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学年生物人教版选修1检测专题5课题1DNA的粗提取与鉴定Word下载.docx

1、A .砖红色 B .橘黄色 C.紫色 D .蓝色答案 D解析 DNA遇二苯胺(沸水浴)会呈现蓝色,D正确。题型二 DNA的粗提取与鉴定的实验设计5.下列不适宜作为DNA提取的实验材料的是()A .鸡血细胞 B.蛙的红细胞C. 人的成熟红细胞 D.菜花解析鸡血细胞、蛙的红细胞、菜花细胞均含有细胞核和各种细胞器,即均 含有较多的DNA,因此适宜作为DNA提取的实验材料,A、B、D不符合题意; 人的成熟红细胞不含细胞核和各种细胞器,即不含 DNA,因此不适宜作为DNA 提取的实验材料,C符合题意。6.进行DNA粗提取时,若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加 入一定量的洗涤剂和食盐。加入食盐的目

2、的是 ()A.利于DNA的溶解 B.分离DNA和蛋白质C.溶解细胞膜 D.溶解蛋白质解析 实验材料是植物细胞时,需先加入洗涤剂和食盐,洗涤剂的作用是瓦 解细胞膜,食盐的作用是溶解 DNA。7.在提取花椰菜的DNA时,加入洗涤剂的目的是()A 破坏细胞膜 B 破坏叶绿素C.破坏细胞壁 D.破坏DNA解析 在提取花椰菜的DNA时,加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜,从而释放出DNA。8.下列有关“ DNA的粗提取与鉴定”实验相关操作中所选取的试剂, 错误的是()选项相关操作选用的试剂A破碎鸡血细胞蒸馏水B溶解核内DNA0.14 mol/L 的 NaCI 溶液C提取杂质较少的DNA冷却的95%酒精DDNA

3、的鉴定现配的二苯胺试剂解析 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水, 可使鸡血细胞吸水涨破,A正 确;2 mol/L的NaCI溶液能溶解较多的核内 DNA,但在0.14 mol/L的NaCI溶液 中,DNA的溶解度最低,B错误;DNA不溶于酒精,而某些蛋白质能溶于酒精, 故用体积分数为95%的冷酒精能提取杂质较少的 DNA,C正确;在沸水浴条件 下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA的试剂,D正 确。9.如图所示为“ DNA粗提取”实验的相关操作步骤,其操作目的错误的是()%窗卵2吧物音蒸嚮屏俱血细胞癒国含I八人的国 5灶启 含nW勺浓WCI溶液 MC1溶液 浓WC溶汩也 A

4、 是洗涤鸡血细胞,去除鸡血细胞表面的杂质B.是稀释NaCI溶液至0.14 mol/L,析出DNAC.是选用2 mol/L NaCI溶液溶解黏稠物中的DNAD是纯化DNA,去除溶于95%的酒精中的杂质解析是让鸡血细胞与蒸馏水混合而使鸡血细胞处于低渗的环境中, 使细胞吸水涨破,释放出DNA。10.在NaCl溶液中反复溶解、析出并过滤,就能除去 DNA溶液中的杂质的理由不包括()A .用高浓度盐溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质B.用低浓度盐溶液使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质C.反复操作就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质D 反复操作就能够使各种杂质变性而沉淀析出解析 DNA

5、在不同浓度之间反复溶解、析出过程中,并未使蛋白质等杂质 变性。11为了纯化提取的DNA,可直接在滤液中加入下列哪种物质,反应 1015 min,以达到实验目的()A .嫩肉粉C. 2mol L-1 NaCl 溶液解析 嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶, 分杂质。B.蒸馏水D.酒精能催化蛋白质水解,从而去除滤液中的部12.在DNA粗提取的实验中,先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是A .稀释血液;冲洗样品B.使血细胞破裂;降低 NaCl溶液浓度,使DNA析出C.使血细胞破裂;增大DNA溶解量D.使血细胞破裂;提取含杂质较少的 DNA解析 在DNA粗提取的实验中,先后两次向烧杯中加入蒸馏水:第一次向 鸡血

