同时蒸馏萃取和固相微萃取分析卤水干豆腐挥发性成分比较精Word文件下载.docx
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Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ａｎｓｈａｎ
１１４１３０５．Ｌｉａｏｎｉｎｇ。
Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：
ＶｏｌａｔｉｌｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＢｒｉｎｅｄｒｉｅｄｔｏｆｕｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙＳｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ
Ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＳＤＥ）ａｎｄＳｏｌｉｄ－ｐｈａｓｅ
Ｍｉｃｒｏ—ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＳＰＭＥ）ｍｅｔｈｏｄ
ｗｅｒｅ
ｉｄｅｎｔｉｆｅｄｂｙＧａｓＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—ｍａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＧＣ—ＭＳ），ｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｓｕｉｔ・
ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔ
ｅｘ—
ａｂｌｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｔｈｅｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍｂｒｉｎｅｄｒｉｅｄｔｏｆｕ．ＦｏｒＳＤＥｍｅｔｈｏｄ，５３ｖｏｌａｔｉｌｅｔｒａｃｔｅｄａｎｄｉｔｉｓｃｏｎｄｕｃｔｉｖｅ
ｔｏ
ｓｅｐａｒａｔｅｔｈｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｉｔｈｈｉｇｈｂｏｉｌｉｎｇｐｏｉｎｔ．ＦｏｒＳＰＭＥｍｅｔｈｏｄ，２５ｖｏｌａｔｉｌｅ
ｃａｎ
ｅｘｔｒａｃｔｅｄ，ａｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅｑｕａｎｔｉｔｙｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｓｓｍａｌｌｅｒｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＳＤＥｍｅｔｈｏｄ，ｉｔ
ｒｅｆｌｅｃｔｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌ
ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｂｒｉｎｅｄｒｉｅｄｔｏｆｕａｎｄ
ｂｅｕｓｅｄｆｏｒｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｗｉｔｈｔｈｅａｄｖａｎｔａｇｅｏｆｅａｓｙ
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ｔｗｏ
ｎｏｔｕｓｅ
ｓｏｌｖｅｎｔｓ
ａｒｅ
ｏｒ
ｄｅｓｔｒｏｙｔｈｅｔｅｓｔｉｎｇｓａｍｐｌｅｓ．Ｔｈｅｃｏｍｍｏｎｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎｂｒｉｎｅｄｒｉｅｄｔｏｆｕｉｄｅｎｔｉ—
ｆｌｅｄｂｙｔｈｅ
ｍｅｔｈｏｄｓ
Ｈｅｘａｎａｌ，１－Ｈｅｘａｎｏｌ，ｓｔｙｒｅｎｅ，Ｈｅｐｔａｎａｌ，Ｆｕｒａｎ，２－ｐｅｎｔｙｌ一，Ｏｃｔａｎａｌ，Ｂｅｎｚａｌｄｅｈｙｄｅ，１一ｏｃｔｅｎ－３・ｏｌ
ａｎｄＮｏｎａｎａｌ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：
Ｓｏｌｉｄ—ｐｈａｓｅＭｉｃｒｏ－ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；
ＳｉｍｕｌｍｎｅｏｕｓＤｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎａｎｄＥｘｔｒａｃｔｉｏｎ；
Ｂｒｉｎｅｄｒｉｅｄｔｏｆｕ；
ＧａｓＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—ｍａｓｓＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ
豆制品富含蛋白质，其含量与动物性食品相当。
目前，很多学者都热衷于对传统豆制品得率¨
刮和营养成分＂ｏ的研究，而对豆制品挥发性成分的研究也基本都集中在发酵豆制品上№４］，忽略了对豆制品本身固有挥发性成分的研究。
同时蒸馏萃取法（Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ
ＤｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎＥｘ—
Ｍｉｃｒｏ—ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ＳＰＭＥ）技术是２０世纪９０年代初兴起的一种样品前处理技术，最先由加拿大Ｗａｔｅｒ—Ｊｏｏ大学的Ｐａｗｌｉｚｙｎ等人提出一１。
它利用内涂固定液的石英纤维萃取样品中的化学成分，具有分析时间短、不使用有机溶剂、样品无需前处理等优点。
该研究利用同时蒸馏萃取法和固相微萃取法对卤水干豆腐的挥发性成分进行分离鉴定，并加以比较。
旨在确定出萃取卤水干豆腐挥发性成分的最佳方法，为卤水豆制品香精香料的研究提供理论依据。
ｔｒａｃｔｉｏｎ，ＳＤＥ）是用于分析样品中半挥发性、挥发性成分的分离方法。
该法将水蒸气蒸馏和溶剂萃取结合到一起，既减少了试验步骤、缩短了分析时间，又节省了萃取所用的试剂旧１；
固相微萃取（Ｓｏｌｉｄ．ｐｈａｓｅ
收稿日期：
２００９．１１．２４
第一作者简介：
李晶（１９８５．），女。
在读硬士，研究方向为食品生物技术。
Ｅ－ｍａｉｌ：
ｌｉｊｉｎｇ＿１０３２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｃｏ。
通讯作者：
辛广，教授．博士。
Ｅ．ｍａｉｌ：
ｘｓｕａｎ９２１２＠１６３．ｅｏｍ。
万方数据
３期李晶等：
５０３
１材料与方法
１．１材料、仪器及主要试剂
供试材料：
市售卤水干豆腐。
仪器设备：
气相色谱一质谱一计算机联用仪（ＧＣ／ＭＳ），美国惠普公司；
同时蒸馏萃取（ＳＤＥ）装置及Ｒ一２０１型旋转蒸发器，上海中科机械研究所；
ＦＡ２００４电子天平，上海天平仪器厂；
ＵＨ一８００Ａ超声波细胞粉碎仪，天津奥特恩斯仪器有限公司；
电子调温电热套，天津市泰斯特仪器有限公司；
固相微萃取器手柄、５０／３０
ｍ
放人２５０ｍＬ三角瓶中，放人６ｇ氯化钠，搅匀，用胶塞封好口。
将封好的三角瓶放入４０。
Ｃ水浴锅中，待样品温度达到４０。
Ｃ时，将手动ＳＰＭＥ装置直接插入样品瓶中，推出石英纤维萃取头，不接触样品，顶空
吸附３０ｍｉｎ。
然后及时将石英纤维插入色谱仪口
中，解析５ｒａｉｎ，不分流进样，用ＧＣ．ＭＳ进行分离鉴
定。
２结果与分析
２．１
处理条件的比较
同样处理１００ｇ干豆腐，ＳＤＥ用１
０００
ＤＶＢ／ＣＡＲ／ＰＤＭＳ的萃取纤维头，上海ｍＬ蒸馏
ｈ
安谱科学仪器有限公司。
主要试剂：
无水硫酸钠（ＡＲ）、无水乙醚（ＡＲ）。
１．２试验条件
１．２．１
水，１００ｍＬ无水乙醚以，超声波破碎４０ｍｉｎ，经６
蒸馏萃取得到干豆腐的萃取液，并加入一定量的无水硫酸钠放置过夜；
而ＳＰＭＥ是直接将纤维萃取头推入于豆腐的顶空中４０℃下吸附３０ｒａｉｎ，然后再将萃取头直接插入色谱进样１３中即可，只消耗６ｇ氯化钠，并节省了时间和水电。
２．２鉴定出的挥发性成分的比较
ＳＤＥ和ＳＰＭＥ萃取的同种干豆腐的挥发性成分的气相色谱图见图１。
鉴定结果如表１所示，由固相微萃取检测出的成分有２５种，其中烃类１０种、醛类６种、酮类１种、醇类４种，其它物质４种。
而由同时蒸馏萃取所鉴定出的成分有５３种，其中烃类１４种、醛类１４种、酮类３种、醇类３种、酚类４种、吲哚２种、呋喃１种、酯类２种、酸类１种，其它物质９种。
其中共同成分有９种，分别是己醛、１一己醛、苯乙烯、
气相色谱条件色谱柱为ＨＰ一５
２５．０ｍ×
０．２ｍｍｘ０．３３
ｍ弹性石英毛细管柱，载气为Ｈｅ气；
载
气流量１ｍＬ・ｒａｉｎ～；
进样口温度２３０。
Ｃ；
程序升温为：
