.原生质体培养
8.固体培养
9.液体培养
10.初代培养
11.继代培养
12.光培养
13.暗培养
14.植物细胞的全能性
15.胚性细胞（分生性细胞）
16.分化
17.脱分化
18.愈伤组织
19.再分化
20.体细胞胚
21.植物的再生功能
22.组培快繁技术
23.外植体
24.琼脂
25.抗生素
26.活性炭
27.母液（贮备液）
28.接种
29.原球茎
30.脱毒苗（无病毒苗）
31.指示植物检测（枯斑测定法）
32.指示植物（鉴别寄主）
33.抗原、抗体、抗血清
34.单配法
35.混配法
二、填空
1.植物组织培养由于培养物脱离母株在试管内培养，故又称
或，植物组织培养根据分类依据不同可以划分为不同的类型，其中，根据培养对象可以分为、
、、根据培养对象可分为、根据培养过程可分为
、根据培养条件可分为
。
2.植物细胞的全能性是一种的能力，不管是
在特定的条件下都能表达出来，产生一个完整植株。
3.一个已分化的细胞要表达出其全能性，就要经过
和的过程，这就是植物组织培养所要达到的目的。
4.脱分化后的细胞进行再分化的过程有两种不同的形式，一是
另一种是。
5.植物再生功能的产生是由于
，在自然情况下，许多植物的营养器官和细胞再生困难，主要是由于
、所致。
6.目前植物种质资源的保存有两个问题，一是
另一个是。
7.植物组织培养是在进行，因此对环境条件和设备的要求。
8.厂房必须满足三个基本的需要：
即、
。
9.厂房根据结构和应用范围一般设计为、
、、、
。
10.药品配制间的主要任务是，
洗涤间的主要任务是，培养基制作间的主要任务是缓冲间的主要任务是
无菌操作间的主要任务是
试管苗培养间的主要任务是
试管苗驯化移植间的主要任务是
11.常用的灭菌设备有、、
四种。
12.湿热灭菌设备（高压蒸汽灭菌锅）用于
的灭菌，根据规模大小有、、
等不同规格，根据控制方式分为、、
等三种不同类型。
13.过滤灭菌设备（防细菌滤膜）要求网孔直径为以下，在需要过滤灭菌的液体量大时，常使用，液量小时，可用，主要用于、、
等不耐热物质的灭菌。
14.干热灭菌设备利用的方法进行灭菌，包括
、。
15.其他灭菌设备是利用紫外光波、超声波、臭氧等杀菌，主要用于对和进行消毒。
常用的设备包括、、。
16.常用的接种设备有、、
其中，是植物组织培养最常用、最普及的无菌操作装置。
根据风幕形成的方式可分为和
两种，根据使用方式分为、、
等，根据操作形式分为和。
常用的接种工具有、、
、、、。
是用于剥离茎尖和进行培养物的观察、分析、拍照等，包括、、
、四种。
17.常用的培养设备有、、
。
18.培养架大多由制成，一般设层，最低一层离地高约，其他每层间隔
左右。
19.是用于液体培养时改善培养过程的氧气供应状况。
20.是对于一些对环境条件要求特别严格的培养物。
21.根据培养目的和要求不同，可选用不同类型和规格的培养容器可分为、、
。
22.主要用于外植体静置培养、振荡培养或试管苗继代培养。
优点有
23.主要用于茎尖培养、液体培养。
主要用于继代和生根培养。
主要用于兰科植物的培养。
24.用于称量的设备与用具有、、
、、六种。
其中，
是用于进行琼脂、蔗糖和各种药品的称量，需要有称量和的分析天平，以及称量大量元素、蔗糖和琼脂的等不同精度的天平。
25.环境控制设备与用具有、、
三种。
26.植物组织培养过程中常用的洗涤剂有、
和，其中适用于玻璃器皿和金属类器具洗涤的是。
27.常用的消毒灭菌方法有、。
其前者可以分为、、
后者可以分为、、、
。
28.根据所作用的物体和工作程序可将消毒灭菌操作主要分为
、、。
29.环境灭菌的方法主要有、、
。
植物组织培养中如超净工作台的局部无菌环境采用
灭菌，对于缓冲间、接种间、培养间采用灭菌。
30.组织培养中根据用具种类不同分别采用、
、。
31.干热灭菌是利用进行烘烤灭菌的方法，适用于各种玻璃器皿和器械的灭菌消毒，将烘箱温度控制在
烘烤分，即可达到灭菌效果。
适用于培养基、玻璃器皿、棉塞、布制品及金属用具等得灭菌，一般灭菌掌握在压力下。
32.培养基灭菌一般采用，特殊情况下采用
