临床微生物学和微生物学检验输血专业教学大纲.docx
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临床微生物学和微生物学检验输血专业教学大纲
临床微生物学和微生物学检验
理论教学大纲
（供输血检验专业五年制本科用）
蚌埠医学院病员生物学教研室编
二00九年九月
前言
《临床微生物学和微生物学检验》是输血检验专业的重要专业课程之一。
在学习了医学微生物学的基础之上，主要讲授临床微生物学检验的基本技术、临床上重要的病原微生物的生物学性状、致病性和微生物学检验方法。
目的是让学生学会应用微生物学的基本知识、理论与技术，掌握各类感染性疾病的微生物特性，通过系统的检验方法，检出病原体，为临床诊断、治疗、预防以及医院感染的防治提供科学依据，为学生毕业后独立开展各种临床微生物学检验工作打下良好基础。
本课程是一门实践性和应用性学科，除了培养学生的理论修养外，更应注意学生独立思考、解决实际问题能力的培养以及良好的实验方法和技术的训练。
教师在教学活动中可根据课程要求适当补充新知识新理论，可引导学生课外学习，了解相关领域发展前沿，拓展学生视野。
一、课程学时分配
课时分配表
授课内容
理论教学时数
实习教学时数
合计教学时数
细菌感染的病原学诊断
3
6
9
抗菌药物敏感试验
1
球菌
3
6
9
革兰阴性杆菌、非发酵菌
8
12
20
弧菌科、其他阴性杆菌
3
6
9
革兰阳性需氧杆菌
2
2
棒状杆菌、分枝杆菌
3
6
9
厌氧菌
2
1
3
螺旋体、支原体、衣原体、立克次体
3
2
5
真菌及其微生物学检验
5
5
病毒的微生物学检验
3
3
6
呼吸道病毒与疱疹病毒
3
3
肠道病毒与肝炎病毒
3
3
逆转录病毒和其他病毒
3
3
综合性、创新性、设计性实验
6
6
临床微生物学检验基本实验操作技能考核
6
6
合计
45
54
99
二、课程内容及教学要求
细菌感染的病原学诊断
【目的要求】
掌握标本的处理原则，不染色标本形态学检查方法、革兰染色、培养基的种类、培养方法及生长现象观察，标本的处理、抗酸染色、主要生化鉴定试验；了解细菌自动化检测和质量控制。
【教学组织与方法】
理论课讲授3学时，实验教学6学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.标本的采集和处理原则：
血液、脑脊液、脓液、痰液、粪便、尿液、生殖道标本等；
2.细菌形态性检查：
不染色标本（悬滴法、压滴法，暗视野显微镜等）与染色标本（革兰染色、抗酸染色等）；
3.细菌的分离培养和鉴定：
培养基的组成成分，培养基种类和选择，细菌接种分离培养方法，生化反应及鉴定；
4.简介细菌自动化检测和质量控制。
【实验内容】基础培养基的制备，菌落观察、显微镜的使用、革兰染色法、细菌鉴定常用的几种生化反应等
【英文专业术语】
Culturemedium,basedmedium,nutrientmedium,differentialmedium,selectivemedium,specialmedium,bloodagar（BA）
【思考题】
1.简述标本处理的一般原则？
2.试述革兰染色的原理、技术要点及意义。
3.什么叫培养基？
根据用途可分为哪几种?
