第6章化妆品卫生化学检验2.ppt

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化妆品检验与安全性评价,安康营养与食品卫生学教研室,化妆品检验,第六章化妆品卫生化学检验,第一节概述第二节重金属的检验第三节防晒剂的检验第四节防腐剂的检验第五节美白祛斑成分的检验第六节发用化妆品禁用及限用物质检验第七节化妆品香精中香料成分的检验第八节化妆品中其他禁限用物质的检验,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,一、紫外线辐射及其对人体皮肤的损害二、防晒剂及其分类三、防晒剂的检验,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,一、紫外线辐射及其对人体皮肤的损害,阳光是美容的“朋友”，可加速皮肤血液循环，增加皮肤中黑色素的含量，保护皮肤，促使皮肤中VD3生成，有利于钙吸收。

同时，太阳光中的紫外线辐射对人体皮肤而言又是一种非常显著的环境因子。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,太阳辐射光谱,波长,-射线,X-射线,紫外线,可见光,红外线,微波,无线电波,组成太阳光谱,太阳光谱中，波长不同，产生的生物学效应也不一样,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,一、紫外线辐射及其对人体皮肤的损害,长时间暴晒，阳光就是美容的“敌人”，它损害皮肤细胞，导致皮肤炎症反应，降低真皮中的弹性纤维，促进皮肤老化，使皮肤增厚、角化、萎缩，出现皱纹、老年斑，甚至可能导致皮肤癌。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,一、紫外线辐射及其对人体皮肤的损害,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,一、紫外线辐射及其对人体皮肤的损害适量的紫外线对健康有益：

不同波段的紫外线其生物学作用不一样抗佝偻病作用：

UV-B（290320nm）红斑作用：

UV-B色素沉着作用：

UV-A（300400nm）杀菌作用：

UV-C（260nm）其他：

增强机体抗病能力,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,一、紫外线辐射及其对人体皮肤的损害,维生素D的生成过程：

B段紫外线7-脱氢胆固醇胆钙化醇肝脏25-羟基胆钙化醇活性维生素D,表皮,光解,（维生素D3）,随血流,25-羟化酶,即1，25-二羟胆钙化醇1,25-（OH）2-D3。

维生素D又称为阳光维生素。

（25-OH-D3）,肾脏,羟化酶,抗佝偻病作用,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,一、紫外线辐射及其对人体皮肤的损害UVA区段晒黑段，可到真皮。

UVB区段晒红段，晒伤主要区段。

UVC区段杀菌段，角质层。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,UV引起皮肤色素沉着1.速发色素沉着是UVA或可见光照射后即刻出现的色素沉着反应，于照射后12小时达高峰，34小时逐渐消退。

不一定有新色素生成，皮肤颜色改变主要是黑素体从黑素细胞核周进入表皮黑素细胞树突所致。

2.持续色素沉着是大剂量的UVA照射皮肤后出现持续的、呈棕黑色的色素沉着且可稳定在224小时。

3.迟发色素沉着主要由UVB照射后引起的。

通常在UVB照射后34天即可检到，其峰值为10天至4周不等，然后逐渐消失。

原因酪氨酸酶的活性增强，黑素生成增加。

具有光保护作用，可提高日光晒伤阈值45倍。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,紫外线导致皮肤光老化UVA30%50%会穿透表皮到达真皮，破坏胶原纤维使之变形。

表现为皮肤曝光部位粗糙、增厚、干燥，皮肤松弛、皱纹加深加粗，局部有过度的色素沉着或毛细血管扩张为特征的改变，这种现象称为皮肤的光老化。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,紫外线对皮肤的其它影响过度强烈的UV照射皮肤可导致许多疾病。

产生急性日晒伤，表现为局部急性，水疱性皮炎，也能诱发或加重光毒性或光变态反应、特发性光照性皮肤病（如多形性日光疹等）。

甚至紫外线辐射可增加发生皮肤癌的危险性，可能出现各种良性或恶性肿瘤（如日光角化病等）。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,紫外线损害皮肤的机制：