6、中加入蒸馏水,目的是使鸡血细胞吸水涨破,释放细胞核物质;第二次向 2 mol Lt的NaCl溶液中加入蒸馏水,目的是降低 NaCl溶液的浓度,使DNA析 出。13.利用DNA和RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,以从生物组织中提取DNA。下面是有关DNA提取鉴定实验的有关问题。下图是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线。在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增 加而 ;在0.14 mol/L时,DNA的溶解度 当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA溶解度又 。(2)为了纯化提取的DNA,需要将获取的含 DNA的滤液做进一步处理。下 面是去除杂

7、质的三个方案:方案一:在滤液中加入浓度为2 mol/L的NaCl溶液,过滤除去不溶的杂质, 再调节NaCl溶液浓度为0.14 mol/L,析出DNA。方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应1015 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白 酶能够分解蛋白质。方案三:将滤液放在6075 C的恒温水浴箱中,保温1015 min。三个方案所利用的原理分别是什么?(3)将上述处理液过滤,加入与滤液体积相等的体积分数为 95%的冷却的酒精,搅拌后溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的 DNA,将丝状物放入试管,加入2 mol/L NaCl溶液5 mL,再加入4 mL二苯胺试剂,在 的条件下,DNA会被染成 。如果将白色

8、丝状物置于载玻片上,滴加几滴甲基绿染色液,DNA将呈现 。答案(1)逐渐降低最小逐渐增大(2)方案一:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制 NaCl溶液的浓度去除杂质;利用蛋白酶分解杂质蛋白质,从而使 DNA 与蛋白质分开;利用 DNA与蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白 质变性与DNA分离。(3)沸水浴蓝绿解析(1)DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCI溶液中的溶解度不 同。当NaCI溶液的物质的量浓度低于 0.14 mol L 一 时,DNA的溶解度随NaCI 溶液物质的量浓度的增加而逐渐降低; NaCI溶液的物质的量浓度为0.14 mol L_ 1时,DN

9、A的溶解度最小;当NaCI溶液的物质的量浓度继续增加时,DNA的溶 解度又逐渐增大。(2)方案一是通过控制NaCI溶液的浓度去除杂质;方案二是利用嫩肉粉中的 木瓜蛋白酶能够分解蛋白质,而对 DNA没有影响,从而将DNA和蛋白质分开; 方案三是利用DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使两者分离。(3)DNA在沸水浴条件下与二苯胺反应呈蓝色; 甲基绿可将DNA染成绿色。14.下图表示以鸡血为实验材料进行 DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请 分析回答下列问题:托 六 U A(5)二苯胺蓝解析破碎红细胞应该用蒸馏水,使之吸水涨破。DNA在不同浓度的NaCI 溶液中溶解度不同,在2 mol/L的NaC

10、I溶液中DNA溶解,在0.14 mol/L的NaCI 溶液中DNA析出。可通过加入蒸馏水将 2 mol/L的NaCI溶液稀释为0.14 mol/L 的NaCI溶液。DNA不溶于冷酒精溶液,在沸水浴的条件下, DNA与二苯胺反 应呈现蓝色。课肩提能训练KE HOU II NENGXUN LIAN1 下列有关DNA的粗提取与鉴定实验的叙述,正确的是()A .取材:鸡血细胞;原因:有细胞核,其他动物的血细胞都没有细胞核B.粗提取:不同浓度的NaCI溶液;DNA在其中的溶解度不同C.提纯:95%的冷酒精;DNA溶于酒精,蛋白质等杂质不溶于酒精D.鉴定:二苯胺试剂;DNA溶液加入二苯胺试剂即呈蓝色解析

11、除了哺乳动物成熟的红细胞,其他动物红细胞都有细胞核, A错误; DNA在不同浓度的NaCI溶液中的溶解度不同,根据此原理可以对 DNA进行粗 提取,B正确;DNA不溶于酒精,而蛋白质等杂质溶于酒精,进而提纯 DNA, C错误;DNA溶液加入二苯胺试剂后沸水浴加热呈蓝色, D错误。2.向溶有DNA的2 mol/L的NaCI溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中 DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是()A .减小、减小 B.增大、增大C.先减小后增大、增大 D.减小、增大解析 由于DNA在0.14 mol/L的NaCI溶液中溶解度最小,故向溶有 DNA 的物质的量浓度为2 mol/L的NaCI溶液

