高考生物真题专项汇编卷全国通用知识点13生物技术实践Word下载.docx
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（3）某同学若用乙装置进行发酵，并设置两个不同处理组（乙A和乙B），乙A装置中保留一定量的氧气，乙B装置中没有氧气。
在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内乙A和乙B中酒精含量的变化趋势及乙A中氧气含量的变化趋势如曲线图所示。
图中曲线①、②、③依次表示________________、______________、________________含量的变化趋势。
（4）从细胞呼吸类型看，酵母菌属于______________生物；
从同化作用的类型看，酵母菌属于_____________（填“自养”或“异养”）生物。
5、豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。
为了研究影响豆豉发酵效果的因素,某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀,再将两者置于适宜条件下进行发酵,并在32h内定期取样观测发酵效果。
回答下列问题:
（1）该实验的自变量是__________、__________。
（2）如果发现发酵容器内上层大豆的发酵效果比底层的好,说明该发酵菌是__________。
（3）如果在实验后,发现32h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系,则无法确定发酵的最佳时间;
若要确定最佳发酵时间,还需要做的事情是__________。
（4）从大豆到豆豉,大豆中的成分会发生一定的变化,其中,蛋白质转变为__________,脂肪转变为__________。
6、回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题:
（1）制作泡菜时,为缩短发酵周期,腌制前可加入乳酸菌。
取少量酸奶,用无菌蒸馏水稀释后,再用__________蘸取少量的稀释液,在MRS乳酸菌专用培养基的平板上划线,以获得乳酸菌单菌落。
下图所示的划线分离操作,正确的是__________。
（2）泡菜腌制过程中,会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐,其中醇类是由__________进行厌氧呼吸产生。
亚硝酸盐对人体有害,为测定泡菜中亚硝酸盐含量,从泡菜中提取要硝酸盐,与__________发生重氮化反应,再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物。
然后用光程为1cm的__________,在550nm光波下测定光密度值,与由一直浓度梯度亚硝酸钠制作的__________比对,计算样品中亚硝酸盐的含量。
（3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。
在一定的腌制时间内,随着腌制时间的延长,泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低,是由于在厌氧和__________环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
7、回答下列与细菌培养相关的问题。
（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。
通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是________。
硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够”或“不能”）生长，原因是____________。
（2）用平板培养细菌时一般需要将平板____________（填“倒置”或“正置”）。
（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________。
（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过____________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。
8、物质W是一种含氮有机物，会污染土壤。
W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。
某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。
回答下列问题。
（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_________。
（2）在从土壤中分离目标菌的过程中，发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示）。
如果要得到目标菌，应该选择________菌落进一步纯化，选择的依据是________。
（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。
若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______。
（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。
为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_________，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。
若C处没有出现透明圈，说明___________；
若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明___________。
9、已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。
某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。
Ⅰ号培养基：
在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5g/L）。
Ⅱ号培养基：
氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（15g/L）。
Ⅲ号培养基：
氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（45g/L）。
（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是___________。
Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是_________。
（2）若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_________，其原因是_________。
（3）Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是______________。
（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_________和_________。
10、酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。
有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。
研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。
下图所示为操作流程，请回答下列问题:
（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的__________，及时对培养基进行分装，并进行__________灭菌。
（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约__________（填25℃、50℃或80℃）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。
（3）挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。
下列叙述合理的有__________。
a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株
（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和__________供应。
为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×
16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上__________色细胞的个数应不少于__________，才能达到每毫升3×
