江苏专用生物高考二轮复习专题提升练 专题八 生物技术实践.docx

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江苏专用生物高考二轮复习专题提升练专题八生物技术实践

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专题提升练（七）

专题八　生物技术实践

（45分钟,100分）

一、单项选择题（包括6题,每题4分,共24分。

每题只有一个选项符合题意。

）

1.（2014·徐州质检）在果酒、果醋和腐乳制作中,都要防止微生物污染,下列有关叙述正确的是　（　　）

A.果醋发酵阶段应封闭充气口,防止杂菌进入

B.腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的酒精以抑制细菌的增殖

C.利用自然菌种发酵果酒时,将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌

D.将长满毛霉的豆腐放在瓶中,并逐层加盐,接近瓶口部分的盐要铺薄一些

【解析】选B。

果醋发酵时醋酸菌进行有氧呼吸,所以发酵阶段应开放充气口,防止杂菌进入,A项错误;腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的酒精抑制细菌增殖,B项正确;利用自然菌种发酵果酒时,不能将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌,以保证酵母菌的活性,C项错误;将长满毛霉的豆腐放在瓶中,并逐层加盐,接近瓶口部分的盐要铺厚一些,以防止杂菌污染,D项错误。

2.（2014·淮安三模）利用如图装置制作果酒和果醋,下列叙述正确的是　（　　）

A.制作果酒时应关闭阀b,适时打开阀a几秒钟

B.制作果酒时如果关闭阀a,打开阀b,会导致爆瓶

C.制作果醋时需打开阀a通气,打开阀b排气

D.制作果醋时把发酵装置放到25℃环境中比较适宜

【解题指导】解答本题的关键:

（1）通过读图,准确把握阀门开闭导致的结果。

（2）准确把握果酒制作和果醋制作中微生物的代谢方式。

【解析】选A。

图示装置中,阀a控制排气,阀b控制进气,所以制作果酒时应关闭阀b,适时打开阀a几秒种以排出产生的气体,A项正确;如果关闭阀a,打开阀b,产生的气体不能排出,会使发酵液从右侧导管排出,不会导致爆瓶,B项错误;制作果醋时,打开阀a是为了排气,打开阀b是为了通气,C项错误;制作果醋时发酵装置应放到30～35℃环境中比较适宜,D项错误。

【易错提醒】果酒和果醋制作中的注意事项

（1）酿酒和酿醋所利用的微生物不同:

前者为酵母菌——真核生物;后者为醋酸菌——原核生物。

二者本质区别是有无以核膜为界限的细胞核。

（2）制作果酒使用的葡萄应先冲洗,再除去枝梗,不能反过来,以免除去枝梗时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会。

对于果酒的自然发酵,冲洗不要反复进行,以免使酵母菌数量减少,发酵周期延长,产生的果酒中酒精含量下降。

（3）酵母菌进行有氧呼吸时,产生能量多,可大量繁殖;进行无氧呼吸时,产生能量少,仅能满足自身代谢,基本不繁殖;所以利用酵母菌进行工业生产时应先进行通气再密封。

（4）防止发酵液被污染。

榨汁机要清洗干净并晾干,发酵瓶要清洗干净并用体积分数为70%的酒精消毒;装入葡萄汁后要封闭充气口。

3.（2014·南京三模）下列有关微生物培养的说法,正确的是　（　　）

A.制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板

B.分离能分解纤维素的细菌,要以纤维素作为培养基中唯一碳源

C.配制培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性

D.在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌

【解析】选B。

制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,A项错误;分离能分解纤维素的细菌,要以纤维素作为培养基中唯一碳源,B项正确;配制培养不同微生物的培养基时都要将pH调到该种微生物需要的最适pH,C项错误;在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌,D项错误。

4.（2014·徐州质检）微生物培养是微生物工程中的基础技术。

下列相关叙述正确的是　（　　）

A.培养基中并不都必须添加碳源或氮源

B.平板划线法常用于微生物的分离与计数

C.病毒和细菌的培养基成分基本相同

D.配制牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后还需调pH

【解析】选A。

能利用空气中的碳源或氮源的微生物,其培养基中不必添加碳源或氮源,A项正确;稀释涂布平板法常用于微生物的分离与计数,B项错误;培养病毒要用活的宿主细胞,培养细菌要用普通培养基,C项错误;牛肉膏蛋白胨培养基配制的步骤为称量、溶化、调pH、过滤、分装、加塞、包扎、灭菌等,D项错误。

5.下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤,下列说法错误的是　（　　）

A.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行

B.步骤①中待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖

C.步骤③中,每次划线前后都需要对接种环进行灼烧处理

D.划线接种结束后,将图④平板倒置后放入培养箱中培养

【解析】选B。

图中①②③分别为倒平板、蘸取菌液、平板划线操作,均应在酒精灯的火焰旁进行,A项正确。

倒平板时应用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,B项不正确。

平板划线操作每次划线前后都需要对接种环进行灼烧处理,C项正确。

划线接种结束后,应将平板倒置后放入培养箱中培养,D项正确。

6.有关加酶洗衣粉使用注意事项叙述正确的是　（　　）

①蛋白质类织物不能用加酶洗衣粉来洗涤

②加酶洗衣粉使用的水温一般在50℃以下

③加酶洗衣粉不宜存放太久,加酶洗衣粉有保质期

④碱性蛋白酶洗衣粉会分解人体皮肤表面蛋白质,而使人患有过敏性皮质、湿疹等,因此,应避免与这类洗衣粉长时间地接触

A.①②　　B.②③④　C.①③④　D.①②③④

【解析】选D。

加酶洗衣粉一般有碱性蛋白酶,能将蛋白质类织物及皮肤表面蛋白质分解;酶的活性受温度等影响,一般酶的活性在35℃～50℃最高,高温会破坏酶的结构,使酶的活性丧失;酶存放太久,也会使酶丧失活性,所以加酶洗衣粉有保质期。

二、多项选择题（包括3题,每题6分,共18分。

每题不止一个选项符合题意。

）

7.（2014·苏州二模）下列生物技术或实验中,涉及无菌操作技术的是　（　　）

A.果酒的制作　　　　　B.纯化大肠杆菌

C.菊花的组织培养D.菊花的扦插繁殖

【解析】选B、C。

果酒制作中没有严格的无菌操作,发酵产生的酒精可以防止杂菌的入侵,A错误;纯化大肠杆菌时所用到的器材都应该严格灭菌,整个过程也应该严格遵循无菌操作技术,以防止杂菌的污染影响大肠杆菌的纯度,B正确;菊花的组织培养中也应该严格灭菌,才能得到无毒苗,C正确;菊花的扦插繁殖中没有涉及无菌操作技术,D错误。

8.（2014·徐州三模）下列有关实验的叙述正确的是　（　　）

A.果醋发酵阶段封闭充气口,防止杂菌进入

B.腐乳制作过程中,前期发酵温度过低,腐乳“皮”不易形成

C.研究人类某遗传病的发病率,在人群中随机取样调查

D.酵母菌计数时,应先盖上盖玻片再用滴管吸取培养液,从盖玻片边缘滴入计数室

【解析】选B、C、D。

果醋发酵阶段需保持通气,为醋酸菌提供充足的氧气,有利于醋酸的生成,A项错误;腐乳制作中,腐乳的“皮”主要是毛霉,若前期温度过低则不利于毛霉的生长,则“皮”不易形成,B项正确;调查发病率是面向全体人群随机取样调查,而调查遗传方式则是在患者家系中进行,C项正确;酵母菌计数时,将酵母菌悬液摇匀,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多）,让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区,勿产生气泡,并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。

也可以将菌悬液直接滴加在计数区上,不要使计数区两边平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后造成计数区深度的升高,然后加盖盖玻片（勿产生气泡）,D项正确。

