分子生物学检验技术课程标准.docx

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分子生物学检验技术课程标准

《分子生物学检验技术》课程标准

课程编号：

17050021

总学时数：

72学时（理论40课时，实验32）

学分：

4.5分

一、课程性质、目的与要求

分子生物学检验技术是医学检验的专业课之一。

本大纲为本科医学检验专业学生教学

的指导性纲要，通过对该课程的学习，掌握分子生物学检验技术的基本内容（概念、术语、原理）、基本方法（PCR核酸杂交、DNA重组、芯片技术等）以及在临床实验诊断中的应用。

对分子诊断学的发展动态有所了解。

二、本课程的基本内容

第一章绪论2课时

（一）教学目的与要求

1、熟悉分子生物学检验技术的历史、发展趋势

2、掌握基因、单基因遗传病和多基因遗传病的概念

3、掌握分子生物学检验技术在临床实验诊断中的五个应用领域

（二）教学的重点与难点

1、重点：

基因、单基因遗传病和多基因遗传病的概念

2、难点：

分子生物学检验技术在临床实验诊断中的应用

（三）课时安排：

2学时

（四）主要内容

第一节分子诊断学的概念、任务和特点（0.4）课时

第二节分子诊断学的发展简史（0.3）课时

第三节分子诊断的基本策略及其在医学中的应用

（1）课时

第四节展望（0.3）课时

第二章基因与基因组6课时

（一）教学目的与要求

1、掌握基因与基因组的概念

2、熟悉基因组的结构特征

3、掌握质粒的概念类型及一般性质

4、掌握转位因子的概念、类型及转位的遗传效应

5、熟悉DNA病毒基因组的总体特征

6、掌握真核生物基因组的特点，包括细胞核基因组和细胞质基因组结构和功能，单顺反子、短列基因、

多基因家族、多态性、基因重叠的概念，重复序列的分类

7、掌握基因结构异常的概念、类型；掌握端粒的概念、结构特点及主要作用，端粒酶组成、特点和作

用，端粒酶活性测定及其临床意义

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）生物基因组的结构特征；基因与基因组的概念

（2）质粒的概念、类型及一般性质；单顺反子、短列基因、多基因家族、多态性、基因重叠

的概念，重复序列的分类

（3）基因结构异常的概念、类型；

2、难点：

转位因子的概念、类型及转位的遗传效应；多基因家族、多态性、基因重叠的概念，重复序

列的分类

（三）课时安排：

6课时

（四）主要内容

第一节基因与基因组概论

1、基因的概念及其发展

2、基因组与C值矛盾

3、基因组学及其意义

第二节真核生物基因组

1、真核生物基因组的结构与功能特点

2、人类基因组计划

3、人类基因组多样性

第三节原核生物基因组

1、原核生物基因组的一般特点

2、质粒

3、转座基因

第四节病毒基因组

1、病毒基因组的核酸类型

2、病毒基因组的大小及碱基组成

3、病毒基因组的结构与功能特点

第三章分子克隆

（一）教学目的与要求

1、掌握常用的工具酶，熟悉DNAT用的重组载体

（1）课时

（2）课时

（2）课时

（1）课时

6课时

2、了解DNAM组与鉴定，了解外源基因的蛋白表达

3、掌握DNA序列测定的原理

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）常用的工具酶的用途

（2）DN附列测定的原理

2、难点：

（1）DNA^列测定的原理

（2）DNAt组与鉴定，外源基因的蛋白表达

（三）课时安排：

6课时

（四）主要内容

第一节工具酶

（2）课时

1、限制性核酸内切酶

2、DN咪合酶

3、DNAI接酶

4、碱性磷酸酶

5、T4多核甘酸激酶

6、核酸酶Si

第二节载体

（1）课时

1、克隆载体

2、表达载体

3、穿梭载体

第三节分子克隆的基本步骤

（2）课时

1、目的基因的获取

2、载体的选择

3、目的基因和载体的连接

4、将重组DNAt入受体细胞

5、重组体的筛选和鉴定

第四节克隆基因的表达

（1）课时

1、原核生物基因表达的特点

2、真核生物基因表达的特点

3、提高克隆基因表达效率的途径

第四章核酸分子杂交技术4课时

（一）教学目的与要求

1、掌握核酸分子杂交的基本原理

2、掌握核酸杂交中的基本概念：

探针、变性、复性、融解温度

3、掌握核酸分子杂交技术的技术要点和影响杂交的主要因素

4、了解核酸分子杂交的方法学评价及其应用

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）核酸分子杂交的基本原理

（2）核酸杂交中的基本概念：

探针、变性、复性、融解温度

（3）核酸分子杂交技术的技术要点和影响杂交的主要因素

2、难点：

核酸分子杂交技术的技术要点和影响杂交的主要因素

（三）课时安排：

4课时

（四）主要内容

第一节核酸分子杂交的基本原理

（1）课时

1、核酸变性

2、核酸复性

第二节核酸探针（2课时）

1、核酸探针的种类

2、核酸探针的标记

3、核酸探针的纯化

4、核酸探针的检测

第三节核酸分子杂交的影响因素

（1）课时

第四节核酸分子杂交的类型

1、固相核酸分子杂交类型

2、液相核酸分子杂交

第五章核酸扩增技术6课时

（一）教学目的与要求

1、掌握PCRRT-PCR的基本原理，及PCR勺反应体系和条件

2、了解以PCM基础的相关技术

3、熟悉PCRT物的检测

4、熟悉PCR技术在临床基因诊断中的应用

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）PCRRT-PCR勺基本原理，及PCR的反应体系和条件