109个活细胞的预期密度。
11、回答下列与酵母菌有关的问题:
（1）分离培养酵母菌通常使用__________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基,该培养基应采用__________灭菌法灭菌。
若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是__________。
（2）酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进__________（填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”）;
若进行厌氧培养,可促进__________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）。
（3）制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是__________。
12、将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。
在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。
（1）M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制__________的生长，加入了链霉素的培养基属于__________培养基。
（2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有__________（答出两点即可）。
氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有__________（答出两点即可）。
（3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。
加入的显色剂是__________，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是__________。
（4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133;
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。
有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是__________。
13、在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。
（1）在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具__________（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬间消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是__________。
（3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能__________。
在照射前,适量喷洒__________,可强化消毒效果。
（4）水厂供应的自来水通常是经过__________（填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”）消毒的。
（5）某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是__________。
14、某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。
（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生______________。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是____________________________，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是___________________________（答出两点即可）。
（2）为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择__________________________（填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”）作为氮源，不选择其他两组的原因是____________________________。
（3）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有___________________________（答出两点即可）。
15、绿色植物甲含有物质W，该物质为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。
其提取流程为：
植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→收集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏（含回收溶剂）→重结晶→成品。
（1）在提取物质W时，最好应选用的一种原料是_____________（填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”）的植物甲，不宜选用其他两种的原因是_______________________________________。
（2）提取物质W时，振荡的作用是_______________________________________。
（3）活性炭具有很强的吸附能力，在提取过程中，用活性炭处理提取液的目的是__________________________。
（4）现有丙酮（沸点56℃）、乙醇（沸点约78℃）两种溶剂，在提取物质W时，应选用丙酮作为提取剂，理由_______________________________________。
（5）该实验操作过程中应注意的事项是__________________________（答出两点即可）。
答案以及解析
1答案及解析：
答案：
B
解析：
制作果酒的酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型,制作酸奶的乳酸菌属于厌氧菌,只能在无氧条件下繁殖,制作果醋的醋酸菌的代谢类型是异养需氧型;
腐乳是用豆腐发酵制成,多种微生物参与发酵,其中起主要作用的是毛霉。
毛霉是一种丝状真菌具发达的白色菌丝。
毛霉等微生物产生的以蛋白酶为主各种酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;
脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
乳酸菌是一种严格的厌氧菌,有氧气存在时,其发酵会受到抑制,因此利用乳酸菌制作酸奶的过程中,应一致处于密闭状态,否则会导致发酵失败,A错误;
家庭制作果酒、果醋与腐乳过程中所用的菌种均来源于自然环境,有多种微生物参与发酵过程,因此均不是纯种发酵,B正确;
果醋制作过程中,醋酸菌有氧呼吸产生二氧化碳和水,二氧化碳溶于水形成碳酸,随着二氧化碳浓度的增加,溶液的pH逐渐降低;
果酒制作过程中,酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳与酒精,二氧化碳溶于水形成碳酸,随着二氧化碳浓度的增加,溶液的pH逐渐降低,因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低,C错误;
毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶参与腐乳发酵,D错误。
2答案及解析：
A
DNA粗提取选材的标准：
DNA含量高，并且材料易得．由于哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器，因此不采用哺乳动物的血液。
DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；
DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。
3、DNA的鉴定：
在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】兔属于哺乳动物，其红细胞没有细胞核及各种细胞器，提取不到DNA，而鸡属于鸟类，其红细胞内含有细胞核与各种细胞器，DNA含量较多，A错误；
DNA分子从细胞中被释放出来且除去蛋白后是非常容易断裂的,如果太过剧烈的搅拌，DNA链可能会被破环，因此轻柔搅拌的目的是为了获得较完整的DNA分子，B正确；
