学年生物人教版选修1检测专题5课题1DNA的粗提取与鉴定Word下载.docx
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A.砖红色B.橘黄色C.紫色D.蓝色
答案D
解析DNA遇二苯胺（沸水浴）会呈现蓝色，D正确。
题型二DNA的粗提取与鉴定的实验设计
5.下列不适宜作为DNA提取的实验材料的是（）
A.鸡血细胞B.蛙的红细胞
C.人的成熟红细胞D.菜花
解析鸡血细胞、蛙的红细胞、菜花细胞均含有细胞核和各种细胞器，即均含有较多的DNA，因此适宜作为DNA提取的实验材料，A、B、D不符合题意；
人的成熟红细胞不含细胞核和各种细胞器，即不含DNA，因此不适宜作为DNA提取的实验材料，C符合题意。
6.进行DNA粗提取时，若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。
加入食盐的目的是（）
A.利于DNA的溶解B.分离DNA和蛋白质
C.溶解细胞膜D.溶解蛋白质
解析实验材料是植物细胞时，需先加入洗涤剂和食盐，洗涤剂的作用是瓦解细胞膜，食盐的作用是溶解DNA。
7.在提取花椰菜的DNA时，加入洗涤剂的目的是（）
A•破坏细胞膜B•破坏叶绿素
C.破坏细胞壁D.破坏DNA
解析在提取花椰菜的DNA时，加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜，从而释
放出DNA。
8.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验相关操作中所选取的试剂，错误
的是（）
选项
相关操作
选用的试剂
A
破碎鸡血细胞
蒸馏水
B
溶解核内DNA
0.14mol/L的NaCI溶液
C
提取杂质较少的DNA
冷却的95%酒精
D
DNA的鉴定
现配的二苯胺试剂
解析在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，可使鸡血细胞吸水涨破，A正确；
2mol/L的NaCI溶液能溶解较多的核内DNA，但在0.14mol/L的NaCI溶液中，DNA的溶解度最低，B错误；
DNA不溶于酒精，而某些蛋白质能溶于酒精，故用体积分数为95%的冷酒精能提取杂质较少的DNA，C正确；
在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂，D正确。
9.如图所示为“DNA粗提取”实验的相关操作步骤，其操作目的错误的是
（）
"
%窗卵2吧物音蒸嚮屏
俱血细胞癒国含I八人的国5灶启含nW勺
浓WCI溶液MC1溶液浓WC］溶汩也
①②③④
A•①是洗涤鸡血细胞，去除鸡血细胞表面的杂质
B.④是稀释NaCI溶液至0.14mol/L，析出DNA
C.③是选用2mol/LNaCI溶液溶解黏稠物中的DNA
D•②是纯化DNA，去除溶于95%的酒精中的杂质
解析①是让鸡血细胞与蒸馏水混合而使鸡血细胞处于低渗的环境中，使细
胞吸水涨破，释放出DNA。
10.在NaCl溶液中反复溶解、析出并过滤，就能除去DNA溶液中的杂质
的理由不包括（）
A.用高浓度盐溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质
B.用低浓度盐溶液使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质
C.反复操作就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质
D•反复操作就能够使各种杂质变性而沉淀析出
解析DNA在不同浓度之间反复溶解、析出过程中，并未使蛋白质等杂质变性。
11•为了纯化提取的DNA，可直接在滤液中加入下列哪种物质，反应10
15min,以达到实验目的（）
A.嫩肉粉
C.2molL-1NaCl溶液
解析嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,分杂质。
B.蒸馏水
D.酒精
能催化蛋白质水解，从而去除滤液中的部
12.在DNA粗提取的实验中，先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是
A.稀释血液；
冲洗样品
B.使血细胞破裂；
降低NaCl溶液浓度，使DNA析出
C.使血细胞破裂；
增大DNA溶解量
D.使血细胞破裂；
提取含杂质较少的DNA
解析在DNA粗提取的实验中，先后两次向烧杯中加入蒸馏水：
第一次向鸡血中加入蒸馏水，目的是使鸡血细胞吸水涨破，释放细胞核物质；
第二次向2molLt的NaCl溶液中加入蒸馏水，目的是降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出。
13.利用DNA和RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,
以从生物组织中提取DNA。
下面是有关DNA提取鉴定实验的有关问题。
⑴下图是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线。
在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而；
在0.14mol/L时，DNA的溶解度当NaCl溶液浓度继
续增加时，DNA溶解度又。
（2）为了纯化提取的DNA，需要将获取的含DNA的滤液做进一步处理。
下面是去除杂质的三个方案：
方案一：
在滤液中加入浓度为2mol/L的NaCl溶液，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液浓度为0.14mol/L,析出DNA。
方案二：
直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10〜15min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
方案三：
将滤液放在60〜75C的恒温水浴箱中，保温10〜15min。
三个方案所利用的原理分别是什么？
（3）将上述处理液过滤，加入与滤液体积相等的体积分数为95%的冷却的酒
精，搅拌后溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA，将丝状物放入试
管，加入2mol/LNaCl溶液5mL，再加入4mL二苯胺试剂，在的条件
下，DNA会被染成。
如果将白色丝状物置于载玻片上，滴加几滴甲