（2）PCRa术在临床基因诊断中的应用

2、难点：

PCR勺反应体系和条件选择与控制

（三）课时安排：

6课时

（四）主要内容

第一节聚合酶链反应技术

（2）课时

1、PC破术原理

2、PC或应体系及其优化

3、扩增产物检测及分析

4、常见问题原因分析与处理

5、PCR行生技术

第二节荧光定量PC叱术

（2）课时

1、荧光定量PC破术基本原理

2、荧光定量PC破术

3、荧光定量PCR1定的数据处理

4、实时荧光定量PCR技术的应用

第三节其他扩增技术

（1）课时

1、基于转录扩增技术

2、探针扩增技术

3、信号扩增技术

第四节临床基因扩增检验实验室的管理与质量控制

（1）课时

1、临床基因扩增实验室的管理与质量控制

2、操作人员培训

3、临床基因扩增实验室的规范化设置

第六章DNA序列测定3课时

（一）教学目的与要求

1、掌握Sanger双脱氧链末端终止法的基本原理及反应条件

2、熟悉化学降解法的基本原理

3、了解其他测序方法

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）Sanger双脱氧链末端终止法基本原理

（2）化学降解法的基本原理

2、难点：

Sanger双脱氧链末端终止法基本原理

（三）课时安排：

3课时

（四）主要内容

第一节Sanger双脱氧链末端终止法

（2）课时

1、测序原理

2、测序体系

3、方法特点

（1）课时

第二节Maxam-Gilbert化学降解法

1、测序原理

2、测序体系

3、方法特点

第三节其他测序技术（自学）

第四节自动化测序（自学）

第八章生物芯片技术与应用

（一）教学目的与要求

1、掌握生物芯片的概念、分类

2、熟悉DNA芯片的制备过程及应用

3、了解蛋白质芯片和缩微芯片技术

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）生物芯片的概念、分类

（2）DNAK片的杂交与检测应用

2、难点：

DNAK片的制备过程及检测原理

（三）课时安排：

2课时

（四）主要内容

第一节基因芯片

1、芯片微阵列制备

2、样品的制备及标记

3、样品与基因芯片的杂交

4、杂交结果的检测及分析

第二节蛋白质芯片

1、蛋白质芯片的原理

2、蛋白质芯片的分类

3、蛋白质芯片的制备及分析

4、蛋白质芯片的应用

第三节组织芯片

1、组织芯片的分类

2、组织芯片的制备

3、组织芯片的应用

第四节液相芯片

1、液相芯片检测技术的原理及特点

2、液相芯片检测技术的应用

课时

（1）课时

（0.3）课时

（0.0.4）课时

（0.3）课时

第章蛋白质组学技术

3学时

（一）教学目的与要求

（1.5）课时

（1.0）课时

（0.5）课时

课时

1、熟悉蛋白质组学研究基本技术

2、熟悉蛋白质问相互作用的研究技术

3、了解蛋白质组学的生物信息学分析

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）双向凝胶电泳技术、蛋白质芯片技术

（2）酵母双杂交技术

2、难点：

酵母双杂交技术

（三）课时安排：

3课时

（四）主要内容

