辣椒红色素的提取与检测.docx

辣椒红色素的提取与检测.docx

《辣椒红色素的提取与检测.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《辣椒红色素的提取与检测.docx（17页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

辣椒红色素的提取与检测

文献检索大作业

姓名：

吴海明

学号：

06209229

课题：

辣椒红色素的提取与检测

一、课题背景及意义

目前，国家对色素的使用进行了严格的限制，禁止使用人工合成色素，促使天然色素的使用量大幅度增加。

天然色素一般来源于天然成分，比如甜菜红、葡萄和辣椒，这些食品已经得到了广大消费者的认可与接受，因此，从无毒、无害及绿色环保的天然产物中提取色素，是当今食用色素的发展新趋势，尤其以常见蔬菜为原料提取的天然色素的开发更受人关注。

我国辣椒资源丰富，种类繁多，从红辣椒中提取的辣椒红色素作为绿色环保产品具有色泽鲜美、性质稳定、无毒副作用，并具有一定疗效保健功能和较高的营养生理价值，己被美国FDA、英国、日本、EEC、FAO/WHO和中国GB等组织审定为A类食用色素，在使用中不加以限量，广泛应用于食品、医药、化妆品、饮料和儿童玩具等领域辣椒红色素是一种色价高的天然类胡萝卜素食用色素，它不仅无毒副作用，还有益于身体抗氧化、调节免疫系统活性等生理功能，因此被广泛应用于食品、医药、化妆品和儿童玩具等领域。

我国辣椒资源丰富，种类繁多，从红辣椒中提取辣椒红色素具有广阔的前景。

辣椒中含有辣椒素、色素、维生素、蛋白质、糖类、油脂和多种矿物质，有着很高的营养和药用价值。

辣椒作为调味品和药物在我国使用已有几百年的历史，辣椒性热，味辛辣，具有温中健胃及杀虫功效，且对于治疗胃寒、食饮不振、消化不良、风湿痛、腮腺炎、多发性疖肿等病症有很好的疗效。

国外辣椒深加工产品的应用已非常普遍，对辣椒红色素的研究已达到较高的水平，己经大量地研究生产高纯度的辣椒色素及辣椒素纯品。

与国外相比国内的辣椒制品生产企业，生产规模相对都较小，资金投入少、技术力量薄弱，而进行辣椒红色素、辣椒素等高附加值的红辣椒精细产品深入研制开发的企业不多，现全国已有20多家生产企业生产辣椒红色素;但生产能力和技术含量有待进一步提高。

二、检索思路

我国对辣椒红色素的提取与检测的研究已经开展很多年了，辣椒红色素的提取与检测工艺也比较完善。

但是我对具体的提取和检测的工艺并不是十分了解，我可以从以下两个方面对其进行检索

（1）辣椒红色素的提取

（2）辣椒红色素的检测

三、检索策略

1、中文检索

1.1书籍检索

【读秀学术搜索】

检索策略1：

输入“红色素提取”

检索结果：

有12本相关图书，但无关于辣椒红色素的书籍

检索策略1：

输入“红色素检测”

检索结果：

无相关图书

【超星电子图书】

检索策略1：

分别输入“色素提取”和“色素检测”

检索结果：

无相关图书

检索策略2：

输入“辣椒”

检测结果：

有83本相关图书，但是均是关于辣椒介绍和种植，以及食用等方面，与课题无关

书籍检索小结

书籍是新项目入门的基础，在书中往往能找到新项目的基础内容，可以从头学起，同时在书中也可以找到期刊中专业术语的出处，能更加的理解最近期刊的内容，但是，如果书籍比较多，选择起来就比较困难，而且要花大力气去学习其中的内容，最好有人推荐其中的好书，这样可以避免选书的烦恼，同时也避免了研究方向的错误。