33.过滤灭菌主要针对的物质。
如赤霉素、生长素、脱落酸、玉米素、部分维生素、多用抗生素和酶，过滤灭菌的原理是
34.叫做外植体，外植体一般采用
灭菌的方法。
35.不同植物种类、外植体类型、取材季节与时间等对灭菌效果有很大影响，一般在灭菌时应先进行实验，确定
、、。
36.配置培养基的目的是人为提供离体培养材料的，
在植物组织培养生产中应根据不同的、
选用不同的培养基。
37.培养基主要有、、
、五大类组成。
配置培养基母液时要用
以确保母液及培养及成分的精确性，大规模生产时可用
。
38.大量元素指的元素，有等。
微量元素指的元素，有等。
39.组织培养中用到的有机化合物有、、
、、五大类。
40.组织培养基中用到的糖类的作用一是二是
使用浓度一般在，在大规模生产时，可用食用的
代替。
41.维生素类化合物在植物细胞中主要以各种的形式参与多种代谢活动，对、等有很好的促进作用。
常用维生素的种类有、、
、、、等七种。
使用浓度是。
42.肌醇又称，作用是，
，，
。
使用浓度一般为。
43.氨基酸的作用是。
常用的有
、、、、
、。
44.天然复合物对有促进作用，对
的作用不明显。
其中使用量最多，效果最大的是，其使用浓度为，主要在兰花组织培养中应用，且对原球茎的增值有明显促进作用的天然复合物是，其用量为
45.植物生长调节物质包括、、
三大类。
常用的生长素类物质作用能力的强弱顺序为。
常用的细胞分裂素类作用能力的强弱顺序是，其中常用的人工合成的、性能稳定的、价格适中的是。
46.细胞分裂素类不溶于水，也不溶于酒精，一般可溶于或。
47.生长调节物质的使用量甚微，浓度一般用表示，一般使用生长素的浓度是，细胞分裂素的浓度为
48.培养基的其他成分有、、
。
在固体培养时，琼脂是最好的，用量在之间。
抗生素的用量在之间。
活性炭的通常使用浓度为。
49.所谓母液是，也称。
母液配制的目的一是，二是
。
50.母液配制的方法有和两种。
配制大量元素母液时用感量的托盘天平称取药品，微量元素母液用感量的分析天平称取药品。
母液保存时放入的冰箱中低温保存，用时再按比例稀释。
51.配制培养基时称取琼脂、蔗糖的量分别为和。
调培养基的PH为，偏碱滴加调整，偏酸滴加
调整。
52.培养基的高压灭菌加压至，稳压时接通电源，继续加压至
开始计时，保压在维持分，此时温度在
。
开锅后贮存于培养基中培养。
53.熬制培养基过程中，先放入，最后加入
。
多数植物适宜的PH在。
54.接种是的过程。
操作过程必须在进行。
55.接种前打开紫外线灯进行环境灭菌，接种人员上工作台后，用檫拭双手，及工作台面。
56.植物组培快繁的流程是、、
、、、、
、。
57.选择适宜的外植体大小是，茎尖分生组织为
茎段上常带个茎节，叶片。
58.组培所需的条件包括、、
、、。
组培温度一般为
，光照主要表现在和方面。
组织培养中多采用光照，光周期最常用的周期是
的光照，的黑暗。
培养室内的湿度要保持，大多数植物适宜的PH在，一般培养基结要求。
59.培养基中由于有无机盐类、蔗糖等化合物，会影响渗透压的变化，通常个大气压对植物生长有促进作用，个大气压对植物生长有阻碍作用，个大气压会使植物生长完全停止，个大气压植物细胞就不能生存。
60.液体培养时应考虑用、、
三种方法。
61.初代培养指。
初代培养建立的无性繁殖系包括、、、
。
62.根据初代培养时发育的方向可分为几种，分别为、
、、。
63.炼苗基质有、、。
草本植物用，木本植物有。
64.炼苗过程中适宜的生根温度为。
65.无病毒苗是指。
66.脱毒方法有、、。
67.热处理的方法有、。
其中适用于休眠器官、剪下的接穗或种植材料的脱毒方法是，
适用于生长期植物材料的脱毒处理。
68.热处理脱毒只对和病毒有效，而对
不起作用。
69.茎尖培养的方法包括、、
、。
其中培养茎尖常采用。
70.影响茎尖培养的因素有、、
其中茎尖大小与脱除效果呈，即剥取茎尖越小，脱出效果。
但茎尖大小与茎尖的成活率呈，
即茎尖越小培养难度，成活率。
一般茎尖切取的大小为且带1---2个叶缘基的茎尖为培养材料。
71.在茎尖培养中，比效果好。