初始温度５０℃，然后以５。
Ｃ・ｒａｉｎ。
的速度上升到２２０。
分流比为２０：
ｌ；
进样量为０．２Ｌ；
溶剂延迟３
ｒａｉｎ。
固相微萃取采用不分流进样，解析时间为５
１．２．２质谱条件
ｍｉｎ。
离子源为ＥＩ源，离子源温度为
２３０。
接口温度为２３０℃；
四级杆温度为１５０。
倍增器
电压为１２００Ｖ；
发射电流３４．６Ａ；
扫描范围２０－５００ａｍｕ．１．３试验方法
１．３．１
同时蒸馏萃取秤取干豆腐１００ｇ，切碎放
ｍＬ圆底烧瓶中，加１
ｍＬ蒸
入２５０ｍＬ烧杯中，加适量蒸馏水，超声波破碎４０ｒａｉｎ，然后倒入２
正庚醛、安息香醛、２征戊基呋喃、辛醛、壬醛和１一辛
烯．３．醇。
利用同时蒸馏萃取法比固相微萃取法多检
测出几个种类，包括吲哚２种、呋喃２种、酯类２种、
馏水使之全部浸透。
采用同时蒸馏萃取的方法萃取
６
ｈ。
将所得到的挥发油醚溶液用无水硫酸钠干燥
过夜，用旋转蒸发器浓缩，获得具有特殊香味的淡黄色透明液体，将其封入自制的玻璃管中，待测。
１．３．２固相微萃取秤取１００ｇ干豆腐，将其粉碎，
酸类１种。
结果表明同时蒸馏萃取法比固相微萃取法检测出的成分更全面，更有利于卤水干豆腐挥发性成分的分析研究。
Ｌ｜－Ｉ．卜—√
ＳＰ副匮ＳＤＥ
圈１
Ｆｉｇ．１
固相微萃取和同时蒸馏萃取法所得萃取物的气相色谱图比较
ｇｒａｍｓｏｆｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙＳＤＥａｎｄＳＰＭＥ
Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｆｏｒｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
表ｌ
Ｔａｂｌｅ１
ＳＤＥ与ＳＰＭＥ检测的挥发性成分
ＳＰＭＥ
ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｆｏｒｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙＳＤＥａｎｄ
Ｎｏ．ｉ２３４５６７８９１０１ｌ１２１３１４１５１６１７１８１９２０２１２２２３２４２５２６２７２８２９３０３１３２３３
ＲｅｔａｉｎＴｉｍｅ／ｒａｉｎ
１．１９２．７９２．８４３．１２３．２５
Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ
ＦｏｒｍｕｌａＣ４ＨＩｏＯ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
７４８８９２１１２１００１１２１００９６９８１０６１０２１０６１１４１１４１０４１１４１５１９６１１２１１２１０６１２８９４１３８１２８１１０１２４１２４１２６１２０１３０１０８１４２１４２１２２ｌ】７１２２１４０１２２１５６１３８１２０１３５１３ｌ１３２１１７１５２２１４１３Ｉ１９８２８２２２６２４０２６６２５４２８２２６４２７８
ｗｅｉ小ｔｓ
＋＋＋＋＋＋＋一一一＋一一＋＋＋＋
．
乙氧基乙烯１一戊醇甲苯１一辛烯
己醛
Ｃ５Ｈ１２０
Ｃ７ＨＩＣｇＨｌ６Ｃ６Ｈ１２０ＣｌＨｌ６Ｃ６Ｈ１２０Ｃ５Ｈ４０２Ｃ６ＨＩｏＯＣＢＨＩｏ
一一＋一一＋＋＋＋＋＋一＋＋一
３．４８３．６７
３．８３４．１７４．３８４．４６４．５２４．９１４．９２４．９８５．１６５．２６５．６９６．４５６．４６６．６１７．０４７．１２７．３８７．６６７．８６８．４５８．４７８．６４８．７９９．４８９．６６１０．０９ｌＯ．４５ｌＯ．７３ｌ】．４３１１．７１１１．９９１２．２３１２．９２１３．５１１３．７１３．８６１４．２７１５．１２１５．７７１６．３１１７．３１１８．２１８．４３２０．９４２３．２８２５．５３２６．４６２７．６６２７．８６２８．６７２９．１５
（Ｅ）一２一辛烯５一己烯一１一醇糠醛
（Ｅ）一２一己烯醛乙苯ｌ一己醇
１，２一二甲苯聚丙烯庚酮２一庚酮苯乙烯
正庚醛
Ｃ６Ｈ１４０
Ｃ。
Ｈ１０Ｃ，Ｈ１４０
Ｃ７Ｈｔ‘０
Ｈｌ
Ｃ，Ｈ１．０
ＣＢＨ９Ｎ０２Ｃ７Ｈ１２ｃ７Ｈ１２０Ｃ７Ｈ，２０Ｃ７Ｈ６０ＣｏＨｌ６０
甲氧基苯基肟环庚烯
（ｚ）一２一丁烯醛（ｚ）一２一庚烯醛安息香醛１一辛烯一３一醇苯酚
２一正戊基呋喃辛醛
（Ｅ，Ｅ）一２，４一庚二烯醛
３一乙基一２一甲基一Ｉ，３一己二烯（ｚ）一３一乙基一２一甲基一１，３一己二烯３一辛烯一２一酮２一癸烯醛１一辛醇
４一甲基一苯酚
２一壬酮壬醛