1.2中文电子期刊检索

【中国期刊网】

检索策略1：

高级检索

辣椒红色素（篇名）并且提取（篇名）

时间：

1979～2012；

范围：

中国期刊全文数据库模糊

检索结果：

96篇

数量太多，无法挑选出比较好的文章

检索策略2：

高级检索

辣椒红色素（篇名）并且提取（篇名）

时间：

2010～2012；

范围：

中国期刊全文数据库精确

检索结果：

19篇

以下几篇是较为实用的：

辣椒红色素提取工艺研究

农业科技与装备

2011/07

辣椒红色素提取与分离纯化工艺研究进展

粮食与油脂

2011/10

辣椒红色素的提取工艺

考试周刊

2010/12

辣椒红色素的提取及其性质测试

太原城市职业技术学院学报

2010/04

溶剂法提取天然辣椒红色素研究

安徽农业科学

2010/25

辣椒红色素的提取方法

中国高新技术企业

2010/33

辣椒红色素提取工艺的改进

湖南农业科学

2011/05

检索策略3：

高级检索

辣椒红色素（篇名）并且检测（篇名）

时间：

2000～2012；

范围：

中国期刊全文数据库精确

检索结果：

4篇

以下3篇与课题比较相关：

辣椒红色素的检测方法

品牌与标准化

2010/04

辣椒红色素提取与检测方法的研究进展

食品研究与开发

2005/03

辣椒红色素的检测方法

辣椒杂志

2003/02

【维普资讯】

检索策略1：

辣椒红色素（题名）并且提取（题名）

时间：

1989～2012

范围：

全部期刊

检索结果：

88篇

数量太多，不符合检索的需要

检索策略2：

辣椒红色素（题名）并且提取（题名）

时间：

2000～2012

范围：

全部期刊

检索结果：

20篇

与中国期刊网上的结果基本一样，在此不再列举了

中文数据库的检索小结

中文数据库中大多是前人所研究的成果，当然其中也不乏有最新的科研成果，通过书籍我们可以学到基础，但是学不到最新的科研，在数据库中，我们可以对照着书籍上的基础知识，来进一步的学习新项目的最近成果，从而达到为自己充电的目的。

2、英文数据库检索

【ACS】

检索策略1：

advancedsearch

AnywhereinContent/Website:

haematochrome

Title:

haematochromeandchilli

Startdata：

1879

检索结果：

noresultfound

检索策略2：

advancedsearch

Title：

paprikaoleoresin

Startdata：

1879

检索结果：

3篇

第一篇是超临界CO2流体萃取法提取辣椒红色素；

第二篇是用高效液相检测辣椒红色素；

第三篇是检测红色素挥发的组分；

第一和第二篇的内容在中文期刊网上均有提到，第三篇与课题相关不大

检索策略3：

advancedsearch

Title：

paprikaredpigment

Startdata：

1879

检索结果：

1篇

内容是用色谱法分离辣椒中的色素

检索策略4：

advancedsearch

Title：

capsicin

Startdata：

1879

检索结果：

62篇

内容太多太杂，需进一步缩小检索范围

检索策略5：

advancedsearch

Title：

capsicin

Startdata：

1879

Abstract：

extractordetection

检索结果：

5篇

所找到的内容与课题相关不大

由于没有关于红色素的文章，所以接下来关于红色素的提取和检测的步骤就不需要进行下去了

【EI】

检索策略1：

refinesearch

Searchforchilliandhaematochrome

检索结果：

noresultfound

检索策略2：

refinesearch

（Paprikaoleoresin）WNallfields

检索结果：

13recordsincompendex&inspecfor1884~2012

内容较杂，需进一步缩小检索范围

检索策略3：

refinesearch

（Paprikaoleoresin）WNallfieldsAND（extract）WNallfields

检索结果：

8recordsincompendex&inspecfor1884~2012

多数文章与课题无关，有几篇与【ACS】中的文章是重复的

检索策略4：

refinesearch

（paprikaredpigment）WNallfieldsAND（extract）WNallfields

检索结果：

6recordsincompendex&inspecfor1884~2012

与课题无关

检索策略5：

refinesearch

（paprikaredpigment）WNallfieldsAND（detection）WNallfields

检索结果：

3recordsincompendex&inspecfor1884~2012

与课题相差较远

英文数据库检索小结

与中文数据库相比，个人感觉是英文数据库比较繁琐，一个中文词汇会对应着几个英文单词，两个中文词汇就可能有十种以上的英文组合，这十几种组合中可能就一个或两个组合是对的，但是我并不知道到底是那种组合是对的，经过检索后的内容就有可能与我们想要的不一样。

四、检索后感想

检索课对我的影响比较大。

以前检索也就是“XX”、“谷歌”一下，所查到的内容对一些杂七杂八的事情还是有点用的，但是对上一些专业的内容就有点欠缺了，虽然这次检索有点让我头昏眼花，但是对我以后的学习有很大的影响，远的就不多说了，近的就是明年的毕业论文，如果一直“XX”、“谷歌”下去，那么后果不堪设想啊！

