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多聚酶链式反应扩增DNA片段

4、7

血红蛋白的提取和分离

3、8、9、11、12、15、17

DNA的提取与鉴定

6、14

                   

一、单项选择题

1.某种花卉感染了植物病毒,叶子呈现疱状,欲培养出无病毒的后代,应采取的方法是(  )

A.用种子培养后代

B.用无明显症状部分的枝扦插

C.用茎尖进行组织培养诱导出植株

D.用叶表皮细胞进行组织培养,诱导出植株

2.植物组织培养所需营养的叙述中,不正确的是(  )

A.MS培养基既含硝态氮又含铵态氮

B.维生素以辅酶的形式参与生物催化剂酶系活动

C.植物生长调节物质包括生长素、细胞分裂素及赤霉素等

D.植物组织培养过程中无需从外部供糖

3.选用红细胞做分离蛋白质的实验材料,下列是其优点的是(  )

A.血红蛋白是有色蛋白B.红细胞无细胞核

C.红细胞蛋白质含量高D.红细胞DNA含量高

4.下列关于PCR的描述中,不正确的是(  )

A.PCR技术的原理是DNA复制

B.是一酶促反应,需耐高温的解旋酶加DNA聚合酶

C.一个DNA片段经PCR扩增,可以形成2n个DNA片段(n代表循环次数)

D.PCR利用了DNA的热变性来控制DNA的解聚与结合

5.下列对花药培养的有关认识中,错误的是(  )

A.材料的选择与培养基的组成影响花药培养的成功率

B.选择花药时常用的方法是醋酸洋红法

C.选取的材料一定要进行消毒

D.培养形成的胚状体可继续在原培养基中分化形成植株

6.(2012·

广东实验)对比“血红蛋白的提取与分离”和“DNA的提取与鉴定”两实验,有关说法中正确的是(  )

A.二者都用到了NaCl溶液

B.二者使用的实验材料相同

C.从细胞中释放目的物的方法完全相同

D.从溶液中分离目的物的方法相同

7.多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,其简要过程如下图所示。

下列关于PCR技术叙述不正确的是(  )

A.PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术

B.反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板

C.PCR技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增

D.应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变

8.相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为下图中的哪一个(  )

9.已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子,其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示,下列有关该样品中蛋白质的分离的叙述正确的是(  )

A.将样品装入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋内,则分子丙也保留在袋内

B.若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质,则分子甲移动速度最快

C.若将样品以2000r/min的速度离心10min,分子戊存在于沉淀中,则分子甲也存在于沉淀中

D.若用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子,则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远

10.(2012·

广东阳江检测)下表是植物组织培养时,相关激素的使用情况及实验结果。

下列叙述错误的是(  )

激素使用情况

实验结果

先使用生长素,后使用细胞分裂素

有利于细胞分裂,但细胞不分化

先使用细胞分裂素,后使用生长素

细胞既分裂也分化

同时使用,且比例适中

促进愈伤组织的形成

同时使用,且生长素用量较高

有利于根的分化、抑制芽的形成

同时使用,且细胞分裂素用量较高

有利于芽的分化、抑制根的形成

A.从表中信息可知,不同激素的使用顺序影响植物细胞的发育方向

B.从表中信息可知,不同激素用量比例影响植物细胞的发育方向

C.在植物组织培养中,生长素的主要作用是促进细胞的生长、分裂和分化

D.在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现减弱趋势

11.下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中,正确的是(  )

A.用蒸馏水进行红细胞的洗涤,其目的是去除细胞表面杂蛋白

B.将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较大的杂质

C.血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂

D.整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构

12.生物产品的分离、纯化是现代生物技术中一种常见的技术。

下列关于物质提取、纯化原理的叙述中,不正确的是(  )

A.采用凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同,在色谱柱中的移动速度不同

B.使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质

C.电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同,产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离

D.离心法分离蛋白质的依据是不同大小的分子离心时沉降速度不同

二、双项选择题

13.某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件除图示外其他均相同。

下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是(  )

A.污染主要是培养基灭菌时间短造成的

B.污染主要来源于组织培养所用的离体组织

C.调节培养基pH能解决污染问题

D.调节培养温度不能解决污染问题

14.下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述中,正确的有(  )