9.下列有关叙述,错误的是　（　　）

A.利用甲基绿染色可明显观察到DNA的分子结构

B.利用凝胶色谱法可分离相对分子质量不同的蛋白质

C.利用无水乙醇或丙酮可提取叶绿体中的色素

D.利用平板划线法可对细菌进行分离和计数

【解析】选A、D。

甲基绿能够使DNA着色,从而可以观察到DNA在细胞中的分布,但是不能观察到DNA的分子结构,A项不正确。

凝胶色谱法是根据蛋白质的相对分子质量大小差异分离蛋白质分子的方法,B项正确。

无水乙醇和丙酮均为有机溶剂,均可用于叶绿体中色素的提取,C项正确。

平板划线法和稀释涂布平板法均能将菌种稀释分散到培养基的表面,因此均可用于对细菌的分离,但是平板划线法不能用于细菌的计数,D项不正确。

三、非选择题（包括3题,共58分）

10.（18分）（2014·南京三模）酵母菌是生物科学研究中一种重要的生物材料,如图所示,请回答有关问题:

（1）在①中,酵母菌与醋酸菌的共同点是　。

（2）在②③的实验中,如何测定酵母菌有氧呼吸无酒精产生,而进行无氧呼吸过程中有酒精产生?

测定步骤如下,请补全。

取3支洁净的试管编号为A、B、C,在A、B两支试管中分别加入2mL有氧呼吸、无氧呼吸的发酵液,在C试管中加入　　　　做对照。

在3支试管中分别滴加0.5mL酸性重铬酸钾溶液并轻轻振荡,观察溶液是否变色。

（3）在④的实验中,如要连续7天测定恒定体积和浓度的培养液中酵母菌种群数量的变化,需要用7支试管来培养并持续分别测定的原因是　。

其中操作正确的有　　　　（填下列操作的序号）。

A.将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的试管中,在适宜条件下培养

B.静置一段时间后,用吸管从试管中吸取培养液

C.在血细胞（球）计数板中央滴一滴培养液,盖上盖玻片

D.用滤纸吸除血细胞（球）计数板边缘多余培养液

E.将计数板放在载物台中央,待酵母菌沉降到计数室底部,在显微镜下观察、计数

（4）在制作葡萄酒的过程中,假设某同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开,该错误操作是 　。

（5）在⑧操作中最关键的步骤是　。

【解析】

（1）酵母菌是真核生物,醋酸菌是原核生物,共同点是都有细胞壁、细胞膜、细胞质和核糖体。

（2）由于A、B两支试管中分别加入2mL有氧呼吸、无氧呼吸的发酵液,C试管中应加入2mL酒精溶液做对照;酸性重铬酸钾溶液可以用来鉴定酒精,观察溶液是否变成灰绿色。

（3）调查酵母菌种群数量的变化实验中,用7支试管来培养并持续分别测定的原因是避免前一次吸取酵母菌培养液对以后测定酵母菌数量的影响;培养酵母菌时,将适量干酵母放入有一定浓度的葡萄糖溶液的试管中,置于适宜条件下培养,故A项正确;每次吸取培养液时,要振荡均匀后再吸取,故B项错误;抽样检测法步骤是:

先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,故C项错误,D项正确;将计数板放在载物台中央,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后计数,故E项正确。

（4）制作葡萄酒时,由于酵母菌进行无氧呼吸产生二氧化碳,因此瓶中压强增大,发酵过程中需要及时排气,否则发酵瓶瓶塞可能被冲开。

（5）⑧为固定化细胞技术,最关键的是海藻酸钠溶液的配制。

答案:

（1）都有细胞壁、细胞膜、细胞质、核糖体

（2）2mL酒精

（3）避免了前一次吸取酵母菌培养液对以后测定酵母菌数量的影响　A、D、E　

（4）未及时排气

（5）海藻酸钠溶液的配制

11.（20分）（2014·南京师大附中三模）烧伤病人容易感染绿脓杆菌,引起化脓性感染,比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。

临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。

实验时,从病人身上获取少量样本,按照一定的实验步骤操作,以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。

（1）获取绿脓杆菌单菌落:

配制适于绿脓杆菌生长的培养基,培养基中的营养成分一般含有　　　　、氮源、生长因子、水和无机盐,调节pH至7,灭菌处理,待培养基冷却至50℃时,在　　　　附近倒平板。

经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。

（2）检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:

取该单菌落适当稀释,用　　　　法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板。

将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置,适宜条件下培养一段时间,结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈,这说明绿脓杆菌对上述抗生素　　　　;含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,这说明　　　　　　　　　　　　;含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,请推测此菌落产生的可能原因:

一是　　　　　　　　　,二是　　　　　　　　。

（3）根据上述实验结果,为达到抗绿脓杆菌的目的,对于该患者来说最好选用抗生素　　　　。

【解析】

（1）培养绿脓杆菌的培养基中营养成分一般含有碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。

接种时要进行无菌操作,需待培养基冷却至50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板。

（2）检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性:

应取该单菌落适当稀释,用涂布平板法接种于固体培养基表面,使其均匀生长,布满平板。

将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置,如果绿脓杆菌对上述抗生素敏感,含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈。

含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小,说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱;含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小,且比阿培南透明圈中出现了一个菌落,可能原因是杂菌污染或抗比阿培南的绿脓杆菌形成的菌落。

（3）绿脓杆菌对美罗培南敏感,对于该患者来说最好选用抗生素美罗培南。

答案:

（1）碳源　酒精灯火焰

（2）涂布平板　敏感　绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱　杂菌污染　抗比阿培南的绿脓杆菌（或绿脓杆菌产生耐药性突变）形成的菌落

（3）美罗培南

12.（20分）（2014·临沂一模）红茶菌液是一种传统的活菌饮料,能帮助消化,治疗多种胃病。

请根据制作流程回答问题:

（1）红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生体,可以用　　　　　　　　　

法分离纯化得到不同的菌种。

在接种活菌之前要将红茶糖液先煮沸,目的是　　　　　　　　　,然后冷却,以防止　。

（2）制备固定化酵母细胞时,首先要使酵母细胞处于　　　　　　　　　状态。

若在培养液中加入酸性的重铬酸钾溶液后,呈现　　　　　　　,证明已经产生酒精。

（3）酵母细胞中蛋白质的提取和分离一般分为样品处理、粗分离、纯化和

　　　　　　　　　四步。

为了准确模拟生物体内的过程,保持细胞内外的pH一致,在样品处理的透析阶段,应将酵母蛋白溶液放入pH较低的　　　　　　　

中。

在装填凝胶柱时,不得有气泡存在,原因是气泡会搅乱洗脱液中　　　　　,降低分离效果。

（4）当　　　　　　　、糖源都充足时,醋酸菌将培养液中的糖分解为醋酸;在利用乳酸菌制备泡菜时,需要测定亚硝酸盐的含量,在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与　　　　　　　　发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成

　　　　　　色染料。

【解析】

（1）微生物的纯化技术包括稀释涂布平板法和平板划线法。

煮沸红茶糖液的目的是杀灭糖液中的杂菌,糖液冷却后才能接种的目的是防止高温杀死菌种。

（2）若利用固定化酵母菌发酵产生酒精,制备固定化酵母细胞时先要使酵母细胞活化。

酒精发酵产生的酒精可与酸性的重铬酸钾溶液反应,呈现灰绿色。

（3）蛋白质的提取和分离的一般步骤包括:

样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定。

为了维持蛋白质的正常形态结构,应使用缓冲液作为实验的溶剂。

用凝胶色谱法分离蛋白质,装填凝胶柱时不能产生气泡,否则气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果。

（4）醋酸发酵为有氧发酵,因此发酵条件为氧气充足。

制作泡菜的过程中会产生对人体有害的物质——亚硝酸盐,检测的方法是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,其产物再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

答案:

（1）稀释涂布平板（或平板划线）　杀灭培养液中的杂菌（或杀灭培养液中的微生物）　高温杀死红茶菌　

（2）活化　灰绿色

（3）纯度鉴定　缓冲液　蛋白质的洗脱次序

（4）氧气　对氨基苯磺酸　玫瑰红

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