五、文献综述

辣椒红色素的提取与检测

摘要：

辣椒红色素是一种色价高的天然类胡萝卜素食用色素，它不仅无毒副作用，而且有益于身体抗氧化，调节免疫系统活性等生理功能。

因此被广泛应用于食品、医药、化妆品和儿童玩具等领域。

我国辣椒资源丰富、种类繁多。

从红辣椒中提取辣椒红色素具有广阔的前景。

本文介绍辣椒红色素的理化性质，简述萃取法、超临界CO2流体萃取法、溶剂微波提取法、超声波溶剂提取法和酶法这几种提取辣椒红色素方法的优缺点、适宜条件及辣椒红色素的分离纯化、检测方法。

关键：

辣椒红色素提取分离纯化检测

辣椒又名红辣椒、辣子、辣茄、番椒、海椒等，是多年生草本茄科植物。

其果实不仅可以用药，还可以用作食用辛香料。

辣椒富含二氢辣椒碱、辣椒玉红素、碳水化合物、维生素、辣椒红素等。

其中辣椒玉红素、辣椒红素被很多国家和组织定为无限性使用的天然食品添加剂。

辣椒红色素成品多为暗红色膏状物，它不仅无毒副作用，而且有益于身体抗氧化，调节免系统活性等生理功能。

因此被广泛应用于食品、医药、化妆品和儿童玩具等领域。

如在食品领域，因其色泽鲜艳，可调出由红到橙等不同色调，将其与乙醇以1:

15溶解后，加量为1:

500时呈红色，1:

8000时呈桔红色，1:

12000时呈黄色,所以用于水产品、肉类、糕点、色拉、罐头、饮料等各类食品的着色。

辣椒红色素着色力强、稳定性好、原料易得，是提倡使用的天然色素之一。

目前，世界上销售最走俏的天然色素是辣椒红色素，同时，辣椒红色素也是销量最大的天然色素。

国际对辣椒红色素的消费量巨大，仅美国每年辣椒红色素的销量就达到了3000t，欧洲、日本、新加坡等发达国家对辣椒红色素的需求量也逐年提升，我国对辣椒红色素的需求量和消耗量也很大。

一、辣椒红色素的性质

辣椒红色素不溶于水，易溶于乙醇、丙酮、正己烷、油脂等有机溶剂，在PH值为3～12时不会发生改变，具有良好的热稳定性，乳化分散性及耐热、耐光、耐酸碱等性质，在紫外线下易褪色，易被氧化，Fe3＋、Cu2＋、Co2＋可促其褪色，遇Pb3＋可形成沉淀。

一般提取所得的辣椒红色素是以辣椒玉红素为主体的混合物，且都不可避免地存在辣椒素，因此在制取辣椒红色素的工艺中，如何将其分离并进行除辣显得尤为重要，目前已有的方法包括提取原料前处理除辣和提取液除辣法。

二、辣椒红色素的提取

辣椒红色素是脂溶性的色素，制备的方法主要有溶剂萃取法、超临界CO2流体萃取法、溶剂微波提取法、超声波溶剂提取法和酶法这几种提取辣椒红色素的方法[1～3]。

1、溶剂萃取法

目前，国内外研究最多的是溶剂萃取法,萃取法操作简便、副产品易回收、产品性能稳定，这种方法首先制得辣椒油树脂，然后对油树脂进行精制，即从油树脂中将异味除去，采用强碱、强酸和盐类进行洗涤，得到辣椒红色素精品。

萃取溶剂的选择是影响辣椒红色素的色价和收率的重要因素，可用的萃取溶剂有95％乙醇、丙酮、石油醚、乙醚、氯仿、甲醇、乙酸乙酯等，鉴于辣椒红色素的严格卫生安全法规，氯仿和甲醇的毒性较大，无法使用，乙醚易挥发，易燃且能使人麻醉，乙醇极性较强，不但能提取出色素，也容易把辣椒中极性大的成分提取出来，从而给后面的脱辣工艺造成更大麻烦，采用丙酮，不但可获较高得率，而且所得油树脂的色值最高，油树脂中辣椒素的含量最低，便于分离。