12、中不断加入蒸馏水,在这个过程中 DNA 的溶解度先减小,0.14 mol/L时溶解度最小,然后增大;而蛋白质在高浓度的盐 溶液中会出现盐析,随浓度降低溶解度逐渐增大。3.下列关于DNA对高温的耐受性的说法,不正确的是()A.DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强B超过80 C后DNA将变性,即使恢复到常温,生物活性也不能恢复C 不同生物的DNA的变性温度不一定相同D.深海热泉附近生活的生物的 DNA对高温的耐受性更强,其DNA中鸟嘌 呤所占的比例更高解析 DNA超过80 C变性,恢复到常温,生物活性将恢复。4某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是()A 加入洗涤剂后用力进行快速、充

13、分地研磨B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNAC 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和,否则会产生许多泡沫,不利于 后续步骤的操作,A错误;蛋白酶能够分解蛋白质,因此能起到纯化 DNA的目 的,B正确;加入酒精后用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧 DNA分子的 断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀,C正确;沸水浴条件下,DNA遇到二 苯胺会被染成蓝色,用作 DNA的鉴定,D正确。5.在“ DNA的粗提取与鉴定”实验过程中,对 DNA提取量影响较小的是A .使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出 DNA等核物质B.搅拌时要用玻璃棒沿一个

14、方向轻缓搅动C.在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,直至黏稠物不再增多D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可将混合液再放入冰箱中冷却解析 在DNA从细胞中释放的操作中,首先加蒸馏水使鸡血细胞吸水涨破, 然后用玻璃棒沿一个方向搅拌,目的是加速细胞的破裂,这有利于 DNA等核物质的充分释放,A不符合题意;搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌的目的是 防止将丝状的DNA搅碎,利于DNA絮状物的挑出,但不影响DNA的提取量, B符合题意;在析出DNA黏稠物时,要缓缓加入蒸馏水,且到黏稠物不再增加, 如果加蒸馏水过快,会导致 DNA的再溶解,从而影响DNA的提取量,C不符 合题意;预冷的酒精具有以下优点:一

15、是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解; 二是降低分子运动,易于形成沉淀析出;三是低温有利于增加DNA分子柔韧性, 减少断裂,因此用冷酒精沉淀 DNA甚至将混合液放入冰箱冷却可以增加 DNA 的提取量,D不符合题意。6在DNA的粗提取和鉴定实验中有三次过滤:1过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液;2过滤含黏稠物的物质的量浓度为 0.14 mol/L的NaCl溶液;3过滤溶解有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液。以上三次过滤分别是为了获得()A 含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA的滤液B含核物质的滤液、滤液中的 DNA、含DNA的滤液C含核物质的滤液、滤液中的 DNA、纱布上的黏

16、稠物D.含较纯DNA的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA的滤液解析 过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液应取滤液 (其内含有DNA,但DNA 纯度不高);过滤含黏稠物的物质的量浓度为 0.14 mol/L的NaCl溶液应取纱布上 的黏稠物(其内含析出的DNA) ; DNA易溶于物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶 液,故过滤该溶液时应取其滤液(其内含有DNA)。7.在“ DNA的粗提取与鉴定”实验中,发现 DNA提取量不足。下列有关 原因分析不正确的是()A .经蒸馏水处理的鸡血细胞用玻璃棒搅拌的时间过短B.溶解DNA时所调制的NaCI溶液浓度未达到2 mol/LC.DNA再溶解时,玻璃棒搅拌方向