在冷的95%酒精溶液中DNA的溶解度最低，DNA的沉淀量最大。
如果用热的95%酒精会提高DNA的溶解度,不能完全使DNA沉淀，C正确；
将析出的DNA溶解在2mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后需要水浴加热才会呈现蓝色，D正确。
3答案及解析：
D
本题主要考查固定化细胞的相关知识点,回忆制作过程中的注意事项:
（1）配制海藻酸钠溶液:
小火、间断加热、定容,如果加热太快,海藻酸钠会发生焦糊;
（2）海藻酸钠溶液与酶母细胞混合:
冷却后再混合,注意混合均匀,不要进入气泡;
（3）制备固定化酵母细胞:
高度适宜,并匀速滴入;
（4）刚溶化的海藻酸钠应冷却后再与酵母菌混合,否则温度过高会导致酵母菌死亡。
在酵母细胞固定化实验中,应该用小火、间断加热的方式使海藻酸钠缓慢溶解,A错误;
将混合液用注射器缓慢滴加到CaCl2溶液进行固定化酵母细胞,CaCl2的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠,B错误;
注射器（或滴管）出口应与液面保持适当的距离,以保证凝胶珠成为球状,C错误;
包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状,并具有一定的弹性,D正确。
4答案及解析：
（1）不需要开盖放气;
避免了因开盖引起的杂菌污染;
（2）为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气;
防止发酵旺盛时汁液溢出;
（3）乙A中的氧气;
乙B中的酒精;
乙A中的酒精;
（4）兼性厌氧;
异养
（1）试管中的X溶液能够吸收酵母菌酒精发酵产生的CO2有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定,果酒制作过程中除了能产生酒精,也会释放二氧化碳,因此要每隔12小时左右（一定的时间）将瓶盖拧松一次,将二氧化碳排出。
与乙装置相比,甲装置的优点是不需要开盖放气、避免了因开盖引起的杂菌污染。
（2）葡萄汁装入甲装置时,要留有约1/3的空间,这样既可以为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气,又可以防止发酵旺盛时汁液溢出。
（3）某同学若用乙装置进行发酵,并设置两个不同处理组（乙A和乙B）,乙A装置中保留一定量的氧气,酵母菌先进行有氧呼吸消耗氧气,氧气减少,然后再进行无氧呼吸产生酒精和CO2,酒精含量增加,乙B装置中没有氧气,只进行无氧呼吸,产生酒精和CO2,酒精含量一开始增加,因此在其他条件相同且适宜的情况下,测得一段时间内乙A中氧气含量的变化趋势如曲线①,乙A中酒精含量的变化趋势如曲线③,乙B中的酒精含量的变化趋势如曲线②。
（4）酵母菌在有氧和无氧条件下均能生存,需要消耗营养物质,其异化作用类型是兼性厌氧型,其同化类型为异养型。
5答案及解析：
（1）菌种;
发酵时间;
（2）好氧菌;
（3）延长发酵时间,观测发酵效果,最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间;
（4）氨基酸和肽;
甘油和脂肪酸
（1）根据题意“某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀”“在32h内定期取样观测发酵效果”可知,自变量是不同的菌种和不同的发酵时间。
（2）上层大豆的发酵效果比底层的好,说明上层的菌种生长状况比底层好,与底层相比,上层的氧气含量较高,所以该发酵菌应该是好氧菌。
（3）根据题意“发现32h内的发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系”可知,对应的曲线没有出现峰值,无法确定最佳发酵时间,所以为了确定最佳发酵时间,还需要延长发酵时间,观测发酵效果,最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间（即对应的曲线应出现峰值,峰值对应的时间即为最佳发酵时间）。
（4）微生物产生的蛋白酶将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸,脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
6答案及解析：
（1）接种环;
B;
（2）假丝酵母;
对氨基苯磺酸;
比色杯;
标准曲线;
（3）酸性
（1）在这道题里,乳酸菌的接种方法为平板划线法。
平板划线法中用接种环蘸取菌液进行划线。
第一次画三至五条平行线,然后灼烧接种环,待其冷却后从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。
重复以上操作,在三、四、五区域内划线,要注意不要将最后一区划线与第一区相连,因此正确的操作是B。
（2）产生醇类的是假丝酵母,其无氧呼吸产生醇类。
检测亚硝酸盐的含量通常采用比色法,原理为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,形成玫瑰红色染料。
用光程为1cm的比色杯在550nm处测定光密度值,与制作的标准曲线对比,利用公式计算亚硝酸盐的含量。
（3）亚硝酸还原酶在厌氧和酸性环境下能够降解亚硝酸盐,故在一定的腌制时间内,泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低。
7答案及解析：
（1）蛋白胨;
不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同;
能够;
硝化细菌可以利用空气中的二氧化碳作为碳源;
（2）倒置;
（3）在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征;
（4）灭菌
（1）蛋白胨含有C、H、O、N等元素，葡萄糖只含有C、H、O，NaNO3不含有C，所以培养基中蛋白胨能同时提供碳源和氮源。
不同细菌生长繁殖所需要的pH不同，因此培养不同的细菌，需要调节培养基的不同pH。
硝化细菌属于化能自养型细菌，可以将空气中的二氧化碳等无机物合成为有机物，它可以在没有碳源的培养基上生长。
（2）用平板培养基培养细菌时，一般需要将平板倒置，以防止培养皿盖上凝结的水珠滴落，导致污染。
（3）不同种的微生物在一定条件下培养，可在培养基上形成大小、颜色、形状等不同的菌落，这是一种比较稳定的特征，可根据菌落的特征区分不同种的微生物。
（4）使用后的培养基需要用强烈的物理或化学手段进行灭菌，以杀灭其中所有的微生物，避免污染环境。
8答案及解析：
（1）W;
（2）乙;
乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W;
（3）将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源;
（4）缓冲液;
缓冲液不能降解W;
酶E与天然酶降解W的能力相近;
本题考查营养条件对微生物培养的影响、筛选目标菌的方法等。
（1）要筛选出能降解w的目标菌，应用W为唯一氮源的选择培养基进行选择。
（2）培养基上甲、乙两种菌都能生长，但只有乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W，所以要得到目标菌，应选择乙菌落进一步纯化。
（3）要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，应将甲、乙菌分别培养在无氮源培养基上，看细菌能否生长，能生长的细菌能利用空气中的氮气作为氮源。
（4）①为比较酶E与天然酶降解W能力的差异，应遵循等量原则和单一变量原则科学设计实验，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加缓冲液，三处滴加量相同。
②一段时间后可以通过透明圈的有无和直径的大小判断W被降解的程度。
C处不出现透明圈，说明缓冲液不能降解W；
A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明酶E与天然酶降解W的能力相近。
9答案及解析：
（1）牛肉膏、蛋白胨;
X;
（2）下降;
不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖;
（3）稀释涂布平板法;
（4）能量;
合成其他物质的原料
（1）氮源是微生物生长需要的一类营养物质，是含氮化合物，可为微生物的生长提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，因此在I号培养基中，可为微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。
碳源也是微生物生长所需要的一类营养物质，可为微生物的生长提供碳元素，而有机物均含碳元素，Ⅱ、Ⅲ号培养基均含有有机物X，因此，Ⅱ、Ⅲ号培养基为微生物的生长提供碳源的均为有机物X。
（2）由于Ⅱ号培养基含有的碳源只有有机物X，所以若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的
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