也有人报道采用丙酮萃取过快使其他杂质同时提出，导致纯度较低。

综上，建议采用丙酮和石油醚的混合液作为萃取溶剂[4]。

2、超临界CO2流体萃取法

目前，国内外已经开始研究应用超临界CO2流体技术萃取辣椒红色素。

超临界CO2流体萃取（SFE-CO2）作为一种新型的化工分离技术，其主要是利用比临界温度还要高的温度、压力的CO2流体作为溶媒的萃取过程。

随着体系温度或压力的变化，物质的溶解度也会随之改变，而且流体在处于临界点附近时对物质有极高的溶解能力，这样就可以方便的通过改变体系的温度或压力，有选择单进行萃取而对不同物质进行分离。

这种技术具有产物易回收、能耗低、产品纯度高、萃取溶剂无毒副作用、工艺简单等优点，而且残留的溶剂也满足相关规定[5～6]。

由于用超临界CO2萃取辣椒果皮中的辣椒红色素成本非常高，因此常用超临界CO2对溶剂萃取后的辣椒红色素粗液进行纯化

3、溶剂微波提取法

微波作为高频电磁波的一种，能够使处在其内的物质中的分子因某种作用而电离形成极化分子，这种分子可以按照一定的方向排列。

当用溶剂微波进行物质的提取时，目标分子在电磁波的作用下产生剧烈振荡，分子就获得了摆脱环境束缚的能量，分子的移动在环境存在不同浓度差时会达到一种平衡，这样就实现了提取的目标。

对于传统提取方法的缺陷，溶剂微波提取法可以很好的进行克服，这就具有很大的应用潜力和良好的发展前景。

溶剂微波提取法虽然对设备的要求很高，但它比传统提取方法减少了溶剂的用量，节省了时间，对提取物纯度和效率有有效的提高[7]。

它不仅在符合环境保护的要求方面具有优越性，而且还能降低设备的投资和运行费用。

范翠丽等[8]人研究发现，微波辅助萃取的最佳工艺为：

干辣椒切碎，用NaOH脱除其中的辣椒碱，以乙酸乙酯为萃取剂，料液比1:

9,微波大火萃取,处理时间14min。

4、超声波提取法

辣椒粉是片状凹凸不平的纤维组织结构，辣椒素及其他脂溶性成分存在于纤维组织内，采用传统的有机溶剂提取法需要耗费大量的有机溶剂和时间才能提取完全。

超声波提取是以溶剂浸提原理为基础的新型萃取技术，超声提取过程会产生强烈的振动、空化、搅拌，与传统提取方式比较，具有收率高、耗时少、能耗少、污染小等优点。

C陈小全等[9]用乙醇为提取溶液将超声波与溶剂浸提相结合，提取辣椒红色素，以料液比1∶8、辐射功率400W、超声时间10min的条件为宜。

但对仪器设备要求过高。

5、酶法

酶工程技术是近几年来用于天然植物有效成分提取的一项生物技术，选用合适的酶，如纤维素酶，可以较温和地将植物组织分解，加速有效成分释放，从而提高提取率。

醇提辣，酶脱脂二步法精制辣椒红色素粗制品的新工艺是由周旭章等研究提出来的。

脱辣最佳工艺条件为：

温度室温，脱辣剂（乙醇）质量浓度70%，投料比1:

5～1:

3.0，萃取次数3～4，脱脂剂（Mix酶）质量浓度10～15mg/L,反应时间50min。

邵学军等研究不同浓度NaOH溶液浸泡辣椒粉脱辣效果后的结果表明，辣椒粉与15%的NaOH溶液之比为1:

9，在90度条件下浸泡1.5小时是用NaOH溶液泡辣椒粉脱除辣素的最佳操作条件。

三、辣椒红色素的分离纯化

辣椒粗提取物主要含有辣椒红色素和辣椒碱两种物质，并残留少量提取剂，这将严重影响产品纯度和质量。

为得到安全性好、纯度高辣椒红色素，研究和探索许多纯化方法。

1、碱液处理法

碱液处理法是通过破坏辣椒素结构达到脱除辣椒色素中辣椒素。

辣椒碱结构分子既有酰胺键，又有酚羟基，酰胺在碱作用下能水解成无辣味产物，酚羟基在微弱电离下与NAOH溶液发生成盐作用，从而分成两相促进辣椒素与色素分离，达到纯化色素目的[10]。