第一节蛋白质组学研究基本技术

1、双向凝胶电泳技术

2、生物质谱技术

3、蛋白质芯片技术

4、蛋白质印迹法

第二节蛋白质问相互作用的研究技术

1、酵母双杂交技术

2、免疫共沉淀技术

第三节蛋白质组学的生物信息学分析

1、蛋白质定性鉴定

2、蛋白质翻译后修饰分析

第三章核酸的分离与纯化4

（一）教学目的与要求

1、掌握核酸的分离与纯化的设计、原则和保持核酸完整性的方法

2、熟悉核酸分离与纯化的技术路线，核酸浓度、纯度和完整性的鉴定的原理与方法

3、掌握DNA提取和纯化的方法原理及其应用

4、熟悉质粒DN月由提的方法及应用

5、掌握总RNA勺分离与纯化的方法原理及应用，mRNA勺分离与纯化的方法原理

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）核酸的分离与纯化的设计、原则和保持核酸完整性的方法

（2）核酸浓度、纯度和完整性鉴定的原理与方法

（3）真核生物基因组DN窗口mRNA勺分离与纯化的方法原理

2、难点：

（1）保持核酸完整性的方法

（2）质粒DNA勺提取和RNA的分离与纯化

（三）课时安排：

4课时

（四）主要内容

第一节核酸的分离与纯化的设计、原则

（1）课时

第二节DNA提取和纯化的方法原理及其应用

（1）课时

第三节质粒DNAtt提的方法及应用

（1）课时

第四节总RNAMmRNA勺分离与纯化的方法原理

（1）课时

第十章感染性疾病的分子诊断4课时

（一）教学目的与要求

1、掌握病毒的基因检测、细菌的基因检测、衣原体的基因检测、支原体的基因检测

2、熟悉梅毒螺旋体的基因检测、真菌的基因检测

（二）教学的重点与难点

1、重点：

（1）病毒的基因检测

（2）细菌的基因检测

（3）衣原体的基因检测、支原体的基因检测

（4）梅毒螺旋体的基因检测

2、难点：

（1）病毒的基因检测与应用

（2）细菌的基因检测与应用

（三）课时安排：

4课时

（四）主要内容

第一节病毒的基因检测

（1）课时

1、乙型肝炎病毒

2、单纯疱疹病毒

3、风疹病毒

4、巨细胞病毒

5、人类免疫缺陷病毒

第二节细菌的基因检测

（1）课时

1、结核分支杆菌

2、淋病奈瑟菌

3、O157型大肠埃希菌

4、幽门螺旋杆菌

5、细菌耐药基因的检测

第三节衣原体的基因检测（0.5）课时

第四节支原体的基因检测（0.5）课时

第五节梅毒螺旋体的基因检测

（1）课时

第六节原虫的基因检测（自学）

第七节真菌的基因检测（自学）

、教学方法

以教师讲授为主，辅以多媒体教学手段，并结合学生的练习与实验。

四、成绩考核方式

本课程成绩考核由平时成绩、实验成绩和理论考试成绩组成。

平时成绩占10%包括到课情况、课

堂提问等；实验成绩20%理论考试占70%课程结束时进行。

五、教材与主要参考书目

（一）教材

李伟，黄彬主编《分子诊断学》，中国医药科技出版社，第3版，2015年

（二）主要参考书目

1、《分子诊断学》，中国医药科技出版社，第2版，2010年

2、郑芳、徐克前、张纯洁主编.分子生物学检验技术学习与考试指导.中国协和医科大学出版社.2005

3、傅桂莲主编.分子生物学检验技术.第二版.人民卫生出版社.2006