—４－一＋＋＋一＋＋一一＋一一一一一４－一一一一一一一一一一一一一一一一＋一一一一一一一
＋一＋＋＋＋＋＋＋一＋＋
Ｃ６吨０
ｃ９Ｈ１４０ｃｌＨｌ６０ｃ７Ｈ１００
Ｃ９Ｈ１６
ｃ９Ｈ１６Ｃ８Ｈ１４０ＣｓＨｌＯｃｓＨ，１０Ｃ７ＨＢ０
＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋一＋＋＋＋＋＋＋
Ｃ９ＨｌＢ０
Ｃ９Ｈｌ８０ＣｓＨｌ００ｃｓＨ７ＮＣ８Ｈ１００Ｃ９Ｈ１６０ｃｌＨＩｏＯＣＴｏＨ２００Ｃ９Ｈ１４０Ｃ８Ｈ８０Ｃ７Ｈ５ＮｓＣ９Ｈ９ＮＣ９ＨｇＯＣ８Ｈ７ＮＣｌｏＨｌ６０Ｃ１２Ｈ２２０３Ｃ９Ｈ９ＮＣｌ，Ｈ∞Ｃ２０Ｈ，２Ｃｉ６Ｈ３４Ｃ１７Ｈ３６Ｃ１６Ｈ２６０３ＣｌｓＨ３Ｓｃ２０Ｈ４２ｃ，９Ｈ３６ｃ１６Ｈ２２０‘
３４
３５３６
ａ一苯乙醇２一甲基苯甲腈２．４一二甲基酚（Ｅ）一２一壬烯醛４一乙基苯酚
２一癸酮
３７
３８３９４０４１４２４３４４４５４６４７４８４９５０５ｌ５２５３５４５５５６５７５８
（Ｅ，Ｅ）一２，４一壬二烯醛乙烯氧基苯
苯并噻唑
苯丙睛
３一苯基一２一丙烯醛
叼Ｉ哚
２．４一癸二烯醛己酸酐３一甲基ⅡｊＩ哚
十四烷
二十烷十六烷
十七烷
２一十二烷烯一ｌ一基丁二酸酐十八烷植烷
５一乙基一５６一乙基顺一八氢一１Ｈ一茚邻苯二甲酸二异丁－酯
同时蒸馏萃取和固相微萃取分析卤水于豆腐挥发性成分比较
５０５
。
＋”表示检出，“一”表示未检出。
以上成分的匹配度都在７０％以上。
＋”ｄｅｎｏｔｅｓ
ｗａｓ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ．“一”ｄｅｎｏｔｅｓＷｆｌｇｎｏｔ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅｍａｔｃｈｉｎｇｏｆｔｈｅａｂｏｖｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ
ｍｏｒｅｔｈａｎ７０％
（ＬｉＬＴ．Ｓｏｙｂｅａｎｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：
Ｃｈｅｍｉ・
３结论与讨论
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ＤＴ，ＮｇＰＫＷ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｔｏｒａｇｅｐｒｏｔｅｉｎｓ
ｖａｒｉｅｔｉｅｓ
ａｎｄ
ｔｈｅｉｒ
ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ
ＭｕｊＯＯ
ｉｎ
Ｒ，Ｔｒｉｎｈ
固相微萃取检测出的挥发性成分有２５种，同时蒸馏萃取所鉴定出的挥发性成分有５３种。
可见，同时蒸馏萃取法更能全面的提取出卤水干豆腐的挥发性成分。
２种方法共同检测出的成分有己醛、１．己醛、苯乙烯、正庚醛、２．正戊基呋喃、辛醛、１．辛烯．３．醇、安息香醛和壬醛。
己醛具有脂肪味、新鲜、青草味、水果味；
１，己醇具有草本味、木本味、芬芳；
苯乙烯具有芳香、如香油味、花香¨
…；
正庚醛有果子香气，用于配制桔子香精和玫瑰香精等；
２．正戊基呋喃具有青豆味、金属味；
辛醛有果子香气；
１．辛烯－３．醇具有草本味、泥土味；
安息香醛具有苦杏仁味；
壬醛具有脂肪、花香、蜡香、柑橘香气。
这些香气特征综合在一起，构成了卤水干豆腐的主要风味特征。
虽然ＳＤＥ萃取时间较长，但可以把卤水干豆腐中的挥发性成分最大限度地萃取出来。
ＳＰＭＥ法能够基本上反映卤水干豆腐的原始信息，可用于卤水干豆腐挥发性成分的初步鉴定。
但是其对试验条件的依赖性较大，特别是纤维萃取头使用一段时间后由于固定相流失，吸附能力明显下降，不容易得到理想的重复性结果。
卤水干豆腐中的挥发性成分主要以烃类为主，而在卞顺平等”１对豆腐挥发性风味成分的研究中并没有检测出。
该文鉴定出的卤水干豆腐挥发性物质主要成分，为卤水豆制品香精香料的研究打下坚实
的基础。
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李晶，辛广，张博，李书倩，LIJing，XINGuang，ZHANGBo，LIShu-qian李晶,LIJing（沈阳农业大学,食品学院,辽宁,沈阳,110866），辛广,李书倩,XINGuang,LI
Shu-qian（沈阳农业大学,食品学院,辽宁,沈阳,110866;
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