抗菌药物敏感试验
【目的要求】
掌握抗菌药物敏感试验（纸片扩散法）的意义、方法类型、技术要点、原理和结果判断，了解抗菌药物的种类，细菌耐药机制。
【教学组织与方法】
理论课讲授1学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.抗菌药物的种类；
2.细菌耐药机制；
3.抗菌药物敏感试验目的、方法（纸片扩散法、肉汤稀释法、E试验等）、原理、技术要点及意义；
【实验内容】小便标本中病原微生物检出及体外药物敏感试验
【英文专业术语】
Antimicrobialsusceptibilitytest（AST）,minimalbactericidalconcentration（MBC）,minimalinhibitoryconcentration（MIC）,Epsilometertest（Etest）,-lactamase,methicillinresistantStaphylococcus（MRS）,extendedspectrum-lactamase（ESBL）,vancomycinresistantEnterococcus（VRE）
【思考题】
1 试述体外抗菌药物敏感试验的意义。
2 什么是MRS、VRE、ESBL？
3 K-B法体外抗菌药敏试验的原理、技术要点和结果判断。
球菌
【目的要求】
掌握葡萄球菌属、链球菌属和奈瑟菌属的重要特性、检验程序和主要鉴定试验；了解葡萄球菌属、链球菌属和奈瑟菌属的致病及临床意义，肠球菌微生物特性、微生物学检验及临床意义。
【教学组织与方法】
理论课讲授3学时，实验教学6学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.葡萄球菌属：
分类（按色素或是否产凝固酶）、生物学特性（染色、形态、排列、色素、溶血环、SPA、抵抗力等）、微生物学检验（鉴定程序，主要鉴定试验：
血浆凝固酶试验等）和临床意义（急性化脓性感染，食物中毒等）；
2.链球菌属：
分类（按溶血现象或抗原血清分型）、生物学特性（染色、形态、排列、营养要求、溶血环等）、微生物学检验（鉴定程序，主要鉴定试验：
触酶试验、杆菌肽试验、CAMP试验、Optochin试验、胆汁溶菌、ASO等）和临床意义（化脓性炎症、猩红热、心内膜炎、风湿热、急性肾小球肾炎，大叶性肺炎等）；
3.肠球菌属：
分类、生物学特性、微生物学检验和临床意义（多见泌尿道感染，重要的医院感染病原菌）；
4.奈瑟菌属：
分类、生物学特性（染色、形态、排列、营养要求、抵抗力等）、微生物学检验（直接涂片检查、主要鉴定试验：
触酶试验、氧化酶试验等）和临床意义（淋病、流脑等）。
【实验内容】脓标本/咽拭子病原菌分离培养鉴定、球菌示教等
【英文专业术语】
Staphylococcus,staphylococcalproteinA（SPA）,Streptococcus,pyogenicStreptococcus, Enterococcus,Neisseria
【思考题】
1.葡萄球菌属和链球菌属的主要鉴定要点有哪些？
2.如何鉴别甲型链球菌和肺炎链球菌？
3.试描述淋病患者生殖道分泌物直接检查的镜下特征。
革兰阴性杆菌
【目的要求】
掌握肠杆菌科细菌的共同特性、临床意义和微生物学检验，埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属等的生物学特性、临床意义和微生物学检查，鼠疫耶尔森菌的临床意义，非发酵革兰阴性菌的概念和初步鉴定特征，铜绿假单胞菌的生物学特性和实验室检查；了解变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属等的生物学特性、临床意义和微生物学检查，不动杆菌属、产碱杆菌、军团菌属主要生物学特性和临床意义。
【教学组织与方法】
理论课讲授8学时，实验教学12学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.肠杆菌科
（1）概述：