基绿染色液，DNA将呈现。
答案
（1）逐渐降低最小逐渐增大
（2）方案一：
利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质；
利用蛋白酶分解杂质蛋白质，从而使DNA与蛋白质分开；
利用DNA与蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性与DNA分离。
（3）沸水浴蓝绿
解析
（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCI溶液中的溶解度不同。
当NaCI溶液的物质的量浓度低于0.14molL一时，DNA的溶解度随NaCI溶液物质的量浓度的增加而逐渐降低；
NaCI溶液的物质的量浓度为0.14molL・_1时，DNA的溶解度最小；
当NaCI溶液的物质的量浓度继续增加时，DNA的溶解度又逐渐增大。
（2）方案一是通过控制NaCI溶液的浓度去除杂质；
方案二是利用嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而对DNA没有影响，从而将DNA和蛋白质分开；
方案三是利用DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使两者分离。
（3）DNA在沸水浴条件下与二苯胺反应呈蓝色；
甲基绿可将DNA染成绿色。
14.下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：
托六UA
（5）二苯胺蓝
解析破碎红细胞应该用蒸馏水，使之吸水涨破。
DNA在不同浓度的NaCI溶液中溶解度不同，在2mol/L的NaCI溶液中DNA溶解，在0.14mol/L的NaCI溶液中DNA析出。
可通过加入蒸馏水将2mol/L的NaCI溶液稀释为0.14mol/L的NaCI溶液。
DNA不溶于冷酒精溶液，在沸水浴的条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色。
■课肩提能训练•
KEHOUIINENGXUNLIAN
1•下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是（）
A.取材：
鸡血细胞；
原因：
有细胞核，其他动物的血细胞都没有细胞核
B.粗提取：
不同浓度的NaCI溶液；
DNA在其中的溶解度不同
C.提纯：
95%的冷酒精；
DNA溶于酒精，蛋白质等杂质不溶于酒精
D.鉴定：
二苯胺试剂；
DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色
解析除了哺乳动物成熟的红细胞，其他动物红细胞都有细胞核，A错误；
DNA在不同浓度的NaCI溶液中的溶解度不同，根据此原理可以对DNA进行粗提取，B正确；
DNA不溶于酒精，而蛋白质等杂质溶于酒精，进而提纯DNA，C错误；
DNA溶液加入二苯胺试剂后沸水浴加热呈蓝色，D错误。
2.向溶有DNA的2mol/L的NaCI溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是（）
A.减小、减小B.增大、增大
C.先减小后增大、增大D.减小、增大
解析由于DNA在0.14mol/L的NaCI溶液中溶解度最小，故向溶有DNA的物质的量浓度为2mol/L的NaCI溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中DNA的溶解度先减小，0.14mol/L时溶解度最小，然后增大；
而蛋白质在高浓度的盐溶液中会出现盐析，随浓度降低溶解度逐渐增大。
3.下列关于DNA对高温的耐受性的说法，不正确的是（）
A.DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强
B•超过80C后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复
C•不同生物的DNA的变性温度不一定相同
D.深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高
解析DNA超过80C变性，恢复到常温，生物活性将恢复。
4•某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是（）
A•加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨
B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNA
C•加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌
D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热
解析加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和，否则会产生许多泡沫，不利于后续步骤的操作，A错误；
蛋白酶能够分解蛋白质，因此能起到纯化DNA的目的，B正确；
加入酒精后用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀，C正确；
沸水浴条件下，DNA遇到二苯胺会被染成蓝色，用作DNA的鉴定，D正确。
5.在“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中，对DNA提取量影响较小的是
A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质
B.搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C.在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多
D.要用冷酒精沉淀DNA，甚至可将混合液再放入冰箱中冷却
解析在DNA从细胞中释放的操作中，首先加蒸馏水使鸡血细胞吸水涨破，然后用玻璃棒沿一个方向搅拌，目的是加速细胞的破裂，这有利于DNA等核物
质的充分释放，A不符合题意；
搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌的目的是防止将丝状的DNA搅碎，利于DNA絮状物的挑出，但不影响DNA的提取量，B符合题意；