17、是单向的D.向2 mol/L的NaCl溶液中加入的蒸馏水太少解析 经蒸馏水处理的鸡血细胞用玻璃棒搅拌的时间过短, 部分细胞还未破 裂,这会造成DNA的提取量不足,A正确;NaCl溶液浓度在0.142 mol/L时, 随着NaCl溶液浓度的升高,DNA的溶解度增大,因此溶解 DNA时所调制的 NaCl溶液浓度未达到2 mol/L时,部分DNA还没有溶解,这会造成 DNA的提 取量不足,B正确;DNA再溶解时,玻璃棒应该沿着一个方向缓慢搅拌,是为了防止DNA分子的断裂,而这不会造成 DNA提取量不足,C错误;向2 mol/L 的NaCl溶液中加入蒸馏水的目的是稀释溶液,使 DNA析出,若加入蒸馏水

18、的量太少,稀释度不够,这会造成 DNA的提取量不足,D正确。8 甲、乙两图为“ DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图 相关叙述正确的是()甲乙A.图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为 NaCl溶液,但两者浓度不同B.图乙试管经稍稍加热后即可观察到一支试管中的溶液明显变蓝,另一支 试管中的溶液不变蓝C.图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使 DNA析出,并缠绕在玻璃棒上D.图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果解析 图甲烧杯中为酒精溶液,图乙试管中为 NaCl溶液,A错误;图乙试 管需要在沸水浴中加热5 min,B错误;图甲用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,卷 起丝状物,C错误;

19、图乙操作中所用的二苯胺试剂最好现配现用,否则二苯胺会 变成浅蓝色,D正确。9.如图为“ DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些重要操作示意图, 请分析回答有关问题:(1)正确的操作顺序是 用字母和箭头表示)图中C、E步骤都加入了蒸馏水,但其目的不同,分别是 和 。(3)图中A步骤中所用酒精必须是经过 的才能使用,该步骤的目的(4)为鉴定图中A步骤中所得到的丝状物的主要成分为 DNA,可将其溶解后,滴加 试剂后沸水浴,如果出现 ,则证明该丝状物的主要成分为DNA。(5)由于鸡血较难找到,某学生试图用牛血代替,结果没有成功,其原因最可能是 。答案 (1)C- B - E-D-A 使鸡血细胞吸水涨破

20、,释放出细胞核物质 降低NaCI溶液的浓度,使DNA析出(3)充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净) 的DNA(4)二苯胺蓝色(5)牛成熟的红细胞没有细胞核和各种细胞器解析(1)DNA的粗提取与鉴定步骤是加入蒸馏水,破碎细胞 -过滤,获取 含DNA的滤液-去除滤液中的杂质-DNA的析出与鉴定。由此可知,正确的操 作顺序是CBEDA o(2)C步骤加入蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破,释放出细胞核物质; E步骤加入蒸馏水的目的是降低 NaCI溶液的浓度,使DNA析出。(3)图中A步骤中所用酒精必须经过充分冷却才能使用,该步骤的目的是获 取含杂质较少(或较纯净)的DNA o(4)鉴定图中A步骤中所得

21、到的丝状物的主要成分,可将其溶解后,滴加二苯胺试剂,并进行沸水浴加热,如果出现蓝色,则该丝状物的主要成分为 DNA o(5)牛是哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和各种细胞器,因此 用牛血代替鸡血来进行该实验不会取得成功。10.某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动,具体步骤如下。 材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各 2份,每份10 g。剪碎后分成两 组,并分别置于20 C和20 C条件下保存24 h0DNA的粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入 15 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体

22、积分数 为95%的冷酒精,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌, 使絮状物缠绕在玻璃棒 上。第三步:取6支试管,分别加入等量的物质的量浓度为 2 mol/L的NaCI溶 液溶解上述絮状物。DNA的检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸 水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如表所示。材料保存温度化采辣椒蒜黄20 + + + +20 C+ + + +注:“ + ”越多表示蓝色越深。分析上述实验过程,回答下列问题。(1)该探究性实验的课题名称是 (2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少 。(3)根据实验结果,得出结论并分析。1结论1:与20 C相比,相同实验