A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞

B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质

C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNA

D.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化

15.(2011·

广东深圳联考)下列有关血红蛋白提取和分离的操作中,正确的是(  )

A.可采集猪血作为实验材料

B.用生理盐水反复洗涤红细胞

C.血红蛋白释放后应低速短时间离心

D.用电泳法提取血红蛋白

三、非选择题

16.阅读下列材料后请回答:

材料一:

微繁殖技术又称快速繁殖技术,就是将植物体的一部分组织小块进行培养,并诱导分化成大量的小植株,从而达到快速无性繁殖的目的。

20m2的培养室内最多可容纳100万株试管苗。

这一技术已有几十年的历史,现已基本成熟,并形成诸如工厂化生产兰花这样的产值巨大的工业生产体系。

材料二:

植物的去病毒技术是微繁殖的一个分支,植物病毒严重地影响着农业生产,对于无性繁殖的植株来说,一旦感染上病毒就会代代相传,日趋严重。

但在茎尖分生组织中,细胞繁殖十分迅速,病毒还来不及侵入,因此就成为植物体相对无病毒的特殊区域。

(1)利用微繁殖技术繁殖植物的方法称为______________。

(2)利用微繁殖技术繁殖植物的优点是____________________。

(3)若要进行兰花无病毒植株的培育,首先要选择外植体,选择对象为兰花的______________________。

(4)对外植体进行消毒用________________、________________消毒剂。

消毒时间分别为________、__________,以保证外植体的活性。

若消毒时间太短消毒不彻底,若消毒时间过长,容易使外植体受损伤。

克服外植体培养过程中的________是实验成败的关键。

(5)探索愈伤组织诱导分化的条件需要做大量的工作。

实践表明在MS培养基上添加激素的________、________、________、__________等都会影响实验结果。

另外,不同的植物对各种环境条件的要求往往不同,除上述因素外,________、________、________等也影响实验结果。

17.试回答下列“蛋白质提取与分离实验”和“叶绿体中色素提取和分离实验”的有关问题:

(1)为了提取和分离血红蛋白,首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白,洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是______。

(2)若要去除血清蛋白中的小分子杂质,采用图1装置。

透析液是________,一段时间后,若向烧杯中加入双缩脲试剂,透析袋内溶液是否出现紫色?

________,判断的依据:

_____________。

(3)色素分离时采用的层析液是________。

(4)图2、图3分别表示电泳法分离蛋白质和纸层析法分离叶绿体中色素的结果。

不同蛋白质得以分离是因为_________________;

不同色素得以分离是因为_________________;

条带c呈________色;

条带d表示________色素。

参考答案

1.解析:

要培养某花卉的无病毒后代,可利用植物组织培养技术进行脱毒。

具体做法是选取含病毒最少或无病毒的植物细胞或组织进行组织培养,植物的幼嫩组织,如芽尖、茎尖、根尖分生组织含病毒少或几乎不含病毒,可用于培育脱毒苗。

答案:

C

2.解析:

通常植物本身能进行光合作用,产生糖类,不需从外部供给糖,但在植物组织进行异养的状况下,大多不能进行光合作用来合成糖类,因此必须在培养基中添加糖,作为碳源和能源。

D

3.解析:

选用红细胞做蛋白质分离的实验材料是因为在红细胞的组成中,约90%是血红蛋白。

4.解析:

PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它以极少量的DNA为模板,以四种脱氧核苷酸为原料,在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3′端连接脱氧核苷酸,短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。

PCR利用DNA在不同温度下变性解聚或复性的特性来解旋并结合引物,不需要用解旋酶来解旋。

B

5.解析:

影响花药培养成功率的因素有很多,如材料和培养条件等;

确定花粉发育时期的常用方法是醋酸洋红法,并且要对所选的材料进行消毒处理;

在组织培养过程中,应根据外植体分化的程度及时更换培养基。

6.解析:

血红蛋白的提取与分离实验中,洗涤血细胞要用生理盐水(0.95%的NaCl溶液),提取DNA是依据其在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同而进行操作的,故A对。

前者用哺乳动物的红细胞,而后者用鸡血细胞等具细胞核的细胞,故B错。

释放血红蛋白的方法是“红细胞+蒸馏水+40%体积的甲苯,磁力搅拌器搅拌10min”;