在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，且到黏稠物不再增加，如果加蒸馏水过快，会导致DNA的再溶解，从而影响DNA的提取量，C不符合题意；
预冷的酒精具有以下优点：
一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；
二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；
三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂，因此用冷酒精沉淀DNA甚至将混合液放入冰箱冷却可以增加DNA的提取量，D不符合题意。
6•在DNA的粗提取和鉴定实验中有三次过滤：
1过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；
2过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液；
3过滤溶解有DNA的物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液。
以上三次过滤分别是为了获得（）
A•含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
B•含核物质的滤液、滤液中的DNA、含DNA的滤液
C•含核物质的滤液、滤液中的DNA、纱布上的黏稠物
D.含较纯DNA的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液
解析过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液（其内含有DNA，但DNA纯度不高）；
过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液应取纱布上的黏稠物（其内含析出的DNA）；
DNA易溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液，故过滤该溶液时应取其滤液（其内含有DNA）。
7.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，发现DNA提取量不足。
下列有关原因分析不正确的是（）
A.经蒸馏水处理的鸡血细胞用玻璃棒搅拌的时间过短
B.溶解DNA时所调制的NaCI溶液浓度未达到2mol/L
C.DNA再溶解时，玻璃棒搅拌方向是单向的
D.向2mol/L的NaCl溶液中加入的蒸馏水太少
解析经蒸馏水处理的鸡血细胞用玻璃棒搅拌的时间过短，部分细胞还未破裂，这会造成DNA的提取量不足，A正确；
NaCl溶液浓度在0.14〜2mol/L时,随着NaCl溶液浓度的升高，DNA的溶解度增大，因此溶解DNA时所调制的NaCl溶液浓度未达到2mol/L时，部分DNA还没有溶解，这会造成DNA的提取量不足，B正确；
DNA再溶解时，玻璃棒应该沿着一个方向缓慢搅拌，是为
了防止DNA分子的断裂，而这不会造成DNA提取量不足，C错误；
向2mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水的目的是稀释溶液，使DNA析出，若加入蒸馏水的
量太少，稀释度不够，这会造成DNA的提取量不足，D正确。
8•甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图相关叙述正确的是（）
甲
乙
A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl溶液，但两者浓度不同
B.图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝，另一支试管中的溶液不变蓝
C.图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA析出，并缠绕在玻璃棒上
D.图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果
解析图甲烧杯中为酒精溶液，图乙试管中为NaCl溶液，A错误；
图乙试管需要在沸水浴中加热5min，B错误；
图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，卷起丝状物，C错误；
图乙操作中所用的二苯胺试剂最好现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，D正确。
9.如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图，请
分析回答有关问题：
（1）正确的操作顺序是用字母和箭头表示）
⑵图中C、E步骤都加入了蒸馏水，但其目的不同，分别是
和。
（3）图中A步骤中所用酒精必须是经过的才能使用，该步骤的目的
（4）为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可将其溶解后，
滴加试剂后沸水浴，如果出现，则证明该丝状物的主要成分为
DNA。
（5）由于鸡血较难找到，某学生试图用牛血代替，结果没有成功，其原因最
可能是。
答案
（1）C-B-E-D-A⑵使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质降低NaCI溶液的浓度，使DNA析出（3）充分预冷提取含杂质较少（或较纯净）的DNA
（4）二苯胺蓝色（5）牛成熟的红细胞没有细胞核和各种细胞器
解析
（1）DNA的粗提取与鉴定步骤是加入蒸馏水，破碎细胞-过滤，获取含DNA的滤液-去除滤液中的杂质-DNA的析出与鉴定。
由此可知，正确的操作顺序是C—B—E—D—Ao
（2）C步骤加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破，释放出细胞核物质；
E
步骤加入蒸馏水的目的是降低NaCI溶液的浓度，使DNA析出。
（3）图中A步骤中所用酒精必须经过充分冷却才能使用，该步骤的目的是获取含杂质较少（或较纯净）的DNAo
（4）鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分，可将其溶解后，滴加二
苯胺试剂，并进行沸水浴加热，如果出现蓝色，则该丝状物的主要成分为DNAo
（5）牛是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和各种细胞器，因此用牛血代替鸡血来进行该实验不会取得成功。