牛古丹等[11]将浓缩液移入烧杯中，加入同体积20%NAOH溶液，在80℃～90℃搅拌保温30min，脱辣、调pH、分层，排出下层液，将上层液蒸发、烘干，得产品。

邵景景等[12]在提取之前用不同浓度NAOH溶液对辣椒粉进行浸泡，浸泡2h后过滤并将分离后所得辣椒粉用漏斗过滤水洗至中性，然后进行提取，研究表明，应用这种方法对红色素有损失。

这两种方法将辣椒碱作为废物处理，且纯度、产量低；不仅造成资源浪费，生产过程中排放出废液造成环境污染且得到辣椒红色素产品色价不高[10]。

马传国等[13]采用碱液脱辣方案经多次实验，结果证明此法很难对辣椒红色素进行有效纯化，且皂化脱辣程度不好控制，很容易损失辣椒红色素。

实验产品得率极低，低于10%;且具有经济价值辣椒素不能得到有效回收。

如将碱炼脱辣法应用于实际工业生产，则不利于辣椒红色素生产企业对辣椒原料综合利用，从而增加生产成本,因此，碱液处理法需有待进一步研究改善。

2、溶剂萃取纯化法

溶剂萃取是利用混合物中各成分在两种互不相溶溶剂中分配系数不同进行分离方法。

萃取时，如果各成分在两相溶剂重分配系数相差越大，则分离效率越高，可用于从溶液中提取、分离、浓缩有效成分或除去杂质[14]。

由于辣椒碱极性较辣椒红色素为大，因而前者较易溶于极性溶剂，而后者在极性溶剂中不溶。

黄新春等[15]用95%酒精反复萃取提纯，提取液上层液在真空度0.09MPa、温度50℃，经5～6h精制得精制辣椒红色素，残溶0.01%以下；酒精与辣椒碱混合液在真空度0.09MPa、温度90℃下，蒸馏1～2h可得精制辣椒碱。

溶剂萃取在技术层面研究已十分成熟，几乎可用于所有物质分离。

但溶剂大量使用、分离度不高导致产品含杂较多;与新兴萃取技术相比，辣椒红色素产率、色价低，含杂较多[16]。

3、硅胶柱层析法

硅胶柱层析分离辣椒红色素，是根据色素与辣素结构差异和硅胶上固定相与洗脱液中溶解度不同，在固定相与洗脱液之间分配系数不同而达到分离效果。

该法操作简单、设备条件不高、分离效果好，去除辣味完全。

贺文智[17]以丙酮为萃取剂，对比溶剂法和硅胶柱层析法得到红色素收率和色价，认为硅胶柱层析法优于溶剂法。

朱书平[18]等将得到浸膏用少量石油醚在温热条件下溶解，注入已装好硅胶柱子上，用石油醚与丙酮复配液作洗脱剂，能很好将色素洗脱下来，又不会将辣椒碱带出，洗至流出液无色为止，收集含辣椒红色素洗脱液，减压回收溶剂得到深红色油状辣椒红色素产品。

再将留在柱子上辣椒碱用75%乙醇进行洗脱，收集辣椒碱部分，减压回收溶剂后，残余物加入无水乙醚中进行结晶，在常温下放1～2天，待乙醚挥发完，得到辣椒碱晶体。

硅胶柱层析法在工业生产中应用已取得不少进展，但与其它新型分离技术相比，其应用领域仍不够广泛。

尤其是硅胶柱层析法在本质上是间歇操作，需大量昂贵固定相，消耗大量流动相，吸附剂不能有效利用，分离产物浓度很低[16]。

此法目前大多处于实验室研究阶段。

4、吸附树脂柱法

树脂吸附法是利用树脂与被吸附分子（吸附质）间范德华引力，通过其巨大比表面进行物理吸附工作，使有机化合物根据吸附力及其分子量大小可经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的[19]。

邵景景等[12]利用树脂吸附对辣椒红色素和辣椒碱进行分离，并与NaOH处理法进行比较。

结果表明，在试验树脂中，D4020树脂显示出较优除辣效

果，且宜在常温下进行吸附和洗脱。

相比较两种除辣方法，树脂法优于碱法前处理除辣。

孟宪昉等[20]利用AB-8大孔径吸附树脂对经回收有机溶剂并碱化处理色素提取液以25℃室温、4.0ml/min条件进行脱辣处理，能有效脱除色素产品中辣味，色素产品能得到2.57%收率，色价为121。