命名与分类、共同特性、自然界和人体分布、临床意义（医院感染的重要病原菌，多为肠道正常菌）、微生物学检查；
（2）埃希菌属：
分类、生物学性状（染色形态、周鞭毛、乳糖发酵、抗原构造等）、临床意义（医院感染常见病原菌，尿路感染多见，致腹泻大肠埃希菌）、微生物学检查（检验程序，双糖铁上下均产酸产气、H2S-，IMViC++--等）；
（3）沙门菌属：
生物学性状（染色形态、周鞭毛、不乳糖发酵等，O抗原、H抗原、表面抗原）、临床意义（伤寒与副伤寒）、微生物学检查（标本的采集、检验程序，双糖铁KA++或KA-+、H2S+，IMViC-+-+/-等，血清学分型鉴定，肥达试验等）；
（4）志贺菌属：
生物学性状（染色形态、无鞭毛，多不发酵乳糖等，O抗原与K抗原）、临床意义（菌痢）、微生物学检查（脓血粘液便，检验程序，双糖铁KA--、H2S-，脲酶-，动力-，IMViC-+--等，血清学分型鉴定）；
（5）耶尔森菌属、变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属等。
2.非发酵革兰阴性杆菌
（1）概述：
非发酵菌定义、主要菌属
（2）假单胞菌属：
铜绿假单胞菌生物学性状（单端鞭毛、生长温度范围25~42℃、绿脓素等）；临床意义（条件性致病菌），微生物学检查（标本采集、检验程序、菌落特征、色素、气味、氧化酶试验、OF试验等），嗜麦芽假单胞菌等；
（3）不动杆菌属：
临床意义（条件致病菌，医院感染）、生物学性状、微生物学检验；
（4）产碱杆菌属：
临床意义（条件致病）、生物学性状（OF产碱等）、微生物学检验；
（5）其他：
军团菌属（军团病）等。
【实验内容】主要肠杆科细菌/粪便标本病原菌分离培养鉴定
【英文专业术语】
Enterobacteriaceae,Escherichia,Salmonella,Shigellae,Klebsiella, Enterobacter,Citrobacter,Serratia,Proteus,Yersinia,NonfermentativeBacilli,Pseudomonas,Acinetobacter,Alcaligenes,
【思考题】
1.试述伤寒或副伤寒病人标本的微生物学检验程序。
2.细菌性痢疾病人标本的微生物学检验程序。
3.什么叫非发酵菌？
弧菌科、其他阴性杆菌
【目的要求】
掌握霍乱弧菌的生物学特性、临床意义、直接标本检查的意义和微生物学检验，流感嗜血杆菌的主要生物学性状、临床意义和微生物学检查；了解邻单胞菌属与气单胞菌属，弯曲菌属和螺杆菌属的培养特性、代表细菌及临床意义和微生物学检验、鲍特菌属和布鲁菌属微生物学特性。
【教学组织与方法】
理论课讲授3学时，实验教学6学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.弧菌科：
氧化酶阳性、具有极端鞭毛、运动活泼、发酵葡萄糖、菌体短小、弧形、革兰阴性。
2.弧菌属：
分类（血清分型、生物型等）、霍乱弧菌的生物学性状（单鞭毛、穿梭状运动、“鱼群”样，培养特性）、临床意义（毒素、霍乱）、微生物学检查（标本直接检查、培养基、氧化酶试验阳性、霍乱红试验、粘丝试验、耐盐试验等），副溶血弧菌等；
3.简介气单胞菌属和邻单胞菌属；
4.弯曲菌属：
空肠弯曲菌的主要生物学特性、临床意义（弯曲菌肠炎等）；
5.螺杆菌属：
幽门螺杆菌的主要生物学特性、临床意义（胃炎等）。
6.苛养革兰阴性杆菌
（1）嗜血杆菌属：
生物学性状（多形性、多有荚膜，生长需X和/或V因子，卫星现象等）、临床意义（原发性化脓性感染等）和微生物学检查（培养基营养要求高等）；
（2）鲍特菌属、布鲁菌属等的生物学性状、临床意义和微生物学检查（百日咳鲍特菌、布鲁菌）。
【英文专业术语】
Vibrionaceae,Vibrio,choleratoxin（CT）,Campylobacter,Hilicobacter,H.Pylori（HP）Haemophilus, satellitephenomenon
【实验内容】弧菌科及非发酵菌分离培养鉴定
【思考题】
1.如何认识霍乱直接标本检查的临床意义？
2.试述霍乱弧菌的微生物学检验程序。