损伤细胞核和线粒体DNA，不同程度影响蛋白质的合成及细胞正常的生理功能，导致细胞衰老和凋亡。

引起活性氧簇（ROS）过量，ROS对染色体、线粒体、细胞膜等生物组织的毒性攻击会引起机体氧化性衰老。

脂褐素积累于细胞内成为细胞老化的标志。

抑制表皮内最主要的免疫细胞朗格汉斯细胞（LC）的功能活性，从而抑制皮肤对过敏、感染的抵抗力。

活化基质金属蛋白酶（MMP），导致细胞外基质特别是胶原的降解，同时胶原合成减少，皮肤弹性下降。

UVA可直接损伤体外培养的皮肤成纤维细胞。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,紫外线引起皮肤疾病的证据不明确，只是一些推测：

皮肤癌：

恶性黑素瘤、基底细胞癌和鳞状细胞瘤等皮肤癌主要由过量暴露太阳紫外线辐射，特别是中波紫外线所致日光角化病（又称光化性角化病）：

长期日光曝晒而引起的慢性皮肤损害，少数可发展成鳞状细胞癌晒斑（又称日光红斑）：

日光曝晒而引起皮肤红斑、水肿，严重者可引起水疱，过后有糠秕样脱屑，并出现皮肤色素沉着唇疱疹再激活：

唇疱疹由单纯性疱疹病毒引起。

原发感染后病毒潜伏在神经细胞中。

潜伏的病毒可被包括日晒在内的某些诱因激活而发病,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,眼睛疾病电光性眼炎：

电焊金属部件，在电焊火花里放射出大量的紫外线，时间长了两眼红肿、充血、流泪，叫电光性眼炎。

雪盲：

在雪地里面，太阳紫外线可以照射到雪里，尽管没有太阳，但紫外线通过雪地反射回空间、被眼睛视网膜吸收，可以突然引起双目失明，叫雪盲。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,防御紫外线对皮肤损伤的途径保湿增强皮肤抵抗力，在太阳光下应大量饮水。

使用抗氧化剂清除过量活性氧簇（ROS）对皮肤损伤。

在盛夏，上午10：

00到下午3：

00之间避免外出。

外出注意戴上太阳帽，涂防晒霜于身体暴露部位。

水、金属、沙子、雪反射过来的太阳光可以增加甚至导致双倍的UV吸收量。

外出时，避免食用光敏性的食物及药物，如韭菜、香菜、芹菜等，药物如四环素族类、喹诺酮类、磺胺及苯噻嗪类等。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,二、防晒剂及其分类在防晒化妆品中，主要起防晒作用的是产品配方中所含的防晒功效成分，即防晒剂。

防晒剂是指添加与具有防晒作用的化妆品中，能够散射、反射和吸收紫外线而引起到防止或减弱对皮肤伤害作用的成分。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,二、防晒剂及其分类防晒剂的作用机制是通过阻断UV对人体皮肤的照射，阻止ROS等自由基产生，可防止DNA和蛋白质损伤，也可阻止炎症介质、细胞因子和组织溶解酶的释放，从而减轻皮肤光老化性损伤，甚至使受损的组织得到一定修复。

可分为化学防晒剂和天然防晒剂。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,二、防晒剂及其分类

（一）化学防晒剂国际上有60种化妆品卫生规范28种：

26种紫外线吸收剂2种紫外线屏蔽剂,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,二、防晒剂及其分类

（一）化学防晒剂国际上有60种化妆品卫生规范28种：

26种紫外线吸收剂2种紫外线屏蔽剂,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,

（二）天然防晒剂天然防晒剂又称生物防晒剂，是指利用天然植物及其从中提取出的有效成分作为紫外线吸收剂的一类上防晒产品，或一些生物活性物质能够清除或减少紫外线辐射造成的活性氧自由基，从而组织或减少皮肤组织损伤，促进日晒后修复的一种间接防晒产品。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,二、防晒剂及其分类无机防晒剂多不易附着，使用后外观不佳有机防晒剂制成的产品透明度感好，但不稳定，已发生光变性和过敏反应天然防晒剂对皮肤刺激小，光化学稳定，安全可靠，但是成本高。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,三、防晒剂的检验化妆品卫生规范规定了28种限用防晒剂。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,三、防晒剂的检验1.对氨基苯甲酸（不常用）2.邻氨基苯甲酸脂类：