大孔树脂吸附具有快速、高效、方便、灵敏、选择性强等优点，因而其发展速度很快，应用面越来越广。

5、超临界CO2流体萃取法

超临界CO2流体萃取法也可应用于分离提纯。

超临界流体萃取通过调节超临界流体压力和温度控制溶解度和蒸汽压，从而达到使物质分离目的，故超临界流体萃取综合溶剂萃取和蒸馏两种功能。

王玉琪等[21]研究采用超临界CO2流体萃取得到辣椒红色素全部指标均符合中国国家标准，产品色价高达150～320，己烷残留质量分数不超过0.001，总有机溶剂残留质量分数不超过0.002%，辣椒素质量分数不超过0.4%，均优于国标规定。

应用超临界CO2流体萃取技术所得产品虽色价、纯度高;但该技术投资大、工艺尚不够成熟等局限性难以大规模工业生产。

6、分子蒸馏法

分子蒸馏技术系指在高真空条件下，蒸发面与冷凝面间距小于或等于被分离物料蒸汽分子平均自由程，由蒸发面逸出分子，既不与残余空气分子碰撞，自身也不相互碰撞，而是毫无阻碍到达并凝集在冷凝面上，从而实现液一液分离的技术。

王芳芳等[22]应用刮膜式分子蒸馏装置对辣椒红色素提纯进行研究。

考察进料速率、进料温度、蒸发温度和刮膜器转速等因素对辣椒红色素分离效果影响，通过试验确定在最佳工艺条件下，色素色价可达176.45，吸光比大于1。

分子蒸馏技术[15]作为一种最温和蒸馏分离手段，克服传统蒸馏操作温度高、受热时间长等缺点，解决大量传统蒸馏无法解决工业化难题，尤其适于高沸点、热敏性物料分离。

因此，该项技术在日化、食品工业中应用具有广阔前景。

四、辣椒红色素的检测

1、鉴别试验

溶解度试验是指将辣椒红色素试样分别放入水、乙醇、甘油、植物油、乙醚、丙酮、乙酸乙酯等溶剂中摇动，时间不少于30s（秒），在5min内观察，并与溶解度的标准分级对照。

色素应不溶于水和甘油，部分溶解于乙醇（油层分离），易溶于植物油、乙醚、丙酮、乙酸乙酯[23,26]。

显色反应是指在1滴色素中加2～3滴氯仿和1滴浓硫酸时，试样应呈现深蓝色[26]。

辣椒红色素还可以通过分光光度法测定法[24,25]。

该法包括测定紫外可见吸收光谱和红外吸收光谱[27]。

紫外可见吸收光谱是取少量样品用石油醚溶解、稀释，以石油醚为参比，在分光光度计（岛津UV-260）上测定其吸收光谱。

红外吸收光谱是将样品制片，在红外分光光度计（岛津IR-408）上测其IR光谱。

将这两种测定结果与国标GB-10783-89比较，看其峰形与标准图谱是否吻合，是否具有标准辣红素的特征吸收峰，从而说明样品的纯度。

2、含量

（1）色价[23,28]用1.8M硫酸溶液配制每1份中含0.30058重铬酸钾和34.968硫酸铵钴晶体的溶液作标准比色液。

在5cm见方的玻璃纸上称取50至80mg试样，精确至0.1mg。

将纸和试样均置100mL容量瓶中，用丙酮定容后不时摇动，萃取15min以上。

用l0ml移液管吸取萃出液10.0mL，移入另一100mL容量瓶中，再用丙酮定容。

用滤纸过滤，弃去10～15mL初滤液。

将滤液滗入吸收池，用丙酮作为空白试样，测定460nm处的吸光度，同时测定标准比色液在460nm处的吸光度（As），按下式计算:

可萃色素ASTA色值=

丙酮萃出液在460nm处的吸光度*164*If/（试样量（g））

其中吸收池长度和仪器校准系数（If=0.600/As）。

萃取液的As值应为0.30一0.70。

如萃出液的As〉0.70，则须用丙酮稀释至原浓度的一半。

如萃出液的As〈0.30，则须弃去，并用较大的试样量重新进行萃取。

（2）半定量测定样品中色素含量[26]取色素液，用丙酮适当稀释后在459nm处测光吸收值，按下式计算出样液中含原添加色素的g数。

样液中原添加色素的g数=AKV/（原色素色价X100）

式中A为光吸收值，K为