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生物安全手册

（888年第一版）

乌鲁木齐人民医院

1．生物安全管理体系

1-1

1.1紧急事件电话和办公室联系方式

1.2生物安全管理机构

1.3职责

2．生物安全评估和管理

2-1

2.1风险评估和风险管理表

2.2暴露途径

2.3生物安全等级

3．标志

3-1

3.1墙面标志

3.2门上标志

3.3标贴和颜色

3.4外送维修或处理的设备

4．生物安全要求和人员管理

4-1

4.1生物物质的使用登记

4.2生物安全柜

4.3人员管理

5．医学监督程序

5-1

5.1暴露于结核杆菌员工的筛选

5.2免疫

5.3医学限制

5.4员工血清贮存

6．个人防护装备（PPE）

6-1

6.1实验服、隔离衣

6.2手套

6.3工作鞋

6.4护目镜

6.5口罩、帽子

7．实验室设备

7-1

7.1生物安全柜

7.2离心沉淀程序

7.3化学吸附真空管和过滤器

7.4注射器和针头

7.5移液管

7.6搅拌机、混匀器、超声波清洗和粉碎机

7.7冻干

7.8其它设备（水浴箱、冷藏箱、振荡器）

8．实验室操作

8-1

8.1与实验室事故相关的人为因素和态度

8.2一级生物安全

8.3二级生物安全

8.4生物危害物的运输（实验室间或物体间）

8.5基础生物安全操作

8.6内务管理

8.7菌（毒）种和生物样本管理

9．意外

9-1

9.1暴露事件的紧急处理

9.2报告事件

9.3医疗援助

9.4实验室事件的调查

9.5应急处置

10．溢出反应

10-1

10.1一个基础溢出试剂盒的组成

10.21级生物安全实验室溢出

10.32级生物安全实验室溢出

11．消毒和灭菌处理过程

11-1

11.1实验室材料的清洁

11.2消除局部环境的污染

11.3清除生物安全柜的污染

11.4洗手/清除手部污染

11.5去污（净化）方法

11.6高压灭菌器程序

11.7化学去污剂的特征（特性）

11.8废弃物处理

12．运送

12-1

12.1传染性物质的包装和运送

13.化学品、火和电的安全

13-1

2.生物安全评估和管理

在建设实验室或开展实验活动之前，生物安全办公室应参照卫生部《名录》组织各相关方面的专家对拟操作的生物因子的危害程度、实验活动的危险性、气溶胶传播的可能性、预防治疗的获得性、防护屏障的安全性、应急预案的有效性等因素进行评估，确定相应的生物安全防护水平等级。

实验室生物危害评估结果应由中心的法定代表人签字认可，并归档保存。

生物安全负责人最终对实验室内的安全负责，其职责之一是指导现行工作以判断潜在的危害（生物安全评估），职责之二是实验开始前采用合适的安全程序（风险管理）。

特定的实验开始前需要预先进行登记和通过生物安全负责人的批准。

风险评估和风险管理的5个“P”是指：

◆Pathogen病原体–危险的生物因子

◆Procedures规程–推荐的实验操作和安全的操作规范

◆Personnel人员–相应的培训与技能

◆Protectiveequipment防护设备–防护衣和安全设备

◆Place地点–实验室所在位置

实验室工作的每一方面都应考虑风险评估和风险管理的5个“P”。

正确地指导和风险评估能帮助免受生物危害的暴露，以及最大程度减少实验室受到感染的可能性。

2.1风险评估和风险管理表

风险评估

风险管理

病原体

◆传染因子类型（见附录A）

◆感染途径

◆感染性疾病发生过程

病毒性、致病性、数量、浓度、人群

中影响程度、昆虫媒介的存在

◆登记

⏹生物安全办公室

⏹感染机构

⏹约束机构

⏹疾控中心–选择机构

规程

◆气溶胶风险：

超声、离心、混匀、

混合、振动

◆经皮风险:

针头、注射器、玻璃吸液管、解剖刀、低温刀片/刀等

◆飞溅/溅泼风险:

吸液管、接种环

◆建立一套结合安全使用的标准操作规程

◆遵守基本的生物安全规则

◆实验室、工作区域、BSL-2或更高传染因子实验室内的设备贴上标识

◆指导实验室操作和检查实验设备

◆用非传染性材料做尝试性试验，以测

试新的规程/设备

人员

◆人员免疫

⏹赘生物疾病

⏹感染

⏹免疫抑制治疗

⏹年龄、种族、性别、妊娠

⏹手术（脾、胃切除）

◆免疫力

◆后暴露预防

◆血清库

◆对安全的态度

◆安慰

◆外伤、破损皮肤、湿疹、皮炎

◆安全培训

◆以前从事生物危害的经历

◆技术的熟练程度

◆立即向生物安全负责人和生物安全办公室报告所有的暴露事件、被忽视的事件以及相关疾病的症状

◆调查/核实事件/飞溅等，以防止再

次发生

防护设备

◆防护：

●气溶胶-可以吸入粒子直径<5µm

●飞溅/溅泼

●锐器

◆个人防护设备（PPE）:

◆口罩–HEPA,N-99,N-95,等

◆面部（眼、鼻、嘴）防护-面具和安

全眼镜、或盖住下颌的面罩、前面无缝外衣或实验室外衣

◆手套

◆生物安全柜

◆安全离心管/转子

地点

◆风险组/生物安全等级、设备

◆气溶胶风险

◆受限制的过道

◆基本的实验室-门、易清洁的地方、冲眼器、窗户

◆标签

◆用直接气流预防

2.2暴露途径

生物因子要导致疾病发生，首先必须有足够数量的因子进入或侵入人体，进入的途径有经口、呼吸道、黏膜及与动物的接触（叮、抓伤），当生物危害物进入人体，它产生疾病还需满足其它条件，它们必须在人体细胞、组织和/或器官内生长繁殖，克服人体的自然免疫机制和变异或适合人体的变化。

年龄、免疫状况、职业、物理或地理环境等因素会导致个体对疾病的不同易感性。

在涉及生物危害时，确定其最低感染量是很困难的。

同一病原体相同剂量在一个人身上可能无症状，而在另一人身上可能导致严重的症状甚至致命。

有些微生物只要一个进入到人体就足以侵入并促使疾病的发生，结核杆菌就是一个例子。

暴露途径的更多信息见下图。

MucousMembranes:

Exposurestomucousmembranesoftheeyes,noseandmouththroughsplashesorsplatters.

Ingestion:

Mouthpipetting,eating,drinking,smokinginthelab.

Inhalation:

Breathinginrespirablesizedaerosols（<5µm）,centrifugeleaks,spills,pipetting,etc.

Percutaneous:

Throughintactornon-intactskinvianeedlestick,puncturewithcontaminatedsharpobject,animalscratchorbite,throughwoundsabrasions,oreczema.

Contact（indirecttransmission）:

Viamucousmembranesornonintactskinfromhandsthathavebeenincontactwithacontaminatedsurface（i.e.benches,phones,

2.2.1实验室内传染因子的传播途径

暴露途径

防护措施

黏膜：

通过飞溅或溅泼暴露眼、鼻、嘴里的

黏膜

通过以下方式进行面部的预防：

◆戴护眼镜或面罩

◆在生物安全柜内或保护罩后工作

◆进行规范的微生物操作

吸入：

由于离心渗漏、溢出或产生气溶胶的

操作如吸液、混匀等而吸入了可吸入

的气溶胶粒子（直径<5µm）。

通过以下方式避免暴露气溶胶：

◆在生物安全柜内工作

◆离心时使用密封转子或杯

◆进行规范的微生物操作

吞咽；口腔吸入、吃、喝、在实验室里抽烟

通过以下方式防止经吞咽产生的暴露：

◆不在实验室内吃、喝或吸烟

◆始终使用手工吸液

◆进行规范的微生物操作

经皮:

被感染过的锐器刺伤完好或破损皮肤、

动物叮咬、抓伤、湿疹

通过以下方式防止皮肤破损：

◆用塑料制品代替玻璃制品

◆使用锐器要非常小心

◆用后立即将锐器丢弃在坚固防漏容器内

◆适当限制动物

◆戴不易划破的手套、袖套、

◆用防水绷带包扎好破损皮肤并戴双层手套

接触（间接传播）:

通过接触污染面（如凳、

电话、电脑、设备把手等）的手来触

摸黏膜或破损皮肤，或实验后洗手不

彻底。

通过以下方式防止间接暴露：

◆工作台面消毒

◆工作后、脱去手套后总是洗手。

◆不要用戴手套或不戴手套的手触摸脸部（良

好的个人习惯）

◆实验室内不使用化妆品。

在实验室内的任何时候始终执行以下工作制度：

◆不在实验室内吃、喝或吸烟

◆工作结束后或脱去手套后总是洗手

◆实验室内穿戴好个人防护设备，离开实验室前务必脱去个人防护设备

◆不用口吸、始终用手工吸液

◆使用锐器格外小心

◆用合适的设备抑制气溶胶的产生

◆对工作台面、溢出物和废弃物进行消毒

2.3生物安全等级

国家和卫生部对微生物和生物医学实验室确立了从事生物危害工作对应的生物安全等级。

提供了微生物操作、实验室设备和安全设施的结合使用，以及所选的感染因子与使用推荐的四种生物安全等级的实验室操作。

以下是1-4级生物安全所要求的实验室操作、防护设备、实验室设施和传染因子的概括。

2.3.1所推荐的生物安全等级与相应感染因子

生物安全等级

感染因子

规程

安全设备

（第一道屏障）

实验室设备

（第二道屏障）

BSL-1

已知对健康成人

和动物不造成疾

病。

标准微生物操作。

不需要。

◆开放工作台。

◆防止节肢动物和啮齿动物进入。

◆实验室靠近出口处有洗手池。

◆实验室的窗户有纱窗。

◆适当的消毒设备。

BSL-2

能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。

实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。

BSL-1操作加：

◆限制进入

◆生物危害警示标记

◆锐器谨慎使用

◆制定安全手册，确定

所有废物消毒和医疗监督计划

I级orII级生物安

全柜或其它物理防护

设备，这些设备应用

于可能会产生飞溅或

气溶胶的感染因子的

操作；个人防护设备：

外套、手套、所需要

的面部防护

BSL-1加：

◆实验室门应带锁并可自动关闭。

◆应设洗眼设施、高压灭菌锅。

BSL-3

能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。

BSL-2操作加：

◆控制进入

◆所有废弃物消毒

◆实验室衣服洗之前对

其进行消毒

II级（B2）或Ⅲ级生物安全柜和用于所有感染因子操作的其它物理防护设备；个人防护设备：