3.何谓苛养菌？
何谓卫星现象？
革兰阳性需氧杆菌
【目的要求】
掌握炭疽芽胞杆菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查；了解阴道加德纳菌的临床意义和微生物学检验，蜡样芽胞杆菌、产单核细胞李斯特菌、红斑丹毒丝菌、放线菌等的主要生物学性状和临床意义。
【教学组织与方法】
理论课讲授2学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.炭疽芽胞杆菌的生物学性状（最大的革兰阳性杆菌、芽胞，卷发状菌落，微溶血、拉丝现象，抗原结构等）；临床意义（炭疽病）；微生物学检查（标本采集处理、检验程序和方法、鉴定试验、动物试验等）；
2.蜡样芽胞杆菌、产单核细胞李斯特菌、红斑丹毒丝菌的主要生物学性状、临床意义；
3.阴道加德纳菌临床意义和微生物学检验；
【英文专业术语】
B． anthracis,Corynebacterium,metachromaticgranule
【思考题】
1.何谓炭疽及微生物检验注意事项？
棒状杆菌、分枝杆菌属
【目的要求】
掌握白喉棒状杆菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查；抗酸染色的原理和意义，结核分枝杆菌的主要生物学性状、主要致病物质及所致疾病、微生物学检查、结核菌素试验；了解麻风分枝杆菌主要生物学性状、临床意义和微生物学检查，非典型分枝杆菌。
【教学组织与方法】
理论课讲授3学时，实验教学6学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.棒状杆菌属：
白喉棒状杆菌主要生物学性状（形态、栅栏状排列、染色、异染颗粒、培养特性、亚碲酸钾培养基、生化反应、抗原构造等）、临床意义（白喉外毒素的特性、致病机制、预防接种、锡克试验等）、微生物学检验（检验程序，培养基、菌落形态、Elek平板毒力试验等）
2.分枝杆菌属的主要特点、分类；
3.结核分枝杆菌：
生物学性状（抗酸染色阳性、专性需氧、营养要求高、菌落形态、变异、抵抗力等）、临床意义（致病物质、结核病、传染性免疫、郭霍现象、结核菌素试验等）、微生物学检查（标本采集与处理、检验程序、抗酸染色、L-J培养基、初步鉴定要点：
抗酸染色、生长速度、色素、菌落特征等），结核分枝杆菌L型；
4.麻风分枝杆菌：
生物学性状（抗酸阳性，胞内寄生菌，麻风细胞，动物接种），临床意义（麻风），微生物学检查（主要依靠直接显微镜检查）。
5.简介非典型分枝杆菌。
【实验内容】棒状杆菌和分枝杆菌常用染色及主要微生物特性
【英文专业术语】
Mycobacterium,acid-fastbacilli,M.tuberculosis,infectionimmunity,Kochphenomenon,tuberculintest,oldtuberculin（OT）,purifiedproteinderivative（PPD）,M.leprae
【思考题】
1.什么是异染颗粒及常用染色方法如何？
2.什么是抗酸染色的原理、意义和过程？
3.简述分枝杆菌的致病因素和临床意义。
4.试述分枝杆菌微生物检验程序。
厌氧菌
【目的要求】
掌握厌氧菌的概念，厌氧菌感染的临床及细菌学指征，厌氧菌标本采集与送检的要求及方法，厌氧菌的检验程序，厌氧培养方法，破伤风梭菌、产气荚膜梭菌的生物学性状、临床意义和微生物学检查；了解艰难梭菌和肉毒梭菌的临床意义，革兰阴性无芽胞厌氧杆菌、革兰阳性无芽胞厌氧杆菌、厌氧性球菌等。
【教学组织与方法】
理论课讲授2学时，实验教学1学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.概述：
厌氧菌的定义、分类和人体分布，厌氧菌感染的原因，厌氧菌感染的临床及细菌学指征，厌氧菌的实验室检验（标本采集与运送与处理、检验程序，厌氧培养法等）；
2.梭状芽胞杆菌属：