从茎尖的活跃生长的程度上说，一般地，比
效果好。
是目前生产无病毒苗最安全、最重要的一条途径。
72.目前的生产实践中还有、、
、等方法。
73.无病毒植物的检测方法有、、
四种，指示植物一般有两种类型，一种是
，另一种是。
74.无病毒原原种的保存置于的温度条件下离体保存。
75．用于组织培养的菊花主要是，如果为了脱除病毒，则应在解剖镜下剥取mm的茎尖进行培养。
76．菊花诱导培养基中加人细胞分裂素mg／l，生长素mg／l，诱导丛包生芽效果最好。
77．菊花采用和两种方法继代增殖可以获得大量试管苗。
78．菊花热处理脱毒是将病毒植株置于℃条件下，生长2个月，再经脱毒。
79．香石竹组培时，应选取优良的品种，在期，切取健壮植株的
作外植体。
80．香石竹的初代培养以诱导或的方法繁殖快。
81．将香石竹植株放到高温环境处理周，能脱除香石竹花叶病毒、环斑病毒、条斑病毒等。
82．蝴蝶兰是茎性热带兰。
83．通过技术繁育蝴蝶兰种苗，是目前繁殖率最高，种苗质量最优秀的方法。
84．蝴蝶兰用花梗或花梗作外植体，是最合适的外植体取样部位。
85．蝴蝶兰炼苗时，将出瓶的小苗要用将附在根部的培养基洗干净，用洁净、消毒的将根包裹，松紧适宜，放在适宜的条件下培养，l个月后，小苗生长稳定，开始喷施。
86．马铃薯在有根小苗继续扩繁的情况下，培养温度给予昼温℃，夜温的培养条件下，便在试管瓶内形成试管微型薯。
87．马铃薯脱毒苗快速繁殖的方法有、、
。
二、选择题
1.对除去细胞壁原生质体的培养称为
A细胞培养B原生质体培养C器官培养D液体培养
2.对外植体进行的第一次培养称为
A初代培养B继代培养C光培养D固体培养
3.利用植物组织培养法快速繁殖种苗的技术称为
A工厂化生产技术B组培快繁技术C组织培养技术
4.植物组织培养厂房必须满足个基本要求
A1B2C3D5
5.主要用于化学药品的贮藏，称量和溶液配制的是
A药品配制间B洗剂间C缓冲间D无菌操作间
6.缓冲间设计面积一般为m2,应安装用以照射灭菌。
A2---3紫外线灯B1----3电灯
C2---3电灯D1---3紫外线灯
7.主要用于培养基，玻璃器皿及其他可高温灭菌用品的灭菌设备为
A防细菌膜B高压蒸汽灭菌锅（湿热灭菌设备）
C烘箱D酒精灯
8.防细菌膜的网孔直径为um以下
A0.45B0.55C0.35D0.4
9.主要用于赤霉素、玉米素、脱落酸等不耐热物质过滤灭菌的设备为
A高压蒸汽灭菌锅B防细菌滤膜
C烘箱D酒精灯
10.超净工作台根据风幕形式可分为
A水平风、垂直风B单人单面、双人单面
C开放式操作、密封式操作
11.用于分离植物组织时用到的工具是
A尖头镊子B枪型镊子C解剖剪D接种针
12.用于茎尖剥离和愈伤组织转接的工具是
A弯头剪B解剖刀C接种针D切割盘
13.用于剥离茎尖和进行培养物的观察、分析、拍照等时用
A显微镜B放大镜C照相机D录像机
14.培养架大多由制成
A木头B金属
15.用于液体培养时能改善培养过程中氧气供应状况的是
A恒温振荡器B光照培养箱C培养架D空调机
16.主要用于外植体静置培养、振荡培养或试管苗继代培养的容器是
A试管B塑料瓶C三角瓶D果酱瓶
17.主要用于兰科植物培养的培养容器是
A试管B塑料瓶C三角瓶D果酱瓶
18.用于称量大量元素、蔗糖和琼脂的天平为
A分析天平B托盘天平C电子天平
19.用于配置培养基母液时溶解各种化合物的用具是
A烧杯B量筒C容量瓶D移液管
20.用于自动控制培养间培养时间的环境设备是
A空调机B冰箱C光照时控器
21.用于存放各种化学药品的设备是
A药品柜B木箱C纸箱
22.适宜的外植体大小是
A0.2----0.5mmB0.5cm×0.5cmC0.5---1cmD1---2cm
23.植物组织培养中温度一般采用
A23----27B25---35C20----25D23----30
24.组织培养中光照的影响主要表现在
A光质、光强B光强、光照时间（光周期）
C光照时间、光和塑率
25.组织培养中多采用lx的光照
A2000---3000B2000---5000C2000---2500D2500---3000
26.组织培养时最常用的周期是h的光照，h的黑暗。