10.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下。
材料处理：
称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。
剪碎后分成两组，并分别置于20C和—20C条件下保存24h0
DNA的粗提取：
第一步：
将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。
用两层纱布过滤，取滤液备用
第二步：
先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步：
取6支试管，分别加入等量的物质的量浓度为2mol/L的NaCI溶液溶解上述絮状物。
DNA的检测：
在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如表所示。
材料保存温度
化采
辣椒
蒜黄
20°
++
+
+++
—20C
++++
注：
“+”越多表示蓝色越深。
分析上述实验过程，回答下列问题。
（1）该探究性实验的课题名称是
（2）第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少。
（3）根据实验结果，得出结论并分析。
1结论1:
与20C相比，相同实验材料在一20C条件下保存，DNA的提取量较多。
结论2:
。
2针对结论1,请给出合理的解释：
（4）氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对
DNA影响极小。
为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是然后
用体积分数为95%的冷酒精使DNA析出。
答案
（1）探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响
（2）DNA分子的断裂（3）①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢（4）将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液
解析
（1）从表格可以看出，该实验有两个自变量：
材料和温度，所以该探究性实验的课题名称为“探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影
响”。
（2）第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取DNA絮状物，所以若搅拌速度快,易造成DNA分子的断裂。
（3）本实验的结论可从两个方面来考虑：
①相同材料在不同保存温度下的结论；
②不同材料在相同保存温度下的结论。
（4）氯仿能使蛋白质变性，而对DNA影响极小，所以可将第三步获得的溶液
与氯仿混合，又因氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA位于
上清液中。
11.真核生物细胞内，大量DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起,难以分离。
生物兴趣小组的同学为了获得纯度相对较高的DNA展开了实验探究
（1）分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质理化性质的不同而采取一定的方法，以下是从各种物质之间的差异角度开展研究：
1取鸡血细胞悬液10mL，加蒸馏水20mL，同时用玻璃棒（填“轻
轻搅拌”或“快速搅拌”），过滤，取滤液，转移到塑料材质的大烧杯中。
2沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，用玻璃棒沿一个方向
填“轻轻搅拌”或“快速搅拌”），同时不断收集析出的物质。
下图是
根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线，请据图分析：
D；
A：
纤维蛋戸球蛋白
C：
DNA
物咸析出的郴刘!
|1
3如果只收集纤维蛋白，可采取的措施是
4先用饱和度40%的硫酸铵溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白，再
在饱和度约为的硫酸铵溶液中析出DNA（既保证DNA提取量较大又避
免其他杂质过多），与此同时析出的物质还有。
（2）如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可采取的两种办法有：
将DNA与球蛋白的混合物加入到中，收集再次析出物；
用
理溶有DNA与蛋白质的溶液。
答案
（1）溶解度①快速搅拌②轻轻搅拌③在硫酸铵浓度达到30%之
前收集析出物④50%球蛋白
（2）冷却酒精嫩肉粉
解析
（1）分析曲线图可知，不同物质在不同浓度的硫酸铵中的析出的相对量有所差别，即分离各种物质的基本思路是根据DNA和其他物质之间溶解度的差异开展研究：
1取鸡血细胞悬液10mL，加蒸馏水20mL,此时可以用玻璃棒快速搅拌，以加速血细胞的破裂。
2沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液，为了防止将DNA的絮
状物搅碎，此时应用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌，同时不断收集析出的物质。
3从图中看出，纤维蛋白在硫酸铵浓度在20%之前已经开始析出，说明溶解度开始减小；
在浓度为30%时析出最快，说明此时的溶解度最低，并且超过30%后球蛋白也将逐渐析出，因此如果只收集纤维蛋白，可以在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物。
4从图中看出，DNA在饱和度约为50%的硫酸铵溶液中溶解度最小，与此同时析出的物质还有球蛋白，只是球蛋白析出量较少。
（2）如果要进一步去掉其他杂质，尽可能提高获得的DNA纯度，可将DNA
与球蛋白的混合物加入到冷却酒精中，由于DNA不溶于酒精，而其他杂质可溶于酒精，因此收集再次析出物；
酶具有专一性，可以用嫩肉粉（含木瓜蛋白酶）处
理溶有DNA与蛋白质的溶液，此时蛋白质可以水解，因此可以分离DNA和蛋
白质。
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