UVA，常用于防晒黑3.二苯酮及其化合物：

效果差，渗透性强，常用4.水杨酸脂类：

UVB，复配使用5.甲氧基肉桂酸脂类：

UVB，广泛使用6.甲烷衍生物：

UVA，高效7.樟脑系列：

UVB，复配使用,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,三、防晒剂的检验化妆品卫生规范第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法第二法高效液相色谱-紫外检测器法一次进样可以检测15种防晒剂其他方法：

气相色谱法、气质联用、液质联用等,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法本规范适用于防晒化妆品中苯基苯并咪唑磺酸、二苯酮-4和二苯酮-5、对氨基苯甲酸、二苯酮-3、p-甲氧基肉桂酸异戊酯、4-甲基苄亚基樟脑、PABA乙基己酯、丁基甲氧基二苯酰基甲烷、奥克立林、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、胡莫柳酯，乙基己基三嗪酮、亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚、双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪等15种防晒剂的检测。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法化妆品中各种防晒剂由于其结构上的差异可被反相高效液相色谱分离。

根据其保留时间和紫外吸收光谱图定性，峰面积定量。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法3.1甲醇，色谱纯。

3.2四氢呋喃，色谱纯。

3.3高氯酸（HClO4）7072，优级纯。

3.4混合溶液：

甲醇（3.1）四氢呋喃（3.2）水高氯酸（3.3）=2504503000.2。

3.5防晒剂标准储备溶液：

按表2称取各紫外吸收剂，分别用表中所示的溶剂溶解稀释到100mL，配成各紫外吸收剂的标准储备液，其浓度如表2所示。

3.6紫外吸收剂混合标准溶液：

移取各紫外吸收剂标准储备溶液1.00mL至100mL容量瓶中，用混合溶液（3.4）定容至100mL，配制成混合标准溶液。

此混合标准溶液所含各紫外吸收剂的浓度如表2所示。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法,4仪器4.1高效液相色谱仪，具三元泵、二极管阵列检测器及积分仪或色谱工作站。

4.2超声波清洗器。

4.3微量进样器（10L），或自动进样器。

4.40.45m滤膜。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法,5.2样品预处理5.2.1不含蜡质的化妆品如护肤类、香波、粉等：

准确称取防晒化妆品约0.25g于25mL具塞比色管中，加入混合溶液，定容，混匀，超声振荡20min30min。

取此震荡液1.00mL，再用混合溶液稀释至10.0mL，混匀后，经0.45m滤膜过滤，滤液备用。

5.2.2含蜡质的化妆品如唇膏、口红等：

准确称取防晒化妆品约0.25g于25mL具塞比色管中，加入四氢呋喃定容，混匀，超声振荡20min30min。

取此震荡液1.00mL，再用四氢呋喃稀释至10.0mL，混匀后，经0.45m滤膜过滤，滤液备用。

混合溶液：

甲醇（3.1）四氢呋喃（3.2）水高氯酸（3.3）=2504503000.2。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,5.1色谱条件色谱柱：

C18柱，250mm4.6mm，5m；紫外检测波长：

311nm；流速：

1.0mL/min；流动相：

溶液A：

甲醇（3.1），使用前经0.45m滤膜过滤及真空脱气。

溶液B：

四氢呋喃（3.2），使用前经0.45m滤膜过滤及真空脱气。

溶液C：

水+高氯酸（3.3）（300+0.2），使用前经0.45m滤膜过滤及真空脱气。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第一法高效液相色谱-二极管阵列检测器-梯度洗脱法,化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第二法高效液相色谱-紫外检测器法化妆品中各种防晒剂由于其结构上的差异可被反相高效液相色谱分离。

根据其保留时间定性，峰面积定量。

本方法的检出限、检出浓度、定量下限和最低定量浓度同第一法。

化妆品检验,第三节防晒剂的检验,第二法高效液相色谱-紫外检测器法色谱条件：

色谱柱：

C18柱，250mm4.6mm，5m；流动相：

混合溶液1（前12）和混合溶液2（后3）；混合