A16、8B16、3C8、16D16、16
27．组培中一般要求培养室湿度保持在
A60---80％B70—90％C70—80％D80—90％
28.组培中大多数植物适宜的PH在之间，一般皆要求为
A5.6---6.5,5.8B5.6---6.6,5.8C6.5---7.5,5.8D6.6---8.6,6.8
29.组培中培养基的渗透压通常在个大气压时对植物生长有促进作用
A1---2B2个以上C5---6个D6个以上
30.转入生根培养基的生根过程，草本植物大约天，木本植物大约天生根
A7,10---15B7,10C8,15D15,7---8
31.适宜的出瓶炼苗阶段为小植株生出条水平根，每条根长
Cm
A3---5,1—2B1---2,3---5C1---3,2---5D2----5,1---3
32.在植物的试管苗的整个生长过程中，采用恒温培养且温度控制在
A27---30B23---27C20----23D25---27
33.试管苗培养瓶内的空气相对湿度接近
A100％B95％C90％D80---90％
34.炼苗要求将试管苗从培养间转移至驯化温室，不开口自然光下放置
天，然后打开封口材料继续放置天
A7----10,1---2B1---2,7---10C5---10,1---2D7---10,6----8
35.试管苗移栽后要保持适宜的温度、光照条件，适宜的生根温度为
℃
A18---20B20---22C18---25D25---28
36.温汤浸渍处理过程中要求将材料放入℃的温水中浸渍数分钟至数小时
A45---55B40---50C50—55D55---65
37.热处理过程中选择季节时以最好
A春季B夏季C秋季D冬季
38.茎尖培养时一般切取mm带1—2个叶原基的茎尖为培养材料
A0.1---1.0B0.2—0.5C0.1—0.5D0.5---0.8
39.茎尖培养的条件为温度℃光照h光照强度为lx
A25,16,2000B27,6,3000
40.主要用于草本植物和通过汁液传播病毒的鉴定的检测方法为
A汁液涂抹法B嫁接法C热处理法D纸桥法
41.对于木本多年生果树及草莓、甘薯等无性繁殖的草本植物，采取
检测病毒
A汁液涂抹法B嫁接法C热处理法D纸桥法
42.采用方法可直接观察有无病毒颗粒的存在，并观察到有关病毒颗粒的大小，形状及结构。
A电子显微镜检测法B嫁接法C抗血清检测法D直观检测法
43.保存无病毒原种苗时，网纱以目为好
A400B300C200D500
44.试管保存无病毒原种时，应置于℃下离体保存
A1---9B11---19C2---8D3---6
三、判断
（）1.植物的组织培养又称试管培养或离体培养，是由于培养物脱离母株。
（）2.对除去细胞壁的原生质体的培养称为细胞培养。
（）3.初代培养是对外植体进行的前两次培养。
（）4.光培养和暗培养过程中都必须有光照的刺激。
（）5.植物细胞的全能性是一种潜在的能力。
（）6.受精卵或合子都具有全能性。
（）7.分化的结果导致胚性细胞的分裂能力丧失，最终形成植物体。
（）8.已分化的细胞恢复分裂转变为分生性状态，并形成愈伤组织的过程称为“再分化”。
（）9.将一个已经失去分裂能力，处于分化成熟和分散静止状态的胚性细胞置于特定的培养基上，首先发生的变化是恢复到分生性状态。
（）10.一个已经脱分化的细胞如果条件合适，可以保持旺盛的分裂状态。
（）11.一个已分化的细胞要表达出其全能性，要经过再分化的过程。
（）12.由愈伤组织不同部位分别独立形成不定芽和不定根的形式称为胚形态建成。
（）13.在某些情况下，再分化可以直接发生在脱分化的细胞中，其间需要插入一个愈伤组织阶段，才能分化出芽和根。
（）14.植物再生功能产生的主要原因是由于植物受伤的组织产生了创伤激素。
（）15.在自然情况下，许多植物的营养器官和细胞的再生困难，主要是由内源激素调整缓慢，不全面或外界条件不适宜所致。
（）16.植物组织培养技术能使植物的再生功能在更大范围内充分的表现。
（）17.植物组织培养过程优化，繁殖率高。
（）18.采用植物组织培养技术繁殖种苗，可以实现育苗的工厂化生产。