分离血红蛋白应用的是凝胶色谱技术。

释放DNA的方法是“红细胞+蒸馏水,玻璃棒搅拌”,分离用到了不同浓度的NaCl溶液、过滤、冷酒精等,故C、D错。

A

7.解析:

PCR技术是人工合成DNA的方法,原料是脱氧核苷酸而不是核糖核苷酸。

8.解析:

当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;

而相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部,路程较短,移动速度快。

B项符合。

9.解析:

分子甲的分子量最小,进入凝胶内部通道而移动速度慢;

分子乙留在透析袋内,说明其相对分子质量比较大,分子丙比分子乙相对分子质量大,所以分子丙也留在袋内;

分子戊比分子甲的分子量大,分子甲可能不存在于沉淀物中;

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的样品,其电泳迁移率完全取决于分子的大小,分子量相差越大,形成的电泳带相距越远。

10.解析:

如先使用生长素,后使用细胞分裂素,则有利于细胞的分裂,但细胞不分化,表明在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强趋势,D错误。

11.解析:

红细胞的洗涤用的是生理盐水,其目的是去除血浆蛋白等杂质,有利于后续步骤的分离纯化;

而本实验中蒸馏水的作用是涨破红细胞,使血红蛋白释放。

将血红蛋白溶液进行透析,其目的是去除相对分子质量较小的杂质。

血红蛋白释放时加入有机溶剂,其目的是溶解细胞膜。

整个过程不断用磷酸缓冲液处理,是为了维持血红蛋白的结构。

12.解析:

本题考查有关物质提取、纯化的原理,意在考查考生的理解能力。

透析的原理是小分子能够通过半透膜,利用透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质。

13.解析:

从四个图中看出培养基的灭菌时间、培养基的pH及培养温度与污染率没有规律性的联系,而离体组织灭菌时间越长,污染率越低。

BD

14.解析:

提取DNA需用蒸馏水涨破细胞,提取蛋白质可以直接用豆浆或研磨的大豆;

透析不能除去DNA;

DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最低,DNA可以析出,通过过滤可以除去蛋白质;

用电泳的方法可将蛋白质、DNA进行分离纯化。

15.解析:

采用低速短时间离心可将血浆和血细胞分离,而血红蛋白释放后通常采用2000r/min的速度离心10min,以达到分离血红蛋白溶液的目的。

AB

16.解析:

微繁殖技术核心内容是植物组织培养技术,其原理为植物细胞的全能性,其培育过程与一般组织培养类似。

(1)植物的组织培养 

(2)繁殖速度快,周期短,不受季节、气候、自然灾害等因素的影响,并可实现工厂化生产 (3)茎尖分生组织 (4)70%的酒精 0.1%的氯化汞 6~7s 1~2min 污染问题 (5)种类 浓度 使用的先后顺序 用量比例 pH 温度 光照

17.解析:

为了提取和分离血红蛋白,首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白,洗涤时应使用生理盐水,因为使用蒸馏水会导致红细胞吸水破裂。

若要去除血清蛋白中的小分子杂质,可以采用透析的方法,透析液是(磷酸)缓冲液,这样可以防止蛋白质变性,一段时间后,若向烧杯中加入双缩脲试剂,透析袋内溶液会出现紫色,因为双缩脲试剂可以透过半透膜,与袋内血清蛋白质反应,生成紫色物质;

色素分离时采用的层析液是石油醚,因为色素在石油醚中溶解度比较大。

图2表示电泳法分离蛋白质的结果,其分离的根据就是不同蛋白质所带电荷性质、分子大小和形状不同,导致电泳时迁移速度不同。

图3表示纸层析法分离叶绿体中色素的结果,其分离的根据就是不同色素在层析液中溶解度不同,导致层析时扩散速度不同。

根据色素分离的结果,离滤液细线近的条带c是叶绿素b,呈黄绿色。

离滤液细线远的条带d是胡萝卜素,呈现橙黄色。

(1)防止红细胞吸水破裂

(2)(磷酸)缓冲液 出现紫色 双缩脲试剂可以透过半透膜,与袋内血清蛋白质反应,生成紫色物质

(3)石油醚

(4)不同蛋白质所带电荷性质、分子大小和形状不同,导致电泳时迁移速度不同 不同色素在层析液中溶解度不同,导致层析时扩散速度不同 黄绿色 胡萝卜素

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