破伤风梭菌主要生物学性状（革兰阳性杆菌、芽胞形态、菌落特征、气味等）、临床意义（破伤风痉挛毒素、破伤风）和微生物学检验（鉴定要点），产气荚膜梭菌（临床最常见的厌氧芽胞梭菌，芽胞特点、荚膜、菌落特征、Nagler反应、“汹涌发酵”等，气性坏疽）、肉毒梭菌（芽胞特点、抵抗力、肉毒毒素、临床意义）、艰难梭菌（伪膜性肠炎等）等。
3.简介：
革兰阴性无芽胞厌氧杆菌（类杆菌属、梭杆菌属等），革兰阳性无芽胞厌氧杆菌（双歧杆菌属、丙酸杆菌属、乳酸杆菌属等）；
4.简介：
厌氧球菌（消化球菌属、消化链球菌属、韦荣球菌属等）。
【实验内容】厌氧培养法（厌氧罐法、庖肉基法等）
【英文专业术语】
Anaerobicbacteria,Clostridium,C.tetani,tetanospasmin,C.perfringens,stormyfermentation,C.Botulinum,anaerobicnonsporeformingGram-negativebacilli,anaerobicnonsporeformingGram-positivebacilli,Bifidobacterium,anaerobiccocci
【思考题】
1.厌氧菌感染的临床及细菌学指征有哪些？
2.厌氧菌标本采集与运送要注意什么？
3.有哪些厌氧培养方法？
4.简答破伤风梭菌、产气荚膜梭菌的主要鉴定要点。
螺旋体、支原体、衣原体、立克次体
【目的要求】
掌握梅毒螺旋体的生物学性状，临床意义和微生物学检查（直接标本检查、抗体或反应素测定），钩端螺旋体的生物学性状，临床意义（钩体病等），支原体定义，肺炎支原体的生物学性状、分离与鉴定，衣原体定义，沙眼衣原体生物学性状、临床意义，立克次体定义；了解其他螺旋体生物学性状，临床意义及微生物学检查，解脲脲原体及其他支原体的生物学性状、分离与鉴定，肺炎衣原体及其他衣原体的生物学性状、临床意义，斑疹伤寒立克次体、恙虫病立克次体临床意义。
【教学组织与方法】
理论课讲授3学时，实验教学2学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.螺旋体：
（1）螺旋体的定义、生物学性状（形态与结构、培养特性、抗原结构、抵抗力等）；
（2）密螺旋体属：
梅毒螺旋体的生物学性状、临床意义（性传播疾病梅毒）、微生物学检查（标本直接检查、抗体和反应素检测等）；
（3）钩端螺旋体属：
自然疫源性疾病，钩端螺旋体的微生物特性、临床意义及微生物学检查；
（4）简介疏螺旋体属：
伯氏疏螺旋体、回归热螺旋体等。
2.支原体
（1）定义和分类；
（2）肺炎支原体生物学性状（多形性、营养要求、油煎蛋样菌落、抵抗力等）、临床意义（非典型肺炎）、微生物学检验（鉴定要点：
形态染色、菌落特征、生化反应及特异性生长等，与细菌L型的区别）；
（3）简介解脲脲原体生物学性状、临床意义（非淋球菌性尿道炎等）、微生物学检验。
3.衣原体
（1）衣原体的定义、分类与命名，独特生活周期；
（2）沙眼衣原体生物学性状（形态染色、抵抗力等）、临床意义（眼结膜炎、生殖道感染等）、微生物学检验（细胞培养、鸡胚培养等）；
（3）简介肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体。
4.立克次体
（1）定义、共同特点、微生物学特性（形态染色、培养特性等）；
（2）简介普氏立克次体和恙虫病立克次体临床意义、生物学性状。
【实验内容】螺旋体、衣原体、立克次体形态及支原体菌落示教；常用的血清学检验方法示教。
【英文专业术语】
Spirochete,Treponemapallidum（TP）,venerealdiseaseresearchlaboratory（VDRL）,unheatedserumregaintest（USR）,rapidplasmaregain（RPR）,toluidineredunheatedserumtest（TRUST）,fluorescenttreponemalantibody-absorption（FTA-ABS）,Liptospira,Mycoplasma pneumoniae（MP）,Ureaplasmaurealyticum（Uu）,C.trahomatis,inclusionbody, Richettsiaceae