（）19.无病毒植株具有抗病毒的能力。
（）20.利用植物组织培养技术可以解决种质资源保存过程中资源衰竭和保持耗资大，易受损失的问题。
（）21.植物组织培养技术对环境条件和设施设备无要求。
（）22.进行植物组织培养的工厂化生产时，要事先做好计划和设计。
（）23.植物组织培养厂房设计时应按自然工作程序先后合理布局，避免生产环节倒排。
（）24.植物组织培养厂房必须满足2个基本需求。
（）25.植物组织培养厂址最好选在常年主风向的下风方向。
（）26.植物组织培养厂房一般设计为7个操作间。
（）27.药品配制间主要用于化学药品的贮藏、称量及容器的洗涤工作。
（）28.药品配制间设计时要求磁力搅拌器与电子天平同放一个台面。
（）29.药品配制间中不需要配制普通冰箱。
（）30.外植体的预处理与清洗，试管苗的出瓶清洗与整理等工作需要在洗涤间进行。
（）31.洗涤间设计时要求方便多人同时操作，配大型水槽及晾干台。
（）32.烘箱、周转箱等设备应配置在缓冲间。
（）33.培养基的制作间主要负责培养基的配置、分装、包扎和高压灭菌等工作。
（）34.培养基的制作间在设计时要求在灭菌锅的下方墙壁上设置换气窗，利于通风排气。
（）35.缓冲间设计时要求3---5平方米。
（）36.缓冲间中设置的紫外线灯主要用于照射灭菌。
（）37.无菌操作间一般要求7---8平方米，需配置推拉门，紫外线灯及一小型空调。
（）38.操作间需配置医用小推车。
（）39.主要用于接种材料培养生长的是试管苗培养间。
（）40.试管苗驯化移植间通常在日光温室内进行，要求能够控温调湿，空光通风，控菌防虫。
（）41.高压蒸汽灭菌主要用于培养基，玻璃器皿及其他高温灭菌用品的灭菌。
（）42.湿热灭菌设备根据规模大小可分为手动控制，半自动控制和全自动控制等不同类型。
（）43.防细菌滤膜的网孔直径为0.55微米以下。
（）44.过滤灭菌设备主要用于赤霉素、玉米素、脱落酸等不耐热物质的灭菌。
（）45.接种器械灭菌器属于热灭菌设备。
（）46.紫外灯、超声波清洗器、臭氧发生器主要用于对空气和物质表面的消毒灭菌。
（）47.超净工作台是植物组织培养最常用、最普及的无菌操作装置。
（）48.超净工作台根据使用方式可分为：
水平风和垂直风。
（）49.枪型镊子主要用于分离植物组织。
（）50.用于植物组织培养基中茎尖剥离和培养物观察、分析拍照的是显微镜。
（）51.培养架多由金属制成。
（）52.恒温振荡器主要用于固体培养时改善培养过程中的氧气供应状况。
（）53.光照培养箱主要用于一些对环境条件要求特别严格的培养物。
（）54.培养器皿要求酸性透光度好玻璃制成。
（）55.主要用于茎尖及液体培养的是果酱瓶。
（）56.植物组织培养过程中微量元素及植物激素称量时用托盘天平。
（）57.主要用于培养基母液定容的是烧杯。
（）58.光照时控器主要用于自动控制培养间的光照强度。
（）59.磁力搅拌器主要用于易溶物质的搅拌。
（）60.恒温水浴锅属于蒸馏设备。
（）61.用于培养基PH值测定时多用PH试纸。
（）62.植物组织培养工作的基本要求是掌握组织培养的工作程序和基本操作技术。
（）63.植物组织培养过程中的各种灭菌方法的有效作用时间都是以材料或用具的作用时间为前提的。
（）64.铬酸洗液的颜色以棕红色为好，变青褐色则失效。
（）65.铬酸洗液的颜色以棕红色为好，变青褐色则失效。
（）66.配制铬酸洗液时应将重铬酸钾溶液注入浓硫酸中。
（）67.可以用手直接接触铬酸洗液。
（）68.对于新购回的玻璃器皿无需洗涤即可使用。
（）69.对于已被霉菌等杂菌污染的器皿应先进行高压蒸汽灭菌在清洗灭菌。
（）70.清洗干净的载玻片，盖玻片应放在95℅的乙醇中备用。
（）71.对新购置的金属器皿应先去油脂，再擦净备用。
（）72.对于已使用过的金属器皿应先用洗衣粉水涮洗，再用酒精擦拭备用。
（）73.用毛刷刷洗器皿时应沿两个方向（瓶壁上下圆周旋转）刷洗。
（）7
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