23、材料在一20 C条件下保存,DNA的提取 量较多。结论2: 。2针对结论1,请给出合理的解释: (4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和 DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高 DNA纯度,依据氯仿的特性,在 DNA粗提取 第三步的基础上继续操作的步骤是 然后用体积分数为95%的冷酒精使DNA析出。答案(1)探究不同材料和不同保存温度对 DNA提取量的影响 (2)DNA分 子的断裂 (3)等质量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄中提取 的DNA量最多 低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢 (4)将第三步 获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液解

24、析(1)从表格可以看出,该实验有两个自变量:材料和温度,所以该探 究性实验的课题名称为“探究不同材料和不同保存温度对 DNA提取量的影响”。(2)第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取 DNA絮状物,所以若搅拌速度快, 易造成DNA分子的断裂。(3)本实验的结论可从两个方面来考虑:相同材料在不同保存温度下的结 论;不同材料在相同保存温度下的结论。(4)氯仿能使蛋白质变性,而对DNA影响极小,所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合,又因氯仿密度大于水,所以蛋白质沉淀位于溶液下部, DNA位于上清液中。11.真核生物细胞内,大量 DNA和蛋白质以及一些RNA等混杂在一起, 难以分离。生物兴趣小组的同学为了获

25、得纯度相对较高的 DNA展开了实验探究(1)分离各种物质的基本思路是根据 DNA和其他物质理化性质的不同而采取 一定的方法,以下是从各种物质之间 的差异角度开展研究:1取鸡血细胞悬液10 mL,加蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒 (填“轻轻搅拌”或“快速搅拌”),过滤,取滤液,转移到塑料材质的大烧杯中。2沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液,用玻璃棒沿一个方向 填“轻轻搅拌”或“快速搅拌”),同时不断收集析出的物质。下图是根据鸡血中几种物质的析出情况绘制的曲线,请据图分析:D;A:纤维蛋戸 球蛋白C: DNA物咸析出的郴刘!|13如果只收集纤维蛋白,可采取的措施是4先用饱和度40%的硫酸铵

26、溶液析出绝大部分纤维蛋白和大部分球蛋白, 再在饱和度约为 的硫酸铵溶液中析出DNA(既保证DNA提取量较大又避免其他杂质过多),与此同时析出的物质还有 。(2)如果要进一步去掉其他杂质,尽可能提高获得的 DNA纯度,可采取的两 种办法有:将DNA与球蛋白的混合物加入到 中,收集再次析出物;用 理溶有DNA与蛋白质的溶液。答案(1)溶解度快速搅拌轻轻搅拌在硫酸铵浓度达到30%之前收集析出物 50% 球蛋白(2)冷却酒精嫩肉粉解析(1)分析曲线图可知,不同物质在不同浓度的硫酸铵中的析出的相对 量有所差别,即分离各种物质的基本思路是根据 DNA和其他物质之间溶解度的 差异开展研究:1取鸡血细胞悬液1

27、0 mL,加蒸馏水20 mL,此时可以用玻璃棒快速搅拌, 以加速血细胞的破裂。2沿大烧杯内壁持续、缓慢地加入饱和硫酸铵溶液,为了防止将 DNA的絮状物搅碎,此时应用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌,同时不断收集析出的物质。3从图中看出,纤维蛋白在硫酸铵浓度在20%之前已经开始析出,说明溶解 度开始减小;在浓度为30%时析出最快,说明此时的溶解度最低,并且超过30% 后球蛋白也将逐渐析出,因此如果只收集纤维蛋白,可以在硫酸铵浓度达到30% 之前收集析出物。4从图中看出,DNA在饱和度约为50%的硫酸铵溶液中溶解度最小,与此 同时析出的物质还有球蛋白,只是球蛋白析出量较少。(2)如果要进一步去掉其他杂质,尽可能提高获得的 DNA纯度,可将DNA与球蛋白的混合物加入到冷却酒精中,由于 DNA不溶于酒精,而其他杂质可溶 于酒精,因此收集再次析出物;酶具有专一性,可以用嫩肉粉 (含木瓜蛋白酶)处理溶有DNA与蛋白质的溶液,此时蛋白质可以水解,因此可以分离 DNA和蛋白质。

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