【思考题】
1.如何进行梅毒螺旋体感染的血清学检查？
2.简述梅毒标本直接检查的意义。
3.什么是支原体、衣原体和立克次体？
真菌及其微生物学检验
【目的要求】
掌握真菌的形态结构、培养特性，真菌标本的直接检查、分离培养鉴定，二相真菌的定义和特性，主要的浅部感染真菌种类、微生物学特性、临床意义、直接检查、分离培养鉴定，假丝酵母菌和隐球菌的微生物学特性、临床意义、直接检查、分离培养鉴定；了解真菌的分类及其他非培养鉴定技术，其他浅部真菌，假丝酵母菌和隐球菌的临床意义，曲霉、组织胞浆菌的微生物学特性和临床意义。
【教学组织与方法】
理论课讲授5学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.真菌总论：
（1）真菌的分类与命名；
（2）真菌的生物学性状：
形态结构（酵母菌、丝状菌，菌丝、孢子等）、培养特性（培养温度、营养要求、菌落、抵抗力等）；
（3）真菌感染的病原学诊断：
标本采集、直接检查、染色检查、分离培养（培养基、培养方法、培养结果观察等）；
（4）简介其他非培养鉴定技术。
2.浅部感染性真菌
（1）皮肤表面感染性真菌：
秕糠马拉癣菌，花斑癣，直接检查等；
（2）皮肤癣真菌：
毛癣菌属、表皮癣菌属和小孢子菌属：
常见菌种，生物学特性（菌丝、孢子和菌落特征等）、微生物学检查（直接检查和分离培养等）、临床意义；
（3）皮下组织感染真菌：
着色真菌、孢子丝菌（二相性真菌）。
3.深部感染真菌
（1）假丝酵母菌属：
临床意义（菌群失调或抵抗力降低时发生感染）、生物学特性（酵母型、芽生孢子、假菌丝、厚膜孢子等）、微生物学检查（直接显微镜检查、分离培养、芽管形成试验、厚膜孢子形成试验等）；
（2）隐球菌属：
临床意义（新生隐球菌病，主要侵犯肺、脑、脑膜等）、生物学特性（宽厚荚膜、出芽现象、粘稠酵母型菌落等）、微生物学检查（直接检查：
墨汁负染，分离培养等）；
3简介：
曲霉、毛霉、卡氏肺孢菌、组织胞浆菌等。
【英文专业术语】
Fungus,yeast,filamentousfungus,mold,hypha,mycelium,Trichophyton,Epidermophyton,Microsporum,Cryptococcus,Candida,
【思考题】
1.如何认识真菌的形态结构在真菌鉴定中的意义？
2.试述真菌标本的直接检查方法。
3.简述二相真菌的定义和特性。
4.主要的浅部感染真菌有哪些？
5.简介脑脊液墨汁负染直接检查的方法和意义。
6 白色念珠菌的主要鉴定试验有哪些？
病毒的微生物学检验
【目的要求】
掌握病毒形态结构、主要化学组成，病毒的检验技术和方法；了解病毒的复制、遗传变异特点，病毒的分类命名等。
【教学组织与方法】
理论课讲授3学时，实验教学3学时，运用多媒体教学。
【教学内容】
1.病毒的定义和基本特性：
形态结构（核壳体，有或无包膜等）、组成、复制周期、遗传与变异、理化因素对病毒的影响；
2.病毒的分类与命名；
3.病毒感染：
感染方式与途径、感染类型、致病机制、抗病毒免疫；
4.病毒感染的检验技术和方法：
标本采集处理、运送保存、分离鉴定（动物接种、鸡胚接种、组织培养，病毒数量与感染性测定等）、快速诊断。
【实验内容】真菌形态及菌落示教；病毒血凝示教。
【英文专业术语】
Virus,viron,core,capsid,interference,inactivation,satellitevirus,prion,horizontaltransmission,verticaltransmission,inapparentinfection,acuteinfection,persistentinfection,latentviralinfection,chronicviralinfection,slowviralinfection,cytocidaleffect,steady
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